检索结果-内蒙古大学图书馆

中国兽医学报 2024年第12期44卷 2585-2590页

作者：雷白时李秀丽康佳梦张会文李伯森赵款张武超梁飞袁万哲河北农业大学河北保定071001 河北省兽医生物技术创新中心河北保定071001 承德市兽药管理站河北承德067000 石家庄市动物基因工程药物技术创新中心河北石家庄050800 河北伯瑞动物药业有限公司河北正定050800

为获得同时具有广谱抗细菌和抗病毒活性的猪β防御素2(PBD2)与猪α干扰素(PoIFN-α)重组融合蛋白,将2种蛋白的基因串联融合后插入pPICZαA载体,电转导入KM71H毕赤酵母细胞构建工程菌,经甲醇诱导表达后,浓缩分离重组蛋白,MTT法和猪红细... 详细信息

为获得同时具有广谱抗细菌和抗病毒活性的猪β防御素2(PBD2)与猪α干扰素(PoIFN-α)重组融合蛋白,将2种蛋白的基因串联融合后插入pPICZαA载体,电转导入KM71H毕赤酵母细胞构建工程菌,经甲醇诱导表达后,浓缩分离重组蛋白,MTT法和猪红细胞溶血试验测定其细胞毒性,并对重组融合蛋白的体外抗细菌和抗病毒活性进行评价。结果显示,成功获得了pPICZαA-PBD2-IFNα-KM71H毕赤酵母工程菌株,经诱导、表达、浓缩纯化后的融合蛋白PBD2-IFN-α的质量浓度为1.116g/L,相对分子质量为25kDa,当蛋白质量浓度低于4^(-4) g/L时对PK-15细胞和猪红细胞无明显毒性,融合蛋白在大肠杆菌或金黄色葡萄球菌混菌平板上产生的抑菌圈直径为(15.0±0.9)mm,均具有比较明显的抑菌活性,Reed-Muench法计算融合蛋白在PK-15中对水泡性口炎病毒(VSV)的抗病毒活性为8.89×10^(5) U/mL。为进一步开发该重组融合蛋白作为抗细菌和抗病毒产品奠定了理论基础。

关键词：猪β防御素2 猪α干扰素重组融合蛋白抗细菌抗病毒

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白头翁口服液的提取与澄清工艺的优化

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饲料研究 2023年第23期46卷 90-95页

作者：韩汝硕郑美如张趁戎畅要纬玉史万玉杜西翠王晓丹河北农业大学中兽医学院河北保定071001 河北锦坤动物药业有限公司河北辛集052360 石家庄市汇丰动物保健品有限公司河北辛集052360 河北省兽用中药制剂技术创新中心河北辛集052360

试验旨在优化白头翁口服液的提取和澄清工艺。采用L9(34)正交试验对白头翁口服液的水提与澄清工艺进行优化。试验固定提取次数3次,以液料比、浸泡时间、提取时间为考察因素,以盐酸小檗碱含量为评价指标,对水提工艺进行探索研究;以药液... 详细信息

试验旨在优化白头翁口服液的提取和澄清工艺。采用L9(34)正交试验对白头翁口服液的水提与澄清工艺进行优化。试验固定提取次数3次,以液料比、浸泡时间、提取时间为考察因素,以盐酸小檗碱含量为评价指标,对水提工艺进行探索研究;以药液浓度、澄清剂用量、絮凝温度为考察因素,以吸光度、盐酸小檗碱保留率为综合评价指标,对澄清工艺进行探索研究,同时对絮凝澄清工艺与醇沉澄清工艺进行比较。结果显示,白头翁口服液的最佳水提工艺为液料比10 mL/g、浸泡时间30 min、提取次数3次、每次提取时间70 min。最佳澄清工艺为药液浓度1∶7 g/mL,ZTC1+1天然澄清剂用量6%A、3%B,絮凝温度60℃。絮凝澄清工艺除杂后盐酸小檗碱平均保留率为70.89%,而醇沉澄清工艺的盐酸小檗碱平均保留率仅56.72%,且不同批次絮凝澄清制备口服液测定的含量保留率相对标准偏差(RSD)值<1.00%(n=3)。研究表明,试验优化的提取澄清工艺稳定可靠,可用于工业化生产。

关键词：白头翁口服液提取工艺澄清工艺 ZTC1+1天然澄清剂盐酸小檗碱

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重组猪干扰素α的原核表达及抗病毒活性

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中国兽医学报 2023年第2期43卷 245-252页

作者：李秀丽韩颖赵款张武超梁飞杨欢雷白时袁万哲河北农业大学河北保定071001 河北省兽医生物技术创新中心河北保定071001 石家庄市动物基因工程药物技术创新中心河北石家庄050800 河北伯瑞动物药业有限公司河北正定050800 山东省莒南县动物疫病预防控制中心山东莒南276600

为了探究重组猪干扰素(PoIFN-α)在体内外的抗病毒活性,利用pET-32a载体系统,构建了PoIFN-α的原核表达体系。在体外,MTT法在猪肾细胞(PK-15)和猪睾丸细胞(ST)上测定了其细胞毒性,并利用细胞病变抑制法测定其抗水泡性口炎病毒(VSV)、猪... 详细信息

为了探究重组猪干扰素(PoIFN-α)在体内外的抗病毒活性,利用pET-32a载体系统,构建了PoIFN-α的原核表达体系。在体外,MTT法在猪肾细胞(PK-15)和猪睾丸细胞(ST)上测定了其细胞毒性,并利用细胞病变抑制法测定其抗水泡性口炎病毒(VSV)、猪脑心肌炎病毒(EMCV)和猪伪狂犬病病毒(PRV)的活性,同时测定了重组蛋白作用PK-15细胞后干扰素刺激基因(ISGs)的转录水平;之后通过小鼠攻毒保护试验,测定了rPoIFN-α治疗后各组织器官的病毒载量,ELISA测定了小鼠血清中细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-10和IL-6的动态变化,并对整个试验期间小鼠出现的临床症状进行打分。结果显示,成功获得了原核表达的特异性重组蛋白rPoIFN-α,在细胞上抗病毒比活性达到1.67×10^(6)IU,对细胞没有损害作用,且显著上调了Mx1、OAS等因子的转录水平;在小鼠体内能明显拮抗EMCV和PRV的增殖,减少促炎因子的产生,延缓临床症状的出现。结果表明,原核表达重组蛋白rPoIFN-α在体内外均具有抗病毒活性,为进一步推进蛋白药物在临床上的应用奠定了基础。

关键词：重组猪干扰素α 大肠杆菌表达干扰素刺激基因细胞毒性抗病毒活性

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HPLC法测定甘草党参粗提物中的甘草酸含量

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饲料研究 2023年第13期46卷 118-121页

作者：戎畅杜西翠张趁刘麒韩汝硕要玮玉史万玉陈福星河北农业大学中兽医学院河北保定071001 河北锦坤动物药业有限公司河北辛集052360 河北省兽用中药制剂技术创新中心河北辛集052360 石家庄市汇丰动物保健品有限公司河北辛集052360

试验旨在建立液态饲料原料甘草党参粗提物的甘草酸含量检测方法。采用高效液相色谱法(HPLC),以甲醇-0.2mol/L醋酸铵-冰乙酸(67:33:1)为流动相进行等度洗脱,色谱柱为Agilent-C18(4.6 mm×250 mm,5μm),柱温为30℃,流速为1.0 mL/min,... 详细信息

试验旨在建立液态饲料原料甘草党参粗提物的甘草酸含量检测方法。采用高效液相色谱法(HPLC),以甲醇-0.2mol/L醋酸铵-冰乙酸(67:33:1)为流动相进行等度洗脱,色谱柱为Agilent-C18(4.6 mm×250 mm,5μm),柱温为30℃,流速为1.0 mL/min,检测波长为250 nm。结果显示,甘草酸检测质量浓度在50~1 000 mg/L范围内,甘草酸的线性方程为Y=7 775.2X-10.3,线性关系良好;该方法的回收率为96.09%,相对标准偏差(RSD)为1.13%。研究表明,试验所用方法准确性、重复性高,适用于测定饲料原料甘草党参粗提物的甘草酸含量。

关键词：党参甘草天然植物粗提物饲料原料甘草酸高效液相色谱法

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青黄常山颗粒防治鸡球虫病临床评价研究

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北方牧业 2023年第6期 19-20页

作者：刘小宝孔春梅王韫顾宪锐田丽芳韩若婵徐海城河北省防治动物球虫病中兽药技术创新中心河北保定071051 石家庄正道动物药业有限公司河北石家庄050200 保定职业技术学院畜牧兽医系河北保定071051

球虫病对鸡群的威胁极大,导致生产性能下降和患病率增高,而且能损害消化道卫生而继发于他人传染,严格限制着饲养场的身心健康发展。疫苗对防治家鸡球虫病有一定作用,但也有散毒和返强的危险性。抗生素的应用在防治鸡球虫病方面起到了作... 详细信息

球虫病对鸡群的威胁极大,导致生产性能下降和患病率增高,而且能损害消化道卫生而继发于他人传染,严格限制着饲养场的身心健康发展。疫苗对防治家鸡球虫病有一定作用,但也有散毒和返强的危险性。抗生素的应用在防治鸡球虫病方面起到了作用,但由于抗生素的长时间运用易发生不敏感性,而且药品残余亦影响到人体身体健康。随着中国舌尖安全性提高,抗生素减量化活动的推进,研究开发安全性、有效性、质量可控的防治鸡球虫病的药品有着重要意义。

关键词：鸡球虫病不敏感性黄常山临床评价减量化抗生素身心健康发展质量可控

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重组鸡白介素2和干扰素α融合蛋白的表达及生物学活性的检测

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河北农业大学学报 2021年第6期44卷 85-91页

作者：苗天姿赵款雷白时张武超庞敬红梁飞袁万哲汪恩强河北农业大学动物医学院河北保定071001 河北省兽医生物技术工程技术创新中心河北保定071001 河北伯瑞动物药业有限公司河北正定050800

为表达鸡的白介素-2(Interleukin-2,IL-2)和干扰素α(Interferon-α,IFN-α)融合蛋白,并进一步探究融合蛋白的生物学活性,本试验根据GenBank登录的鸡IL-2和IFN-α基因序列,使用linker连接成为嵌合基因,合成pET-32a-rChIL-2-IFN-α原核表达载体,转化至大肠杆菌BL21(DE3)经IPTG诱导表达。通过MTT法检测重组融合蛋白促鸡外周血淋巴细胞(PBLC)增殖活性;通过细胞病变抑制法检测重组融合蛋白在鸡胚成纤维细胞(CEF)上的抗病毒活性;通过RT-qPCR检测了融合蛋白对干扰素刺激基因和内源性干扰素的作用。结果表明,重组融合蛋白促PBLC增殖活性效果显著,在CEF上具有抗VSV活性;重组融合蛋白能够显著地上调CEF中5种干扰素刺激基因和内源性干扰素的mRNA转录水平。综上所述,本试验表达的重组融合蛋白具有促淋巴细胞增殖活性和抗病毒作用,试验结果为进一步探究融合蛋白在鸡体内的活性奠定了基础。

关键词：鸡IL-2 鸡IFN-α 融合蛋白抗病毒干扰素刺激基因

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鸡源性解淀粉芽孢杆菌B-4M-6发酵液对肉鸡生长性能、免疫功能及肠道健康的影响

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饲料研究 2023年第3期46卷 36-41页

作者：朱永明冯金民宋玉卓郗艳菊郝庆红河北维尔利动物药业集团有限公司河北石家庄050227 河北省功能性饲料添加剂技术创新中心河北石家庄050200 石家庄市兽用功能性添加剂工程技术中心河北石家庄050200 河北农业大学生命科学学院河北保定071001

试验旨在研究饮水中添加不同水平的解淀粉芽孢杆菌B-4M-6发酵液对肉鸡生长性能、肠道菌群、消化酶活性、血清生化、免疫指标的影响。选用1日龄健康肉雏鸡240只,随机分为4组,每组6个重复,每个重复10只鸡。对照组饮水中不添加任何药物,试... 详细信息

试验旨在研究饮水中添加不同水平的解淀粉芽孢杆菌B-4M-6发酵液对肉鸡生长性能、肠道菌群、消化酶活性、血清生化、免疫指标的影响。选用1日龄健康肉雏鸡240只,随机分为4组,每组6个重复,每个重复10只鸡。对照组饮水中不添加任何药物,试验Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组分别在饮水中添加0.1%、0.3%、0.5%菌含量为1.0×10^(9) CFU/mL的解淀粉芽孢杆菌B-4M-6发酵液。试验期42 d。结果显示,与对照组相比,全期试验Ⅱ组和Ⅲ组肉鸡平均日采食量均显著提高(P<0.05),料重比均显著降低(P<0.05);各试验组肉鸡的死亡率显著降低(P<0.05)。与对照组相比,试验Ⅱ组和Ⅲ组肉鸡肠道双歧杆菌的数量显著提高(P<0.05);试验Ⅲ组的乳酸菌含量显著增加(P<0.05),沙门氏菌含量显著降低(P<0.05);试验Ⅲ组肉鸡胰脏中胰蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶活性显著提高(P<0.05),十二指肠中胰蛋白酶、脂肪酶活性显著提高(P<0.05),试验Ⅱ组、Ⅲ组空肠中脂肪酶活性显著提高(P<0.05)。与对照组相比,试验第42 d,各试验组粪便中粗蛋白含量均显著降低(P<0.05)。与对照组相比,21日龄、42日龄各试验组肉鸡血清总蛋白含量均显著提高(P<0.05);21日龄时,试验Ⅲ组肉鸡血清葡萄糖含量显著提高(P<0.05),尿素氮含量显著降低(P<0.05),血清谷丙转氨酶活性显著降低(P<0.05);42日龄时,各试验组肉鸡血清高密度脂蛋白含量明显提高(P<0.05),试验Ⅲ组谷草转氨酶活性显著降低(P<0.05);试验Ⅲ组21日龄和42日龄肉鸡血清中免疫球蛋白A (IgA)、免疫球蛋白(IgM)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1 (IL-1)、白细胞介素-2 (IL-2)、白细胞介素-6 (IL-6)含量显著提高(P<0.05)。研究表明,饮水中添加0.5%的解淀粉芽孢杆菌B-4M-6发酵液可提高肉鸡生长性能及免疫功能,改善肠道健康。

关键词：解淀粉芽孢杆菌肉鸡生长性能肠道菌群消化酶活性

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基于Box-Behnken设计-响应面法优化改良葛根芩连汤提取工艺研究

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中兽医医药杂志 2024年第1期43卷 64-69页

作者：房思远刘贺赵子玉朱永明封晓慧李育明赵兵令河北农业大学中兽医学院河北保定071000 河北维尔利动物药业集团公司河北石家庄050200 河北凯盛医药科技有限公司河北石家庄050200 河北省中兽药产业技术研究院河北石家庄050200 河北省功能性饲料添加剂技术创新中心河北石家庄050200

优化和评价改良葛根芩连汤的提取工艺,为提高其临床适用性以及开发新兽药奠定基础。采用Box-Behnken设计-响应面法,以葛根素含量为评价指标,对提取次数、煎煮时间、加水量3个影响因素进行考察,并对响应面条件下17批样品进行定量分析,得... 详细信息

优化和评价改良葛根芩连汤的提取工艺,为提高其临床适用性以及开发新兽药奠定基础。采用Box-Behnken设计-响应面法,以葛根素含量为评价指标,对提取次数、煎煮时间、加水量3个影响因素进行考察,并对响应面条件下17批样品进行定量分析,得出各因素对葛根素提取率的影响程度。通过Box-Behnken中心组和设计建立数学模型分析回归模型方差以及响应面曲面图,获得改良葛根芩连汤最佳提取工艺为:提取3次,提取时间2 h,加水量9倍。通过工艺验证测得葛根素含量平均值为0.8108 mg/mL,与预测值0.8110 mg/mL接近。优化的改良葛根芩连汤最佳提取工艺特征有效成分溶出率高,稳定可行,可为该复方制剂的进一步研究提供理论依据。

关键词：葛根芩连汤葛根素提取工艺响应面法

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基于网络药理学探究鱼腥草桔蓝口服液对家禽呼吸道疾病的作用机制

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中兽医医药杂志 2023年第6期42卷 32-37,F0003页

作者：荣轩房思远赵子玉朱永明李育明赵兵令河北维尔利动物药业集团有限公司河北石家庄050200 河北省中兽药产业技术研究院河北石家庄050200 石家庄市禽用中药产业技术研究院河北石家庄050200 河北农业大学动物医学院河北保定071000 河北省功能性饲料添加剂技术创新中心河北石家庄050200

为探究鱼腥草桔蓝口服液治疗家禽呼吸道疾病的作用机制,本研究通过检索鱼腥草桔蓝口服液的化学成分及作用靶点,构建药物-靶点网络图和交集靶点蛋白质(PPI)相互作用网络图,并对交集靶点进行富集分析;通过分子对接技术对药物活性成分和核... 详细信息

为探究鱼腥草桔蓝口服液治疗家禽呼吸道疾病的作用机制,本研究通过检索鱼腥草桔蓝口服液的化学成分及作用靶点,构建药物-靶点网络图和交集靶点蛋白质(PPI)相互作用网络图,并对交集靶点进行富集分析;通过分子对接技术对药物活性成分和核心靶点进行分子对接验证。结果显示,鱼腥草桔蓝口服液在槲皮素、山奈酚和β-谷甾醇等活性成分的作用下,对白细胞介素-6(IL-6)、B淋巴细胞瘤-2(BCL2)、信号转导和转录激活因子3(STAT3)等关键靶点产生影响;GO功能富集获得58条生物过程条目、4条细胞组成条目、15条分子功能条目;KEGG通路分析显示,交集基因主要作用于C型凝集素受体信号通路、FoxO信号通路、MAPK信号通路和VEGF信号通路等多条信号通路,对家禽呼吸道疾病进行治疗。分子对接结果显示,药物关键成分与核心蛋白靶点有较好的结合性。结果表明鱼腥草桔蓝口服液可通过多成分、多靶点、多通路的机制治疗家禽呼吸道疾病。

关键词：鱼腥草桔蓝口服液家禽呼吸道疾病网络药理学分子对接

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基于网络药理学和分子对接探究四逆汤缓解鸡冷应激的作用机制

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动物医学进展 2025年第7期46卷 64-70页

作者：王韫孙艳玲李云波张娜杜西翠徐丹黄芳李丽敏赵兴华河北农业大学动物医学院河北保定071000 河北锦坤动物药业有限公司河北石家庄052360 河北省兽用中药制剂技术创新中心河北石家庄052360 保定职业技术学院河北保定071000 北京市通州区动物疫病预防控制中心北京100011

利用网络药理学探究四逆汤缓解鸡冷应激的作用机制并进行分子对接模拟验证。在中药系统药理学分析平台(TCMSP)等数据库搜集附子、干姜和炙甘草的活性成分及对应靶点,同时,在GeneCards数据库中获取鸡冷应激的相关靶点,通过韦恩在线作图... 详细信息

利用网络药理学探究四逆汤缓解鸡冷应激的作用机制并进行分子对接模拟验证。在中药系统药理学分析平台(TCMSP)等数据库搜集附子、干姜和炙甘草的活性成分及对应靶点,同时,在GeneCards数据库中获取鸡冷应激的相关靶点,通过韦恩在线作图工具筛选出这些靶点的交集,并对共有靶点进行蛋白互作和通路富集分析。利用AutoDock Vina1.1.2软件进行分子对接验证。四逆汤缓解鸡冷应激的主要活性成分为槲皮素、7-甲氧基-2-甲基异黄酮、山奈酚、β-谷甾醇和异鼠李素,核心靶点包括B细胞淋巴瘤-2基因(BCL-2)、丝裂原活化蛋白激酶3(MAPK3)、白细胞介素-1β(IL-1β)、胱天蛋白酶3(CASP3)和白细胞介素6(IL-6)。GO功能富集分析涉及生物过程72个、细胞组分145个以及分子功能64个;KEGG通路富集分析获得33条相关信号通路。分子对接的结果进一步验证,四逆汤的主要活性成分与核心靶点对接活性良好,结果为四逆汤在缓解鸡冷应激的应用奠定基础。

关键词：四逆汤鸡冷应激网络药理学

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