检索结果-内蒙古大学图书馆

miR-495-3p靶向BUB1调控STAT3信号通路对食管癌细胞生物学行为的影响

安徽医科大学学报 2024年第8期59卷 1446-1454页

作者：杨晖石宁陈晓伟宋雪杰周茜司富春河南中医药大学中医学院郑州450046 河南省中医方证信号传导重点实验室郑州450046 河南省中医方证信号传导国际联合实验室郑州450046 河南中医药大学医学院郑州450046

目的探讨miR-495-3p靶向苯并咪唑出芽抑制解除同源物蛋白1(BUB1)调控信号转导及转录激活因子3(STAT3)信号通路对食管癌细胞生物学行为的影响。方法使用cDNA芯片技术筛选出食管癌组织和正常组织差异表达基因,并用生物信息学方法进行分... 详细信息

目的探讨miR-495-3p靶向苯并咪唑出芽抑制解除同源物蛋白1(BUB1)调控信号转导及转录激活因子3(STAT3)信号通路对食管癌细胞生物学行为的影响。方法使用cDNA芯片技术筛选出食管癌组织和正常组织差异表达基因,并用生物信息学方法进行分析。运用TargetScan数据库对miRNA的靶基因进行预测,并用双荧光素酶报告基因检测技术进行验证。将KYSE150细胞分为空白对照组、NC mimics组和miR-495-3p mimics组。通过细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测细胞增殖活力。用流式细胞术测定细胞周期和凋亡。通过定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)测定BUB1 mRNA的表达水平。通过蛋白质印迹法(Western blot)测量BUB1、STAT3、磷酸化(p)-STAT3、细胞周期蛋白B1(CCNB1)、细胞周期蛋白依赖性激酶1(CDK1)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、半胱氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)和半胱氨酸蛋白水解酶9(Caspase-9)蛋白水平。用划痕和Transwell小室实验测定细胞的迁移和侵袭能力。结果差异表达基因参与生物学过程、信号通路和网络构建主要与细胞周期相关,BUB1是关键的核心(Hub)基因,miR-495-3p靶向调控BUB1。体外实验表明,过表达miR-495-3p能显着抑制食管癌细胞的生长、迁移和侵袭,诱导细胞凋亡和G2/M期阻滞。过表达miR-495-3p处理后,食管癌细胞中Caspase-3、Caspase-9表达量升高(P<0.01),而Bcl-2、BUB1、CCNB1、CDK1、p-STAT3表达量降低(P<0.01)。STAT3信号通路也被发现在此过程中发挥着重要作用。结论 miR-495-3p可能通过下调BUB1介导STAT3信号通路影响食管癌细胞的生物学行为。

关键词：食管癌 miR-495-3p BUB1 STAT3信号通路生物学行为

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基于TGF-β1/Smad2通路探讨六君子汤促进食管癌相关成纤维细胞凋亡的分子机制

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中华中医药学刊 2025年

作者：刘娅茹刘洋陈星菅佳宁肖小乔周哲旭胡啸博陈玉龙河南中医药大学中医学院(仲景学院) 河南省中医方证信号传导重点实验室/河南中医药大学

目的：肿瘤相关成纤维细胞（cancer-associated fibroblasts， CAFs）是肿瘤组织中被癌细胞激活的成纤维细胞，具有成肌纤维细胞的特性。CAFs可以为肿瘤细胞提供营养支持和侵袭通道，从而帮助肿瘤细胞的增殖、侵袭和转移。本文观察六君... 详细信息

目的：肿瘤相关成纤维细胞（cancer-associated fibroblasts， CAFs）是肿瘤组织中被癌细胞激活的成纤维细胞，具有成肌纤维细胞的特性。CAFs可以为肿瘤细胞提供营养支持和侵袭通道，从而帮助肿瘤细胞的增殖、侵袭和转移。本文观察六君子汤对食管癌相关CAFs凋亡的影响，并探讨其分子机制，为六君子汤治疗食管癌的临床应用提供实验依据。方法： 1 MTT法检测不同浓度六君子汤对CAFs活性的影响。2 MTT法检测不同浓度TE-1条件培养基（即TE-1M）对CAFs活性的影响。3 Elisa检测六君子汤对各分组CAFs分泌转化生长因子-β1（TGF-β1）的影响。4 流式细胞术检测各分组CAFs凋亡水平。5 RT-qPCR检测六君子汤对各分组CAFs凋亡相关分子mRNA的表达水平的影响。6 Western Blot法检测六君子汤对各分组CAFs凋亡相关分子蛋白的表达水平的影响。结果： 1 MTT检测结果显示：与空白组相比，50μg/mL的六君子汤对CAFs的活性抑制无明显影响，其他浓度组对CAFs的活性均有抑制作用（P＜0.05）。2 MTT检测结果显示：与空白组相比，10%、20%和30%TE-1M对CAFs的增殖具有促进作用，其中20%浓度的TE-1M对CAFs的增殖作用最显著（P＜0.001），40%TE-1M（P＜0.05）及50%TE-1M（P＜0.01）对CAFs的增殖有明显的抑制作用。3 Elisa法检测结果显示：与空白组相比，模型组CAFs分泌TGF-β1含量下降（P＜0.001）；与模型组相比，六君子汤组TGF-β1含量显著升高（P＜0.001）；与六君子汤组相比，抑-六君子汤组（SB-431542抑制剂+六君子汤组）TGF-β1含量降低（P＜0.001）。4 流式细胞术检测结果显示：与空白组相比，模型组凋亡率无明显差异；与模型组相比，六君子汤组凋亡率显著升高（P＜0.001）；与六君子汤组相比，抑-六君子汤组凋亡率明显下降（P＜0.001）。5 PCR检测结果显示：与空白组相比，模型组Smad2、FAP基因表达升高（P＜0.01，P＜0.001）；与模型组相比，六君子汤组Smad2、Caspase3和FAP表达显著升高（P＜0.05，P＜0.01，P＜0.001）；与六君子汤组相比，抑-六君子汤组Smad2、Caspase3和FAP明显下降（P＜0.05，P＜0.001）。6 Western Blot检测结果显示：与空白组相比，模型组Smad2蛋白表达水平下降（P＜0.01）；与模型组相比，六君子汤组Smad2和Caspase3表达显著升高（P＜0.001），FAP蛋白表达水平升高（P＜0.05）。与六君子汤组相比，抑-六君子汤组Smad2、Caspase3明显下降（P＜0.01），FAP蛋白表达下降（P＜0.05）。结论：与食管癌细胞间接共培养条件下通过抑制TGF-β1/Smad2通路促进CAFs增殖；六君子汤可以通过TGF-β1/Smad2通路诱导CAFs凋亡。

关键词：六君子汤癌相关成纤维细胞 TGF-β/Smad2 细胞凋亡食管癌

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CAFs条件培养基影响EC9706细胞能量代谢的分子机制探索

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世界科学技术-中医药现代化 2023年第10期25卷 3246-3253页

作者：陈星娄翔宇尚艺婉周哲旭刘洋刘娅茹胡啸博陈玉龙河南中医药大学河南省中医方证信号传导重点实验室郑州450046

目的通过收集癌相关成纤维细胞(CAFs)的条件培养基,探索CAFs促进EC9706细胞能量代谢的分子机制。方法通过MTT检测细胞活性,以DMEM高糖培养基培养的EC9706作为对照,筛选最适合间接共培养的CAFs条件培养基(CAFM);比色法检测EC9706细胞上... 详细信息

目的通过收集癌相关成纤维细胞(CAFs)的条件培养基,探索CAFs促进EC9706细胞能量代谢的分子机制。方法通过MTT检测细胞活性,以DMEM高糖培养基培养的EC9706作为对照,筛选最适合间接共培养的CAFs条件培养基(CAFM);比色法检测EC9706细胞上清中乳酸及葡萄糖含量;Seahorse系统能量代谢分析系统检测EC9706细胞在DMEM与CAFM中能量代谢情况;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real time quantitative PCR,RT-qPCR)、蛋白免疫印迹法(Western blot)检测能量代谢相关分子mRNA及蛋白的表达。结果细胞融合度为50%-60%、70%-80%的CAFs条件培养基(CAFM)组与正常食管成纤维细胞条件培养基(NFM)相比,均有促进EC9706细胞增殖的作用(P<0.01),且在细胞融合度达70%-80%的CAFM各组中,与对照组相比,CAFM含量为60%时,对EC9706细胞的增殖作用显著升高(P<0.01)。与DMEM相比,CAFM可以上调EC9706细胞葡萄糖摄取、上清乳酸含量、基础呼吸值、基础糖酵解、补偿糖酵解(P<0.05),非线粒体耗氧、最大呼吸值、合成ATP耗氧量、备用呼吸能力(P<0.01)。RT-qPCR结果显示,CAFM还可上调EC9706细胞的低氧诱导因子-1α(HIF-1α)、己糖激酶2(HK2)、单羧酸转运蛋白1(MCT1)(P<0.05),葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)、丙酮酸激酶2(PKM2)(P<0.01)mRNA的表达。蛋白免疫印迹法结果显示,与DMEM相比,HK2、PKM2、MCT1、GLUT1的蛋白表达均显著提高(P<0.01)。结论CAFM能够通过促进EC9706细胞HK2、PKM2、HK2、GLUT1、MCT1、MCT4的mRNA和蛋白的表达,促进EC9706细胞的能量代谢。

关键词：癌相关成纤维细胞 EC9706细胞能量代谢食管癌分子机制

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食管癌肿瘤微环境中的癌相关细胞研究进展

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中国实验方剂学杂志 2022年第4期28卷 262-270页

作者：江始源司富春王文彬宋雪杰河南中医药大学中医药科学研究院河南省中医方证信号传导重点实验室河南省中医方证信号传导国际联合实验室郑州450046

食管癌是致死率较高的恶性肿瘤之一,全球范围内每年有近57万人死于食管癌,且这一数字逐年攀升。近年来,尽管针对食管癌的治疗方案不断精进,但由于治疗过程中耐药性的产生及患者机体耐受度的不同,食管癌的总体5年生存率仍然不足20%。肿... 详细信息

食管癌是致死率较高的恶性肿瘤之一,全球范围内每年有近57万人死于食管癌,且这一数字逐年攀升。近年来,尽管针对食管癌的治疗方案不断精进,但由于治疗过程中耐药性的产生及患者机体耐受度的不同,食管癌的总体5年生存率仍然不足20%。肿瘤微环境(TME)是以肿瘤细胞为核心的多种细胞及相关成分构成的一种乏氧、酸中毒、慢性炎症及免疫抑制的微环境,对肿瘤的发展起着重要的推动作用。研究发现,TME中的肿瘤相关成纤维细胞、肿瘤相关巨噬细胞、髓源性抑制细胞及调节性T细胞等能通过分泌细胞因子、激活促炎通路等途径促进癌细胞增殖、迁移、侵袭、淋巴结转移,并通过诱导癌细胞耐药性的产生及逃避免疫抑制从而促进癌症进展。由于TME中的癌相关细胞在遗传上比癌细胞更稳定、突变较少,产生耐药性的机会更低,因此通过调控TME,靶向TME中的癌相关细胞是癌症治疗的一个新的研究方向。中药具有多成分、多靶点的优势,能通过多途径参与调控TME,降低TME中癌相关细胞的数量、抑制其与癌细胞之间的串话、恢复免疫细胞功能等,是调控TME及靶向TME中癌相关细胞药物研发的重要来源。该文通过对食管癌TME中癌相关细胞的作用及目前以TME中癌相关细胞为靶向的中药应用进行综述,以期为食管癌TME靶向药物的研发提供参考。

关键词：食管癌肿瘤微环境肿瘤相关细胞免疫抑制细胞

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有毒中药抗食管癌作用机制研究进展

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中国实验方剂学杂志 2022年第20期28卷 274-282页

作者：高振东司富春河南中医药大学中医学院(仲景学院) 郑州450046 河南省中医方证信号传导重点实验室/河南省中医方证信号传导国际联合实验室郑州450046

食管癌是最常见的恶性肿瘤之一,发病率及死亡率分别位于恶性肿瘤的第7位和第6位。以毒攻毒法是中医治疗食管癌的重要手段之一,因此在食管癌治疗时常用到有毒中药来增强疗效。近年来随着天然药物成为抗肿瘤药物研发的重要领域,有毒中药... 详细信息

食管癌是最常见的恶性肿瘤之一,发病率及死亡率分别位于恶性肿瘤的第7位和第6位。以毒攻毒法是中医治疗食管癌的重要手段之一,因此在食管癌治疗时常用到有毒中药来增强疗效。近年来随着天然药物成为抗肿瘤药物研发的重要领域,有毒中药也受到越来越多的关注,并且研究显示多种有毒中药具有显著的抗食管癌作用。通过对中国生物医学文献数据库(SinoMed)、中国期刊全文数据库(CNKI)、万方数据知识服务平台(WanFang)、维普网(VIP)收录的文献中治疗食管癌的有毒中药进行统计,发现在食管癌的临床治疗中主要用到半夏、壁虎、急性子、蜈蚣、水蛭、山豆根、全蝎、蟾皮等有毒中药,按照功效可以分为清热解毒类、攻毒类、化痰类、活血化瘀类4种,其中具有辛味(19,52.78%)、苦味(17,47.22%)的居多,归经统计显示有毒中药主要归肝经(25,69.44%)、脾经(13,36.11%)、肺经(12,33.33%)。对上述常用有毒中药国内外文献研究整理发现,绝大部分药物具有抗肿瘤作用,其中部分药物有抗食管癌的相关研究报道,其作用机制主要体现在,抑制细胞增殖、迁移、分化,诱导细胞周期阻滞,激活B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白/Bcl-2/胱天蛋白酶(Bax/Bcl-2/Caspase)信号通路诱导凋亡等。该文就临床常用治疗食管癌有毒中药进行统计,并对其抗食管癌作用机制进行综述,以期为有毒中药临床合理用药、毒效机制研究等提供参考。

关键词：食管癌有毒中药作用机制归经研究进展

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六君子汤乙酸乙酯提取物干预CAFs条件培养基下EC9706细胞能量代谢的机制研究

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中国比较医学杂志 2023年第11期33卷 17-24页

作者：陈星娄翔宇尚艺婉周哲旭刘洋刘娅茹胡啸博陈玉龙河南中医药大学郑州450046 河南省中医方证信号传导重点实验室郑州450046

目的探索六君子汤乙酸乙酯提取物(EAELD)对癌相关成纤维细胞(CAFs)条件培养基下食管癌EC9706细胞能量代谢影响的分子机制。方法噻唑蓝(MTT)法检测EAELD对EC9706增殖活性的影响;比色法检测EAELD对CAFs条件培养基(CAFM)下EC9706细胞上清... 详细信息

目的探索六君子汤乙酸乙酯提取物(EAELD)对癌相关成纤维细胞(CAFs)条件培养基下食管癌EC9706细胞能量代谢影响的分子机制。方法噻唑蓝(MTT)法检测EAELD对EC9706增殖活性的影响;比色法检测EAELD对CAFs条件培养基(CAFM)下EC9706细胞上清中乳酸及葡萄糖含量的影响;Seahorse能量代谢分析系统检测EAELD对CAFM下EC9706细胞能量代谢的影响;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)、蛋白免疫印迹(Western blot)法检测EAELD对能量代谢相关分子mRNA及蛋白表达的影响。结果与DMEM相比,除10μg/mL组外,EAELD对EC9706细胞增殖活性均有明显抑制作用(P<0.05),选取抑制浓度(IC30)25μg/mL,半抑制浓度(IC50)40μg/mL,作为低、高剂量组进行后续实验。在CAFM培养的EC9706细胞各组中,EAELD低、高剂量组都能显著降低非线粒体耗氧、基础呼吸值、最大呼吸值、合成ATP耗氧量、备用呼吸能力、基础糖酵解、补偿糖酵解、糖酵解潜能(P<0.01),减少EC9706细胞上清乳酸含量(P<0.01),下调GLUT1的mRNA表达(P<0.05,P<0.01),下调p-PKM2、HK2、PKM2、MCT1蛋白表达(P<0.01);EAELD高剂量组能够下调EC9706细胞的线粒体耗氧与基础糖酵解比值(P<0.05),减少EC9706细胞葡萄糖摄取(P<0.05),下调p-PKM2、GLUT1的蛋白表达(P<0.01,P<0.05);EAELD低剂量组能够下调MCT1的mRNA表达(P<0.05)。结论六君子汤乙酸乙酯提取物能够干预CAFs条件培养基下EC9706细胞的能量代谢,其机制可能与EAELD调控HK2、PKM2、GLUT1、MCT1、MCT4的mRNA和蛋白表达相关。

关键词：癌相关成纤维细胞条件培养基六君子汤乙酸乙酯提取物能量代谢食管癌

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麦门冬汤的药理作用和临床应用研究进展

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世界中医药 2024年第10期19卷 1520-1525页

作者：刘博宇陈玉龙蔡永敏河南中医药大学郑州450046 河南省中医方证信号传导国际联合重点实验室郑州450046 河南中医药大学仲景中医药研究院郑州450046

麦门冬汤出自张机《金匮要略》,具有滋养肺胃、降逆下气之功,临床常通过药物加减或合方治疗呼吸、消化系统等疾病。近年来,麦门冬汤的临床、实验研究文献逐渐增多,而未有较全面的综述分析。通过对麦门冬汤的古代文献进行整理考释和现代... 详细信息

麦门冬汤出自张机《金匮要略》,具有滋养肺胃、降逆下气之功,临床常通过药物加减或合方治疗呼吸、消化系统等疾病。近年来,麦门冬汤的临床、实验研究文献逐渐增多,而未有较全面的综述分析。通过对麦门冬汤的古代文献进行整理考释和现代文献有关麦门冬汤药理作用、临床应用等信息的统计分析,以期为其进一步的研究应用提供参考。

关键词：麦门冬汤药理作用临床研究文献研究综述《金匮要略》张机呼吸系统疾病消化系统疾病

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基于IL-6/STAT3通路研究健脾和胃法干预肿瘤微环境下肌细胞自噬的分子机制

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中华中医药杂志 2023年第7期38卷 3314-3318页

作者：彭梦薇贺倩文蒋时红张彩丽郝羚伦张艳陈玉龙刘燕吴耀松河南中医药大学中医药科学院河南省中医方证信号传导重点实验室郑州450046

目的:基于小鼠肺癌细胞/小鼠成肌细胞(Lewis/C_(2)C_(12))体外共培养模型研究健脾和胃法六君子汤干预肿瘤微环境下细胞自噬的分子机制。方法:采用Lewis/C_(2)C_(12)共培养方法模拟肿瘤微环境,将细胞分为5组,分别为空白对照组、模型组、... 详细信息

目的:基于小鼠肺癌细胞/小鼠成肌细胞(Lewis/C_(2)C_(12))体外共培养模型研究健脾和胃法六君子汤干预肿瘤微环境下细胞自噬的分子机制。方法:采用Lewis/C_(2)C_(12)共培养方法模拟肿瘤微环境,将细胞分为5组,分别为空白对照组、模型组、六君子汤组、抑制剂组、联合用药组。加药48 h后,MTT法检测六君子汤1000μg/mL、抑制剂3μmol/L对两种细胞的影响;马血清诱导C_(2)C_(12)细胞分化,建立Lewis/C_(2)C_(12)细胞共培养体系;免疫荧光法检测C_(2)C_(12)细胞中肌肉蛋白重链MyHC的表达;电子显微镜下观察C_(2)C_(12)细胞中自噬体的变化;ELISA检测共培养条件下细胞上清中IL-6的含量;Western Blot法检测STAT3及Beclin1、LC3B/LC3A、泛素结合蛋白p62、ULK1的表达。结果:MTT结果显示六君子汤和抑制剂分别为1 mg/mL和3μmol/L的浓度符合肿瘤微环境模型要求;与空白对照组比较,模型组MyHC蛋白表达量显著下降(P<0.05),上清中IL-6含量、STAT3、Beclin1、p62、LC3B/LC3A、ULK1蛋白表达量以及自噬体数量显著上升(P<0.05)。与模型组比较,各给药组MyHC蛋白表达量显著上升(P<0.05),细胞上清中IL-6含量、STAT3、p62、LC3B/LC3A、ULK1蛋白表达均显著下降(P<0.05),自噬体数量显著减少(P<0.05)。与六君子汤组比较,抑制剂组、联合用药组MyHC蛋白表达量显著上升(P<0.05),细胞上清中IL-6下降,抑制剂组细胞p62、LC3B/LC3A表达量显著下降(P<0.05),联合用药组p62表达显著下降(P<0.05)。结论:六君子汤可通过抑制自噬溶酶体途径的激活,逆转肿瘤恶病质肌肉萎缩,其机制可能与IL-6/STAT3信号通路有关。

关键词：六君子汤肿瘤恶病质肌肉萎缩 IL-6/STAT3信号通路自噬 C_(2)C_(12)细胞

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基于《伤寒杂病论》探析桥本甲状腺炎的治疗研究

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中国中医基础医学杂志 2023年第7期29卷 1182-1185页

作者：王玥司富春河南中医药大学河南省中医方证信号传导重点实验室郑州450046 河南省中医方证信号传导国际联合实验室郑州450046 河南中医药大学中医学院(仲景学院) 郑州450046

《伤寒杂病论》集秦汉以来医药理论之大成,确立了六经辨证的纲领,奠定了辨证论治的基础,尤其“观其脉证,知犯何逆,随证治之”的论述更是被诸家誉为辨证论治的金句箴言。桥本甲状腺炎是临床中的常见疾病,既往医家多采用气血津液辨证,鲜... 详细信息

《伤寒杂病论》集秦汉以来医药理论之大成,确立了六经辨证的纲领,奠定了辨证论治的基础,尤其“观其脉证,知犯何逆,随证治之”的论述更是被诸家誉为辨证论治的金句箴言。桥本甲状腺炎是临床中的常见疾病,既往医家多采用气血津液辨证,鲜有通过六经辨证应用于疾病的诊疗。本文基于仲景创设学术思想从伤寒六经辨证与经方论治出发,文章以“六经传变”为理论基础,阐述桥本甲状腺炎在不同时期中的辨证要点,挖掘当前主流治法中所蕴含的仲景学术思想,并结合现代医学对桥本甲状腺炎治疗的临床药理作用研究,探讨了《伤寒杂病论》对治疗桥本甲状腺炎的指导作用。结尾部分引《伤寒杂病论》合方治疗桥本氏甲状腺炎验案一则,以期拓宽临床思路,对该病治疗有所裨益。

关键词：伤寒杂病论桥本甲状腺炎瘿病

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经典名方白头翁汤的药理作用、临床应用研究进展及质量标志物预测分析

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辽宁中医药大学学报 2025年

作者：杨丹司富春河南中医药大学中医学院(仲景学院)河南省中医方证信号传导重点实验室/河南省中医方证信号传导国际联合实验室

白头翁汤最早见于张仲景所著《伤寒论》，功效清热解毒、凉血止痢，是治疗热毒血痢的经典名方。现代药理学研究发现具有抗炎、抗肿瘤、调节免疫、抗氧化、抗菌等药理作用，临床上主要用于治疗溃疡性结肠炎、放射性肠炎、细菌性痢疾等消... 详细信息

白头翁汤最早见于张仲景所著《伤寒论》，功效清热解毒、凉血止痢，是治疗热毒血痢的经典名方。现代药理学研究发现具有抗炎、抗肿瘤、调节免疫、抗氧化、抗菌等药理作用，临床上主要用于治疗溃疡性结肠炎、放射性肠炎、细菌性痢疾等消化系统疾病，还可用于治疗肿瘤和念珠菌性阴道病等，疗效显著，不良反应少。本文总结白头翁汤近年来的药理作用和临床应用，并基于中药质量标志物（Quality marker，Q-marker）的“五原则”途径对白头翁汤的质量标志物进行预测分析。结果提示白头翁皂苷B4、小檗碱、黄连碱、表小檗碱、巴马汀、黄柏碱、秦皮甲素、秦皮乙素可作为白头翁汤的质量标志物，为白头翁汤的质量控制研究及后续复方制剂研发提供理论参考。

关键词：白头翁汤药理作用临床应用质量标志物

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