检索结果-内蒙古大学图书馆

中国生物化学与分子生物学报 2024年第4期40卷 463-473页

作者：孟领航张威王佳佳河南大学抗体药物开发技术国家地方联合工程实验室河南开封475000

O-连接-N-乙酰葡糖胺(O-GlcNAc)糖基化修饰是将N-乙酰葡萄糖胺添加到细胞核和细胞质蛋白质的丝氨酸和苏氨酸残基上的一种丰富的、独特的翻译后修饰,与癌症、神经退行性病变和糖尿病等疾病密切相关。明确O-GlcNAc修饰位点是探究其在相关... 详细信息

O-连接-N-乙酰葡糖胺(O-GlcNAc)糖基化修饰是将N-乙酰葡萄糖胺添加到细胞核和细胞质蛋白质的丝氨酸和苏氨酸残基上的一种丰富的、独特的翻译后修饰,与癌症、神经退行性病变和糖尿病等疾病密切相关。明确O-GlcNAc修饰位点是探究其在相关疾病中调控机制的前提,同时也是临床诊断和靶向干预的关键。本文介绍了近年来O-GlcNAc糖基化修饰与疾病之间的关系以及相关修饰位点的富集方法,包括抗体和凝集素、化学酶法、亲水作用液相色谱法和非天然糖代谢标记等;此外,“凹凸理论”、“定点活化”等靶向标记特定组织内蛋白质的糖基化修饰策略已成为当前研究热点,同时基于“一石多鸟”的多功能酶法标记,以及“一锅法”分析多种糖链结构等方法也将极大促进糖蛋白组学的快速发展。总之,开发更加高效、特异的糖蛋白富集策略,将对阐明包括O-GlcNAc在内的异常糖基化修饰在相关疾病中的调控机制具有重要的研究意义。

关键词：糖蛋白 O-连接-N-乙酰葡糖胺修饰蛋白富集代谢标记

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糖代谢标记在肿瘤靶向治疗中的应用策略

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中国肿瘤生物治疗杂志 2022年第4期29卷 276-283页

作者：王佳佳李霞河南大学抗体药物开发技术国家地方联合工程实验室河南开封475000

肿瘤细胞的特异性识别和结合是实现肿瘤靶向治疗的关键,缺乏有效靶标仍然是肿瘤靶向治疗面临的主要问题。糖代谢标记以其可以进行活体标记并且具有密度高、毒性低、干扰小等特点,使其能够为肿瘤靶向治疗提供新的策略。基于糖代谢标记策... 详细信息

肿瘤细胞的特异性识别和结合是实现肿瘤靶向治疗的关键,缺乏有效靶标仍然是肿瘤靶向治疗面临的主要问题。糖代谢标记以其可以进行活体标记并且具有密度高、毒性低、干扰小等特点,使其能够为肿瘤靶向治疗提供新的策略。基于糖代谢标记策略,可以对肿瘤细胞进行半抗原、抗原、化疗药物及细胞毒性药物等的标记,从而实现对肿瘤细胞的特异性识别,或激活机体的细胞和体液免疫应答,还可以通过标记免疫细胞增加其对肿瘤细胞的特异性识别和结合。糖代谢标记在肿瘤靶向治疗中具有广阔的应用前景。

关键词：非天然糖糖工程代谢标记靶向治疗抗肿瘤

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一株降低了抗体依赖性增强效应的西尼罗病毒中和抗体的表达与体外活性研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2024年第1期44卷 44-49页

作者：郝相君陈楠朱婉露王晶陈国江乔春霞李新颖沈倍奋冯健男柴立辉肖鹤军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所北京100850 河南大学抗体药物开发技术国家地方联合工程实验室开封475004

目的建立降低抗体依赖性增强(antibody-dependent enhancement,ADE)效应的抗体表达系统,以期降低目标抗体的ADE效应。方法对哺乳细胞抗体表达载体Fc区进行L234A和L235A点突变,建立抗体表达载体pFRT-IgG1κ-FcM。选取前期工作中获得的1... 详细信息

目的建立降低抗体依赖性增强(antibody-dependent enhancement,ADE)效应的抗体表达系统,以期降低目标抗体的ADE效应。方法对哺乳细胞抗体表达载体Fc区进行L234A和L235A点突变,建立抗体表达载体pFRT-IgG1κ-FcM。选取前期工作中获得的1株具有显著ADE效应的抗体Wt-WNV利用pFRT-IgG1κ-FcM系统进行表达,获得突变后抗体FcM-WNV。ELISA检测FcM-WNV与靶抗原西尼罗病毒包膜蛋白DⅢ(West Nile virus envelope protein-DⅢ,WNV E-DⅢ)的结合,流式细胞术分析FcM-WNV与人高亲和力IgG Fc受体hFcγRⅠ(hCD64)的结合。假病毒感染宿主细胞(BHK21和K562)试验检测FcM-WNV的体外中和活性。结果FcM-WNV与Wt-WNV表达水平相当,能识别结合WNV E-DⅢ,且呈浓度依赖效应;与Wt-WNV相比,FcM-WNV与hCD64的结合力明显减弱,表现为荧光强度明显降低;与前期实验结果一致,Wt-WNV在5μg/ml的浓度下具有明显增强WNV假病毒感染K562细胞的作用,而FcM-WNV在5μg/ml浓度下,能有效阻断假病毒感染K562和BHK21细胞。结论本研究建立的抗体表达系统可有效降低目标抗体的ADE效应。

关键词：中和抗体西尼罗病毒抗体依赖性增强效应

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纤维连接蛋白额外结构域B（FN-EDB）在肿瘤微环境中的作用及其靶向免疫治疗研究进展

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中国免疫学杂志 2024年

作者：蔡军雨李霞冯健男李慧王晶河南大学抗体药物开发技术国家地方联合工程实验室军事医学研究院毒物药物研究所国家安全特需药品全国重点实验室

肿瘤细胞与肿瘤微环境（Tumor microenvironment，TME）之间的错综复杂的相互作用是肿瘤发展和转移的重要推动因素。近年来，调控TME以逆转肿瘤进程作为治疗策略备受关注。然而，为了精准评估肿瘤患者治疗效果并协助临床方案决策，急需... 详细信息

肿瘤细胞与肿瘤微环境（Tumor microenvironment，TME）之间的错综复杂的相互作用是肿瘤发展和转移的重要推动因素。近年来，调控TME以逆转肿瘤进程作为治疗策略备受关注。然而，为了精准评估肿瘤患者治疗效果并协助临床方案决策，急需准确有效的TME标志物与相关预测模型。纤维连接蛋白（Fibronectin）是一种具有多个结构域的细胞外基质（Extracellular matrix，ECM）蛋白，在生理和病理过程扮演着关键角色。其中，纤维连接蛋白额外结构域B（Fibronectin Extra Domain B，FN-EDB）在调控细胞外基质与细胞之间的相互作用中具有重要功能。在活跃的组织重塑过程中，尤其在血管生成中，FN-EDB的表达上调。研究显示，FN-EDB还参与调控肿瘤发生的多个关键环节，包括促进肿瘤细胞的侵袭和转移、影响免疫逃逸机制的发展、促进肿瘤血管生成以及导致化疗耐药性的产生等。因此，将FN-EDB作为潜在的肿瘤治疗靶点，开发相关治疗药物具有重要意义和广阔临床应用前景。本文综述了近几年FN-EDB在肿瘤微环境中的作用以及针对该靶点的肿瘤免疫治疗研究进展，旨在为肿瘤治疗领域提供新的思路和策略。

关键词：肿瘤微环境纤维连接蛋白额外结构域B 细胞外基质靶向免疫治疗

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靶向甲型流感病毒表面糖蛋白广谱单克隆抗体的研究进展

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中国免疫学杂志 2025年第5期41卷 1238-1245页

作者：陈楠郝相君柴立辉肖鹤军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所北京100850 河南大学抗体药物开发技术国家地方联合工程实验室开封475004

流感在全球范围内是一个重要的公共卫生问题,每年导致数百万的患者住院治疗。除接种疫苗和采用抗病毒药物抵御流感外,单克隆抗体疗法因具有交叉反应性和靶向性而成为一种有应用前景的治疗方法。广泛反应性的单克隆抗体可以结合并中和多... 详细信息

流感在全球范围内是一个重要的公共卫生问题,每年导致数百万的患者住院治疗。除接种疫苗和采用抗病毒药物抵御流感外,单克隆抗体疗法因具有交叉反应性和靶向性而成为一种有应用前景的治疗方法。广泛反应性的单克隆抗体可以结合并中和多种亚型的甲型流感病毒,对感染的小鼠也显示出良好的保护作用,在预防和治疗流感方面具有高度潜力。本综述就近年来靶向甲型流感病毒的两种重要表面糖蛋白HA和NA的广谱单克隆抗体的研究进展进行简要阐述。

关键词：甲型流感病毒广谱交叉反应性单克隆抗体

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O-GlcNAc糖基化修饰的研究进展

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聊城大学学报（自然科学版） 2024年第1期37卷 92-101页

作者：王梦荷郑路孟领航王佳佳河南大学抗体药物开发技术国家地方联合工程实验室河南开封475000

蛋白质的N-乙酰氨基葡萄糖(O-linked-N-acetylglucosamine,GlcNAc)修饰是一种广泛存在于真核细胞内的O-连接的单糖修饰,其通过β-糖苷键将GlcNAc与细胞质或核蛋白上的丝氨酸或苏氨酸残基结合。O-GlcNAc糖基化修饰可以调控基因的表达、... 详细信息

蛋白质的N-乙酰氨基葡萄糖(O-linked-N-acetylglucosamine,GlcNAc)修饰是一种广泛存在于真核细胞内的O-连接的单糖修饰,其通过β-糖苷键将GlcNAc与细胞质或核蛋白上的丝氨酸或苏氨酸残基结合。O-GlcNAc糖基化修饰可以调控基因的表达、调节信号转导、参与免疫保护和细胞代谢等生理过程,其异常表达与某些疾病相关,如糖尿病、癌症、心血管和神经退行性疾病等,明确蛋白质的糖基化修饰位点对阐明疾病的发生具有重要意义。由于O-GlcNAc修饰是一种动态、化学计量的修饰,质谱检测信号响应低,导致位点鉴定困难。本文将基于O-GlcNAc的生物学功能,对O-GlcNAc糖蛋白的富集方法进行归纳总结,为未来O-GlcNAc相关研究提供思路。

关键词： O-GlcNAc糖基化修饰分子探针代谢标记

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基于H5N1假病毒的体内中和试验模型的建立

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中华微生物学和免疫学杂志 2023年第6期43卷 458-463页

作者：陈楠郝相君王晶陈国江乔春霞李新颖沈倍奋冯健男柴立辉肖鹤军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所北京100850 河南大学抗体药物开发技术国家地方联合工程实验室开封475004

目的建立H5N1假病毒的体内感染模型,并对抗体FHA3的体内中和活性进行鉴定。方法依据A/Anhui/1/2005/H5N1毒株血凝素(hemagglutinin,HA)和神经氨酸酶(neuraminidase,NA)的序列信息,构建重组表达质粒pcDNA3.1-HA5和pcDNA3.1-NA1,并与质粒***.R-E-共转染293T细胞制备H5N1假病毒上清,电镜观察上清中假病毒颗粒形态。假病毒上清感染MDCK细胞后,测定病毒滴度;经腹腔注射入BALB/c小鼠体内,在感染后2、5、8、12 d进行生物发光成像,检测假病毒体内感染情况。利用建立的小鼠感染模型,评价抗体FHA3的体内功能活性。结果重组表达质粒pcDNA3.1-HA5和pcDNA3.1-NA1构建正确,与***.R-E-质粒共转染293T细胞可制备出高滴度的假病毒上清,电镜下可见圆形的病毒颗粒。H5N1假病毒感染后,小鼠体内发出较强的荧光,而攻毒前给予抗体FHA3处理可减弱其荧光信号。结论成功构建出H5N1假病毒体内感染模型,并证实抗体FHA3对假病毒的感染具有体内保护作用。

关键词：流感病毒假病毒体内模型中和试验

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黄病毒治疗性抗体效应优化的研究进展

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中华微生物学和免疫学杂志 2023年第7期43卷 565-569页

作者：郝相君陈楠柴立辉肖鹤军事科学院军事医学研究院毒物药物研究所北京100850 河南大学抗体药物开发技术国家地方联合工程实验室开封475004

黄病毒属病毒是一类主要通过节肢动物媒介传播的正链RNA病毒,在世界范围内可引起高死亡率和高发病率。目前,尚无特效疗法。黄病毒治疗性抗体为治疗黄病毒感染带来了希望,但与此同时,通过感染而引发的抗体依赖性增强(antibody-dependent ... 详细信息

黄病毒属病毒是一类主要通过节肢动物媒介传播的正链RNA病毒,在世界范围内可引起高死亡率和高发病率。目前,尚无特效疗法。黄病毒治疗性抗体为治疗黄病毒感染带来了希望,但与此同时,通过感染而引发的抗体依赖性增强(antibody-dependent enhancement,ADE)效应可导致黄病毒感染患者疾病恶化。理想的黄病毒治疗性抗体既能治疗黄病毒感染,又可以避免ADE带来的危害。因此,研究者们将已发现的一些抗体进行优化以寻求最佳治疗抗体。本综述简单阐述了黄病毒治疗性抗体的研究进展、作用机制,以及降低ADE效应的相关策略。

关键词：黄病毒治疗性抗体抗体依赖性增强效应

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流感病毒假病毒研究进展

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军事医学 2024年第11期48卷 869-873页

作者：朱婉露张军肖鹤军事科学院军事医学研究院国家安全特许药物全国重点实验室北京100850 河南大学抗体药物开发技术国家地方联合工程实验室河南开封475004

流感病毒自发现以来已引起多次全球性大流行,造成千万以上的人员死亡,给人类的生命健康带来了严重危害,对全球经济和公共卫生造成严重挑战。高致病性流感病毒毒株(如H5、H7)的研究需使用生物安全3级实验室,大大增加了实验风险和成本。... 详细信息

流感病毒自发现以来已引起多次全球性大流行,造成千万以上的人员死亡,给人类的生命健康带来了严重危害,对全球经济和公共卫生造成严重挑战。高致病性流感病毒毒株(如H5、H7)的研究需使用生物安全3级实验室,大大增加了实验风险和成本。假病毒技术作为一种较为安全有效的研究技术已用于多种高风险病毒的研究中。通过不断的研究与完善,目前流感病毒假病毒技术已具有操作简便、安全性高等优点,在抗体中和、抗病毒药物筛选等方面得到广泛应用。该文综述了流感病毒假病毒技术的研究进展。

关键词：流感病毒假病毒研究进展

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罗沙司他通过抑制凋亡和炎症反应改善小鼠心肌缺血再灌注损伤

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天津医药 2024年第11期52卷 1146-1151页

作者：蔡灯塔常静宜贾姗姗屠荫琼河南大学第一附属医院药学部 450052 河南大学抗体药物开发技术国家地方联合工程实验室河南大学基础医学院医用生物实验室

目的探讨罗沙司他对小鼠心肌缺血-再灌注(I/R)损伤的改善作用及相关机制。方法24只雄性C57BL/6N小鼠随机分为假手术组、对照组和罗沙司他组,每组8只。对照组灌胃含5%二甲基亚砜的生理盐水100μL,罗沙司他组灌胃25 mg/kg罗沙司他100μL,... 详细信息

目的探讨罗沙司他对小鼠心肌缺血-再灌注(I/R)损伤的改善作用及相关机制。方法24只雄性C57BL/6N小鼠随机分为假手术组、对照组和罗沙司他组,每组8只。对照组灌胃含5%二甲基亚砜的生理盐水100μL,罗沙司他组灌胃25 mg/kg罗沙司他100μL,将2组小鼠左冠状动脉前降支结扎40 min,再灌注24 h,建立小鼠心肌I/R模型;假手术组仅对冠状动脉左前穿针,不结扎。氯化三苯基四氮唑(TTC)染色检测小鼠心肌梗死面积,原位末端标记法(TUNEL)染色检测小鼠心肌细胞的凋亡情况,免疫组化染色检测凋亡相关蛋白bcl-2相关X蛋白质(Bax)、胱天蛋白酶3(Caspase3)表达及炎性细胞标志物F4/80、髓过氧化物酶(MPO)浸润情况,苏木精-伊红(HE)染色观察小鼠心肌细胞损伤情况。结果罗沙司他组小鼠心肌梗死面积小于假手术组和对照组(P<0.05)。对照组和罗沙司他组细胞凋亡数量多于假手术组,罗沙司他组细胞凋亡数量少于对照组(P<0.05)。对照组和罗沙司他组心肌组织中Bax、Caspase3蛋白表达水平高于假手术组,罗沙司他组低于对照组(P<0.05)。罗沙司他组心肌组织中F4/80和MPO蛋白表达水平低于对照组(P<0.05)。对照组小鼠心肌组织排列紊乱、组织间隙空泡增多;与对照组相比,罗沙司他组心肌细胞排列较整齐,组织间隙空泡减少。结论罗沙司他可缩小I/R损伤后心肌梗死面积,抑制心肌细胞凋亡,减轻心肌损伤,减少心肌巨噬细胞和中性粒细胞浸润,降低炎症损伤。

关键词：心肌再灌注损伤细胞凋亡炎症罗沙司他

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