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中国药理学与毒理学杂志 2021年第9期35卷 671-671页

作者：苏晓梅张丹参河北医科大学基础医学院药理学教研室河北石家庄050017 河北科技大学化学与制药工程学院河北石家庄050018

星形胶质细胞(AS)是中枢神经系统内含量最丰富的神经胶质细胞,约占脑总体积的50%,其数量约为神经元的10倍。AS与神经元之间存在广泛而复杂的信息传递,以直接或间接作用的方式与神经元发生联系。在生理情况下,AS对神经元发挥营养支持的作... 详细信息

星形胶质细胞(AS)是中枢神经系统内含量最丰富的神经胶质细胞,约占脑总体积的50%,其数量约为神经元的10倍。AS与神经元之间存在广泛而复杂的信息传递,以直接或间接作用的方式与神经元发生联系。在生理情况下,AS对神经元发挥营养支持的作用,可参与神经元的糖、脂肪和体液代谢过程。在缺血性脑卒中发生时,由于AS线粒体内可以储存大量糖原,使得其对低氧环境具有弹性和适应性,AS可以通过自身生物能量和线粒体动力学的变化为损伤神经元提供能量支持。不仅如此,在缺血性脑卒中发生时,AS可以通过隧道纳米管或细胞外囊泡与周围的受损神经元进行线粒体交换,释放功能性线粒体。同时,神经元也可以释放受损线粒体并将其转移至AS内,进行内吞和降解,实现线粒体的循环利用,使得线粒体在健康细胞和受损细胞之间发生串扰。此外,AS的终足与中枢神经系统中的微动脉和毛细血管接触,成为神经元网络和血管网络之间的桥梁,通过影响血管直径来调节脑血流。综上,AS可以作为治疗缺血性脑卒中的重要靶点之一,改善缺血性脑卒中的临床治疗效果。

关键词：星形胶质细胞缺血性脑卒中生物能量线粒体转移脑血流

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星形胶质细胞与神经退行性疾病的相关性

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中国药理学与毒理学杂志 2019年第10期 868-869页

作者：苏晓梅张丹参河北医科大学基础医学院药理教研室河北科技大学化学与制药工程学院

星形胶质细胞是脑内数量最多的胶质细胞,其总体积占脑总体积20%-50%,星形胶质细胞与神经元之间存在广泛而复杂的信息传递,以直接、相互作用的方式与神经元发生联系,在神经系统的发育、突触传递、调控信息处理与信号传递、离子平衡、调... 详细信息

星形胶质细胞是脑内数量最多的胶质细胞,其总体积占脑总体积20%-50%,星形胶质细胞与神经元之间存在广泛而复杂的信息传递,以直接、相互作用的方式与神经元发生联系,在神经系统的发育、突触传递、调控信息处理与信号传递、离子平衡、调节神经和突触的可塑性等方面都发挥重要作用。星形胶质细胞在损伤状态下可以快速反应,转变为反应性星形胶质细胞,此时其保护功能己经丧失,反而会加剧损伤。反应性星形胶质细胞并非为"全或无"概念,而是经历了从可逆的基因表达改变、正常结构区域内的细胞肥大,到永久性胶质瘢痕形成、组织结构改变这一系列变化的星形胶质细胞的总称。胶质瘢痕的增殖多伴随着胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达增加,因此组织中GFAP升高是中枢神经系统对损伤作出反应的一个标志性信号。星形胶质细胞功能异常或退变严重破坏了星形胶质细胞-神经元之间的信息传递,导致神经元功能紊乱,诱发神经退行性疾病的产生,包括帕金森病、阿尔茨海默病、亨廷顿病及肌萎缩脊髓侧索硬化症。因此,星形胶质细胞绝不仅仅是神经退行性疾病中的配角,而是极其重要的参与者。阐明星形胶质细胞与神经退行性疾病的相关性可以为其有效药物的研发提供新的思路。

关键词：星形胶质细胞神经退行性疾病相关性

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环状RNA在血管平滑肌细胞表型重塑中调节作用

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生命的化学 2020年第10期40卷 1808-1814页

作者：曹利孔鹏韩梅河北医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室河北省医学生物技术重点实验室石家庄050017

环状RNAs(circular RNAs,circRNAs)是一种内源性RNA,并且在哺乳动物中90%以上的circRNAs是由2~3个外显子反向剪接形成500~700个核苷酸长度的单链、共价闭合RNA,其生物学合成过程受特定的顺式作用元件和反式作用因子调控。随着转录组测... 详细信息

环状RNAs(circular RNAs,circRNAs)是一种内源性RNA,并且在哺乳动物中90%以上的circRNAs是由2~3个外显子反向剪接形成500~700个核苷酸长度的单链、共价闭合RNA,其生物学合成过程受特定的顺式作用元件和反式作用因子调控。随着转录组测序和转录组测序技术的快速发展,circRNAs的功能得到了深入解读,发现circRNAs既可作为"miRNA海绵",也可充当蛋白质"骨架",在转录和转录后的水平影响其反向剪接、亚细胞定位、亲本基因转录、蛋白质翻译等过程。近年来研究发现,circRNAs可通过作用于α-平滑肌肌动蛋白、平滑肌肌球蛋白重链、蛋白钙调素和基质金属蛋白酶等基因,发挥调节血管平滑肌表型重塑,促进或抑制平滑肌细胞增殖、迁移的作用。本文主要综述了circRNAs的调节功能及不同的转导途径对血管平滑肌细胞表型重塑的调控作用。

关键词：环状RNA 血管平滑肌细胞表型重塑

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miRNAs作为血管稳态重要调节因子参与动脉瘤发生

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中国细胞生物学学报 2019年第6期41卷 1165-1173页

作者：崔妍孔鹏韩梅河北医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室河北省医学生物技术重点实验室

动脉瘤是指直径达到正常毗邻动脉段1.5倍以上的不对称动脉扩张。目前临床处理仍以手术为主,尚无其他有效的治疗方法。miRNAs是一类长度约为22个核苷酸的单链非编码RNA,通常结合靶基因mRNA的3′非翻译区(UTR),在转录后水平调控基因的表... 详细信息

动脉瘤是指直径达到正常毗邻动脉段1.5倍以上的不对称动脉扩张。目前临床处理仍以手术为主,尚无其他有效的治疗方法。miRNAs是一类长度约为22个核苷酸的单链非编码RNA,通常结合靶基因mRNA的3′非翻译区(UTR),在转录后水平调控基因的表达。研究发现, miRNAs参与动脉瘤形成及发展过程。该文综述了miRNAs参与动脉瘤的研究进展。

关键词： miRNAs 动脉瘤血管内皮细胞血管平滑肌细胞细胞外基质

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跨膜蛋白ESDN的表达与血管内膜増生的初步研究

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河北医科大学学报 2019年第7期40卷 753-757,798页

作者：贡悦王齐松王凡轲孟泽琪刘晓宁聂磊河北医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室

目的探讨跨膜蛋白内皮和平滑肌细胞来源的neuropilin样分子(endothelial and smooth muscle cell-derived neuropilin-like molecule,ESDN)与血管内膜増生的关系。方法利用 Esdn 基因敲除( Esdn^-/-)小鼠及野生型小鼠建立颈总动脉结扎... 详细信息

目的探讨跨膜蛋白内皮和平滑肌细胞来源的neuropilin样分子(endothelial and smooth muscle cell-derived neuropilin-like molecule,ESDN)与血管内膜増生的关系。方法利用 Esdn 基因敲除( Esdn^-/-)小鼠及野生型小鼠建立颈总动脉结扎血管内膜增生模型,采用HE染色检测不同时间血管内膜增生情况,计算内膜/中膜(intima/media,I/M)厚度比。Western blot和免疫荧光检测 Esdn^-/-小鼠及野生型小鼠颈总动脉结扎不同时间血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)收缩表型标志物平滑肌α-肌动蛋白(smooth muscle α-actin,SM α-actin)和SM22α以及增殖表型标志物骨桥蛋白(osteopontin,OPN)的表达情况。结果随颈总动脉结扎时间延长,野生型小鼠和 Esdn^-/-小鼠I/M厚度比值呈明显升高趋势。结扎术后7d、14d和21d,Esdn^-/-小鼠I/M厚度比值明显高于野生型小鼠;野生型小鼠和 Esdn^-/-小鼠颈总动脉壁中VSMC收缩表型标志物SM α-actin、SM22α表达逐渐降低;术后7d、14d、21d,Esdn^-/-小鼠血管组织中SM α-actin、SM22α表达显著低于野生型小鼠;野生型小鼠和 Esdn^-/-小鼠颈总动脉壁中增殖型VSMC标志基因OPN表达逐渐升高;术后3d、7d、14d、21d,Esdn^-/-小鼠血管组织中OPN表达显著高于野生型小鼠。结论 ESDN的表达参与平滑肌细胞表型转化和血管重塑过程。

关键词：血管内膜增生跨膜蛋白肌细胞,平滑肌

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桑黄素下调KLF5表达改善糖尿病血管炎性病变

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上海中医药大学学报 2020年第1期34卷 57-64页

作者：周静杨高山聂子元张龙秦岩河北医科大学第二医院内分泌科河北石家庄050000 河北中医学院基础医学院生物化学与分子生物学教研室河北石家庄050000 河北医科大学第二医院血液内科河北石家庄050000 河北省血液病重点实验室河北石家庄050000 河北大学附属医院中心实验室河北省放化疗机制与规程研究重点实验室河北保定071000

目的:研究桑黄素对糖尿病血管炎性病变的作用及其分子机制。方法:①选取24只db/db小鼠,随机分为模型组(高糖高脂饲料)12只和桑黄素治疗组(高糖高脂饲料+腹腔注射40 mg/kg桑黄素)12只,另设12只C57BL/6J小鼠作为正常对照组(正常饲料)。各... 详细信息

目的:研究桑黄素对糖尿病血管炎性病变的作用及其分子机制。方法:①选取24只db/db小鼠,随机分为模型组(高糖高脂饲料)12只和桑黄素治疗组(高糖高脂饲料+腹腔注射40 mg/kg桑黄素)12只,另设12只C57BL/6J小鼠作为正常对照组(正常饲料)。各组均给予相应干预,连续12周。末次给药后,分离腹主动脉。HE染色后光镜下观察血管组织形态学变化,PCR检测血管组织Krüppel样因子5(KLF5)和白介素-6(IL-6)的mRNA表达水平。②采用不同浓度的葡萄糖(5.5、10、15、25 mmol/L)刺激血管平滑肌细胞(VSMCs)24 h,或高浓度葡萄糖(25 mmol/L)处理VSMCs不同时间(0、6、12、24 h),Western blot检测细胞KLF5和IL-6蛋白表达水平。③采用不同浓度(0、5、10、50、100、200μmol/L)桑黄素干预VSMCs细胞24 h后,MTT法检测并计算细胞生长抑制率。④将VSMCs细胞分为空白组、高糖组、桑黄素组和高糖+桑黄素组。先给予高糖组和高糖+桑黄素组细胞25 mmol/L葡萄糖刺激24 h后,再给予桑黄素组和高糖+桑黄素组细胞10μmol/L桑黄素干预24 h,Western blot检测各组细胞KLF5和IL-6蛋白表达水平。⑤应用转染技术构建KLF5过表达的VSMCs细胞,将细胞分为空白组、KLF5过表达组、桑黄素组和KLF5过表达+桑黄素组,细胞转染6 h后,桑黄素组和KLF5过表达+桑黄素组细胞给予10μmol/L桑黄素干预24 h,Western blot检测各组细胞KLF5和IL-6蛋白表达水平。结果:①与正常对照组相比,模型组小鼠出现明显的血管平滑肌细胞增生及紊乱,并有斑块形成;且血管组织KLF5和IL-6的mRNA表达量显著增加(P<0.01)。桑黄素能有效抑制糖尿病小鼠的血管病变,并显著下调KLF5和IL-6的mRNA表达量(P<0.01)。②葡萄糖可以诱导VSMCs细胞KLF5和IL-6蛋白表达增加(P<0.01),且呈浓度和时间依赖性。选择25 mmol/L葡萄糖干预24 h作为模型诱导条件。③随着桑黄素浓度增加,VSMCs细胞的生长抑制率显著增高(P<0.01)。选择10μmol/L进行后续实验。④与空白组相比,高糖组细胞KLF5和IL-6蛋白表达显著升高(P<0.01),桑黄素组细胞KLF5和IL-6蛋白表达明显降低(P<0.01);与高糖组相比,高糖+桑黄素组细胞KLF5和IL-6蛋白表达显著下调(P<0.01)。⑤与空白组相比,KLF5过表达组细胞KLF5的mRNA和蛋白表达水平均明显升高(P<0.01),且IL-6蛋白表达水平亦显著上调(P<0.01);与桑黄素组相比,KLF5过表达+桑黄素组细胞KLF5和IL-6蛋白表达水平显著上调(P<0.01)。结论:桑黄素可能通过抑制KLF5表达改善糖尿病血管炎性病变。

关键词：桑黄素糖尿病血管病变 KLF5 IL-6 db/db小鼠血管平滑肌细胞

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星形胶质细胞与神经退行性疾病的相关性

星形胶质细胞与神经退行性疾病的相关性

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中国药理学会第十五次全国学术大会

作者：苏晓梅张丹参河北医科大学基础医学院药理教研室河北科技大学化学与制药工程学院

关键词：星形胶质细胞神经退行性疾病相关性

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NMDA受体的作用位点研究

NMDA受体的作用位点研究

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2019全国老年痴呆与认知障碍相关疾病学术大会

作者：苏晓梅张丹参河北医科大学基础医学院药理学教研室河北科技大学化学与制药工程学院

N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）受体是离子型谷氨酸受体家族中的重要一员,是神经系统发育以及神经毒性的核心。NMDA受体通道大分子上存在着许多独立的结合位点。①谷氨酸（Glu）作用位点:Glu作为NMDA受体经典的激动剂,高浓度Glu的作用于NMD... 详细信息

N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）受体是离子型谷氨酸受体家族中的重要一员,是神经系统发育以及神经毒性的核心。NMDA受体通道大分子上存在着许多独立的结合位点。①谷氨酸（Glu）作用位点:Glu作为NMDA受体经典的激动剂,高浓度Glu的作用于NMDA受体识别部位,使细胞膜去极化,离子通道开放;低浓度的Glu则不能使NMDA门控的离子通道打开,需要甘氨酸（Gly）的参与。②Gly作用位点:Gly受体和NMDR有相同的分布,并对NMDA受体激活有增强作用。Gly能增加Glu与NMDA识别位点的亲和力,使通道开放频率增加4～6倍。研究表明NMDA受体被Glu激活前,需要Gly的结合,Gly起着NMDA受体协同激动剂的作用。③Mg作用位点:Mg是兴奋性氨基酸受体NMDA非竞争性阻断剂和Ca拮抗剂。NMDA受体通道的开放受配体和膜电位的双重控制。在静息态的膜蛋白条件下,Mg等镶嵌在通道深部,阻挡胞内外离子交换,这时即使Glu和Gly结合到NMDA受体,Mg也会阻断离子的流出。细胞去极化时Mg2+被电场力移开,离子得以流动,Mg的抑制作用逐渐减小并消失,故Mg是调节NMDA受体的重要位点。④Zn作用位点:Zn可以非竞争性地拮抗NMDA受体的反应。升高Gly的浓度不能翻转Zn的抑制作用,表明Zn有单独的结合位点。Zn对NMDA受体的抑制作用需要两个结合位点参与,其一是高亲和力、非电压依赖性结合位点,其二是低亲和力呈电压依赖性的结合位点。⑤多胺作用位点:多胺对NMDA的电流有多重影响。多胺的增强效应可分为:非Gly依赖性刺激作用（饱和Glu和Gly会引起全细胞电流增加）;Gly依赖性刺激作用（在Gly浓度亚饱和的情况下,精胺能增加NMDA受体与Gly的亲和力,对NMDA电流有刺激效应）。多胺的抑制效应也可分为电压依赖性通道抑制作用,以及Glu受体亲和力降低作用。其中,Gly是Glu为开放受体通道所必需的,多胺对通道开放起正性调节作用,而Zn和Mg则起负性调节作用。此外,这些位点之间还存在着复杂的交互作用,NMDA受体通道是由复杂多样的因子所调节的。NMDA受体是学习记忆相关神经网络中一个相对中心的关键位点,中枢系统中广泛参与学习记忆、突触可塑性、缺血性脑损伤及神经退行性疾病等多种生理病理过程。本文以NMDA受体的作用位点为切入点,阐明NMDA受体的调节作用,以期为神经系统相关疾病的研究提供理论指导。

关键词： N-甲基-D-天冬氨酸谷氨酸甘氨酸作用位点

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肺泡微石症的基础与临床研究进展

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医学研究生学报 2018年第10期31卷 1110-1114页

作者：彭子衡周大鹏尚丹丹河北医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室石家庄050017

肺泡微石症是一种罕见的肺部遗传性疾病,呈常染色体隐性遗传,该病以肺泡内出现钙化微石为主要特征。编码钠磷酸盐转运体的SLC34A2基因突变是造成该病的主要原因,该基因突变导致肺泡内磷酸盐的聚集,进而促进肺泡内钙化微石的形成。该病... 详细信息

肺泡微石症是一种罕见的肺部遗传性疾病,呈常染色体隐性遗传,该病以肺泡内出现钙化微石为主要特征。编码钠磷酸盐转运体的SLC34A2基因突变是造成该病的主要原因,该基因突变导致肺泡内磷酸盐的聚集,进而促进肺泡内钙化微石的形成。该病的主要特征是肺内有"风暴样"改变,具有典型的影像学改变、病理学特征和与之紧密相连的特定的遗传学基因突变。该病起病隐匿,病程迁延,预后不佳,除肺移植外,无有效治疗方法。文章对肺泡微石症的流行病学,分子遗传学特征和临床特征进行综述。

关键词：肺泡微石症 SLC34A2 突变

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3种细胞裂解液提取总蛋白在Western blot中的效果分析

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河北医科大学学报 2019年第3期40卷 263-267页

作者：庞雅湘聂启昊刘晓宁王帅冯琦牛洪琳河北医科大学临床学院实验中心河北石家庄050031 河北师范大学附属中学高中部河北石家庄050017 河北医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室河北石家庄050017 河北医科大学第三医院肾内科河北石家庄050051

目的寻找一种适用于培养血管平滑肌细胞总蛋白提取的细胞裂解液配方,以更好地应用于Westernblot分析。方法采用3种常用的细胞裂解液(Ⅰ液,Ⅱ液和Ⅲ液),提取总蛋白后Bradford法测定蛋白含量,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离提取的蛋白,Wester... 详细信息

目的寻找一种适用于培养血管平滑肌细胞总蛋白提取的细胞裂解液配方,以更好地应用于Westernblot分析。方法采用3种常用的细胞裂解液(Ⅰ液,Ⅱ液和Ⅲ液),提取总蛋白后Bradford法测定蛋白含量,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离提取的蛋白,Western blot检测PDGFR-β、Akt、GAPDH和SM22α等不同分子量的蛋白表达情况。结果 3种细胞裂解液得到的蛋白含量差异无统计学意义(P>0.05)。小分子量蛋白(<50 000),细胞裂解液Ⅱ和细胞裂解液Ⅲ得到的光密度值高于细胞裂解液Ⅰ(P<0.05);中等分子量蛋白(50 000～80 000),细胞裂解液Ⅱ和细胞裂解液Ⅲ得到的光密度值高于细胞裂解液Ⅰ,细胞裂解液Ⅲ得到的光密度值高于细胞裂解液Ⅱ(P<0.05);高分子量蛋白(>80 000),细胞裂解液Ⅲ得到的光密度值高于细胞裂解液Ⅰ(P<0.05)。Western blot结果显示:PDGFR-β,细胞裂解液Ⅱ和细胞裂解液Ⅲ所检测到的条带光密度值显著高于细胞裂解液Ⅰ(P<0.05);Akt,细胞裂解液Ⅱ和细胞裂解液Ⅲ所检测到的条带光密度值显著高于细胞裂解液Ⅰ,细胞裂解液Ⅲ所检测到的条带光密度值显著高于细胞裂解液Ⅱ(P<0.05);GAPDH,细胞裂解液Ⅱ所检测到的条带光密度值显著高于细胞裂解液Ⅰ和细胞裂解液Ⅲ(P<0.05);SM22α,细胞裂解液Ⅱ所检测到的条带光密度值显著高于细胞裂解液Ⅰ和细胞裂解液Ⅲ(P<0.05)。结论确定了一种裂解效果更好、能满足对不同分子量蛋白进行Western blot检测的裂解液配方,为以Western blot为主的蛋白检测相关研究提供了一定的参考。

关键词：肌细胞,平滑肌细胞培养技术细胞裂解液

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