检索结果-内蒙古大学图书馆

吉林大学学报（医学版） 2008年第5期34卷 786-789页

作者：王少华孙吉凤刘剑凯张连芝邓志会林大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室吉林长春130021 长春医学高等专科学校基础医学部生物化学教研室吉林长春130031

目的:研究吗啡对C6神经胶质瘤细胞谷氨酸(Glu)-谷氨酰胺(Gln)循环代谢产物含量及其相关酶基因转录的影响,探讨吗啡依赖与耐受的作用机制。方法:传代培养的C6神经胶质瘤细胞,随机分为4组:对照组(C组),吗啡组(M组),纳洛酮加吗啡组(N+M组)... 详细信息

目的:研究吗啡对C6神经胶质瘤细胞谷氨酸(Glu)-谷氨酰胺(Gln)循环代谢产物含量及其相关酶基因转录的影响,探讨吗啡依赖与耐受的作用机制。方法:传代培养的C6神经胶质瘤细胞,随机分为4组:对照组(C组),吗啡组(M组),纳洛酮加吗啡组(N+M组)和纳洛酮组(N组),应用比色法测定C6神经胶质瘤细胞培养上清液中Glu及Gln的含量,应用半定量RT-PCR法测定C6神经胶质瘤细胞Glu-Gln循环关键酶谷氨酰胺合成酶(GS)及谷氨酸脱氢酶(GDH)mRNA相对含量的变化。结果:与C组比较,M组细胞外Glu含量显著性增加(P<0.01)。与M组比较,N+M组细胞外Glu含量显著性降低(P<0.01);与C组比较,M组、N组以及N+M组细胞外Gln含量均降低,但差异无显著性(P>0.05)。与C组比较,M组、N组细胞GSmRNA转录活性均显著降低(P<0.01)。与M组比较,N+M组细胞GS mRNA转录活性显著升高(P<0.01);与C组比较,M组细胞GDH mRNA转录活性升高(P<0.05)。与M组比较,N+M组细胞GDH mRNA转录活性显著性升高(P<0.01)。结论:吗啡可能通过对Glu-Gln循环关键酶GS和GDH基因转录活性的影响调节细胞外Gln和Glu浓度,其机制可能与吗啡依赖等作用相关。

关键词：吗啡谷氨酸谷氨酰胺谷氨酰胺合成酶谷氨酸脱氢酶

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吲哚美辛对喉癌Hep-2细胞增殖与iNOS活性的影响

引用

吉林大学学报（医学版） 2008年第2期34卷 251-253页

作者：张连芝孙吉凤王少华王为方杨柳王宁刘剑凯吉林大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室吉林长春130021 长春医学高等专科学校基础医学部生物化学教研室吉林长春130031

目的:探讨吲哚美辛对喉癌细胞增殖与诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性的影响,为喉癌的预防和治疗提供理论依据。方法:Hep-2细胞培养于含吲哚美辛(30、60、125和250μmol.L-1)的培养基中,分别培养24h和48h;用MTT方法检测吲哚美辛组细胞增殖... 详细信息

目的:探讨吲哚美辛对喉癌细胞增殖与诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性的影响,为喉癌的预防和治疗提供理论依据。方法:Hep-2细胞培养于含吲哚美辛(30、60、125和250μmol.L-1)的培养基中,分别培养24h和48h;用MTT方法检测吲哚美辛组细胞增殖的抑制率,用台盼蓝染色法检测吲哚美辛组细胞活力的抑制作用,并与溶剂对照组进行比较;吲哚美辛(125、250和500μmol.L-1)与脂多糖(LPS,10μmol.L-1)同时处理细胞16h,同时设只加LPS对照组,采用酶法和分光光度法检测细胞培养上清液中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的活性。结果:与对照组比较,不同浓度的吲哚美辛(30、60、125和250μmol.L-1)组Hep-2细胞增殖的抑制率均显著增加(P<0.05)。相同浓度的吲哚美辛,随作用时间延长,Hep-2细胞增殖的抑制率显著降低(P<0.05);与对照组比较,不同浓度的吲哚美辛(30、60、125和250μmol.L-1)随剂量增加,Hep-2细胞活力的抑制程度均显著增加(P<0.05)。相同浓度的吲哚美辛,随作用时间延长,Hep-2细胞活力的抑制程度显著降低(P<0.05);与LPS对照组比较,吲哚美辛在125、250及500μmol.L-1浓度时,LPS诱导的细胞培养上清液中iNOS的活性显著降低(P<0.05)。结论:吲哚美辛在30～250μmol.L-1浓度范围内显著抑制Hep-2细胞的细胞增殖与细胞活力,明显降低LPS诱导的细胞iNOS的活性升高。

关键词：吲哚美辛消炎药非甾类喉肿瘤一氧化氮合酶

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金黄色葡萄球菌eap基因的克隆与表达

引用

中国医药生物技术 2008年第3期3卷 210-213页

作者：卢杰卢珍大庆医学高等专科学校基础医学部生物化学教研室 163312 解放军二六一医院妇产科北京100094

目的构建携带eap基因的原核表达载体,诱导表达具有活性的重组EAP融合蛋白。方法PCR法扩增金黄色葡萄球菌基因组DNA,回收、纯化的扩增产物与pMD18-T载体相连接得重组质粒pMD18-T-EAP,转化***21(DE3)感受态细胞,酶切鉴定;未酶切组作为对... 详细信息

目的构建携带eap基因的原核表达载体,诱导表达具有活性的重组EAP融合蛋白。方法PCR法扩增金黄色葡萄球菌基因组DNA,回收、纯化的扩增产物与pMD18-T载体相连接得重组质粒pMD18-T-EAP,转化***21(DE3)感受态细胞,酶切鉴定;未酶切组作为对照组重组质粒pMD18-T-EAP和pET28a(+)表达载体分别用NdeI和XhoI限制性内切酶双酶切、连接,转化***21(DE3)感受态细胞,酶切鉴定;空载体作为对照组。用不同浓度(终浓度1、2、4、8mmol/L)和不同诱导时间(1、2、3、4、5、6h)的异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)对阳性重组菌进行表达优化,分别取***上清液和沉淀做电泳分析。应用MagneHis-蛋白纯化系统纯化重组EAP融合蛋白,并通过薄层扫描测定蛋白质的浓度。结果所获eap基因与GeneBank的基因序列同源性>99%;氨基酸同源性达100%。重组质粒经IPTG诱导,阳性重组菌转化子均有表达;当吸光度(A)值等于0.6～0.8时,相对分子质量约70000处出现目的蛋白条带。破碎的重组菌pET28a-EAP上清液中目的蛋白条带较清楚,沉淀中几乎看不到。终浓度1mmol/L为最佳蛋白表达工作浓度。IPTG诱导1h重组EAP融合蛋白有一定量的表达,随着时间的延长,表达量增加不明显,3h时的表达量达最高,之后,蛋白表达量变化不明显。表达的重组EAP融合蛋白含量占全菌体蛋白的29.6%。结论成功地克隆和表达了金黄色葡萄球菌重组EAP融合蛋白,为进一步研究以EAP蛋白作为免疫原预防和治疗由金黄色葡萄球菌引起的疾病奠定基础。

关键词：葡萄球菌金黄色克隆分子基因表达胞外黏着蛋白

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转录因子FBI-1的结构与功能

引用

医学分子生物学杂志 2007年第5期4卷 451-454页

作者：王黎芳浙江医学高等专科学校基础医学部生物化学与免疫病原微生物教研室杭州市310053

FBI-1是一个新近发现的和转录相关的胞内蛋白,属于POK蛋白家族成员。FBI-1通过直接结合DNA或者与其他蛋白形成复合物影响目的基因的转录水平,从而推动肿瘤的生长、促进细胞黏附拮抗凋亡、促进前体细胞分化。

关键词： FBI-1 转录因子前体细胞肿瘤 HIV

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