目的探讨轻盈祛浊汤治疗糖尿病肾病(DN)的作用机制。方法利用网络药理学预测轻盈祛浊汤治疗DN的作用机制,并通过分子对接预测活性成分的结合部位。结合网络药理学及分子对接结果,构建DN大鼠模型,2023年1—6月,将60只大鼠分为正常组、模型组、马来酸依那普利组、轻盈祛浊汤组,每组15只。治疗8周后比较四组大鼠24 h尿微量白蛋白(urinary microalbuminexcretion rate,UAER)、尿素氮、血肌酐水平和钠/葡萄糖协同转运蛋白1(recombinant sodium/glucose cotransporter 1,SGLT1),A1腺苷受体(A1 adenosine receptor,A1AR)蛋白表达水平。结果网络药理学共筛选出轻盈祛浊汤有效成分1114种,作用靶点269个,DN相关靶点2020个,其交集靶点174个。基因本体富集(GO)和基因组的京都百科全书(KEGG)分析得出主要涉及信号转导、炎症反应、细胞凋亡等一系列的生物学反应过程,主要参与丝裂原活化蛋白激酶/核因子κB(mitogen-activated protein kinase/nuclear factor kappa-B,pMAPK/NF-κB)、NOD样受体家族蛋白3/白细胞介素-1β(NOD-like receptor protein 3/interleukin-1β,NLRP3/IL-1β)、白细胞介素6/信号传导和转录激活因子3(interleukin-6/signal transducer and activator of transcription 3,IL-6/STAT3)、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)、肿瘤蛋白p53(tumor protein 53,P53)和前列腺素内过氧化物合酶(prostaglandin-endoperoxide synthase 2,PTGS2)等信号通路的调控。分子对接表明,轻盈祛浊汤主要成分与DN靶点的结合活性较强。模型组大鼠24 h UAER[(4539.71±516.03)μg/24 h比(226.59±72.71)μg/24 h]、血肌酐[(85.63±12.96)mL·kg^(-1)·min^(-1)比(0.48±0.12)mL·kg^(-1)·min^(-1)]、SGLT1(1.17±0.07比0.82±0.06)高于正常组,而模型组大鼠尿素氮、A1AR低于正常组(P<0.05)。马来酸依那普利片组大鼠24 h UAER、血肌酐、SGLT1低于模型组,马来酸依那普利片组大鼠尿素氮、A1AR高于模型组(P<0.05)。轻盈祛浊汤组大鼠24 h UAER、血肌酐、SGLT1低于马来酸依那普利片组,而轻盈祛浊汤组大鼠尿素氮、A1AR高于马来酸依那普利片组(P<0.05)。结论轻盈祛浊汤可通过调节pMAPK/NF-κB、NLRP3/IL-1β、IL-6/STAT3、TNF、P53和PTGS2信号通路发挥治疗DN的作用。
[目的]探究CCCH型锌指蛋白13(ZC3H13)在甲状腺癌(TC)发生发展的作用及可能机制。[方法]收集57例TC组织和对应癌旁组织、TC细胞(TPC-1,KTC-1,WRO)和正常甲状腺细胞Nthy-ori 3-1,Western Blot检测各组织、细胞中ZC3H13蛋白表达。选择TPC-1细胞随机分为control组、ZC3H13组(过表达ZC3H13)和NC组,CCK-8、Transwell、划痕实验检测各组细胞增殖、侵袭、转移水平,Western Blot检测Ras、细胞外信号调节激酶(ERK)、Snail、金属基质蛋白酶2(MMP-2)、胞质紧密黏连蛋白1(Zo-1)蛋白表达。[结果]TPC-1细胞TC组织ZC3H13蛋白表达低于癌旁组织(0.17±0.02 vs 0.99±0.01),TPC-1、KTC-1、WRO细胞ZC3H13蛋白表达低于Nthy-ori 3-1细胞(P<0.05);Western Blot检测ZC3H13组细胞ZC3H13蛋白表达高于control组和NC组(1.73±0.11 vs 1.05±0.18,1.11±0.23,P<0.05);ZC3H13组细胞增殖水平(0.91±0.11 vs 1.46±0.13,1.52±0.14)、侵袭数(74.64±12.18 vs 105.31±15.72,108.74±16.34)个、迁移率(19.42±2.13 vs 54.27±7.32,51.81±9.31)%均低于control组和NC组(P<0.05);与control组和NC组比较,ZC3H13组细胞MMP-2、Zo-1蛋白表达升高,K-Ras、p-ERK、Snail蛋白表达降低(P<0.05)。[结论]ZC3H13在TC组织及细胞中低表达,上调ZC3H13表达可抑制TPC-1细胞增殖、侵袭、转移能力,这可能是通过抑制Ras-ERK信号通路(0.65±0.12 vs 0.35±0.16)实现的。
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