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第十四届全国植物线虫学学术研讨会

作者：李秀花马娟高波王容燕陈书龙河北省农林科学院植物保护研究所/河北省农业有害生物综合防治工程技术研究中心/农业部华北北部作物有害生物综合治理重点实验室保定071000

小麦根腐线虫病是一种世界性病害，其病原线虫为根腐线虫.在国外，澳大利亚、加拿大、东南亚、南亚和美国都有根腐线虫的报道，并且在小麦生产上已造成严重的产量损失，对小麦生产构成严重威胁.在澳大利亚，根腐线虫引起产量损失在38％ ... 详细信息

小麦根腐线虫病是一种世界性病害，其病原线虫为根腐线虫.在国外，澳大利亚、加拿大、东南亚、南亚和美国都有根腐线虫的报道，并且在小麦生产上已造成严重的产量损失，对小麦生产构成严重威胁.在澳大利亚，根腐线虫引起产量损失在38％～ 85％，在墨西哥产量损失在10％～40％，在爱尔兰产量损失在70％.国内已有根腐线虫危害其他作物的相关报道.在2006年河南首次发现小麦上有短体线虫危害，对小麦造成产量损失在13.58％～15.46％.河北省是我国的小麦生产大省，其小麦种植面积与产量始终位居全国前三名.在河北省还没有报道在小麦上发现小麦根腐线虫.本研究主要对河北省小麦根腐线虫病的发生与分布区域进行系统调查，通过调查明确河北省小麦根腐线虫病的发生与分布状况，为其综合治理提供理论基础.2014-2017年，在小麦返青后到拔节期间，随机选择小麦地块，每块地随机选择10个点，取小麦根际土样和小麦根系，土样混匀后用浅盘法分离土样中的线虫，小麦根系洗净后用浅盘法分离根系中的线虫，在显微镜下镜检并计数.对根系分离出的根腐线虫初步用分子方法进行鉴定.通过对河北省7个地区38个县486个不同的采样点进行调查，发现小麦根际土壤中的植物寄生线虫种类主要有7个属，数量由多到少依次为小麦孢囊线虫、根腐线虫属、矮化线虫属、螺旋线虫属、垫刃线虫属、盘旋线虫属、茎线虫属，小麦根系中主要的线虫种类有4个属小麦孢囊线虫、根腐线虫属、螺旋线虫属、矮化线虫属.在486个不同的采样点中有315个样点分离出了根腐线虫，总检出率为64.81％.河北省的每个小麦地区都有发生，其中保定地区根腐线虫检出率最高，达96％，检出率最低的是沧州地区，为35.48％，各地区依据根腐线虫检出率大小顺序依次为：保定、邢台、石家庄、唐山(主要玉田和滦南)、衡水、邯郸、沧州.调查中发现在小麦水肥较好的地区，如保定、邢台、石家庄、唐山的玉田和滦南等根腐线虫发生较重，而在贫瘠土壤中根腐线虫的检出率相对较低，如沧州、邯郸、衡水根腐线虫发生相对较轻.不同地区小麦根腐线虫病的发生程度不同，同一地区不同地块的根腐线虫密度差别也较大.在沧州地区，根腐线虫的发生程度最轻，发病地块的根腐线虫数量大多在5个/100mL土以下，其中海兴县8.3％发病地块的根腐线虫数量在15.1～20个/100mL土;衡水地区的根腐线虫发生程度稍重于沧州地区，发病地块的根腐线虫数量大多在10个/100mL土，其中景县有8.3％发病地块的根腐线虫数量在40.1 ～45个/100mL土;其他5个地区发病地块的根腐线虫数量大多在15个/100mL土以下，在唐山地区的滦南有2.7％发病地块的根腐线虫数量在15.1 ～20个/100mL土，邢台地区的柏乡有5％发病地块的根腐线虫数量在15.1～20个/100mL土，邯郸地区的临漳县和肥乡县分别有3.8％和16.7％发病地块的根腐线虫数量分别在15.1 ～20个/100mL土和20.1～30个/100mL土，石家庄地区的藁城有7.1％发病地块的根腐线虫数量在30.1～40个/100mL土，保定地区的清苑县有11.1％发病地块的根腐线虫数量在100～150个/100mL土，而保定地区的安新县分别有19％和9.6％发病地块的根腐线虫数量在20.1～ 30个/100mL土和30.1～50个/100mL土.在这38个县中根腐线虫发生较严重的县是安新、无极、赵县、藁城、高邑和易县.通过分子方法初步鉴定出河北省小麦根腐病原线虫为落选短体线虫(Pratylenchus neglectus)和斯克里布纳根腐线虫(Pratylenchus scribneri).

关键词：根腐线虫发生分布

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对韭菜迟眼蕈蚊高毒力Bt资源的筛选与应用

对韭菜迟眼蕈蚊高毒力Bt资源的筛选与应用

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第十三届全国青年植保科技创新学术研讨会暨全国植物保护博士后论坛

作者：宋健曹伟平杜立新河北省农林科学院植物保护研究所河北省农业有害生物综合防治工程技术研究中心农业部华北北部作物有害生物综合治理重点实验室保定071000

韭菜迟眼蕈蚊(Bradysia odoriphaga Yang et Zhang)俗称韭蛆,属双翅目眼蕈蚊科迟眼蕈蚊属,是影响韭菜产量和品质的重要害虫,每年造成产量损失达30％～80％,经济损失超过30％.该虫主要为害百合科蔬菜的韭菜、大蒜、大葱和洋葱,其次为害... 详细信息

韭菜迟眼蕈蚊(Bradysia odoriphaga Yang et Zhang)俗称韭蛆,属双翅目眼蕈蚊科迟眼蕈蚊属,是影响韭菜产量和品质的重要害虫,每年造成产量损失达30％～80％,经济损失超过30％.该虫主要为害百合科蔬菜的韭菜、大蒜、大葱和洋葱,其次为害菊科、藜科、十字花科、葫芦科和伞形科等6科30多种蔬菜,泛分布于我国东北、华北、华中、西北等地,是我国的特有害虫.目前生产上主要依靠化学农药进行防治,一方面,韭蛆繁殖快、隐蔽性强、防治难度大,导致菜农不规范过量使用化学农药进行防治;另一方面,长期大量使用化学农药增强害虫抗药性、污染环境、杀伤鸟类、害虫再猖獗的恶性循环,不能达到对害虫种群的有效控制,同时造成韭菜农药残留超标,使消费者健康受到威胁,并造成恶劣的社会影响.为此,寻找环境友好、安全有效的防治措施,成为防治韭菜迟眼蕈蚊亟待解决的问题.近年来,河北省农林科学院植物保护研究所从河北、河南、山东等韭菜产地,采集土样5 000余份,分离到苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis简称Bt)2 000余株,2013年通过室内生物测定筛选到6株对韭蛆高毒力的Bt菌株,其中JQ23菌株对韭蛆杀虫活性最高,对韭菜迟眼蕈蚊2龄幼虫72h的LC50值为8.38× 106芽胞/mL.经室内盆栽防治试验结果表明,菌株JQ23在1×107芽胞/mL浓度下,采用根部精准滴灌法连续用药3次,间隔7d,对韭菜迟眼蕈蚊的防治效果达到86.28％.目前针对该菌株研制出一套以棉籽饼粉和大豆饼粉为主的中试发酵条件,并制成水剂(7.2× 109芽胞/mL),粉剂(2.07× 1010芽胞/g)和颗粒剂(4.00× 109芽胞/g)三种剂型.通过室内生物活性评价,明确三种剂型对韭蛆2龄幼虫的LC50与原始菌株效果无显著差异,且各剂型在室温条件下均可稳定保存10个月.2014-2017年,在河北韭菜主产区沧州肃宁和邢台南宫建立了试验示范基地,经春季、秋季和扣棚三个栽培期的田间试验,明确JQ23水剂对韭菜迟眼蕈蚊表现出良好的田间防治效果,1×108芽胞/mL浓度时对韭蛆的防治效果达77.67％,防治效果稳定.JQ23菌株能够有效控制韭菜迟眼蕈蚊为害,满足了我国绿色防控、发展生态农业、可持续发展要求,丰富了我国Bt资源,具有良好的应用前景.

关键词：韭菜迟眼蕈蚊苏云金芽胞杆菌资源筛选田间应用

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马铃薯腐烂茎线虫Dd-unc-87基因的RNAi致死效应分析

马铃薯腐烂茎线虫Dd-unc-87基因的RNAi致死效应分析

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第十四届全国植物线虫学学术研讨会

作者：高波马娟王容燕李秀花陈书龙河北省农林科学院植物保护研究所/河北省农业有害生物综合防治工程技术研究中心/农业部华北北部作物有害生物综合治理重点实验室保定071000

马铃薯腐烂茎线虫(Dttylenchus destructor)引起的甘薯茎线虫病,给我国的甘薯产业生产造成了严重损失.在实际生产中线虫的防治主要为化学防治,药剂主要有机磷类、氨基甲酸酯类等.因马铃薯腐烂茎线虫对不良环境具有很强的耐受力,可选择... 详细信息

马铃薯腐烂茎线虫(Dttylenchus destructor)引起的甘薯茎线虫病,给我国的甘薯产业生产造成了严重损失.在实际生产中线虫的防治主要为化学防治,药剂主要有机磷类、氨基甲酸酯类等.因马铃薯腐烂茎线虫对不良环境具有很强的耐受力,可选择的杀线虫剂品种又很有限,目前茎线虫病的防治非常困难.田间防治中大量的施用化学药剂,不仅会污染环境,还将造成其抗药性水平增加进而其用药量增加的恶性循环.线虫病的防治工作面临严峻形势.因此,急需开发一种新的线虫控制方法,例如通过dsRNA/siRNA介导的基因沉默(RNAi)来开发抗线虫类作物即具有很好的前景.秀丽小杆线虫的UNC-87蛋白是线虫体壁肌肉的重要组成部分,在线虫的运动中发挥着重要的作用.本研究对马铃薯腐烂茎线虫的unc-87同源基因(Dd-unc-87)进行了研究,其cDNA序列长1 471bp,ORF区域长为1134bp,编码一个含377个氨基酸的蛋白质,预测蛋白分子量为42ku,等电点为7.08;UNC-87蛋白含有7个Calponin-like结构域,N端没有信号肽,预测其可能存在于细胞核中.Dd-unc-87的基因组序列长为7 369 bp,基因组结构中包含12个外显子,11个内含子.Southern杂交结果显示用XbaI和EcoRI酶切的基因组泳道中只出现一条带,可得unc-87在基因组中为单拷贝基因.将所得cDNA基因序列进行Blastx比对和系统发育分析结果显示马铃薯腐烂茎线虫与松材线虫的亲缘关系最近,其次为大豆孢囊线虫和根结线虫.用来自unc-87两端和中间的三个靶位点片段dsRNA处理线虫24h后,qPCR结果显示靶基因的沉默效率最高的为2号区段dsRNA处理线虫,所以利用2号段dsRNA来进行下面的实验.受unc-87基因2号区段dsRNA处理的线虫靶基因表达量显著降低;沙柱通过率与对照组差异不显著;在胡萝卜上的繁殖量要显著的低于对照组,下降约49％.说明unc-87基因可能在线虫迁移中的作用不明显,而在线虫的繁殖中发挥正调控的作用.

关键词：马铃薯腐烂茎线虫 Dd-unc-87基因 RNAi致死效应

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甘薯象耳豆根结线虫的初报

甘薯象耳豆根结线虫的初报

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第十四届全国植物线虫学学术研讨会

作者：高波马娟王容燕李秀花陈书龙河北省农林科学院植物保护研究所河北省农业有害生物综合防治工程技术研究中心农业部华北北部作物有害生物综合治理重点实验室保定071000

甘薯寄生线虫病是甘薯生产上严重病害之一,特别是在中国长江中下游和南方薯区,根结线虫为害较重,本研究应用分子生物学手段对来自广东湛江和重庆甘薯上的根结线虫种类进行了鉴定.通过利用根结线虫属通用引物MF/MR,以及南方根结线虫特异... 详细信息

甘薯寄生线虫病是甘薯生产上严重病害之一,特别是在中国长江中下游和南方薯区,根结线虫为害较重,本研究应用分子生物学手段对来自广东湛江和重庆甘薯上的根结线虫种类进行了鉴定.通过利用根结线虫属通用引物MF/MR,以及南方根结线虫特异引物Mi-F/Mi-R,爪哇根结线虫特异引物Fjav/Rjav和象耳豆根结线虫特异引物Me-F/Me-R初步鉴定结果表明两地的根结线虫均为象耳豆根结线虫,进一步对28S rRNA D2D3区域和rDNA-IGS2区域进行Blast比对和系统发育分析,最终确定来自两地的发病薯块的病原线虫均为象耳豆根结线虫.

关键词：甘薯象耳豆根结线虫病害防控

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列当生防菌Br-2的DsRed红色荧光标记及定殖

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植物保护学报 2017年第4期44卷 664-670页

作者：王亚娇纪莉景栗秋生王连生孔令晓河北省农林科学院植物保护研究所河北省有害生物综合防治工程技术研究中心农业部华北北部作物有害生物综合治理重点实验室保定071000

为探明生防菌Br-2在分枝列当体内及番茄根围的定殖能力,采用PEG-CaCl_2介导的原生质体转化体系将红色荧光蛋白基因DsRed转入到菌株Br-2中,并构建其生长曲线,测定其对分枝列当种子萌发的抑制率,通过共聚焦显微镜观察其在分枝列当茎内及... 详细信息

为探明生防菌Br-2在分枝列当体内及番茄根围的定殖能力,采用PEG-CaCl_2介导的原生质体转化体系将红色荧光蛋白基因DsRed转入到菌株Br-2中,并构建其生长曲线,测定其对分枝列当种子萌发的抑制率,通过共聚焦显微镜观察其在分枝列当茎内及番茄根围的定殖情况。结果表明:通过原生质体转化体系得到了标记菌株Br-2-DsRed,继代培养5代后,其在共聚焦显微镜下仍可观察到亮红色荧光,经PCR检测带有DsRed基因,证明其稳定性好。标记菌株Br-2-DsRed与野生菌株Br-2的生长曲线基本一致,对分枝列当种子萌发的抑制率分别为75.86%和74.14%,无显著差异。显微观察发现,标记菌株Br-2-DsRed接种1 d后即能够侵染分枝列当的茎部表皮,3 d后主要分布在茎表皮和厚壁细胞间隙,5 d后侵染到厚壁细胞及维管束细胞内部并导致茎部腐烂;而标记菌株Br-2-DsRed不能侵染番茄根尖的内部,主要定殖在番茄根尖表面。

关键词：列当生防菌红色荧光蛋白原生质体转化定殖

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列当生防菌层出镰刀菌Br-1发酵条件的优化及田间防治效果

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中国生物防治学报 2017年第5期33卷 692-698页

作者：王亚娇纪莉景栗秋生肖颖王连生孔令晓河北省农林科学院植物保护研究所/河北省有害生物综合防治工程技术研究中心/农业部华北北部作物有害生物综合治理重点实验室保定071000

列当是根寄生杂草,很难防除。菌株Br-1是从感病列当中分离出的对列当有较高防治效果的层出镰刀菌。为了提高菌株Br-1的产孢量,本研究通过单因素试验和正交设计试验对其培养基和发酵条件进行了优化。结果表明,菌株Br-1适宜的发酵培养基... 详细信息

列当是根寄生杂草,很难防除。菌株Br-1是从感病列当中分离出的对列当有较高防治效果的层出镰刀菌。为了提高菌株Br-1的产孢量,本研究通过单因素试验和正交设计试验对其培养基和发酵条件进行了优化。结果表明,菌株Br-1适宜的发酵培养基为葡萄糖1%,NH4NO_3 0.2%,KH_2PO_4 0.3%,Mg SO4·7H_2O0.1%;优化后的培养条件为:最初pH 5.0,培养温度24℃,装液量20%,振荡速度190 r/min,发酵时间6 d。较优化前的初始培养基和培养条件产孢量提高了257.5倍。在田间防治试验中菌株Br-1对弯管列当的防治效果最高可达67.2%。

关键词：层出镰刀菌发酵优化培养基防治效果

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甘薯蚁象对不同甘薯品种植物挥发物的EAG和嗅觉反应

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昆虫学报 2017年第11期60卷 1285-1291页

作者：贾小俭马娟高波李秀花张涛陈书龙王容燕河北省农林科学院植物保护研究所河北省农业有害生物综合防治工程技术研究中心农业部华北北部作物有害生物综合治理重点实验室河北保定071000

【目的】为筛选对甘薯蚁象Cylas formicarius(Fabricius)有引诱作用的植物挥发性物质。【方法】采用顶空气体采样法收集5个甘薯品种的植物挥发物,通过气相-质谱联用系统(GC-MS)进行物质鉴定及定量分析,测定甘薯蚁象成虫对候选挥发物的... 详细信息

【目的】为筛选对甘薯蚁象Cylas formicarius(Fabricius)有引诱作用的植物挥发性物质。【方法】采用顶空气体采样法收集5个甘薯品种的植物挥发物,通过气相-质谱联用系统(GC-MS)进行物质鉴定及定量分析,测定甘薯蚁象成虫对候选挥发物的触角电位(EAG)反应和嗅觉趋向选择行为。利用Y型嗅觉仪测定甘薯蚁象成虫对5个甘薯品种茎叶的嗅觉反应。【结果】5种甘薯品种的植物挥发物种类和含量有所差异。7种候选挥发物(罗勒烯、柠檬烯、壬醛、β-石竹烯、葎草烯、法尼烯和乙酸-顺-3-己烯酯)均引起甘薯蚁象雌、雄成虫的EAG反应。其中,雌虫对柠檬烯、壬醛和β-石竹烯的反应相对值较大;而引起雄虫反应相对值较大的挥发物为罗勒烯、柠檬烯、葎草烯。在趋向行为反应中,柠檬烯和壬醛对甘薯蚁象雄虫的吸引作用高于对照,而雌虫对葎草烯、柠檬烯有极显著的趋向选择。甘薯蚁象成虫对5种茎叶的反应率为40.90%~65.21%,且5个甘薯品种的茎叶挥发物均没有显著的引诱作用(P>0.05)。【结论】甘薯蚁象雌、雄成虫对甘薯植物挥发物具有不同的EAG及趋向行为反应,气味化合物柠檬烯与甘薯蚁象偏爱选择密切相关。

关键词：甘薯蚁象寄主植物甘薯植物挥发物 EAG反应嗅觉反应

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不同机制杀菌剂对小麦白粉病的敏感性及与三唑酮的交互抗性

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植物保护学报 2017年第2期44卷 331-336页

作者：毕秋艳马志强韩秀英张小风王文桥赵建江河北省农林科学院植物保护研究所河北省农业有害生物综合防治工程技术研究中心农业部华北北部作物有害生物综合治理重点实验室保定071000

为明确三唑酮和氟环唑、吡唑醚菌酯、啶酰菌胺、嘧菌环胺、乙嘧酚5种不同作用机制的杀菌剂对小麦白粉病的敏感性及交互抗性,采用田间小区试验和室内喷雾离体叶段法测定了不同杀菌剂对小麦白粉病的防治效果。结果表明,5种不同作用机制杀... 详细信息

为明确三唑酮和氟环唑、吡唑醚菌酯、啶酰菌胺、嘧菌环胺、乙嘧酚5种不同作用机制的杀菌剂对小麦白粉病的敏感性及交互抗性,采用田间小区试验和室内喷雾离体叶段法测定了不同杀菌剂对小麦白粉病的防治效果。结果表明,5种不同作用机制杀菌剂对小麦白粉病的防治效果可达90%以上,而三唑酮最高的防治效果仅为72.17%;小麦白粉病菌群体对氟环唑、吡唑醚菌酯、啶酰菌胺、嘧菌环胺、乙嘧酚的敏感性EC50分别在0.087~1.901、0.058~1.402、0.186~3.014、0.222~6.005、0.006~1.742μg/mL之间,5种不同作用机制杀菌剂的敏感性均呈连续单峰曲线,可作为小麦白粉病菌对5种不同作用机制杀菌剂的敏感基线。研究表明,三唑酮与氟环唑、吡唑醚菌酯、啶酰菌胺、嘧菌环胺、乙嘧酚之间不存在交互抗性。

关键词：小麦白粉病菌三唑酮敏感基线交互抗性

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河北省黄瓜霜霉病菌对甲霜灵和嘧菌酯的抗性动态及七种药剂的田间防效

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植物保护学报 2017年第5期44卷 849-855页

作者：孟润杰韩秀英吴杰赵建江路粉王文桥河北省农林科学院植物保护研究所河北省农业有害生物综合防治工程技术研究中心农业部华北北部作物有害生物综合治理重点实验室保定071000

为明确黄瓜霜霉病菌对甲霜灵和嘧菌酯的抗性动态及相应药剂对黄瓜霜霉病的田间防效,采用叶盘漂浮法监测了2011—2015年河北省黄瓜霜霉病菌对甲霜灵和嘧菌酯的抗性,采用茎叶喷雾法测定了含甲霜灵或精甲霜灵的混剂及嘧菌酯单剂等7种药剂... 详细信息

为明确黄瓜霜霉病菌对甲霜灵和嘧菌酯的抗性动态及相应药剂对黄瓜霜霉病的田间防效,采用叶盘漂浮法监测了2011—2015年河北省黄瓜霜霉病菌对甲霜灵和嘧菌酯的抗性,采用茎叶喷雾法测定了含甲霜灵或精甲霜灵的混剂及嘧菌酯单剂等7种药剂的田间防效。结果表明:采自河北省不同地区的838株黄瓜霜霉病菌对甲霜灵和嘧菌酯普遍产生抗性,抗性频率为100.00%,抗性倍数为482.99和354.97,黄瓜霜霉病菌对甲霜灵和嘧菌酯的抗性随着监测地区和监测年限而波动,唐山、沧州、石家庄、衡水、廊坊和保定市的菌株对甲霜灵和嘧菌酯的抗性指数高于其它地区,黄瓜霜霉病菌对甲霜灵和嘧菌酯的抗性指数在不同年度间高位波动。按照田间推荐剂量喷施,250 g/L嘧菌酯悬浮剂对黄瓜霜霉病的防效为72.15%~74.13%;68%精甲霜灵·代森锰锌水分散粒剂和58%甲霜灵·代森锰锌可湿性粉剂的防效分别为65.30%~70.19%和63.26%~68.35%,与80%代森锰锌可湿性粉剂防效相当;50%烯酰吗啉可湿性粉剂、250 g/L双炔酰菌胺悬浮剂和687.5 g/L氟吡菌胺·霜霉威盐酸盐悬浮剂的防效达82.00%以上,对黄瓜霜霉病具有较好的防效,在黄瓜霜霉病菌对嘧菌酯、甲霜灵和精甲霜灵产生抗性的地区,可作为替代或混配药剂使用。

关键词：黄瓜霜霉病菌甲霜灵嘧菌酯抗性动态田间防效

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黄淮海夏玉米主产区穗腐病病原菌的分离鉴定

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植物保护学报 2017年第5期44卷 796-802页

作者：孙华张海剑郭宁石洁陈丹马红霞河北省农林科学院植物保护研究所农业部华北北部作物有害生物综合治理重点实验室河北省农业有害生物综合防治工程技术研究中心保定071000

为明确我国黄淮海夏玉米主产区玉米穗腐病的病原菌种类、优势种群及虫害、年度、省份对病原菌的影响,以形态学为基础,结合分子生物学方法对2013、2015年随机采自河南、河北、山东3省的155份玉米穗腐病样品进行分离鉴定。结果表明,引起... 详细信息

为明确我国黄淮海夏玉米主产区玉米穗腐病的病原菌种类、优势种群及虫害、年度、省份对病原菌的影响,以形态学为基础,结合分子生物学方法对2013、2015年随机采自河南、河北、山东3省的155份玉米穗腐病样品进行分离鉴定。结果表明,引起黄淮海夏玉米主产区玉米穗腐病的主要致病菌为镰孢菌Fusarium spp.,包括拟轮枝镰孢***、禾谷镰孢***、层出镰孢***、木贼镰孢***及藤仓镰孢***,分离频率分别为49.7%、28.4%、12.3%、3.9%和1.3%;其次为木霉菌Trichoderma spp.,包括哈茨木霉***、绿色木霉***和棘孢木霉***,分离频率分别为8.4%、3.2%和5.2%;青霉菌Penicillium spp.分离频率较低,为14.2%;曲霉菌Aspergillus spp.包括黑曲霉***和黄曲霉***,分离频率分别为2.6%和1.9%。研究表明,黄淮海主产区玉米穗腐病优势病原菌为拟轮枝镰孢、禾谷镰孢和木霉菌,不同省份不同年度间病原菌种类及优势病原菌存在差异,虫害能加重玉米穗腐病的发生。

关键词：穗腐病镰孢菌拟轮枝镰孢禾谷镰孢木霉菌

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