检索结果-内蒙古大学图书馆

新乡医学院学报 2021年第3期38卷 213-219页

作者：崔朝初卢娜冯超丽杨建波郭志坤王现伟新乡医学院基础医学院河南省医用组织再生重点实验室河南新乡 453003

动脉粥样硬化(AS)严重威胁着人类的生命健康.低密度脂蛋白胆固醇通过促进泡沫细胞的形成及炎症反应在AS的发生、发展中发挥重要作用.低密度脂蛋白受体(LDLR)是负责清除血液中低密度脂蛋白(LDL)的主要分子之一.前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白... 详细信息

动脉粥样硬化(AS)严重威胁着人类的生命健康.低密度脂蛋白胆固醇通过促进泡沫细胞的形成及炎症反应在AS的发生、发展中发挥重要作用.低密度脂蛋白受体(LDLR)是负责清除血液中低密度脂蛋白(LDL)的主要分子之一.前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶9(PCSK9)能够通过多种途径促进LDL介导的AS的发生和发展,其已被证实是治疗AS的重要靶点,目前已有多种类型的PCSK9抑制剂应用于AS的临床治疗或临床试验研究.本文综述了PCSK9的分子调节机制及其在AS中的作用,以及靶向PCSK9抑制剂的研究进展.

关键词：前蛋白转化酶枯草杆菌蛋白酶9 低密度脂蛋白受体胆固醇动脉粥样硬化心血管疾病

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小鼠脂肪源和骨髓源间充质干细胞表面标记表达的比较

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解剖学报 2016年第2期47卷 203-208页

作者：余霞李琼任明芬牛艳菲甘黎郭志坤新乡医学院河南省医用组织再生重点实验室新乡医学院第二附属医院心内科河南新乡453003

目的探讨小鼠脂肪源间充质干细胞（ADMSCs）和骨髓源间充质干细胞（BMSCs）表面标记表达的差异。方法分别对小鼠脂肪源和骨髓源间充质干细胞进行成骨、成脂、成心肌分化诱导、鉴定;流式细胞术与细胞免疫荧光法检测CD29、CD44、CD45和CD7... 详细信息

目的探讨小鼠脂肪源间充质干细胞（ADMSCs）和骨髓源间充质干细胞（BMSCs）表面标记表达的差异。方法分别对小鼠脂肪源和骨髓源间充质干细胞进行成骨、成脂、成心肌分化诱导、鉴定;流式细胞术与细胞免疫荧光法检测CD29、CD44、CD45和CD73的表达并进行比较。结果 BMSCs形态均一,呈长梭形;ADMSCs形态多样,呈梭形、星形、多角形等,胞体较大,表面分泌物较多;两者均可诱导分化为成骨细胞、脂肪细胞和心肌样细胞。流式细胞术检测显示,BMSCs表面分子CD29、CD44和CD73表达率分别为（83.43±1.97）%、（90.33±0.81）%、（2.63±0.42）%;ADMSCs表面分子CD29和CD44的表达率分别为（53.1±1.05）%、（34.8±2.1）%,CD73表达不稳定,在1.8%~19.7%之间波动。两种细胞均不表达造血干细胞标记物CD45。免疫荧光显示,CD73分子与部分CD29、CD44阳性细胞共表达。结论小鼠BMSCs和ADMSCs均具有成脂、成骨、成心肌分化能力,但是在形态上和分子表达上均存在差异。BMSCs的CD44和CD29表达高于ADMSCs;而CD73的表达则相反,CD73在两种细胞的表达均较低,在ADMSCs的表达不稳定。

关键词： CD73 CD29 CD44 间充质干细胞免疫荧光法流式细胞术小鼠

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大鼠白色和棕色脂肪来源的间充质干细胞成脂分化特性的比较

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解剖学报 2016年第5期47卷 607-613页

作者：牛艳菲赵国安常玉巧甘黎殷国田郭志坤新乡医学院河南省医用组织再生重点实验室新乡医学院第三附属医院心内科河南新乡453003

目的探讨白色脂肪组织(WAT)和棕色脂肪组织(BAT)来源的间充质干细胞成脂分化特性的差异。方法雄性SD大鼠15只,3只用于细胞分离培养,12只用于细胞移植。体外分离培养WAT和BAT两种来源的脂肪干细胞,用油红O染色检测两种干细胞的成脂分化率... 详细信息

目的探讨白色脂肪组织(WAT)和棕色脂肪组织(BAT)来源的间充质干细胞成脂分化特性的差异。方法雄性SD大鼠15只,3只用于细胞分离培养,12只用于细胞移植。体外分离培养WAT和BAT两种来源的脂肪干细胞,用油红O染色检测两种干细胞的成脂分化率,用免疫荧光技术检测成脂诱导、分化后的细胞是棕色脂肪细胞还是白色脂肪细胞。4’6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)标记两种来源的干细胞后移植至腹股沟区,分别在第1、2、3周取材,免疫荧光技术检测植入细胞的分化趋向。结果 WAT来源的干细胞增殖速度明显快于BAT来源的干细胞,前者成脂分化率为0.205±0.069,后者为0.165±0.053,两种干细胞的成脂诱导率差异无统计学意义(P>0.05)。两种干细胞分别植入体内后,在第1、2、3周发现,两种干细胞均表达棕色脂肪特异性蛋白解耦联蛋白1(UCP1)。结论 WAT和BAT来源的干细胞在体外及体内诱导成脂后均分化为棕色脂肪细胞。

关键词：解耦联蛋白1 棕色脂肪组织白色脂肪组织脂肪间充质干细胞成脂诱导免疫荧光大鼠

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鸡胚活体原位电转基因技术报告基因绿色荧光蛋白质量评估

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解剖学报 2012年第4期43卷 468-472页

作者：杨慈清毛会丽郭志坤林俊堂新乡医学院生命科学技术系河南省医用组织再生重点实验室河南新乡453003

目的在成功建立鸡胚活体原位电转基因技术的基础上,探讨报告基因绿色荧光蛋白(GFP)的表达及其在鸡胚发育过程对胚胎形态结构影响,分析α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和神经丝蛋白(NF)的表达情况。方法活体原位电转基因技术将pCAGGS-GFP质粒... 详细信息

目的在成功建立鸡胚活体原位电转基因技术的基础上,探讨报告基因绿色荧光蛋白(GFP)的表达及其在鸡胚发育过程对胚胎形态结构影响,分析α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和神经丝蛋白(NF)的表达情况。方法活体原位电转基因技术将pCAGGS-GFP质粒转入带壳培养第3天和第3天去壳培养至第5天的鸡胚,在电转基因24h后荧光体视显微镜观察,选择对照组和阳性表达胚胎,每组各5个胚胎,冷冻切片后进行荧光免疫组织化学检测α-SMA和NF分别在脊髓和视顶部位的表达状况。结果在脊髓和视顶不同发育阶段和转染的不同时间,实验组、对照组及GFP阳性表达区域和正常区域内α-SMA、NF两种蛋白表达不存在差异,胚胎形态结构也不存在差异。结论原位电转GFP在鸡胚发育早期过程中不影响正常基因的表达及鸡胚胎发育形态结构的变化,可以作为报告基因。

关键词：胚胎绿色荧光蛋白 α-平滑肌肌动蛋白神经丝蛋白活体电转鸡

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鸡胚培养及活体电转基因方法的建立

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解剖学报 2012年第4期43卷 564-568页

作者：杨慈清毛会丽林俊堂新乡医学院生命科学技术系河南省医用组织再生重点实验室河南新乡453003

目的建立和优化鸡胚胎带壳培养(in ovo culture)、去壳培养(ex ovo culture)和活体原位电转基因(in vivo electroporation)等技术。方法鸡胚孵化第2～3天,带壳培养至2～3 d和去壳培养至5～6d,分别在脊髓和大脑视顶部位,在电压18V、电流6... 详细信息

目的建立和优化鸡胚胎带壳培养(in ovo culture)、去壳培养(ex ovo culture)和活体原位电转基因(in vivo electroporation)等技术。方法鸡胚孵化第2～3天,带壳培养至2～3 d和去壳培养至5～6d,分别在脊髓和大脑视顶部位,在电压18V、电流60mA、间隔90ms和电脉冲6次(60ms/次)的条件下进行定时定位活体电转基因。结果带壳和去壳培养样本数分别为20个和10个,成活率分别是85%和80%,胚胎发育至2～3 d和5～6 d在脊髓和视顶部位转染样本数分别为11个和10个,阳性表达率为54.5%和60%。结论成功建立和优化了鸡胚培养和活体定时定位电转基因的方法。

关键词：发育培养活体电转鸡胚

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中国病理生理杂志 2013年第2期29卷 290-293页

作者：宋海岩邓晓慧孙春莉新乡医学院人体解剖学教研室河南省医用组织再生重点实验室河南新乡453003

目的:探讨食管癌相关基因2(esophageal cancer-related gene 2,ECRG2)蛋白联合顺铂(cisplatin,DDP)化疗对人食管癌EC9706细胞增殖和凋亡的影响。方法:采用MTT法分别检测单用ECRG2蛋白和ECRG2蛋白联合顺铂对EC9706细胞增殖的影响;采用Hoe... 详细信息

目的:探讨食管癌相关基因2(esophageal cancer-related gene 2,ECRG2)蛋白联合顺铂(cisplatin,DDP)化疗对人食管癌EC9706细胞增殖和凋亡的影响。方法:采用MTT法分别检测单用ECRG2蛋白和ECRG2蛋白联合顺铂对EC9706细胞增殖的影响;采用Hoechst 33258染色法检测二者对EC9706细胞凋亡的影响;Westernblotting检测二者对EC9706细胞中p53蛋白表达的影响。结果:MTT结果显示,ECRG2蛋白可抑制EC9706细胞增殖,ECRG2蛋白和DDP联用后抑制细胞增殖作用增强,且在一定浓度范围内呈时间、剂量依赖关系。Hoechst33258染色显示,ECRG2蛋白和DDP联合作用24 h后EC9706细胞凋亡数目多于单用ECRG2蛋白。Western blot-ting结果提示ECRG2蛋白和DDP联合用药较单用ECRG2蛋白明显上调p53蛋白的表达。结论:DDP可增强ECRG2蛋白对人食管癌EC9706细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用,其增强诱导EC9706细胞凋亡的机制可能与上调p53蛋白的表达有关。

关键词：食管癌相关基因2 顺铂细胞增殖细胞凋亡 EC9706细胞

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Bax、NOS在NMDA诱导的兴奋性神经毒中的表达变化

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中国临床解剖学杂志 2012年第6期30卷 675-677页

作者：宋海岩李娜娜付升旗任铭新新乡医学院人体解剖学教研室、河南省医用组织再生重点实验室河南新乡453003

目的探讨一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)及Bax在N-甲基-D-天(门)冬氨酸(N-Methyl-D-Asparate,NMDA)诱导的兴奋性神经毒中的作用及其可能的作用机制。方法原代培养SD新生大鼠皮层神经元,利用免疫荧光方法进行细胞纯度鉴定。神... 详细信息

目的探讨一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS)及Bax在N-甲基-D-天(门)冬氨酸(N-Methyl-D-Asparate,NMDA)诱导的兴奋性神经毒中的作用及其可能的作用机制。方法原代培养SD新生大鼠皮层神经元,利用免疫荧光方法进行细胞纯度鉴定。神经元细胞随机分为正常组、NMDA组、NG-Nitro-L-arginine Methyl Este(r L-NAME)组,分别采用NO浓度测定、ELISA及Weastern blotting检测各组细胞中NO浓度、NOS的表达及Bax的表达。结果免疫荧光大多数细胞为NSE阳性细胞,L-NAME组中NO浓度、NOS及Bax的表达均高于正常组而低于NMDA组。结论 NO毒性在NMDA诱导的神经细胞凋亡中起重要的作用,其可能是通过上调Bax的表达发挥作用。

关键词：兴奋性神经毒一氧化氮合酶 Bax

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鸡胚发育过程中音猬因子超表达对Pax家族基因表达的影响

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解剖学报 2015年第5期46卷 667-672页

作者：李晗杨慈清乔梁张必超林俊堂新乡医学院生命科学技术学院河南新乡453003 新乡医学院河南省医用组织再生重点实验室河南新乡453003

目的探讨鸡胚发育过程中,音猬因子（Shh）基因在脊髓中超表达后对配对框（Pax）基因家族Pax3、Pax6以及Pax7蛋白表达的影响。方法在鸡胚龄2.5-3.0d（E2.5-E3）时,实验组利用鸡胚脊髓活体电转基因技术将携带Shh基因的质粒和携带有绿色... 详细信息

目的探讨鸡胚发育过程中,音猬因子（Shh）基因在脊髓中超表达后对配对框（Pax）基因家族Pax3、Pax6以及Pax7蛋白表达的影响。方法在鸡胚龄2.5-3.0d（E2.5-E3）时,实验组利用鸡胚脊髓活体电转基因技术将携带Shh基因的质粒和携带有绿色荧光蛋白（GFP）报告基因的质粒共转入鸡胚脊髓,对照组则只转入报告基因质粒。E4时取材,每组至少取3例,冷冻切片后采用原位杂交技术检测Shh基因的mRNA表达水平,利用荧光免疫技术检测Shh在鸡胚脊髓中超表达后对Pax3,Pax6以及Pax7蛋白表达水平的影响,并将对照组及实验组中3种基因在脊髓两侧的表达量进行统计学分析。结果原位杂交结果表明,E4时Shh的mRNA主要表达在脊髓底板和脊索,实验组结果显示,利用鸡胚脊髓活体电转技术成功建立了Shh超表达模型。对照组中荧光免疫结果表明,Pax3主要表达于脊髓翼板、生肌节、背根以及背根神经节;Pax6主要表达于跨越翼板和基板的脊髓中间部位;Pax7则主要均匀表达于翼板、顶板和生肌节。Shh超表达后,脊髓转染侧与未转染侧相比Pax3、Pax6以及Pax7的表达量差异极显著（P〈0.01）,这3种基因在脊髓中的表达均被抑制。结论在鸡胚发育过程中,Pax家族Pax3、Pax6以及Pax7 3种基因在鸡胚脊髓中具有不同的表达模式,Shh超表达后对其均具有明显的抑制作用,显示这3种Pax基因受Shh信号通路调控。

关键词：音猬因子配对框鸡胚脊髓活体电转原位杂交鸡

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超声联合藤黄酸纳米粒抗人神经胶质瘤的研究

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现代肿瘤医学 2023年第5期31卷 789-794页

作者：董磊魏茜茜李孟壕何美李城李昭一尹朝华张素婷李娜娜王永玲常连生王峰新乡医学院基础医学院河南省医用组织再生重点实验室河南新乡453003

目的:研究藤黄酸对人神经胶质瘤细胞U87的有效作用浓度,以及载藤黄酸(gambogic acid,GA)的多孔脂质/PLGA杂化微泡(GA/PLGA)在超声作用下对U87的杀伤效果。方法:马尔文粒度仪检测GA/PLGA粒径电位分布情况;CCK-8法检测细胞活力;Annexin V... 详细信息

目的:研究藤黄酸对人神经胶质瘤细胞U87的有效作用浓度,以及载藤黄酸(gambogic acid,GA)的多孔脂质/PLGA杂化微泡(GA/PLGA)在超声作用下对U87的杀伤效果。方法:马尔文粒度仪检测GA/PLGA粒径电位分布情况;CCK-8法检测细胞活力;Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡率。结果:每50 mg PLGA中添加4 mg GA制备出的GA/PLGA具有最高的包封率和载药量,分别为(95.57±1.89)%和(7.65±0.15)%;GA对U87细胞的半数抑制浓度(IC50)为1.5μmol/L;US+GA/PLGA处理组对应U87细胞活力最低为(3.85±0.67)%;US+GA/PLGA处理组U87细胞凋亡率最高,为(75.97±0.49)%。结论:GA/PLGA微泡在超声作用下可以增强GA对U87的杀伤效果。

关键词：人神经胶质瘤超声微泡藤黄酸声孔效应

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小鼠脂肪间充质干细胞体外培养时间与细胞衰老关系初探

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中国免疫学杂志 2013年第10期29卷 1028-1032页

作者：李琼左红波张珉李慈霞郭志坤新乡医学院河南省医用组织再生重点实验室新乡453003 河南省肿瘤医院肝胆外科郑州450000

目的:探讨脂肪间充质干细胞(Adipose-derived mesenchymal stem cells,ADMSCs)体外培养时间与细胞衰老之间的关系,为细胞治疗提供实验参考。方法:分离、培养小鼠ADMSCs,MTT法绘制细胞生长曲线;β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色检测第1至第1... 详细信息

目的:探讨脂肪间充质干细胞(Adipose-derived mesenchymal stem cells,ADMSCs)体外培养时间与细胞衰老之间的关系,为细胞治疗提供实验参考。方法:分离、培养小鼠ADMSCs,MTT法绘制细胞生长曲线;β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色检测第1至第10代ADMSCs以及第4代细胞培养第1至第8天细胞的衰老情况;流式细胞术检测细胞周期变化;电镜观测第3和第8代细胞的超微结构。结果:衰老ADMSCs胞浆呈蓝色,随着代次增加细胞衰老率升高,第8代开始高于第1代细胞(P<0.05),并且G0/G1期细胞所占比例升高,S期和G2/M期细胞所占比例明显降低,提示细胞分裂增殖速度减慢;相同代次细胞,随着培养天数增加细胞衰老率呈上升趋势,第4天开始细胞的衰老比率明显高于第1天(P<0.05)。随着细胞代次增加,细胞膜出现较多突起,且胞质内脂滴增多,出现自噬体。结论:ADMSCs细胞衰老率与体外培养时间正相关。

关键词：脂肪间充质干细胞细胞衰老超微结构

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