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安徽医科大学学报 2023年第5期58卷 780-787页

作者：郭静宜原翔石林林张秀森孔金玉张顶彧高社干河南科技大学基础医学院与法医学院洛阳471003 河南省微生态与食管癌防治重点实验室河南省肿瘤表观遗传重点实验室洛阳471003 河南科技大学第一附属医院河南科技大学临床医学院洛阳471003

目的探讨牙龈卟啉单胞菌(Pg)感染食管癌细胞对肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)的极化及其功能变化的影响。方法采用ELISA方法检测食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞系上清及Pg感染的ESCC细胞系上清细胞因子分泌情况;构建ESCC细胞与巨噬细胞体外共培养模... 详细信息

目的探讨牙龈卟啉单胞菌(Pg)感染食管癌细胞对肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)的极化及其功能变化的影响。方法采用ELISA方法检测食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞系上清及Pg感染的ESCC细胞系上清细胞因子分泌情况;构建ESCC细胞与巨噬细胞体外共培养模型,采用qPCR、细胞免疫荧光及流式细胞术方法检测TAMs表面标志的变化情况;采用ELISA方法检测共培养TAMs分泌细胞因子的影响;使用共培养TAMs的条件培养基(CM)培养ESCC细胞,采用CCK-8、克隆形成实验、划痕实验及Transwell实验评估TAMs对ESCC细胞的增殖、迁移及侵袭能力的影响。结果Pg感染的ESCC细胞白细胞介素(IL)-6、IL-10表达量升高(P<0.01);与Pg感染的ESCC细胞共培养的TAMs表面CD163及CD206表达量升高(P<0.001);Pg感染的ESCC细胞共培养的TAMs分泌细胞因子IL-6、IL-10相对升高(P<0.01);Pg感染的ESCC细胞共培养的TAMs能够增强ESCC细胞增殖、迁移和侵袭能力(均P<0.05)。结论Pg感染ESCC细胞可诱导其分泌细胞因子,重塑TAMs向M2型免疫抑制表型极化,从而促进ESCC细胞的恶性生物学行为。

关键词：食管鳞癌牙龈卟啉单胞菌细胞因子 THP-1细胞巨噬细胞

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牙龈卟啉单胞菌感染在食管鳞癌中的作用及机制研究

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安徽医科大学学报 2024年第4期59卷 715-720页

作者：孔金玉刘怡文钱梦凡孙蔚邢玲(综述) 高社干(审校) 河南科技大学信息工程学院洛阳471003 河南科技大学第一附属医院河南科技大学临床医学院河南科技大学肿瘤研究所河南省微生态与食管癌防治重点实验室河南省肿瘤表观遗传重点实验室洛阳471003

食管癌是常见的消化道恶性肿瘤之一,预后差,生存率低。食管癌病因复杂,包括遗传、环境、微生物等多种因素。近年来,微生物在癌症的发生和发展中的作用成为研究热点。作为牙周病最重要病原体,牙龈卟啉单胞菌在食管鳞癌的发生、发展中起... 详细信息

食管癌是常见的消化道恶性肿瘤之一,预后差,生存率低。食管癌病因复杂,包括遗传、环境、微生物等多种因素。近年来,微生物在癌症的发生和发展中的作用成为研究热点。作为牙周病最重要病原体,牙龈卟啉单胞菌在食管鳞癌的发生、发展中起重要作用。该文就牙龈卟啉单胞菌与食管鳞癌发生发展的关系及发病机制作一综述,以期为食管癌防治提供新思路。

关键词：牙龈卟啉单胞菌食管鳞癌口腔微生物食管微生物预后机制

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牙龈卟啉单胞菌通过miR-21-5p/RASA1/ERK信号通路促进食管鳞癌自噬

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安徽医科大学学报 2024年第9期59卷 1621-1628页

作者：杜玉博焦叶林程月月程浩东茹艺梁高峰高社干齐义军河南科技大学基础医学与法医学院洛阳471023 洛阳市第一人民医院病理科洛阳471002 河南科技大学临床医学院河南科技大学第一附属医院肿瘤医院省部共建食管癌防治国家重点实验室河南省微生态与食管癌防治重点实验室河南省肿瘤表观遗传重点实验室洛阳471003

目的探讨牙龈卟啉单胞菌(Pg)促进食管鳞癌(ESCC)细胞自噬发生的分子机制。方法Pg感染siAtg7或氯喹(CQ)预处理的KYSE70细胞和KYSE140细胞,Western blot检测Atg7、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ和p62蛋白,荧光共聚焦显微镜检测mRFP-GFP-LC3标记ESCC细胞... 详细信息

目的探讨牙龈卟啉单胞菌(Pg)促进食管鳞癌(ESCC)细胞自噬发生的分子机制。方法Pg感染siAtg7或氯喹(CQ)预处理的KYSE70细胞和KYSE140细胞,Western blot检测Atg7、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ和p62蛋白,荧光共聚焦显微镜检测mRFP-GFP-LC3标记ESCC细胞自噬流,CCK-8法检测ESCC细胞活性,迁移小室检测ESCC细胞迁移及侵袭能力。miR-21-5p inhibitor、RASA1过表达或U0126分别阻断miR-21-5p/RASA1/ERK信号通路,如上检测自噬相关表型变化。免疫组化检测ESCC组织中Pg丰度和LC3蛋白表达,RT-PCR检测ESCC及其癌旁组织中miR-21-5p的表达,统计分析Pg、LC3和miR-21-5p相关性。结果Pg感染诱导KYSE70细胞和KYSE140细胞中LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白表达上调、p62蛋白表达下调,增加了mRFP-GFP-LC3标记细胞中的红色、绿色和黄色荧光斑点数目和荧光强度,同时促进KYSE70细胞和KYSE140细胞增殖、迁移和侵袭能力增加,上述Pg诱导的ESCC细胞表型改变被CQ或siAtg7预处理逆转。miR-21-5p inhibitor、U0126或RASA1过表达质粒的预处理,也同样逆转了Pg对ESCC细胞自噬的促进作用。Pg丰度与miR-21-5p、LC3蛋白表达呈正相关。结论Pg通过miR-21-5p/RASA1/ERK信号通路促进ESCC自噬发生。

关键词：食管鳞癌牙龈卟啉单胞菌自噬 miR-21-5p RASA1 ERK

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RNAscope原位杂交技术在食管癌牙龈卟啉单胞菌感染研究中的应用价值

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食管疾病 2022年第3期4卷 161-166页

作者：谷变利兰子君郭静宜马丽霞高社干河南科技大学第一附属医院(临床医学院) 肿瘤医院河南省微生态与食管癌防治重点实验室河南省肿瘤表观遗传重点实验室中国洛阳471003

目的对比免疫组化(IHC)技术,探究新的RNA原位杂交技术——RNAscope在食管鳞癌组织牙龈卟啉单胞菌(Pg)检测中的应用价值。方法在Pg感染阳性食管癌细胞系中,测试RNAscope探针特异性;收集我院新确诊为食管鳞癌的患者石蜡包埋组织标本44例,... 详细信息

目的对比免疫组化(IHC)技术,探究新的RNA原位杂交技术——RNAscope在食管鳞癌组织牙龈卟啉单胞菌(Pg)检测中的应用价值。方法在Pg感染阳性食管癌细胞系中,测试RNAscope探针特异性;收集我院新确诊为食管鳞癌的患者石蜡包埋组织标本44例,对比免疫组化技术,分析RNA原位杂交技术检测Pg的性能及临床预后能力。结果RNAscope技术可特异性检出食管癌细胞中感染的Pg;对比IHC,RNAscope检测食管癌石蜡包埋组织中Pg的敏感性、特异性分别为88.24%和92.59%,RNAscope技术与IHC技术检测一致率达90.91%(kappa=0.808;P<0.001);两种技术下,Kaplan-Meier评估Pg感染情况与食管癌总生存结果相似(IHC,P=0.006;RNAscope,P=0.026)。结论RNAscope技术是Pg感染食管癌临床研究的新的有效技术手段。

关键词：食管癌牙龈卟啉单胞菌 RNA原位杂交免疫组化

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多功能蛋白聚糖对食管鳞癌细胞体外迁移和侵袭的影响

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食管疾病 2024年第1期6卷 12-17页

作者：周东利刘嘉星张峰张卫国河南科技大学临床医学院河南科技大学第一附属医院肿瘤医院省部共建食管癌防治国家重点实验室河南省微生态与食管癌防治重点实验室河南省肿瘤表观遗传重点实验室洛阳471003

目的探讨多功能蛋白聚糖(versican,VCAN)在食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)KYSE150和EC9706细胞中的表达及其对细胞体外迁移和侵袭的影响。方法从GEO数据库中下载GSE77861数据集,采用生物信息学方法进行数据处理并... 详细信息

目的探讨多功能蛋白聚糖(versican,VCAN)在食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)KYSE150和EC9706细胞中的表达及其对细胞体外迁移和侵袭的影响。方法从GEO数据库中下载GSE77861数据集,采用生物信息学方法进行数据处理并筛选差异表达基因,筛选出与ESCC预后相关的关键基因VCAN;Western blot检测人正常食管上皮细胞HEEC及4种ESCC细胞系KYSE70、KYSE140、KYSE150、EC9706中VCAN的蛋白表达水平。将KYSE150和EC9706细胞分3组(si-VCAN沉默表达组、si-NC阴性对照组和空白对照组)处理,然后Western blot检测各组VCAN的蛋白表达水平;划痕实验、Transwell实验分别检测沉默表达VCAN对细胞迁移和侵袭能力的影响。结果ESCC细胞系的VCAN相对表达水平高于人正常食管上皮细胞HEEC,且si-VCAN沉默表达组的VCAN表达水平低于si-NC阴性对照组和空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05);划痕实验和Transwell实验结果表明,si-VCAN沉默表达组的迁移和侵袭细胞数目较对照组减少,差异有统计学意义(P<0.05)。结论VCAN在ESCC细胞系中高表达,沉默表达VCAN后可抑制ESCC细胞的体外迁移和侵袭。

关键词：食管鳞癌多功能蛋白聚糖差异表达基因细胞迁移细胞侵袭生物信息学

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牙龈卟啉单胞菌诱导选择性自噬接头蛋白SQSTM1/p62高表达在食管鳞癌中的临床意义及预后价值

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华中科技大学学报（医学版） 2022年第5期51卷 592-600页

作者：郭艺博刘怡文杨海军代宁涛孙蔚米优嘉张家铭周福有原翔高社干河南科技大学第一附属医院(临床医学院)肿瘤医院河南省微生态与食管癌防治重点实验室河南省肿瘤表观遗传重点实验室洛阳471003 河南科技大学基础医学院洛阳471003 安阳市肿瘤医院病理科安阳455000 安阳市肿瘤医院胸外科安阳455000

目的分析牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)对食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)选择性自噬接头蛋白p62的表达诱导效应及其与食管癌患者临床病理特征及生存期的相关性。方法采用透射电子显微镜及Western b... 详细信息

目的分析牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)对食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)选择性自噬接头蛋白p62的表达诱导效应及其与食管癌患者临床病理特征及生存期的相关性。方法采用透射电子显微镜及Western blot法检测Pg对ESCC细胞KYSE150自噬的影响,随后通过共聚焦显微镜检测Pg感染及p62敲降对KYSE150细胞自噬进程的影响,并进一步采用平板克隆、CCK-8及划痕实验检测Pg感染及p62敲降对KYSE150细胞增殖及迁移能力的影响。采用免疫组织化学法检测ESCC组织中Pg感染及p62的表达情况,并分析其与患者临床病理特征的相关性;采用Kaplan-Meier法分析二者对ESCC患者生存期的影响。结果Pg感染初期可通过p62介导KYSE150细胞自噬水平的提高,但随着Pg持续感染进一步诱导p62高表达,则导致ESCC细胞自噬受阻,同时增强ESCC细胞的增殖及迁移能力。ESCC组织中Pg感染与p62表达高于相应癌旁组织,且二者阳性表达呈显著一致性。Pg感染与p62表达阳性的患者多为吸烟、饮酒的男性,其肿瘤分化程度低、有淋巴结转移、临床分期晚,且5年生存期显著缩短。其中Pg感染与p62表达共阳性患者的5年生存期缩短最为显著。结论长期吸烟、饮酒的男性患者感染Pg的风险增高,Pg可通过诱导p62高表达,阻断ESCC细胞自噬,促进其恶性进展。有效清除Pg并抑制其对p62的诱导效应有望成为ESCC新的防治策略。

关键词：牙龈卟啉单胞菌食管鳞癌 p62 预后

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基于纳米医学的光热治疗在食管癌诊疗中的研究进展

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食管疾病 2023年第2期5卷 81-86页

作者：郭子兴石林林李佳怡喻莹牛浩瑾张小漫高社干河南科技大学临床医学院河南科技大学第一附属医院肿瘤医院省部共建食管癌防治国家重点实验室河南省微生态与食管癌防治重点实验室河南省肿瘤表观遗传重点实验室中国洛阳471003

食管癌是常见的上消化道恶性肿瘤之一,传统的治疗方式难以改善患者的生存质量。近年来,光热治疗(photothermal therapy,PTT)在食管癌治疗领域崭露头角,与传统治疗方式相比,PTT具有非侵入性、时空可控性和高效性等优点。PTT是通过光热转... 详细信息

食管癌是常见的上消化道恶性肿瘤之一,传统的治疗方式难以改善患者的生存质量。近年来,光热治疗(photothermal therapy,PTT)在食管癌治疗领域崭露头角,与传统治疗方式相比,PTT具有非侵入性、时空可控性和高效性等优点。PTT是通过光热转换剂(photothermal agent,PTA)将近红外光转化为热能来杀伤肿瘤细胞的一种治疗手段,具有靶向性强、创伤小、治疗时间和空间可控及较低不良反应等优势。本文就PTT的背景、作用原理、抗肿瘤机制以及纳米药物在食管癌PTT中的应用及展望进行阐述。

关键词：食管癌光热治疗纳米医学联合治疗

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靶向免疫代谢改善肿瘤微环境

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食管疾病 2023年第4期5卷 279-284页

作者：刘谷一周宏祎丁剑兰陈乐乐孙江涛河南科技大学临床医学院河南科技大学第一附属医院肿瘤医院省部共建食管癌防治国家重点实验室河南省微生态与食管癌防治重点实验室河南省肿瘤表观遗传重点实验室中国洛阳471003

免疫代谢近年来日益受到关注,癌基因驱动的肿瘤细胞代谢变化可影响肿瘤微环境(TME),进而抑制免疫反应,并对癌症治疗造成障碍。这提示我们可以通过靶向代谢途径改善TME,增强抗癌免疫效应。本文总结目前将TME内免疫细胞代谢转变为促炎状... 详细信息

免疫代谢近年来日益受到关注,癌基因驱动的肿瘤细胞代谢变化可影响肿瘤微环境(TME),进而抑制免疫反应,并对癌症治疗造成障碍。这提示我们可以通过靶向代谢途径改善TME,增强抗癌免疫效应。本文总结目前将TME内免疫细胞代谢转变为促炎状态的策略,并强调需要更好地还原生理条件,进而选择靶点、阐明机制和优化代谢抑制剂。

关键词：免疫代谢肿瘤微环境食管癌免疫治疗

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牙龈卟啉单胞菌FimA促进ESCC细胞MHC-I的降解与免疫抑制

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食管疾病 2024年第1期6卷 1-7页

作者：张旭东张秀森杨泽陈乐乐丁剑兰原翔河南科技大学临床医学院河南科技大学第一附属医院肿瘤医院省部共建食管癌防治国家重点实验室河南省微生态与食管癌防治重点实验室河南省肿瘤表观遗传重点实验室洛阳471003

目的探讨牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)感染食管鳞状细胞癌细胞后对主要组织相容性一类分子(MHC-I)的影响及其免疫调控机制。方法Western blot检测Pg感染KYSE-150细胞后主要毒力因子鞭毛蛋白(fimbriae,FimA)及MHC-I的表... 详细信息

目的探讨牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)感染食管鳞状细胞癌细胞后对主要组织相容性一类分子(MHC-I)的影响及其免疫调控机制。方法Western blot检测Pg感染KYSE-150细胞后主要毒力因子鞭毛蛋白(fimbriae,FimA)及MHC-I的表达水平,免疫共沉淀(Co-immunoprecipitation,Co-IP)法探索FimA和MHC-I之间的相互作用,共聚焦检测KYSE150细胞转染LC3双荧光慢病毒后的荧光变化,western blot检测Pg感染KYSE150后LC3B-Ⅱ的表达量,流式细胞术检测感染Pg的KYSE150与外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)共培养后PMBC表达MKi67的情况。结果Western blot显示Pg感染KYSE150细胞后FimA的表达增多而MHC-I的表达减少。Co-IP显示FimA与MHC-I蛋白可直接相互作用,共聚焦显微镜显示Pg感染KYSE150后荧光强度增强,流式细胞术显示Pg感染的KYSE150细胞与PBMC细胞共培养后能显著降低PBMC中Gzmb和Mki67的表达(均P<0.001)。结论FimA可能通过自噬途径促进MHC-1的降解、抑制T细胞免疫应答,参与ESCC的免疫抑制和肿瘤进展。

关键词：食管鳞状细胞癌牙龈卟啉单胞菌自噬毒力因子肿瘤免疫微环境

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共表达网络鉴定食管鳞癌中抗肿瘤细胞毒性分子

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食管疾病 2023年第1期5卷 11-18页

作者：李孟祥陈攀杜玉博张自超孙魁冯笑山高社干齐义军洛阳理工学院数学与物理教学部河南洛阳471023 河南科技大学第一附属医院肿瘤医院省部共建食管癌防治国家重点实验室河南省微生态与食管癌防治重点实验室河南省肿瘤表观遗传重点实验室中国洛阳471003

目的鉴定新的抗食管鳞癌(ESCC)免疫细胞毒性相关分子。方法基于ESCC转录组表达谱数据,利用CIBERSORT反卷积算法计算ESCC样本中免疫细胞构成比;通过加权基因共表达网络分析(WGCNA)构建基因模块;计算免疫细胞构成比与细胞毒性基因、共表... 详细信息

目的鉴定新的抗食管鳞癌(ESCC)免疫细胞毒性相关分子。方法基于ESCC转录组表达谱数据,利用CIBERSORT反卷积算法计算ESCC样本中免疫细胞构成比;通过加权基因共表达网络分析(WGCNA)构建基因模块;计算免疫细胞构成比与细胞毒性基因、共表达网络模块的相关性,确定关键模块。通过基因的模块隶属度、基因显著性和预后相关性,鉴定关键基因。结果WGCNA方法共构建30个基因模块,其中white模块包含了本研究纳入的所有细胞毒性相关基因(GZMA、PRF1、GZMB和IFNG),将其作为关键模块。关键模块共包含18个关键hub基因,其中8个基因表达异常与ESCC患者预后相关。结论通过基因共表达网络方法,鉴定到8个ESCC细胞毒性相关基因。

关键词：食管鳞癌基因共表达网络免疫细胞毒性

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