检索结果-内蒙古大学图书馆

6-羟多巴损伤黑质导致弓状核离子钙接头蛋白1和阿片-促黑素皮质素原表达的变化

中国病理生理杂志 2017年第6期33卷 975-980页

作者：张毅敏连辉宋海岩周立蔡君艳王志勇新乡医学院河南省医用组织再生重点实验室河南新乡453003 东南大学附属中大医院江苏南京210009

目的:观察6-羟多巴(6-OHDA)损伤大鼠黑质(SN)后下丘脑弓状核(Arc)中酪氨酸羟化酶(TH)、离子钙接头蛋白1(Iba1)和阿片-促黑素皮质素原(POMC)的表达变化,为帕金森病(PD)患者消瘦的发生机制提供线索。方法:20只SD大鼠随机分为6-OHDA大鼠组... 详细信息

目的:观察6-羟多巴(6-OHDA)损伤大鼠黑质(SN)后下丘脑弓状核(Arc)中酪氨酸羟化酶(TH)、离子钙接头蛋白1(Iba1)和阿片-促黑素皮质素原(POMC)的表达变化,为帕金森病(PD)患者消瘦的发生机制提供线索。方法:20只SD大鼠随机分为6-OHDA大鼠组(双侧SN内注射6-OHDA)和对照组(注射等体积生理盐水)。免疫荧光染色和Western blot检测SN内TH,以及Arc内TH、Iba1和POMC的表达。结果:与对照组比较,6-OHDA大鼠组体重无明显变化,但腹膜后脂肪重量从(7.550±0.670)g减少到(3.895±0.465)g(P<0.01)。SN内TH阳性细胞数量从56±5减少至14±2(P<0.05);蛋白表达水平从0.75±0.11降低至0.41±0.09(P<0.01)。Arc中TH阳性细胞数量从21±2减少到10±3(P<0.05);Iba1阳性细胞数量从12±2增加到30±5(P<0.05);POMC阳性细胞数量从16±4增加到31±2(P<0.05)。下丘脑内TH蛋白的表达水平从0.35±0.05降低到0.21±0.02(P<0.01);Iba1蛋白的表达水平从0.23±0.06增加至0.51±0.04(P<0.01);POMC的蛋白表达水平从0.37±0.05增加至0.65±0.03(P<0.01)。结论:Arc中TH、Iba1和POMC表达变化可能与PD脂肪减少存在一定的联系。

关键词： 6-羟多巴弓状核酪氨酸羟化酶离子钙接头蛋白1 阿片-促黑素皮质素原

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鸡胚发育过程GFP标记视顶盖神经元迁移规律及NF分布特点的研究

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中国免疫学杂志 2013年第4期29卷 412-415页

作者：杨慈清李小英付苏雷李晗林俊堂新乡医学院生命科学技术学院新乡453003 河南省医用组织再生重点实验室新乡453003

目的:阐明鸡胚发育过程视顶盖层的组织学结构,神经元迁移的模式及神经丝蛋白的分布特点。方法:鸡胚正常培养到第3天(E3),采用鸡胚带壳开窗培养方法,取出3～4 ml蛋清,开窗培养至E5,将质粒pCAGGS-GFP通过活体原位电转基因技术导入视顶盖,... 详细信息

目的:阐明鸡胚发育过程视顶盖层的组织学结构,神经元迁移的模式及神经丝蛋白的分布特点。方法:鸡胚正常培养到第3天(E3),采用鸡胚带壳开窗培养方法,取出3～4 ml蛋清,开窗培养至E5,将质粒pCAGGS-GFP通过活体原位电转基因技术导入视顶盖,电转后继续培养到胚胎发育的E8～E12,取材、固定、包埋、切片后进行荧光免疫组化分析不同时期各层结构的形成和神经丝蛋白的分布。结果:在鸡胚发育过程,视顶盖从内向外最终共形成6层结构,大部分神经元垂直于视顶盖平面迁移至视神经纤维层终止,部分细胞沿视神经纤维层继续水平迁移,在中央灰质层(SGC)层,细胞迁移复杂,既存在纵向也存在横向迁移模式,NF的表达具有明显层的特点。结论:鸡胚发育过程视顶盖神经元不但存在从内向外垂直迁移的模式,而且还存在水平横向迁移的模式。

关键词：胚胎发育视顶盖神经丝蛋白神经元迁移

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大鼠出生前后心肌端粒酶逆转录酶表达的变化

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解剖学杂志 2010年第3期33卷 304-306页

作者：常连生郭志坤新乡医学院河南省组织再生重点开放实验室新乡453003

目的：探讨大鼠心肌组织端粒酶逆转录酶的发育规律。方法：免疫组织化学和免疫印迹技术检测SD大鼠心肌端粒酶逆转录酶（TERT）的表达，图像分析技术对心肌组织TERT的表达进行定量分析。结果：3组大鼠心肌组织中的心肌细胞、平滑肌和内... 详细信息

目的：探讨大鼠心肌组织端粒酶逆转录酶的发育规律。方法：免疫组织化学和免疫印迹技术检测SD大鼠心肌端粒酶逆转录酶（TERT）的表达，图像分析技术对心肌组织TERT的表达进行定量分析。结果：3组大鼠心肌组织中的心肌细胞、平滑肌和内皮细胞均有TERT的表达。TERT主要位于细胞质和细胞核内。TERT的总表达规律是20d胎鼠阳性表达强于出生后6d大鼠，出生后12d大鼠心肌表达最低，3组之间TERT的组间比较差异有统计学意义。结论：大鼠心肌组织的端粒酶活性随着日龄增加，其表达逐渐减少。

关键词：端粒酶逆转录酶免疫组织化学免疫印迹法心肌大鼠

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鸡胚发育过程中金属硫蛋白水解酶17在视顶盖中的过表达与血管生成的关系

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解剖学杂志 2014年第4期37卷 437-439,476,F0002页

作者：李小英范文艳林俊堂李晗崔莉马义杰杨慈清新乡医学院生命科学技术学院新乡453003 河南省医用组织再生重点实验室新乡453003

目的：探索金属硫蛋白水解酶17（ADAM17）在胚胎发育过程中过表达与血管形成的关系.方法：鸡胚正常培养到第3天（E3 d）,采用鸡胚带壳开窗培养方法,取出3～4 ml蛋清,密封开口继续培养至E5d,将pCAGGS-ADAM17和pCAGGS-GFP质粒通过活体电... 详细信息

目的：探索金属硫蛋白水解酶17（ADAM17）在胚胎发育过程中过表达与血管形成的关系.方法：鸡胚正常培养到第3天（E3 d）,采用鸡胚带壳开窗培养方法,取出3～4 ml蛋清,密封开口继续培养至E5d,将pCAGGS-ADAM17和pCAGGS-GFP质粒通过活体电转基因导入视顶盖,电转后继续培养到胚胎发育的E12 d,取材、4％多聚甲醛固定、OCT包埋、切片后采用原位杂交检测ADAM17表达水平,免疫荧光组织化学分析ADAM17过表达对微血管形成的影响.结果：鸡胚发育过程,采用活体电转基因实现了ADAM17在视顶盖中的过表达,ADAM17过表达对微血管的形成具有一定的影响.结论：ADAM17过表达促进微血管数量的增加.

关键词：金属硫蛋白水解酶17 视顶盖微血管过表达

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鸡胚发育早期Sonic Hedgehog在脊髓中的异位表达对形态结构及相关蛋白表达的影响

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中国细胞生物学学报 2014年第8期36卷 1123-1127页

作者：李小英杨慈清王聪睿付苏雷李晗林俊堂新乡医学院生命科学技术学院新乡453003 河南省医用组织再生重点实验室新乡453003

该文主要分析音猬因子（Sonic Hedgehog,Shh）在鸡胚发育过程中对脊髓形态结构的形成和相关蛋白表达的影响。实验过程采用鸡胚带壳开窗培养技术,待胚胎发育至第3 d,将2μg/μL pCAGGS-Shh和0.25μg/μL pCAGGS-GFP质粒以1：8浓度混合,将... 详细信息

该文主要分析音猬因子（Sonic Hedgehog,Shh）在鸡胚发育过程中对脊髓形态结构的形成和相关蛋白表达的影响。实验过程采用鸡胚带壳开窗培养技术,待胚胎发育至第3 d,将2μg/μL pCAGGS-Shh和0.25μg/μL pCAGGS-GFP质粒以1：8浓度混合,将0.1~0.5μL混合液准确地注射到神经管,在电压18 V、每次脉冲60 ms、间隔100 ms、电脉冲6次的条件下进行定时定位活体电转基因,电转后6 h开始到5 d分别收集胚胎,冰冻切片,采用荧光免疫组化和DAPI染色观察组织形态结构及相关蛋白的变化。结果表明,电转后6 h便可以观察到GFP的表达,24 h时Shh在脊髓中的异位表达能够诱导转录因子Nkx2.2（NK2 homeobox 2）的表达,并且能够抑制Pax7（paired-type homeobox 7）的表达,而Shh异位表达时脊髓的结构发生了明显的改变;说明Shh作为脊髓发育过程重要的信号分子,其异位表达能够诱导和抑制相关蛋白的表达,影响脊髓正常发育。

关键词：鸡胚脊髓

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不同发育时段大鼠心肌组织中超极化激活环核苷酸门控阳离子通道4阳性细胞的分布特征

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解剖学报 2018年第6期49卷 752-758页

作者：张亚南任明芬郭志坤新乡医学院河南省医用组织再生重点实验室新乡医学院第二附属医院心内科河南新乡453003

目的探讨超极化激活环核苷酸门控阳离子通道4(HCN4)在不同发育时期大鼠心肌组织中各类细胞的表达规律,为进一步研究HCN4对心肌的作用提供形态学依据。方法出生1 d、1月、3月、6月健康SD大鼠各15只。取新鲜心脏,石蜡切片和冷冻切片,利用... 详细信息

目的探讨超极化激活环核苷酸门控阳离子通道4(HCN4)在不同发育时期大鼠心肌组织中各类细胞的表达规律,为进一步研究HCN4对心肌的作用提供形态学依据。方法出生1 d、1月、3月、6月健康SD大鼠各15只。取新鲜心脏,石蜡切片和冷冻切片,利用免疫组织化学和荧光技术观察不同发育时段大鼠心肌组织HCN4阳性细胞的表达分布情况及形态学特征。利用Western blotting技术观察左右心室HCN4的蛋白含量。结果免疫组织化学和荧光染色结果显示,HCN4阳性细胞在出生后1 d、1月、3月、6月的血管平滑肌细胞,心内膜和血管的内皮细胞,心外膜的间皮细胞、成纤维细胞,大量心房肌细胞和少量心室肌细胞、传导组织细胞均有表达,但不同部位的表达细胞数量不均;Western blotting结果显示,心室HCN4蛋白随着月龄的增加表达逐渐降低。结论 HCN4在大鼠心肌组织中的表达随年龄的增加逐渐下降,但增殖能力较强的细胞持续存在,提示HCN4可能对心肌组织中的多种细胞的生存起调控作用。

关键词：心脏超极化激活环核苷酸门控阳离子通道4 免疫组织化学免疫荧光免疫印迹法大鼠

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整合素CD11a、CD11b和CD11c在大鼠心脏发育中的表达变化

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解剖学报 2013年第4期44卷 525-529页

作者：穆灵敏王文锋郭志坤张光谋新乡医学院形态学实验室新乡医学院生命科学技术系河南省医用组织再生重点实验室河南新乡453003

目的探讨整合素CD11a、CD11b和CD11c在大鼠心脏发育中的表达变化。方法利用免疫组织化学和RT-PCR方法,检测胚胎18d(E18d)、生后5d(P5d)、P19d、P40d及生后1年(P1y)大鼠心肌组织的CD11a、CD11b和CD11c的基因和蛋白表达。结果免疫组织化... 详细信息

目的探讨整合素CD11a、CD11b和CD11c在大鼠心脏发育中的表达变化。方法利用免疫组织化学和RT-PCR方法,检测胚胎18d(E18d)、生后5d(P5d)、P19d、P40d及生后1年(P1y)大鼠心肌组织的CD11a、CD11b和CD11c的基因和蛋白表达。结果免疫组织化学结果显示,大鼠心肌组织CD11a、CD11b和CD11c表达部位在心肌细胞质内;从E18d到P1y大鼠心肌组织CD11a、CD11b和CD11c的表达逐渐减弱。RT-PCR显示,CD11a、CD11b、CD11c各组均呈阳性表达。其中CD11a在P5d和P40d间,P5d和P19d间比较(P>0.05)差异无统计学意义,其他各组间比较差异均有统计学意义;CD11b在E18d、P5d、P19d和P40d分别比较(P>0.05)差异无统计学意义,其他各组差异均有统计学意义;CD11c各组间差异有统计学意义(P<0.01)。结论 CD11a、CD11b和CD11c在大鼠心肌的发育过程中出现表达量的变化,不同结构的整合素分子在心脏发育过程表现出相似的表达规律,它们可能对心肌细胞的发育起重要的调控作用。

关键词：心脏整合素CD 免疫组织化学反转录一聚合酶链反应大鼠

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钙激活的氯离子通道Anoctamin 5在骨骼肌发育过程中的表达变化

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中国临床解剖学杂志 2016年第3期34卷 318-321页

作者：宋海岩张毅敏周立田岳民付升旗新乡医学院基础医学院人体解剖学教研室河南省医用组织再生重点实验室河南新乡453003

目的探讨钙依赖的氯离子通道Anoctamin5在骨骼肌发育过程中的可能作用。方法采用RT-PCR检测Anoctamin5 m RNA在小鼠骨骼肌发育的不同时期的表达变化,同时,采用免疫荧光,Western blot的方法检测Anoctamin 5蛋白在小鼠骨骼肌发育不同时期... 详细信息

目的探讨钙依赖的氯离子通道Anoctamin5在骨骼肌发育过程中的可能作用。方法采用RT-PCR检测Anoctamin5 m RNA在小鼠骨骼肌发育的不同时期的表达变化,同时,采用免疫荧光,Western blot的方法检测Anoctamin 5蛋白在小鼠骨骼肌发育不同时期的表达变化。结果 Anoctamin5m RNA与蛋白在1 d至6月的小鼠骨骼肌中均有表达,但随着年龄的增长,Anoctamin5 m RNA与蛋白的表达呈逐渐降低的趋势。结论 Anoctamin5在骨骼肌的发育过程中发挥着重要的作用,也可能参与骨骼肌的分化、增殖及损伤修复,这也与Anoctamin5突变的病人出现症状较晚相一致。

关键词： Anoctamin5 骨骼肌发育表达

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C1型尼曼-匹克病小鼠生长繁殖及血液生理生化指标的测定分析

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中国实验动物学报 2017年第3期25卷 250-255页

作者：乔梁杨恩慧杨记超顾巧美董宏天林俊堂闫欣新乡医学院生命科学技术学院河南新乡453003 河南省医用组织再生重点实验室河南新乡453003

目的测定SPF级C1型尼曼-匹克病小鼠(Npc1^(-/-)小鼠)的生长繁殖及血液生理生化指标,为开展NPC1病人的研究提供理论性的基础资料。方法 (1)选取0~77日龄Npc1^(-/-)、Npc1^(+/-)和Npc1+/+小鼠雌雄各40只,定期称重并绘制生长曲线;(2)Npc1^(... 详细信息

目的测定SPF级C1型尼曼-匹克病小鼠(Npc1^(-/-)小鼠)的生长繁殖及血液生理生化指标,为开展NPC1病人的研究提供理论性的基础资料。方法 (1)选取0~77日龄Npc1^(-/-)、Npc1^(+/-)和Npc1+/+小鼠雌雄各40只,定期称重并绘制生长曲线;(2)Npc1^(-/-)小鼠由Npc1^(+/-)小鼠交配繁殖产生,统计Npc1^(+/-)小鼠连续4代的繁殖数据;(3)检测60日龄Npc1^(-/-)和Npc1+/+小鼠的血液生理生化指标。结果 (1)Npc1^(-/-)小鼠的体重在7周前随着日龄的增加而增加,7周后随着日龄的增加而减少,直至11周左右死亡。Npc1+/+和Npc1^(+/-)小鼠的体重均随着日龄的增长而逐渐增加,两者之间并没有显著差别。4周后雄性比雌性体重增加明显比雌性小鼠快;(2)Npc1^(+/-)小鼠不同代内交配分娩间隔、窝产仔数、离乳仔数、离乳仔数中雌雄数量及阳性数量差异无显著性(P>0.05),而第2代的离乳率明显大于第1代(P<0.05);(3)Npc1^(-/-)和Npc1+/+小鼠血液生理指标中平均红细胞血红蛋白含量(MCH)和平均过氧化物酶指数(MPXI)差异有显著性(P<0.05),其余差异无显著性(P>0.05)。生化指标中尿素(UREA)差异有极显著性(P<0.01),而天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、葡萄糖(GLU)、乳酸脱氢酶(LDH)、钾(K)和铜(Cu)等差异有显著性(P<0.05),其余差异无显著性(P>0.05)。结论 (1)Npc1^(-/-)、Npc1^(+/-)和Npc1+/+小鼠的生长曲线因基因型和性别的不同而存在差异;(2)Npc1^(+/-)小鼠不同代的繁殖能力差异无显著性;(3)Npc1^(-/-)和Npc1+/+小鼠的部分血液生理生化指标差异有显著性。

关键词： C1型尼曼-匹克病,小鼠生长曲线繁殖血液参数

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肝细胞生长因子和类胰岛素样生长因子对心肌干细胞的诱导作用

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解剖学报 2014年第5期45卷 663-669页

作者：朱蓓蓓蔡新华孙银平新乡医学院河南省医用组织再生重点实验室河南新乡453003 新乡医学院病理生理学教研室河南新乡453003

目的探讨肝细胞生长因子(HGF)和类胰岛素样生长因子(IGF1)在外能否诱导心肌干细胞(CSCs)发生增殖并向心肌细胞定向分化。方法组织贴块法分离培养心肌干细胞,免疫荧光技术鉴定c-kit和CD34表达,流式细胞仪分选纯化c-kit+细胞,CFDA SE荧光... 详细信息

目的探讨肝细胞生长因子(HGF)和类胰岛素样生长因子(IGF1)在外能否诱导心肌干细胞(CSCs)发生增殖并向心肌细胞定向分化。方法组织贴块法分离培养心肌干细胞,免疫荧光技术鉴定c-kit和CD34表达,流式细胞仪分选纯化c-kit+细胞,CFDA SE荧光探针示踪培养检测细胞增殖特征。实验分为单纯心肌干细胞组和与心肌共培养组,分别用HGF和IGF1干预,倒置显微镜观察细胞不同时期数量与形态的变化,活细胞工作站观察CFDA SE示踪剂荧光强弱,采集图像,进行统计学分析。免疫荧光技术检测Nkx2.5、心肌肌钙蛋白T(cTnT)的表达。结果单纯心肌干细胞组,生长因子刺激后心肌干细胞数量与形态均无明显变化。与心肌共培养组,细胞均发生增殖与形态变化,Nkx2.5、cTnT阳性表达,有个别心肌干细胞分化为自发搏动的心肌细胞。结论心肌干细胞与心肌细胞共培养条件下,HGF和IGF1能够促进心肌干细胞增殖,联合作用能够诱导心肌干细胞向心肌细胞分化。

关键词：心肌干细胞增殖心肌分化肝细胞生长因子类胰岛素样生长因子免疫荧光大鼠

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