检索结果-内蒙古大学图书馆

生物化学与生物物理进展 2002年第6期29卷 910-914页

作者：郑斌温进坤韩梅周爱儒河北医科大学基础医学研究所石家庄050017 河北医科大学基础医学研究所生物化学与分子生物学研究室北京大学医学部生物化学与分子生物学系北京100083

为了研究hhlim基因表达调控机制 ,对该基因 5′上游 - 2 5 37bp序列从 5′端依次进行缺失后 ,利用荧光素酶报告基因检测各种不同长度片段在C2C12细胞中驱动荧光素酶表达的活性 .结果表明 ,在hhlim基因 5′上游- 2 5 37～ - 15 37bp之间... 详细信息

为了研究hhlim基因表达调控机制 ,对该基因 5′上游 - 2 5 37bp序列从 5′端依次进行缺失后 ,利用荧光素酶报告基因检测各种不同长度片段在C2C12细胞中驱动荧光素酶表达的活性 .结果表明 ,在hhlim基因 5′上游- 2 5 37～ - 15 37bp之间存在负调控元件 ,在 - 2 5 3～ - 15 7bp之间含有增强子样序列 .用含有增强子样序列的DNA片段做探针 ,对未分化型和分化型C2C12细胞的核蛋白进行电泳迁移率改变分析 (electrophoreticmopilityshiftassay ,EMSA) .分析的结果显示 ,两种表型细胞中的核蛋白与探针结合所形成滞后带的谱型明显不同 .结果还发现内皮素 1(ET 1)和碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)既能显著诱导C2C12细胞对hhlim的表达 ,也能刺激含增强子样序列的调控区域所驱动的报告基因表达 .提示hhlim基因转录起始点至 - 2 5 37bp的区域内含有负调控元件及增强子样序列 ,该基因的表达受ET

关键词： hhlim基因转录调控区域鉴定表达调控调控序列成肌细胞

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外源E2F和CArG顺式元件对血管平滑肌细胞表型相关基因表达的影响

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中国生物化学与分子生物学报 2001年第5期17卷 626-630页

作者：韩梅温进坤河北医科大学基础医学研究所生物化学研究室石家庄050017

利用转录因子“诱骗”策略 ,阻断血管平滑肌细胞 (VSMC)表型特异基因和增殖相关基因的反式激活 ,揭示VSMC表型转化和增殖之间的关系 .电泳迁移率改变分析结果表明 ,相当于分化型VSMC特异表达基因共有顺式元件CArG和细胞增殖相关基因共... 详细信息

利用转录因子“诱骗”策略 ,阻断血管平滑肌细胞 (VSMC)表型特异基因和增殖相关基因的反式激活 ,揭示VSMC表型转化和增殖之间的关系 .电泳迁移率改变分析结果表明 ,相当于分化型VSMC特异表达基因共有顺式元件CArG和细胞增殖相关基因共有顺式元件E2F的双股寡核苷酸(ODNs)可分别与从分化型和去分化型VSMC中提取的核蛋白特异性结合 ,形成DNA 蛋白质复合物 .Northern杂交结果显示 ,导入VSMC中的CArGODN可使平滑肌α肌动蛋白 (α actin)表达活性降低 ,肌丝数量减少 ,明显抑制转染细胞的再分化过程 .去分化型VSMC被E2FODN转染后 ,增殖相关基因c myc表达受到抑制 ,细胞增殖速率减慢 ,去分化表型特征减弱 .结果提示 ,E2F和CArG调控元件分别对VSMC增殖和分化起重要调节作用 ,并证实VSMC表型转化与增殖是两个密切相关但不完全相同的细胞事件 .

关键词：顺式元件诱骗表型转化基因调控血管平滑肌细胞 VSMC 表型相关基因

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胱硫醚β-合酶在大鼠不同组织中的分布及其在As时的表达变化

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中国应用生理学杂志 2001年第2期17卷 160-160,200页

作者：郑斌韩梅温进坤河北医科大学基础医学研究所生物化学研究室河北石家庄050017

高同型半胱氨酸血症是动脉粥样硬化(atherosclerosis,As)的一个独立危险因素,胱硫醚β-合酶(cystathionine β-synthase,CBS)是参与同型半胱氨酸代谢的关键酶.CBS活性异常与As关系密切.但在As发生过程中,CBS基因表达及活性是否发生变化... 详细信息

高同型半胱氨酸血症是动脉粥样硬化(atherosclerosis,As)的一个独立危险因素,胱硫醚β-合酶(cystathionine β-synthase,CBS)是参与同型半胱氨酸代谢的关键酶.CBS活性异常与As关系密切.但在As发生过程中,CBS基因表达及活性是否发生变化尚未见报道.本文观察CBS基因在不同组织中的表达活性及其在As时的变化规律.

关键词：动脉粥样硬化胱硫醚β-合酶 AS 危险因素

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骨桥蛋白的病理功能

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中国老年学杂志 2005年第2期25卷 230-232页

作者：张永钢韩梅温进坤河北医科大学基础医学研究所生物化学研究室河北石家庄050017

骨桥蛋白(osteopontin，OPN)是在机体发育过程中或某些病理状态下主要由问叶组织细胞分泌到细胞外基质中的一种酸性糖蛋白。OPN是一种重要细胞外基质结构组分，通过一定的信号途径参与细胞的黏附、迁移等多种细胞行为的调节。是机体组... 详细信息

骨桥蛋白(osteopontin，OPN)是在机体发育过程中或某些病理状态下主要由问叶组织细胞分泌到细胞外基质中的一种酸性糖蛋白。OPN是一种重要细胞外基质结构组分，通过一定的信号途径参与细胞的黏附、迁移等多种细胞行为的调节。是机体组织或器官发育过程中一个重要的调节因素；而且OPN在细胞免疫、刨伤愈合、肿瘤转移等病理过程中，同样发挥着重要的调节作用。

关键词：骨桥蛋白病理学

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粘着斑激酶活化与血管内皮剥脱后再狭窄的关系初探

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中国应用生理学杂志 2002年第2期18卷 135-135,195页

作者：杨长春温进坤韩梅河北医科大学基础医学研究所生物化学研究室河北石家庄050017

粘着斑激酶（focal adhension kinase, FAK）是一种非受体酷氨酸激酶，最初是在转染v-Src的鸡胚成纤维细胞中被发现。近年研究证实，FAK介导细胞外信号由整合素受体向细胞内转导的过程。FAK的磷酸化激活以及由此产生的下游一系列蛋白质... 详细信息

粘着斑激酶（focal adhension kinase, FAK）是一种非受体酷氨酸激酶，最初是在转染v-Src的鸡胚成纤维细胞中被发现。近年研究证实，FAK介导细胞外信号由整合素受体向细胞内转导的过程。FAK的磷酸化激活以及由此产生的下游一系列蛋白质的磷酸化，是细胞外基质（extracellular matrix, ECM）与细胞相互作用并产生一系列生物学效应的关键环节，参与细胞增殖、迁移与凋亡的调节过程。已经发现，FAK与肿瘤的生长、浸润和转移密切相关。然而，在以血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cell, VSMC）增生为主要特征的血管再狭窄发生过程中，FAK是否参、介导了VSMC的迁移与增殖目前尚未见报道。

关键词：粘着斑激酶活化血管内皮剥脱血管再狭窄

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LIM蛋白家族的研究进展

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生理科学进展 2002年第4期33卷 305-308页

作者：郑斌温进坤韩梅河北医科大学基础医学研究所生物化学与分子生物学研究室石家庄050017

LIM蛋白是分子结构中含有一个或多个LIM结构域的蛋白质家族,该家族中的蛋白质通过其LIM结构域与某些结构蛋白、激酶、转录调控因子等多种蛋白质相互作用,对某些基因的表达、细胞分化与发育、细胞骨架形成等发挥重要调控作用。本文介绍LI... 详细信息

LIM蛋白是分子结构中含有一个或多个LIM结构域的蛋白质家族,该家族中的蛋白质通过其LIM结构域与某些结构蛋白、激酶、转录调控因子等多种蛋白质相互作用,对某些基因的表达、细胞分化与发育、细胞骨架形成等发挥重要调控作用。本文介绍LIM蛋白家族的分类与功能、LIM蛋白及其与其他蛋白之间的相互作用,以及LIM蛋白在心血管系统中的作用。

关键词： LIM蛋白家族研究进展 LIM结构域功能发育

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内源性和外源性一氧化氮对正常和滴注博莱霉素大鼠肺泡巨噬细胞生存的调节(英文)

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生理学报 2005年第5期57卷 619-626页

作者：陈晓玲黄善生刘昆艾洁河北医科大学基础医学研究所病理生理研究室石家庄050017 河北医科大学基础医学院生物化学教研室石家庄050017

分别用一氧化氮(nitric oxide,NO)供体硝普钠(sodium nitroprusside,SNP)和前体L-精氨酸(L-arginin,L-Arg)孵育来自正常大鼠(alveolar macrophages from normal rats,normal AMs)和滴注博莱霉素大鼠的肺泡巨噬细胞(alveolar macrophages from BLM-treated rats,BLM AMs),以探讨NO对不同状态细胞生存的调节。用凋亡和细胞周期评价细胞生存,细胞内Bcl-2 和Bax蛋白含量探讨其分子机制。结果如下:(1)BLM AMs的凋亡多于normal AMs;G0／G1期BLM AMs数少于normal AMs:S+G2M期BLM AMs数与相应的normal AMs数间的差异无统计学意义;(2)与normal AMs相比,BLM AMs内 Bcl-2下凋,Bax上调;(3)与相应的对照比,SNP和L-Arg能诱导normal AMs和BLM AMs凋亡;L-Arg仅能增加S+G2M 期BLM AMs数:(4)SNP和L-Arg诱导normal AMs内Bcl-2下调和Bax上调,但不能使BLM AMs内的Bcl-2和Bax发生上述变化:(5)L-Arg下调BLM AMs内的Bax。上述结果显示:NO能诱导BLM AMs和normal AMs凋亡;Bcl-2和Bax 与NO诱导的normal AMs凋亡有关,而与NO诱导的BLM AMs的凋亡无关,提示NO诱导normal AMs和BLM AMs分子机制不同;内源性NO促进BLM AMs增殖,这可能与其下调Bax有关。

关键词：一氧化氮肺泡巨噬细胞凋亡细胞周期肺纤维化

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不同时相血管平滑肌细胞受促分裂原刺激后基因表达谱及迁移活性的比较

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中国生物化学与分子生物学报 2000年第6期16卷 809-813页

作者：韩梅温进坤李相印周秀霞河北医科大学基础医学研究所生物化学研究室石家庄050017

探讨处于细胞周期不同时相的血管平滑肌细胞 (vascular smooth muscle cell,VSMC)受促分裂原刺激后基因表达谱及迁移行为的变化 .采用细胞平面及跨膜迁移试验 ,观察处于静止期和增殖状态的 VSMC在相同因素作用下迁移活性的变化 ;应用 No... 详细信息

探讨处于细胞周期不同时相的血管平滑肌细胞 (vascular smooth muscle cell,VSMC)受促分裂原刺激后基因表达谱及迁移行为的变化 .采用细胞平面及跨膜迁移试验 ,观察处于静止期和增殖状态的 VSMC在相同因素作用下迁移活性的变化 ;应用 Northern印迹杂交和体外转录分析 ,检测 VSMC迁移及增殖相关基因表达谱 .结果显示 ,处于静止期的 VSMC,在具有促分裂作用的细胞因子 b FGF、IL- β和 TNF- α刺激下 ,所迁移的距离分别是对照组的 5.8± 1 .53、4.68± 0 .89和 4.1 5± 1 .0 4倍 ,在相同条件下 ,处于增殖状态的细胞其迁移距离仅为静止期细胞的 1 /4;b FGF可诱导VSMC降解胶原成分进行跨膜迁移 ;杂交及体外转录分析证实 ,静止期的 VSMC被 b FGF诱导后 ,迁移相关基因基质金属蛋白酶 - 2 (matrix metalloproteinase 2 ,MMP- 2 )和组织基质金属蛋白酶 - 2抑制剂 (tissue inhibitor of metalloproteinase 2 ,TIMP- 2 )及增殖相关基因骨桥蛋白 (osteopontin,OPN)和 c- jun同时被活化 ;相反 ,处于增殖时相的细胞在该因子作用下 ,仅有 OPN和 c- jun基因进行转录 .提示 ,处于细胞周期不同时相的 VSMC受促分裂原刺激后迁移活性和迁移及增殖相关基因表达谱明显不同 ,在相同因素作用下 ,静止期细胞的迁移相关基因表达水?

关键词：血管平滑肌细胞迁移促分裂原细胞周期时相

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骨桥蛋白的制备及功能研究

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中国老年学杂志 2004年第8期24卷 725-727页

作者：柴锡庆郑斌韩梅杨淑丽温进坤河北医科大学基础医学研究所生物化学与分子生物学研究室河北石家庄050017

目的　探讨骨桥蛋白 (OPN)对血管平滑肌细胞是否具有促黏附及趋化作用。方法　从大鼠源性血管平滑肌细胞的细胞培养基中纯化OPN ,制备家兔抗OPN多克隆抗体。用酶联免疫吸附及迁移分析方法测定OPN对血管平滑肌细胞的影响。结果　骨桥蛋... 详细信息

目的　探讨骨桥蛋白 (OPN)对血管平滑肌细胞是否具有促黏附及趋化作用。方法　从大鼠源性血管平滑肌细胞的细胞培养基中纯化OPN ,制备家兔抗OPN多克隆抗体。用酶联免疫吸附及迁移分析方法测定OPN对血管平滑肌细胞的影响。结果　骨桥蛋白能够促进血管平滑肌细胞发生黏附 ,且其促黏附功能呈浓度依赖性。黏附率在实验开始后 90～ 1 2 0min区段达到最高。与对照相比 ,OPN刺激血管平滑肌细胞的迁移距离明显增加。结果　骨桥蛋白是血管平滑肌细胞的黏附。

关键词：骨桥蛋白血管平滑肌细胞黏附迁移

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河北省汉族人群CYP4502C9和VKORC1基因多态性与华法林剂量相关性研究

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中华流行病学杂志 2010年第2期31卷 218-222页

作者：张亚楠崔炜韩梅郑斌刘凡谢瑞芹杨晓红谷国强郑红梅温进坤河北医科大学第二医院河北省心脑血管病研究所心内科石家庄050000 河北医科大学基础医学研究所生物化学与分子生物学研究室

目的了解河北省汉族人群CYP4502C9和VKORC1的基因多态性分布与其他不同民族之间的差异，探讨CYP4502C9＊3＋1075C／A和VKORC1—1639A／G基因多态性与华法林剂量的关系。方法随机选取门诊体检的健康人487名，检测CYP4502C9＊3＋1075C／A... 详细信息

目的了解河北省汉族人群CYP4502C9和VKORC1的基因多态性分布与其他不同民族之间的差异，探讨CYP4502C9＊3＋1075C／A和VKORC1—1639A／G基因多态性与华法林剂量的关系。方法随机选取门诊体检的健康人487名，检测CYP4502C9＊3＋1075C／A和VKORC1—1639A／G基因型及其分布频率，并与国外多个民族的CYP4502C9＊3＋1075C／A和VKORC1—1639A／G的基因多态性进行比较。选取服用华法林稳定剂量的患者101例，检测其基因型并结合其个体差异和华法林的稳定剂量进行分析。结果487名正常人CYP4502C9＊3＋1075C／A基因型中，AA型为449名（92．2％），AC型36名（7．4％），CC型2名（0．4％）；VKORC1—1639A／G基因型中AA型为415名（85-2％），GA型72名（14．8％），未发现GG型（0．0％）。采用多元逐步回归得出有关华法林稳定剂量的方程：In（D）=0．346＋O．017（体重）-0．376（CYP4502C9＊3＋1075C／A）＋0．148（VKORCl—1639A／G）-O．002（年龄）（r=0．827，P=0．02）。结论汉族人群CYP4502C9和VKORCl存在明显的基因多态性。CYP4502C9＊3＋1075C／A和VKORCl—1639A／G的基因型和患者个体之间的体重、年龄差异是影响华法林稳定剂量的因素。

关键词：华法林基因多态性多聚酶链反应限制性片段长度多态性

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