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绿色生态可持续发展与植物保护——中国植物保护学会第十二次全国会员代表大会暨学术年会

作者：马爱红路子云冉红凡刘文旭李建成河北省农林科学院植物保护研究所河北省农业有害生物综合防治工程技术研究中心农业部华北北部作物有害生物综合治理重点实验室

中红侧沟茧蜂(Microplitis mediatorHaliday)属膜翅目茧蜂科小蜂茧蜂亚科侧沟茧蜂属。该蜂属于独居性内寄生蜂(Solitary parasite),一头雌蜂平均产卵80头,最高可产200头以上;寄生蜂幼虫营容性寄生方式,一头寄主体内只能生产一头蜂,繁殖... 详细信息

中红侧沟茧蜂(Microplitis mediatorHaliday)属膜翅目茧蜂科小蜂茧蜂亚科侧沟茧蜂属。该蜂属于独居性内寄生蜂(Solitary parasite),一头雌蜂平均产卵80头,最高可产200头以上;寄生蜂幼虫营容性寄生方式,一头寄主体内只能生产一头蜂,繁殖力的高低与寄主龄期大小、蜂体的强弱、雌蜂交配是否充分以及营养状况有密切关系。寄生蜂的产卵量及产卵规律是室内大量繁殖及田间释放应用的重要参考依据,明确适宜的蜂虫比例是利用中间寄主繁殖中红侧沟茧蜂的关键技术之一。不同蜂虫比例对寄生率的影响结果表明,随着寄主数量的增加,寄生率呈下降趋势,但差异不明显。当蜂虫比为1:10时,其寄生率达到74.88%;蜂虫比为1:20时寄生率为74.5%、蜂虫比为1:30寄生率为51.00%、蜂虫比为1:40时寄生率为56.88%、蜂虫比为1:50时寄生率为45.73%。在大量繁殖中红侧沟茧蜂的过程中,同时考虑寄生率和未寄生粘虫的浪费问题,单纯提高蜂虫比例并不能提高繁蜂效果,反而增加繁蜂成本,建议接蜂的蜂虫比在1:(100)。不同蜂虫比对子代性比的影响结果表明,中红侧沟茧蜂具有孤雌产雄生殖特性,成虫羽化后不进行交配繁育出的子代均为雄性。不同蜂虫比例繁育的后代在同一天的雌雄比没有显著性差异,随寄生天数的增加而有所下降,但是下降趋势幅度不大。因此,在室内大量繁殖中红侧沟茧蜂时,除了合理的蜂虫比例外,还应考虑接蜂适期及持续寄生的时间,以保证最大的蜂茧生产率;田间释放时应考虑寄生蜂的寿命和不同成虫日龄的寄生能力,一般将蜂虫比定在1:(300);此外,一些环境因子也对寄生蜂的寄生产生影响。

关键词：中红侧沟茧蜂蜂虫比繁育

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营养物质对枯草芽孢杆菌NCD-2菌体生长和芽孢形成的调控

营养物质对枯草芽孢杆菌NCD-2菌体生长和芽孢形成的调控

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中国植物病理学会2017年学术年会

作者：付一帆郭庆港鹿秀云董丽红赵卫松张晓云李社增马平河北省农林科学院植物保护研究所河北省农业有害生物综合防治工程技术研究中心农业部华北北部作物有害生物综合治理重点实验室

枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)是一种应用广泛的生防细菌,对多种植物病害表现良好的生防效果。枯草芽孢杆菌由于能形成抗逆、耐热的芽孢而有利于产品货架期的延长和产品开发,因此,成为开发微生物源农药的重要资源。由我实验室筛选得... 详细信息

枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)是一种应用广泛的生防细菌,对多种植物病害表现良好的生防效果。枯草芽孢杆菌由于能形成抗逆、耐热的芽孢而有利于产品货架期的延长和产品开发,因此,成为开发微生物源农药的重要资源。由我实验室筛选得到的枯草芽孢杆菌NCD-2菌株对多种植物土传病害表现较好的防治效果,以该菌株为主要活性成分的微生物农药已获得正式农药登记。目前已建立了NCD-2菌株的规模化发酵工艺,但其发酵水平还有提高的空间。为了能进一步提高发酵水平,筛选能提高芽孢总量、芽孢形成率,缩短发酵时间的碳源、氮源等营养物质变得势在必行。利用微生物表型芯片技术(Phenotype:Microassays)发现了5种对NCD-2菌株生长有明显影响的营养物质,碳源物质有:木糖、阿拉伯糖、核糖;氮源物质有:谷氨酰胺、半胱氨酸。以M9为基础培养基,通过单因素摇瓶发酵实验发现:含有阿拉伯糖或者谷氨酰胺的培养基,芽孢形成的时间早,以阿拉伯糖为碳源的改良培养基在24h时就开始形成芽孢,此时以葡萄糖为碳源的M9基础培养基中没有发现芽孢形成。更值得注意的是,以谷氨酰胺为氮源的改良培养基,在36h时芽孢形成率就达到了78.8%,菌体总量达到6.1×10～7CFU/mL,而此时以氯化铵为氮源的M9基础培养基中菌体总量达到6.8×10～7CFU/mL,但是还没有芽孢的形成。这一结果可以为实际生产过程中的菌体发酵和产品加工提供思路。

关键词：枯草芽孢杆菌芽孢营养物质

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河北省甘薯细菌性软腐病病原鉴定

河北省甘薯细菌性软腐病病原鉴定

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中国植物病理学会第十三届青年学术研讨会

作者：高波王容燕马娟李秀花陈书龙河北省农林科学院植物保护研究所河北省农业有害生物综合防治工程技术研究中心农业部华北北部作物有害生物综合治理重点实验室保定071000

甘薯(Ipomoea batatas Lam.)在我国是继小麦、水稻、玉米、大豆之后的第五大粮食作物.甘薯细菌性病害是近几年危害我国甘薯生产的一类重要的病害,严重威胁着甘薯产业的健康发展.目前国内外报道的甘薯细菌性病害主要包括甘薯瘟病和甘薯... 详细信息

甘薯(Ipomoea batatas Lam.)在我国是继小麦、水稻、玉米、大豆之后的第五大粮食作物.甘薯细菌性病害是近几年危害我国甘薯生产的一类重要的病害,严重威胁着甘薯产业的健康发展.目前国内外报道的甘薯细菌性病害主要包括甘薯瘟病和甘薯茎腐病,其中甘薯茎腐病发生最为广泛,已在我国的南北方薯区均有报道.近几年河北省部分甘薯种植区甘薯呈细菌性腐烂的情况时有发生,我们于2015-2016年在对河北省甘薯病害调查中,在大田多次发现甘薯软腐状病样,其症状在'龙薯9'上主要表现为薯块呈水浸状腐烂,变软,伴有恶臭味,与之前报道的甘薯茎腐病的症状相似.经对元氏和雄县采集的样品进行室内病原分离纯化,最终获得了三株代表性菌株DD1、YLT2和XX3,三株菌均能在CVP(crystal violet pectate)培养基上产生圆形凹陷.将三株菌分别回接到薯块上,以接种无菌水为对照,28℃灭菌沙土中保湿培养,24 h后观察发现所有实验组均有腐烂病斑产生且与田间症状一致,而对照组无症状,说明三株菌均为病原菌.通过Biolog微生物鉴定系统(ver 5.2.01,Hayward,CA)分析发现DD1、YLT2 和 XX3 与 Pectobacterium carotovorum ***(Pcc)最为相似,SIM值分别为0.638、0.610和0.840.进一步通过对DD1、YLT2和XX3的16S rDNA(对应 GenBank 登录号为 KU180445、KU180448 和 KU180447)、acnA(KU882668、KU882672和KU882671)和mdh(KU882675、KU882674和KU882676)基因的克隆和序列分析结果显示,DD1和XX3与Pcc的菌株同源性最高为99％～100％,而YLT2则与*** ***(Pco)的菌株同源性最高为99％～100％,该结果与微生物鉴定系统的结果有所差异.为了进一步验证分子鉴定的结果,通过利用一种专门用于Pectobacterium亚种鉴定的生理生化检测方法(Schaad et al.2001)最终确定DD1和XX3为Pcc,而YLT2为Pco,即与分子鉴定的结果一致.由此确认导致河北元氏和雄县甘薯软腐状的病原为Pcc和Pco,此类病原在甘薯上的危害在我国尚属首次报道,该病害暂命名为甘薯细菌性软腐病.

关键词：甘薯细菌性软腐病 Pectobacterium carotovorum subsp.carotovorum P.carotovorum subsp.odoriferum

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梨树挥发物成分的鉴定及其对梨叶斑蛾的触角电位反应

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安徽农业科学 2017年第9期45卷 145-148页

作者：张晓芳刘红敏张爱红方川张涛河北省农林科学院植物保护研究所河北省农业有害生物综合防治工程技术研究中心农业部华北北部作物有害生物综合治理重点实验室河北保定071000 信阳农林学院农学院河南信阳464000

[目的]筛选梨叶斑蛾引诱物质。[方法]利用气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)分析了梨树挥发物的主成分,并通过触角电位仪(EAG)测定了梨叶斑蛾对主要挥发物的电生理反应。[结果]梨叶中共鉴定出包含萜类、酯类、醛类及醇类在内的24种主要挥发物... 详细信息

[目的]筛选梨叶斑蛾引诱物质。[方法]利用气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)分析了梨树挥发物的主成分,并通过触角电位仪(EAG)测定了梨叶斑蛾对主要挥发物的电生理反应。[结果]梨叶中共鉴定出包含萜类、酯类、醛类及醇类在内的24种主要挥发物。梨叶斑蛾雌雄蛾对供试挥发物均可产生EAG反应,其中雌蛾对芳樟醇、月桂烯、反-β-罗勒烯的反应最明显;雄蛾对芳樟醇、反-β-罗勒烯、α-法尼烯的反应最强烈。剂量反应试验结果表明,梨叶斑蛾雌蛾对3种供试化合物的EAG活性与化合物的剂量之间呈正相关性。[结论]试验结果为制定基于植物源的梨叶斑蛾监测与防治策略提供了理论依据。

关键词：梨叶斑蛾梨叶挥发物触角电位气相色谱-质谱联用

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枯草芽孢杆菌BAB-1代谢产物对黄瓜白粉病的防治作用

枯草芽孢杆菌BAB-1代谢产物对黄瓜白粉病的防治作用

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中国植物病理学会第十三届青年学术研讨会

作者：张晓云鹿秀云郭庆港李社增王培培赵卫松马平河北省农林科学院植物保护研究所/河北省农业有害生物综合防治工程技术研究中心/农业部华北北部作物有害生物综合治理重点实验室保定071000

枯草芽孢杆菌BAB-1是本实验室筛选出的一株对黄瓜白粉菌及番茄灰霉菌等气传病原菌具有较强抑制作用的生防菌.为明确菌株BAB-1的抑菌机理,本试验采用子叶喷雾法探究菌株BAB-1代谢产物不同成分对黄瓜白粉病的防治效果;通过灌根法研究该菌... 详细信息

枯草芽孢杆菌BAB-1是本实验室筛选出的一株对黄瓜白粉菌及番茄灰霉菌等气传病原菌具有较强抑制作用的生防菌.为明确菌株BAB-1的抑菌机理,本试验采用子叶喷雾法探究菌株BAB-1代谢产物不同成分对黄瓜白粉病的防治效果;通过灌根法研究该菌株代谢产物不同成分的诱导抗病能力.结果表明,菌株BAB-1的最佳发酵时间为44 h,此时发酵液(100倍稀释)对黄瓜白粉病的防效高达91.56％;发酵上清液和菌体悬浮液稀释100倍后的防效分别为83.47％和28.48％,说明发酵上清液在黄瓜白粉病的防治中发挥了主要作用;发酵上清液中的蛋白(100倍稀释)对黄瓜白粉病的防效为69.96％,而脂肽(100倍稀释)的防效仅为16.65％;诱导抗性试验结果表明菌株BAB-1发酵上清液能够诱导黄瓜产生抗病性,并且上清液中的蛋白是诱导黄瓜对白粉病产生抗性的主要成分,其诱导防效为19.2％,而脂肽不具诱导抗性作用.

关键词：枯草芽孢杆菌蛋白脂肽防病机理

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应用性信息素迷向法防治桃园梨小食心虫

应用性信息素迷向法防治桃园梨小食心虫

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中国植物保护学会第十二次全国会员代表大会暨2017年学术年会

作者：刘文旭冉红凡马爱红路子云李建成河北省农林科学院植物保护研究所河北省农业有害生物综合防治工程技术研究中心农业部华北北部作物有害生物综合治理重点实验室保定 071000

梨小食心虫属鳞翅目小卷叶蛾科，为世界性蛀果害虫之一.在我国除西藏外，其他各地均有分布.在果产区为害梨、桃等果树甚重.由于其钻蛀习性，防治较为困难，常规的化学防治难以达到防治效果，而且容易造成环境污染、杀伤天敌、果品农药... 详细信息

梨小食心虫属鳞翅目小卷叶蛾科，为世界性蛀果害虫之一.在我国除西藏外，其他各地均有分布.在果产区为害梨、桃等果树甚重.由于其钻蛀习性，防治较为困难，常规的化学防治难以达到防治效果，而且容易造成环境污染、杀伤天敌、果品农药残留超标等问题.利用昆虫性信息素迷向干扰成虫交配是近年国内外兴起的一种新型害虫可持续治理技术，具有专一性强、无毒无害、不杀伤天敌、不污染环境等优点，近年来在田间害虫防治方面应用越来越广泛.2012-2016年，笔者连续5年在河北省保定市顺平县100亩桃园开展应用迷向丝迷向干扰成虫交配防治梨小食心虫，于3月底初见梨小食心虫成虫前在桃园悬挂迷向丝，每棵树悬挂1根，在迷向防治区悬挂三角型诱捕器监测成虫数量，每天统计诱蛾量，计算迷向率.同时在迷向区和对照区分别调查折梢率和蛀果率.结果表明，迷向防治区桃园梨小食心虫迷向率5年分别为97.39％、95.01％、97.24％、96.03％和99.72％，迷向效果明显;迷向区折梢率为2.25％，对照区折梢率为19.4％，防治效果为88.40％;迷向区蛀果率为0.11％，对照区为8.31％，防治效果为98.68％.无论对于新梢还是果实，大面积应用迷向丝对梨小食心虫均取得较好的防治效果.利用性信息素迷向法对靶标害虫进行防治，干扰雄成虫迷失方向，丧失寻找雌虫的能力，降低交配概率，达到减少害虫种群数量的目的，是一种经济高效的防治手段，应用越来越广泛.应用迷向丝防治害虫的效果受多种因素的影响，在迷向法不能完全控制害虫时，应与其他防治措施结合.

关键词：梨小食心虫性信息素迷向防治

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不同蜂虫比例对中红侧沟茧蜂繁蜂效果的影响

不同蜂虫比例对中红侧沟茧蜂繁蜂效果的影响

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中国植物保护学会第十二次全国会员代表大会暨2017年学术年会

作者：马爱红路子云冉红凡刘文旭李建成河北省农林科学院植物保护研究所河北省农业有害生物综合防治工程技术研究中心农业部华北北部作物有害生物综合治理重点实验室保定071000

中红侧沟茧蜂(Microplitis mediator Haliday)属膜翅目茧蜂科小蜂茧蜂亚科侧沟茧蜂属。该蜂属于独居性内寄生蜂(Solitary parasite)，一头雌蜂平均产卵80头，最高可产200头以上;寄生蜂幼虫营容性寄生方式，一头寄主体内只能生产一头蜂... 详细信息

中红侧沟茧蜂(Microplitis mediator Haliday)属膜翅目茧蜂科小蜂茧蜂亚科侧沟茧蜂属。该蜂属于独居性内寄生蜂(Solitary parasite)，一头雌蜂平均产卵80头，最高可产200头以上;寄生蜂幼虫营容性寄生方式，一头寄主体内只能生产一头蜂，繁殖力的高低与寄主龄期大小、蜂体的强弱、雌蜂交配是否充分以及营养状况有密切关系。寄生蜂的产卵量及产卵规律是室内大量繁殖及田间释放应用的重要参考依据，明确适宜的蜂虫比例是利用中间寄主繁殖中红侧沟茧蜂的关键技术之一。

关键词：中红侧沟茧蜂蜂虫比繁育

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降解无机磷的解淀粉芽孢杆菌PHODB35的分离筛选与鉴定

降解无机磷的解淀粉芽孢杆菌PHODB35的分离筛选与鉴定

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中国植物病理学会第十三届青年学术研讨会

作者：赵卫松苏振贺王培培郭庆港鹿秀云李社增张晓云马平河北省农林科学院植物保护研究所农业部华北北部作物有害生物综合治理重点实验室河北省农业有害生物综合防治工程技术研究中心保定071000

磷是植物生长过程中不可缺少的大量元素之一.目前农业生产上大多是通过反复施加磷肥来获得高产,但随着磷肥使用量的增加,其利用率逐年降低,并且增加了农业成本.土壤中含有大量的磷,但其易与Ca2+、Al3+等离子结合形成难溶性磷酸盐,在土... 详细信息

磷是植物生长过程中不可缺少的大量元素之一.目前农业生产上大多是通过反复施加磷肥来获得高产,但随着磷肥使用量的增加,其利用率逐年降低,并且增加了农业成本.土壤中含有大量的磷,但其易与Ca2+、Al3+等离子结合形成难溶性磷酸盐,在土壤中被固定导致难以被植物吸收利用.因此,如何将土壤中的难溶性磷转化为能够被植物吸收利用的可溶性磷,筛选对作物具有促生功能的微生物,对于减少化肥的使用提供了重要的思路.本研究利用选择性培养基NBRIP筛选无机磷降解菌,通过钼锑抗比色法测定发酵液中可溶性磷含量达75.74 mg/L,经16S rRNA和gyrB基因序列比对分析,初步鉴定PHODB35菌株为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens).盆栽试验研究结果表明,接种PHODB35菌株发酵液后对番茄植株株高、地上部鲜重、地下部鲜重与空白对照之间均存在显著差异,增加率分别为28.21％、22.59％、113.06％;同时经PHODB35菌株处理后土壤中的有效磷和番茄植株中的有效磷增长率分别为45.08％和16.24％,表明PHODB35菌株具有较大的开发利用潜力.

关键词：无机磷降解菌解淀粉芽孢杆菌促生作用

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PhoR/PhoP双组分对枯草芽孢杆菌NCD-2菌株中surfactin合成的影响

PhoR/PhoP双组分对枯草芽孢杆菌NCD-2菌株中surfactin合成的影响

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中国植物病理学会2017年学术年会

作者：董丽红郭庆港王培培李社增鹿秀云张晓云赵卫松马平河北农业大学植物保护学院河北省农林科学院植物保护研究所/河北省农业有害生物综合防治工程技术研究中心/农业部华北北部作物有害生物综合治理重点实验室

Surfactin是由芽孢杆菌类细菌产生的一种脂肽类物质,具有溶血活性和排油能力,并且与细菌生物膜形成和根际定殖能力相关。PhoR/PhoP双组分系统是枯草芽孢杆菌中普遍存在的一种调控系统。在低磷环境下,位于细胞膜上的组氨酸蛋白激酶PhoR... 详细信息

Surfactin是由芽孢杆菌类细菌产生的一种脂肽类物质,具有溶血活性和排油能力,并且与细菌生物膜形成和根际定殖能力相关。PhoR/PhoP双组分系统是枯草芽孢杆菌中普遍存在的一种调控系统。在低磷环境下,位于细胞膜上的组氨酸蛋白激酶PhoR自磷酸化后将自身获取的磷酸基团转移到位于细胞质中的调控因子PhoP上,磷酸化的调控因子PhoP通过与下游目的基因的启动子区域相结合进而调控目的基因的表达。笔者分析了PhoR/PhoP双组分对生防枯草芽孢杆菌NCD-2菌株中surfactin的合成的影响。结果发现,在低磷环境下,同NCD-2野生型菌株相比,PhoR和PhoP突变子显著降低了NCD-2菌株的溶血活性;NCD-2菌株的排油能力很强,而PhoR和PhoP突变子均丧失排油能力;NCD-2野生型菌株的生物膜形成能力分别是PhoR和PhoP突变子的2.0倍和2.2倍。通过AKTA Purifier 10:fast protein liquid chromatography（FPLC）色谱分析技术证明NCD-2菌株可以产生surfactin,并发现在低磷条件中,野生型菌株NCD-2所产生的surfactin分别是PhoR和PhoP突变子的2.3倍和6.4倍。通过RT-qPCR技术分析了surfactin合成酶基因srfAA在不同菌株中的表达情况,结果表明在低磷环境下,PhoR和PhoP突变子中srfAA基因的表达量比NCD-2野生型菌株均降低了2.1倍。构建PhoR和PhoP突变子的互补菌株,证明互补菌株均能使突变子的性状恢复到野生型水平。以上结果证明,PhoR/PhoP双组分影响surfactin的合成。

关键词：枯草芽孢杆菌双组分脂肽类抗生素溶血性生物膜

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梨小食心虫寄生蜂--丽下腔茧蜂的生物学特性及生防潜力

梨小食心虫寄生蜂--丽下腔茧蜂的生物学特性及生防潜力

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中国植物保护学会第十二次全国会员代表大会暨2017年学术年会

作者：冉红凡马爱红刘文旭路子云李建成河北省农林科学院植物保护研究所河北省农业有害生物综合防治工程技术研究中心农业部华北北部作物有害生物综合治理重点实验室保定071000

本文对采自保定市郊桃园一种梨小食心虫寄生蜂进行了描述.经鉴定该蜂为膜翅目(Hymenoptera)茧蜂科(Braconidae)窄径茧蜂亚科(Agathidinae)的丽下腔茧蜂[Therophilus festivus (Muesebeck)].笔者对其学名、发生分布及生物学特性进行了简... 详细信息

本文对采自保定市郊桃园一种梨小食心虫寄生蜂进行了描述.经鉴定该蜂为膜翅目(Hymenoptera)茧蜂科(Braconidae)窄径茧蜂亚科(Agathidinae)的丽下腔茧蜂[Therophilus festivus (Muesebeck)].笔者对其学名、发生分布及生物学特性进行了简述,并对其生防潜力进行了讨论.1953年Muesebeck从中国山东的梨小食心虫[Grapholita molesta (Busck)]中养出窄径茧蜂1新种,将其归入窄径茧蜂属(Agathis),命名为Agathis festivus.此后Shenefelt(1970)、Bhat和Gupta (1977)、Chou (1981)等均采用这一学名.1989年Chou和Sharkey将其归入闭腔茧蜂属(Bassus),命名为丽闭腔茧蜂(Bassus festivus).2010年van Achterberg和Long将其归入下腔茧蜂属Therophilus,命名为丽下腔茧蜂(Therophilus festivus).

关键词：梨小食心虫丽下腔茧蜂物学特性生防潜力

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