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中国病原生物学杂志 2015年第1期10卷 25-28,33页

作者：靳静陈松建张改王书伟李振江李亚辉王进王中全河南医学高等专科学校病原生物学与免疫学教研室河南郑州451193 郑州大学基础医学院病原生物学教研室河南郑州450001

目的自地下生活污水中分离肺炎克雷伯菌的噬菌体,明确其生物学特性,观察其对小鼠多重耐药肺炎克雷伯菌所致败血症的疗效。方法电镜观察LH-01形态,调查其噬菌谱、生长曲线等生物学特性。建立小鼠败血症感染模型,观察LH-01的疗效。结果 LH... 详细信息

目的自地下生活污水中分离肺炎克雷伯菌的噬菌体,明确其生物学特性,观察其对小鼠多重耐药肺炎克雷伯菌所致败血症的疗效。方法电镜观察LH-01形态,调查其噬菌谱、生长曲线等生物学特性。建立小鼠败血症感染模型,观察LH-01的疗效。结果 LH-01在其宿主菌的菌苔上形成毒性噬菌体所具有的完全透明的噬菌斑,电镜观察LH-01具典型的有尾噬菌体目短尾病毒科病毒的形态特征。一步生长曲线显示LH-01的潜伏期约为10min,裂解量约为100PFU/细胞。稳定性试验显示LH-01在pH 5~10及50℃和60℃环境均具良好稳定性。LH-01治疗克雷伯菌感染败血症小鼠的存活率为90%,对照组存活率为0,差异有统计学意义（P〈0.001）,且无毒副作用。结论 LH-01具有高效的裂菌活性和高稳定性,治疗克雷伯菌感染小鼠败血症有效且安全,有望成为生物抗菌剂,其有效成分有待进一步研究。

关键词：肺炎克雷伯菌败血症噬菌体生物学特性噬菌体治疗

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鲍曼不动杆菌噬菌体ZZ2生物学特性研究

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中国病原生物学杂志 2013年第10期8卷 885-888页

作者：靳静李振江王书伟张改陈松建王进赵国强王中全河南医学高等专科学校病原生物学与免疫学教研室河南郑州451191 郑州大学基础医学院病原生物学教研室河南郑州450001

目的研究鲍曼不动杆菌裂解性噬菌体ZZ2的生物学特性。方法电镜观察ZZ2形态，并研究其噬菌谱、生长曲线及稳定性等生物学特性。结果ZZ2可在3株鲍曼不动杆菌（AB09V，AB0901，AB0904）菌苔上形成裂解性噬菌体所具有的完全透明的滴斑区，其... 详细信息

目的研究鲍曼不动杆菌裂解性噬菌体ZZ2的生物学特性。方法电镜观察ZZ2形态，并研究其噬菌谱、生长曲线及稳定性等生物学特性。结果ZZ2可在3株鲍曼不动杆菌（AB09V，AB0901，AB0904）菌苔上形成裂解性噬菌体所具有的完全透明的滴斑区，其中AB09V是其最敏感的宿主菌。电镜观察ZZ2具典型的有尾噬菌体目肌尾病毒科病毒的形态特征；一步生长曲线显示ZZ2感染AB09V的潜伏期为12min，裂解量为（191±5）PFU／细胞。稳定性试验显示ZZ2在pH4～9及50℃和60℃环境均具良好稳定性。结论噬菌体ZZ2能杀灭鲍曼不动杆菌，可作为生物抗菌剂使用。

关键词：鲍曼不动杆菌噬菌体生物学特性

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超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌噬菌体F20的分离鉴定及其对小鼠败血症治疗效果

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微生物学通报 2019年第6期46卷 1502-1509页

作者：陈松建王书伟张改李振江李亚辉王山梅王中全靳静河南医学高等专科学校病原生物学与免疫学教研室河南郑州451191 河南省人民医院检验科河南郑州450001 郑州大学基础医学院病原生物学教研室河南郑州450001

【背景】肺炎克雷伯菌是引起临床感染的重要条件致病菌之一,肺炎克雷伯菌中产超广谱β-内酰胺酶(Extended-spectrum beta-lactamases,ESBLs)的耐药菌株增多迫切需要找到一种新的治疗方法。【目的】自污水中分离超广谱β-内酰胺酶肺炎克... 详细信息

【背景】肺炎克雷伯菌是引起临床感染的重要条件致病菌之一,肺炎克雷伯菌中产超广谱β-内酰胺酶(Extended-spectrum beta-lactamases,ESBLs)的耐药菌株增多迫切需要找到一种新的治疗方法。【目的】自污水中分离超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌噬菌体,并明确其生物学特性、观察其治疗小鼠产ESBLs肺炎克雷伯菌感染的疗效。【方法】电镜观察F20形态,调查其噬菌谱、生长曲线等生物学特性。建立小鼠败血症感染模型观察F20治疗小鼠肺炎克雷伯菌感染的疗效。【结果】F20在其宿主菌的菌苔上形成裂解性噬菌体所具有的完全透明的噬菌斑,电镜观察F20具典型的有尾噬菌体目长尾病毒科病毒的形态特征。一步生长曲线显示F20的潜伏期为18 min,裂解量为89 PFU/细胞。稳定性试验显示F20在pH 5.0-9.0及50℃环境均具良好稳定性。使用噬菌体F20对败血症小鼠治疗后,治疗组小鼠各外周血和各脏器(肺脏、肝脏、脾脏和肾脏)中的细菌数也显著小于对照组细菌数(P<0.001),与对照组相比下降大约1–3数量级。F20治疗败血症小鼠存活率达到87.5%,无毒副作用,而对照组小鼠在1 d内全部死亡,可显著提高小鼠的存活率(P<0.001)。【结论】新分离的裂解性噬菌体F20在小鼠体内能安全有效地治疗超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌引起的败血症,可作为生物抗菌剂的有效成分。

关键词：肺炎克雷伯菌败血症噬菌体F20 感染

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南阳市中年居民25项生物学表型左右侧差异

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解剖学报 2016年第6期47卷 833-837页

作者：柏永刚王延柯范迎徐国昌刘荣志南开大学医学院解剖学教研室天津300071 南阳理工学院人类学研究所河南南阳473004 南阳医学高等专科学校基础医学部河南南阳473061

目的调查南阳市中年人生物学表型特征,比较其左、右侧差异性。方法采用体质测量法、直观判定法采集495例（男230例,女265例）45~59岁健康城市居民的25项生物学表型,并进行统计学分析。结果男、女性在上肢全长、臂长、前臂围、握力、蹬... 详细信息

目的调查南阳市中年人生物学表型特征,比较其左、右侧差异性。方法采用体质测量法、直观判定法采集495例（男230例,女265例）45~59岁健康城市居民的25项生物学表型,并进行统计学分析。结果男、女性在上肢全长、臂长、前臂围、握力、蹬伸力、a-b嵴线数右侧大于左侧（P〈0.05）,而足长、小腿围、肱三头肌皮褶厚度是左侧大于右侧（P〈0.05）;男性食指指纹嵴线数（FRC）、掌纹t距比（t PD）右侧大于左侧（P〈0.05）;女性收缩压、大腿皮褶厚度、t PD左侧大于右侧（P〈0.05）;女性臂围、小指FRC右侧大于左侧（P〈0.05）。其他指标左、右侧差异无统计学意义。结论南阳市中年人四肢生物学表型特征一些指标存在左右侧差异,数据为该人群的体质特征全貌研究提供基线资料。

关键词：表型左右侧差体质人类学中年人

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日本血吸虫童虫表膜结合多肽的亲和筛选与初步鉴定

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2010年第3期28卷 172-175页

作者：魏琦刘彦曾庆仁陈欲晓周军刘碧源邹艳杨胜辉蔡力汀李立新兰玲梅中南大学基础医学院免疫学教研室长沙410013 中南大学基础医学院细胞与分子生物学实验中心长沙410013 中南大学湘雅三医院实验中心长沙410013 湖南中医药高等专科学校基础医学部株洲410013

目的筛选噬菌体十二肽库中与日本血吸虫(Schistosoma japonicum)童虫表膜特异性结合的多肽并鉴定。方法利用噬菌体十二肽库与日本血吸虫活童虫靶分子之间的亲和力结合,经3轮吸附-洗脱-扩增,从末次回收的结合噬菌体中随机挑取20个克隆进... 详细信息

目的筛选噬菌体十二肽库中与日本血吸虫(Schistosoma japonicum)童虫表膜特异性结合的多肽并鉴定。方法利用噬菌体十二肽库与日本血吸虫活童虫靶分子之间的亲和力结合,经3轮吸附-洗脱-扩增,从末次回收的结合噬菌体中随机挑取20个克隆进行测序。根据测序结果 ,选取出现次数最多的噬菌体克隆作为目标噬菌体,免疫组化检测目的噬菌体,并回输到已感染日本血吸虫的小鼠体内,2.5h后处死小鼠,回收肝脏和日本血吸虫童虫,分别洗脱与肝脏和童虫结合的噬菌体,进行统计学分析。结果经3轮筛选后,噬菌体回收率从第1轮的0.77×10-8到第3轮的0.75×10-5,说明噬菌体得到了有效富集。DNA测序结果表明,20个噬菌体克隆中的15个克隆呈现QHPRIRKOOOOO序列。免疫组化结果显示,表达该序列的噬菌体能与童虫表膜有效结合;体内回输试验证实,该噬菌体能有效地靶向结合于体内日本血吸虫童虫表膜。结论筛选获得的短肽QHPRIRKOOOOO能有效地靶向结合日本血吸虫童虫表膜。

关键词：日本血吸虫童虫噬菌体展示技术表膜靶向性

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体外转染CyclinA2基因对原代大鼠心肌细胞增殖的影响

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解剖学报 2015年第1期46卷 57-62页

作者：卢杏张进忠郭志坤常玉巧贾银明徐振平新乡医学院生命科学技术学院新乡医学院河南省医用组织再生重点实验室河南新乡453003 安阳市中医院心内科河南安阳455000 河南医学高等专科学校基础医学部生物学教研室郑州451191

目的探讨体外转染细胞周期素A2（Cyclin A2）基因对原代大鼠心肌细胞增殖的影响,为心脏再生提供细胞学依据。方法 SD乳鼠12只,分离、培养、鉴定原代乳鼠心肌细胞并分为3组,实验组：转染带有强化绿色荧光蛋白（GFP）和Cyclin A2基因的重... 详细信息

目的探讨体外转染细胞周期素A2（Cyclin A2）基因对原代大鼠心肌细胞增殖的影响,为心脏再生提供细胞学依据。方法 SD乳鼠12只,分离、培养、鉴定原代乳鼠心肌细胞并分为3组,实验组：转染带有强化绿色荧光蛋白（GFP）和Cyclin A2基因的重组腺病毒（Ad-Cyclin A2-GFP）;空病毒组：转染不含目的基因带有GFP的重组腺病毒（Ad-Null-GFP）;阴性对照组：未做转染处理,仅加入等量的培养基。利用GFP示踪技术,评估原代心肌细胞转染效率;转染后的细胞继续体外培养3～5d,利用免疫荧光技术分别检测Cyclin A2、磷酸化组蛋白H3（H3P）、心肌肌钙蛋白-T（c Tn T）。结果 1.荧光GFP示踪表明原代心肌细胞的转染效率高达（97±0.74）%;2.免疫荧光标记显示,空病毒组和对照组结果相似;心肌细胞特异性标记蛋白c Tn T分布于细胞质,原代心肌细胞纯度高达（95±0.62）%;心肌细胞Cyclin A2主要在胞核内聚集,少数分布于细胞质。H3P为核蛋白在细胞核内分布。3.转染Cyclin A2后,实验组H3P阳性率明显高于空病毒组和对照组,差异具有统计学意义（P〈0.05）;实验组可见大量多核细胞,以双核为主,伴少量3核细胞。结论腺病毒作为转染载体对原代心肌细胞有很好的侵染效率;Cyclin A2超表达促进原代心肌细胞形成双核。

关键词： Cyclin A2 心肌细胞增殖基因转染免疫荧光大鼠

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MicroRNA-141靶向Keap1调控Nrf2/ARE信号通路对乳腺癌T47D细胞活力的影响

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中国病理生理杂志 2018年第7期34卷 1245-1249页

作者：常景芝陈剑芦琨郭亚莉沈永杰李宜川张善锋商丘医学高等专科学校生物化学与分子生物学教研室河南商丘476100 郑州大学基础医学院河南郑州450001

目的:探讨微小RNA-141(miRNA-141)靶向Keap1调控Nrf2/ARE信号通路对乳腺癌T47D细胞活力的影响。方法:乳腺癌T47D细胞分别转染miRNA-141模拟物(mimic)和阴性对照序列(NC),作为miRNA-141组和NC组,并设立未转染空白对照组,采用real-time PCR法检测细胞中miRNA-141的含量;MTT法与荧光探针2’,7’-二氢二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)法分别检测细胞活力和活性氧簇(ROS)水平;Western blot法检测胞质接头蛋白Keap1、核因子E2相关因子2(Nrf2)、超氧化物歧化酶2(SOD2)和谷胱甘肽过氧化酶1(GPx1)的表达;双萤光素酶实验检测miRNA-141与Keap1的关系。结果:转染miRNA-141 mimic后,miRNA-141组的miRNA-141表达量明显增高,细胞活力、ROS水平和Keap1蛋白表达均下降,而细胞核Nrf2蛋白SOD2和GPx1表达升高(P<0.05);双萤光素酶实验结果显示Keap1为miRNA-141的靶基因。结论:miRNA-141可能通过靶向负调控Keap1激活Nrf2/ARE信号通路,诱导抗氧化酶的表达,以降低细胞氧化应激水平,从而抑制乳腺癌细胞的活力。

关键词：微小RNA-141 Nrf2/ARE信号通路乳腺癌细胞活力

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噬菌体PF18的生物学特性及其对肺炎克雷伯菌所致小鼠全身感染疗效的初步研究

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中国人兽共患病学报 2016年第10期32卷 871-875页

作者：张改陈松建靳静李振江王书伟黄德海李亚辉王小亭王山梅王中全河南医学高等专科学校病原生物学与免疫学教研室郑州451191 郑州大学基础医学院病原生物学教研室郑州450000 河南省人民医院检验科郑州450000

目的研究新分离噬菌体PF18的生物学特性及其对肺炎克雷伯菌所致小鼠全身感染的疗效。方法调查PF18的噬菌谱,观察其感染肺炎克雷伯菌临床株F18的噬菌斑形态。电镜下明确其形态分类。提取噬菌体PF18的基因组并进行酶切鉴定。观察PF18尾静... 详细信息

目的研究新分离噬菌体PF18的生物学特性及其对肺炎克雷伯菌所致小鼠全身感染的疗效。方法调查PF18的噬菌谱,观察其感染肺炎克雷伯菌临床株F18的噬菌斑形态。电镜下明确其形态分类。提取噬菌体PF18的基因组并进行酶切鉴定。观察PF18尾静脉注射治疗全身感染小鼠的生存状态变化。结果 PF18在F18上可形成直径约为5mm完全透明且周围有晕环的噬菌斑,电镜显示其属于有尾噬菌体目,长尾噬菌体科。PF18感染F18的潜伏期为17min,爆发量约为200PFU/细胞。PF18的基因组可被EcoRI、BamHI两种限制性内切酶降解,但不能被HindⅢ,kpnI降解。PF18治疗组小鼠1d内生存率为100%,1周内生存率可达30%,而无治疗对照组小鼠1d能全部死亡,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 PF18潜伏期短,爆发量大,且治疗肺炎克雷伯菌所致小鼠的全身感染有一定疗效,有望作为对抗多重耐药肺炎克雷伯菌感染的生物抗菌剂,应对PF18进行深入研究。

关键词：肺炎克雷伯菌噬菌体生物学特性噬菌体治疗全身感染

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侧脑室注射生长抑素对大鼠痛阈和电针镇痛作用的影响

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第二军医大学学报 1996年第4期17卷 362-365页

作者：刘玲爱宋朝佑王静明余静林葆城中国人民解放军北京医学高等专科学校生理学教研室上海第二军医大学基础医学部神经生物学教研室

目的：观察脑内生长抑素（ＳＳ）对痛阈和针刺镇痛的影响。方法：以钾离子透入引起大鼠甩尾为测痛方法，侧脑室注射生长抑素（ＳＳ）、生长抑素的耗竭剂半胱胺（ＣＳＨ）和抗生长抑素血清（ＡＳＳＳ），电针刺激大鼠足三里。结果：侧脑... 详细信息

目的：观察脑内生长抑素（ＳＳ）对痛阈和针刺镇痛的影响。方法：以钾离子透入引起大鼠甩尾为测痛方法，侧脑室注射生长抑素（ＳＳ）、生长抑素的耗竭剂半胱胺（ＣＳＨ）和抗生长抑素血清（ＡＳＳＳ），电针刺激大鼠足三里。结果：侧脑室注射ＳＳ使大鼠痛阈升高并使电针镇痛的效应增强；侧脑室分别注射ＣＳＨ和ＡＳＳＳ使大鼠痛阈降低并使电针镇痛的效应减弱。结论：无论外源性还是内源性ＳＳ都参与痛觉的调制并在电针镇痛过程中发挥重要的作用。

关键词：生长抑素半胱胺痛阈电针镇痛侧脑室

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耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌噬菌体F19的分离鉴定和全基因组分析

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中国病原生物学杂志 2020年第12期15卷 1385-1391页

作者：陈松建王山梅靳静王书伟张改李振江李敏霞王中全河南医学高等专科学校检验系河南郑州451193 河南省人民医院实验室检验科郑州大学基础医学院病原生物学教研室

目的分析1株耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌噬菌体F19的生物学特性和全基因组。方法从肺炎患者痰液分离肺炎克雷伯菌为宿主菌分离噬菌体F19,电镜观察其形态,并绘制生长曲线,观察F19对温度及pH值的敏感性。分析F19全基因组序列,预测可能存在的... 详细信息

目的分析1株耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌噬菌体F19的生物学特性和全基因组。方法从肺炎患者痰液分离肺炎克雷伯菌为宿主菌分离噬菌体F19,电镜观察其形态,并绘制生长曲线,观察F19对温度及pH值的敏感性。分析F19全基因组序列,预测可能存在的开放读码框。根据F19全基因组序列构建系统进化树,进行比较基因组学分析。结果分离到1株新型的肺炎克雷伯菌噬菌体,命名为F19,F19可在其宿主菌菌苔上形成裂解性噬菌体所具有的完全透明的滴斑。电镜观察F19具典型的有尾噬菌体目短尾病毒科病毒形态特征。一步生长曲线显示F19的潜伏期为12 min,裂解量为(102±13)PFU/细胞。F19全基因组长43766 bp,(G+C)%的含量为53.8%。预测和注释F19全基因组51个开放读码框(ORF),按照功能分为DNA复制及调控模块,噬菌体结构基因模块,裂解宿主蛋白模块3大类。比较基因组学分析F19与短尾噬菌体科Drulisvirus属噬菌体基因组具有明显相似保守框架,一致性较强。噬菌体DNA酶基因进化分析表明F19属于Drulisvirus属成员。结论从污水中分离鉴定1株新的耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌噬菌体F19,在生物学分类上属于Drulisvirus属噬菌体,为噬菌体治疗耐碳青霉烯肺炎克雷伯感染奠定了基础。

关键词：肺炎克雷伯菌耐碳青霉烯酶噬菌体全基因组分析

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