检索结果-内蒙古大学图书馆

中国畜牧兽医 2023年第3期50卷 1160-1168页

作者：李华玮郭科威王旭英张小雨路紫微李新锋马辉侯文静河南牧业经济学院畜产品质量安全技术研究院郑州450046 河南农业大学动物医学院郑州450046 河南牧业经济学院动物医药学院郑州450046 河南牧业经济学院食品与生物工程学院郑州450046

【目的】对猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)非结构蛋白7(nonstructural protein 7,NSP7)进行真核表达及生物信息学分析,从而推测其在PRRSV复制过程中的功能。【方法】按照GenBank数据库中NSP 7基因序列合成目的基因并构建真核表达载体P3×FLAG-CMV-NSP7,瞬时转染Marc-145细胞后通过Western blotting验证蛋白表达,通过间接免疫荧光试验(indirect immunofluorescence assay,IFA)对NSP7蛋白进行亚细胞定位,利用生物信息学分析软件预测NSP7蛋白的理化性质、结构及功能。【结果】成功构建P3×FLAG-CMV-NSP7真核表达载体;Western blotting结果显示,获得大小约为2.7 ku的目的条带,证实重组载体在Marc-145细胞中高效表达。IFA结果证实在PRRSV感染初期NSP7蛋白大部分分布于细胞质中,随着感染时间延长NSP7蛋白由细胞质进入细胞核。生物信息学分析结果显示,NSP7蛋白由259个氨基酸编码,分子式为C _(1284) H _(2020) N _(348) O _(379) S_( 8),分子质量为28652.75 u,理论等电点为5.88,为不稳定、亲水蛋白。结构预测发现,NSP7蛋白二级结构包括α-螺旋和β-转角,占比分别为35.91%和5.41%。核定位序列分析发现,NSP7蛋白具有一段跨膜序列RLNKKKRRRMEAVGIF。【结论】本研究成功构建高效表达的PRRSV NSP7真核表达载体,在PRRSV感染初期NSP7蛋白分布于细胞质,感染后期分布于细胞核,NSP7蛋白存在核定位序列。

关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV) 非结构蛋白7(NSP7) 亚细胞定位

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霉菌毒素在反刍动物饲料中的危害及防控措施

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饲料研究 2023年第22期46卷 151-155页

作者：徐博文米俊宪陈盼丁文丽郑丽君菅复春黄淑成河南农业大学动物医学院河南郑州450002 河南牧业经济学院河南郑州450046

饲料质量对畜牧业发展至关重要,直接影响动物健康及其产品安全。在适宜条件下,霉菌可在饲料中生长并产生毒素,受污染的饲料一旦被动物摄食,能够导致动物生产性能下降、组织器官病变以及繁殖障碍等问题,严重影响养殖的经济效益。由于食... 详细信息

饲料质量对畜牧业发展至关重要,直接影响动物健康及其产品安全。在适宜条件下,霉菌可在饲料中生长并产生毒素,受污染的饲料一旦被动物摄食,能够导致动物生产性能下降、组织器官病变以及繁殖障碍等问题,严重影响养殖的经济效益。由于食物链的富集作用,最终霉菌毒素也可能危害人类健康。牛、羊等反刍动物养殖在我国畜牧业中占有很大比重,而用于饲喂反刍动物的饲料在收获前和贮藏过程中易受霉菌侵袭,导致霉菌毒素污染问题出现。目前,国内外对饲料中霉菌毒素污染的研究主要集中在猪、家禽等单胃动物,反刍动物相关报道较少。因此,文章从反刍动物饲料中霉菌毒素的种类、污染现状、对反刍动物组织器官的影响以及防控措施等方面进行探讨,为反刍动物健康养殖提供参考。

关键词：反刍动物饲料霉菌毒素健康养殖

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多重PCR结合基因芯片技术检测5种猪繁殖障碍性病毒病方法的研究

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中国畜牧兽医 2019年第5期46卷 1532-1540页

作者：刘胜利刘玲玲吕玉金吴凤笋李文刚河南农业大学牧医工程学院郑州450002 河南牧业经济学院动物医学院郑州450046

为建立运用多重PCR和基因芯片技术同时检测5种猪繁殖障碍性病毒病的方法。本研究根据GenBank中登录的猪瘟病毒(CSFV)、猪细小病毒(PPV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪日本乙型脑炎病毒(JEV)及猪圆环病毒2型(PCV2)的基因序列设计... 详细信息

为建立运用多重PCR和基因芯片技术同时检测5种猪繁殖障碍性病毒病的方法。本研究根据GenBank中登录的猪瘟病毒(CSFV)、猪细小病毒(PPV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪日本乙型脑炎病毒(JEV)及猪圆环病毒2型(PCV2)的基因序列设计特异性引物与探针,制备相应的寡核苷酸芯片,检测了5种猪繁殖障碍性疾病病毒的标准毒株,并对16份临床样品进行检测。通过多重PCR扩增出带有荧光标记的5种病毒的特异性基因片段,并与固定有特异性探针的基因芯片杂交。结果显示,本研究建立的多重PCR结合基因芯片检测方法特异性强、稳定性好,灵敏度可达10~2拷贝/μL。16份临床样品检测结果显示阳性率达87.5%(14/16)。以上结果表明该方法特异性好、灵敏度高,可高效检测以上5种病毒,为其临床诊断及流行病学调查提供了有效的检测方法。

关键词：多重PCR 基因芯片 CSFV PPV PRRSV JEV PCV2

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一株猪源摩氏摩根菌的分离鉴定与药物敏感性分析

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河南农业科学 2024年第9期53卷 126-131页

作者：彭志锋张菡黄慧敏宋幸辉朱亚博李梓怡乔宏兴边传周河南牧业经济学院动物医药学院河南郑州450046 河南农业大学动物医学院河南郑州450046

摩氏摩根菌是一种可导致多种疾病的条件性病原菌,已成为全球范围内的一种重要新发病原菌。为了解猪源摩氏摩根菌的药物敏感性和致病性,从河南省某猪场病死猪肠道中分离得到一株疑似致病菌,对其进行革兰氏染色、基质辅助激光解吸/电离飞... 详细信息

摩氏摩根菌是一种可导致多种疾病的条件性病原菌,已成为全球范围内的一种重要新发病原菌。为了解猪源摩氏摩根菌的药物敏感性和致病性,从河南省某猪场病死猪肠道中分离得到一株疑似致病菌,对其进行革兰氏染色、基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱鉴定和16S rRNA基因同源性分析,然后测定14种药物对该菌株的最小抑菌浓度,并进行小鼠感染试验。结果显示,该菌为革兰氏阴性短杆菌,鉴定为摩氏摩根菌,命名为A185。药敏试验结果表明,该菌对阿莫西林、美罗培南、替加环素、多黏菌素、多西环素、头孢西丁耐药;对环丙沙星、庆大霉素中度敏感;对磷霉素、头孢他啶敏感。小鼠感染试验结果显示,感染摩氏摩根菌的昆明鼠表现为肝脏、肠道和肺脏不同程度出血。以上结果表明,猪源摩氏摩根菌A185具有多重耐药性和较强的致病性。

关键词：猪源摩氏摩根菌分离鉴定药敏试验 16S rRNA 致病性

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c-KIT受体蛋白在犬皮肤肥大细胞瘤中的作用及其应用

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中国兽医杂志 2024年第10期60卷 106-111页

作者：康静静蔡茂焦静旖秦永敏杨静亚宋予震河南牧业经济学院动物医药学院河南郑州450046 河南农业大学动物医学院河南郑州450046

皮肤肥大细胞瘤(MCT)是犬发生率较高的皮肤肿瘤类型之一,多发于老年犬,是危害犬类健康的重要疾病之一。c-KIT受体蛋白是一种跨膜蛋白,具有酪氨酸激酶活性,可调控肥大细胞的生长和分化。本文旨在阐明c-KIT受体蛋白在犬皮肤MCT中的作用及... 详细信息

皮肤肥大细胞瘤(MCT)是犬发生率较高的皮肤肿瘤类型之一,多发于老年犬,是危害犬类健康的重要疾病之一。c-KIT受体蛋白是一种跨膜蛋白,具有酪氨酸激酶活性,可调控肥大细胞的生长和分化。本文旨在阐明c-KIT受体蛋白在犬皮肤MCT中的作用及其应用,总结了c-KIT受体蛋白在肥大细胞增殖调控中的作用,深入探讨了c-KIT受体蛋白检测在犬皮肤MCT诊断中的应用价值,明确了c-KIT受体蛋白在犬皮肤MCT发生发展中的作用,同时也为进一步研究c-KIT受体蛋白在犬皮肤MCT中的发病机制提供了重要参考。

关键词：犬皮肤肥大细胞瘤作用机制 c-KIT受体蛋白

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猪β-防御素-2在黄曲霉毒素B1致小鼠肠道炎症损伤中的作用

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畜牧与兽医 2024年第7期56卷 36-43页

作者：张曼王坤丽王艳慧李庆豪李明边思琦皇甫和平河南牧业经济学院动物医药学院河南郑州450046 河南农业大学动物医学院河南郑州450046

旨在探究猪β-防御素-2(pBD-2)在黄曲霉毒素B1(AFB1)致鼠肠道损伤中的作用。本试验以4周龄KM小鼠为研究对象,将体重相近的30只健康小鼠随机均分为5组,分别为空白对照组(不做任何处理)、DMSO组(1%DMSO灌胃)、AFB1组(0.3 mg/kg AFB1灌胃)... 详细信息

旨在探究猪β-防御素-2(pBD-2)在黄曲霉毒素B1(AFB1)致鼠肠道损伤中的作用。本试验以4周龄KM小鼠为研究对象,将体重相近的30只健康小鼠随机均分为5组,分别为空白对照组(不做任何处理)、DMSO组(1%DMSO灌胃)、AFB1组(0.3 mg/kg AFB1灌胃)、pBD-2组(0.03 mg/kg pBD-2灌胃)和AFB1+pBD-2组(0.3 mg/kg AFB1灌胃28 d后再用0.03 mg/kg pBD-2灌胃28 d),试验持续56 d,通过观察小鼠肠道结构的变化以及采用qPCR和免疫荧光的方法检测炎症相关因子的表达水平。结果:与对照组相比,AFB1组小鼠的平均日增重(ADG)和平均日采食量(ADFI)均呈现显著下降趋势(P<0.05),料重比(F/G)降低,但差异不显著(P>0.05),而小鼠饲喂pBD-2以后ADG和ADFI均较AFB1组显著增加(P<0.05);HE染色结果显示,AFB1导致小鼠空肠黏膜显著损伤,并伴有严重的肠壁变薄,肠绒毛萎缩、稀疏,肠绒毛高度与隐窝深度之比、相对肠绒毛数量及肠壁厚度均显著降低(P<0.05),而使用pBD-2处理小鼠损伤模型,肠道结构可见显著恢复(P<0.05);qPCR和免疫荧光染色结果表明,AFB1处理小鼠可显著上调白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的mRNA和蛋白表达水平(P<0.05),但对白细胞介素-8(IL-8)的表达水平出现了下调趋势,而用pBD-2处理小鼠损伤模型后可显著下调炎症因子的表达水平,说明pBD-2对AFB1造成的肠黏膜炎症具有缓解作用。本研究结果为AFB1中毒的防控及pBD-2在畜牧生产中的应用提供了科学依据。

关键词：猪β-防御素-2 黄曲霉毒素B1 肠道炎症小鼠

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共表达TGEV AD蛋白和PEDV S蛋白CS区重组伪狂犬病病毒的构建及纯化

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中国兽医学报 2024年第2期44卷 237-243页

作者：赵丽吕玉金徐通许瑞勤金钺陈红英河南牧业经济学院动物医药学院河南郑州450046 河南农业大学动物医学院河南郑州450046

根据猪流行性腹泻病毒(PEDV)S蛋白的CS中和表位区(499~789 aa)序列设计1对特异性引物,在其5′端分别引入BamHⅠ和HindⅢ,PCR扩增PEDV CS区。将扩增的CS片段插入至pBApo-EF1α_Pur_DNA真核表达载体的BamHⅠ和HindⅢ位点,然后扩增含CS区... 详细信息

根据猪流行性腹泻病毒(PEDV)S蛋白的CS中和表位区(499~789 aa)序列设计1对特异性引物,在其5′端分别引入BamHⅠ和HindⅢ,PCR扩增PEDV CS区。将扩增的CS片段插入至pBApo-EF1α_Pur_DNA真核表达载体的BamHⅠ和HindⅢ位点,然后扩增含CS区表达盒,将其插入至含猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)AD基因的PRV转移质粒pG-AD-EGFP中,构建转移质粒pG-AD-CS-EGFP。利用转染试剂ZLip2000将伪狂犬病病毒(PRV)三基因缺失毒株rPRV NY-gE-/gI-/TK-基因组与转移质粒pG-AD-CS-EGFP共转染ST细胞,获得携带有TGEV AD、PEDV CS区和绿色荧光蛋白标记基因的重组病毒rPRV-AD-CS-EGFP。扩增重组病毒rPRV-AD-CS的表达盒,测序后进行遗传稳定性评价,同时将重组病毒rPRV-AD-CS、亲本株Bartha-K61和PRV强毒株分别接种小鼠,进行安全性评价。将该重组病毒与CRISPR/Cas9-EGFP敲除质粒共转染ST细胞,经3轮病毒空斑纯化获得无绿色荧光标记的重组病毒rPRV-AD-CS。经Western blot和IFA证实rPRV-AD-CS在ST细胞中能表达CS外源蛋白,具有良好的遗传稳定性和安全性。结果表明,成功构建共表达TGEV AD蛋白和PEDV S蛋白CS区的重组病毒株rPRV-AD-CS,该重组病毒具有遗传稳定性和安全性,为开发安全、有效的预防TGEV、PEDV和PRV感染的三联苗奠定基础。

关键词： PEDV CS中和表位区 TGEV AD抗原表位区 PRV

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猪流行性腹泻病毒变异毒株与传统毒株RT-PCR鉴别诊断方法的建立

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中国动物传染病学报 2019年第6期27卷 94-98页

作者：赵攀登赵胜杰王岩邓同炜卢建洲刘静静朱文龙冀梦瑶陈益河南牧业经济学院动物医学院郑州450046 河南省动物疫病预防控制中心郑州450000

为建立猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)变异毒株和传统毒株RT-PCR鉴别诊断方法,本研究根据GenBank中PEDV变异毒株(JN381492.1)和传统毒株(JN599150.1)S基因序列,设计两对特异性引物,进行反应条件优化。结果显示... 详细信息

为建立猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)变异毒株和传统毒株RT-PCR鉴别诊断方法,本研究根据GenBank中PEDV变异毒株(JN381492.1)和传统毒株(JN599150.1)S基因序列,设计两对特异性引物,进行反应条件优化。结果显示:建立的RT-PCR鉴别诊断方法能够特异性区分PEDV变异毒株和传统毒株,能扩增出变异毒株442 bp的目的片段,而传统毒株是270 bp的目的片段,并且与猪传染性胃肠炎病毒、猪伪狂犬病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪细小病毒、猪呼肠孤病毒、猪瘟病毒、猪脑心肌炎病毒、轮状病毒均无交叉反应;敏感性结果表明该方法能检测出变异毒株和传统毒株的底限均为4×10^4 copies;利用该方法对42份临床腹泻样品进行检测,PEDV阳性率为69%(29/42),变异毒株占总PEDV毒株的93.1%(27/29),传统毒株占总PEDV毒株的6.9%(2/29)。该RT-PCR方法为PEDV的病原鉴别诊断和流行病学调查提供了技术手段。

关键词：猪流行性腹泻病毒 S基因 RT-PCR 鉴别诊断

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基于工作过程的课程体系在兽医传染病学禽病教学中的构建

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黑龙江畜牧兽医 2020年第2期 135-136页

作者：董建国饶丹刘涛曲哲会易本驰黄立刘纪成赵攀登信阳农林学院牧医工程学院河南信阳464000 河南牧业经济学院动物医学院郑州450046

"禽传染病学"是高等教育动物医学专业的一门专业核心课程,该课程要求学生具备传染病理论知识和临床诊断预防的实践技能,能够熟练运用各种传染病知识进行诊断与预防,具有理论性强和实践能力要求高的特点。笔者基于工作过程课... 详细信息

"禽传染病学"是高等教育动物医学专业的一门专业核心课程,该课程要求学生具备传染病理论知识和临床诊断预防的实践技能,能够熟练运用各种传染病知识进行诊断与预防,具有理论性强和实践能力要求高的特点。笔者基于工作过程课程开发的方法,通过调研动物医学专业毕业生就业岗位情况,将就业岗位分为两大类,分别构建了以基于门诊诊断过程和基于养殖生产过程的"禽传染病学"课程体系,并分析比较了两种基于工作过程的"禽传染病学"课程体系的特点和差异,确定其适用的学生对象和教学环节,以达到提高教学质量和培养应用型人才的目的。

关键词：工作过程兽医传染病学门诊诊断养殖生产课程开发差异比较

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女贞子、α-甘露聚糖肽对热应激小鼠血清激素水平及肝脏热应激蛋白表达的影响

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饲料研究 2023年第15期46卷 88-92页

作者：聂芙蓉周亚星张汪郭良兴江青东河南牧业经济学院动物科技学院河南郑州450046 河南农业大学动物医学院河南郑州450046

试验旨在观察小鼠热应激模型的血清激素水平和肝脏热应激蛋白激素的动态水平,探讨女贞子、α-甘露聚糖肽抗热应激的调节作用。选取日龄、体型、体重相近的40只小白鼠,随机分为5组,每组8重复,每个重复1只,分别为空白组、热应激对照组、... 详细信息

试验旨在观察小鼠热应激模型的血清激素水平和肝脏热应激蛋白激素的动态水平,探讨女贞子、α-甘露聚糖肽抗热应激的调节作用。选取日龄、体型、体重相近的40只小白鼠,随机分为5组,每组8重复,每个重复1只,分别为空白组、热应激对照组、女贞子组(0.2 mL)、α-甘露聚糖肽组(0.2 mL)、女贞子+α-甘露聚糖肽组(各0.1 mL)。空白对照组小鼠正常饲养,其他4组均进行热应激处理。结果表明,当小鼠受到热应激,单独使用女贞子和α-甘露聚糖肽可以使小鼠血糖(GLU)、肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、皮质醇(CORT)水平极显著降低(P<0.01)。当两者混合使用时,小鼠GLU、LDH、CORT水平与热应激对照组差异不显著(P>0.05),CK活性极显著高于热应激对照组(P<0.01)。当小鼠处于热应激状态时,热休克蛋白HSP60、HSP70、HSP90的表达量分别是空白组的1.91、2.03、1.26倍,表达量明显提高。单独使用女贞子和α-甘露聚糖肽后,HSP60、HSP90的表达量明显低于热应激对照组,HSP70的表达量相比空白组和热应激对照组均明显上升。当两种药物同时使用时,HSP60、HSP90的表达量和热应激对照组相比无明显差异,HSP70的表达量明显高于热应激对照组。研究表明,女贞子和α-甘露聚糖肽在单独使用时能够显著降低小鼠的热应激反应程度,两种药物混合使用可能无缓解热应激作用或者两药物相互拮抗。

关键词：小鼠热应激女贞子 α-甘露聚糖肽热休克蛋白

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