检索结果-内蒙古大学图书馆

中国老年学杂志 2013年第8期33卷 1843-1845页

作者：王永霞李永真崔静李娜张洁千新来新乡医学院病理学教研室河南新乡453003

目的探讨人乳腺癌细胞中高危型人乳头瘤病毒16型(HPV16)E6/E7与COX-2表达的关系。方法以HPV16 E6/E7表达阴性的人乳腺癌细胞系MCF-7和分别稳定高表达HPV16 E6、E7和同时高表达E6/E7的乳腺癌细胞系MCF-7-E6、MCF-7-E7、MCF-7-E6/E7及空... 详细信息

目的探讨人乳腺癌细胞中高危型人乳头瘤病毒16型(HPV16)E6/E7与COX-2表达的关系。方法以HPV16 E6/E7表达阴性的人乳腺癌细胞系MCF-7和分别稳定高表达HPV16 E6、E7和同时高表达E6/E7的乳腺癌细胞系MCF-7-E6、MCF-7-E7、MCF-7-E6/E7及空转细胞MCF-7-vec为研究对象,通过RT-PCR和Western印迹方法检测各乳腺癌细胞系中COX-2基因及蛋白的表达情况。结果所有细胞系中COX-2 mR-NA及蛋白均有阳性表达,且MCF-7-E6、MCF-7-E7和MCF-7-E6/E7细胞中的表达水平要显著高于MCF-7-vect和MCF-7亲本细胞(mRNA:F=135.236,P<0.01;蛋白:F=146.125,P<0.01),而MCF-7-E6、MCF-7-E7和MCF-7-E6/E7细胞中COX-2 mRNA及蛋白的表达水平无显著性差异,MCF-7-vect空转和MCF-7亲本细胞中COX-2 mRNA及蛋白的表达水平也无显著性差异。结论人乳腺癌中HPV16 E6/E7与COX-2的表达间可能存在密切关系。

关键词：乳腺癌人乳头瘤病毒环氧化酶-2

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用序列特异性引物多聚酶链反应的方法进行大样本、多基因的多态性鉴定

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中国组织工程研究与临床康复 2007年第2期11卷 321-324页

作者：杨瑞王淑秀秦川杨献军新乡医学院分子生物研究室河南省新乡市453003 新乡医学院病理学教研室河南省新乡市453003

目的:建立多个基因同时进行多态性分析的序列特异性引物多聚酶链反应的方法,以满足其在临床检验中进行基因多态性鉴定时的应用。方法:实验于2005-10/2006-05于河南省新乡医学院分子生物研究室完成。进行临床普通血液常规检测的患者血样... 详细信息

目的:建立多个基因同时进行多态性分析的序列特异性引物多聚酶链反应的方法,以满足其在临床检验中进行基因多态性鉴定时的应用。方法:实验于2005-10/2006-05于河南省新乡医学院分子生物研究室完成。进行临床普通血液常规检测的患者血样200份(由新乡医学院第三附属医院提供),采用临床血样,提取DNA后采用多聚酶链反应扩增,并以扩增后的样品进行琼脂糖凝胶电泳,以是否出现相应的扩增条带作为基因分型的标准。应用优化后的序列特异性引物多聚酶链反应的方法分析以下基因的多态性:肿瘤坏死因子α-308A/G和-238G/A变异、白细胞介素6-174G/C变异、细胞色素P4502D6(CYP2D6)*10B外显子第188位的C/T变异。并由此优化序列特异性引物多聚酶链反应的方法,以达到应用同一个多聚酶链反应扩增程序,可同时对多个基因、多个临床样本的基因多态性同时进行分析,且基因型清晰,分型快速、准确。结果:①用20 g/L的琼脂糖凝胶电泳可看到每泳道内可有2条或1条扩增产物,其中阳性对照β珠蛋白基因的扩增片段长268 bp,此条带可以出现、减弱或者不出现。②其中肿瘤坏死因子α-308A/G存在G/G和A/G两种基因型;肿瘤坏死因子α-238G/A位点可检测到的基因型有G/A、G/G和A/A3型;白细胞介素6-174G/C变异位点可检测到的基因型均为G/G纯合子;细胞色素P4502D6*10B外显子第188位的C/T位点可检测到的基因型为C/C、C/T、T/T3型。结论:优化后的序列特异性引物多聚酶链反应适合对大样本,多个基因的单核苷酸位点变异进行多态性分析,快速、准确、成本低。

关键词：聚合酶链反应多态性单核苷酸基因变异(遗传学)

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siRNA干扰缺氧诱导因子-2α对乳腺癌细胞增殖能力的影响

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临床与实验病理学杂志 2014年第1期30卷 6-9页

作者：李娜王洪兴张洁李永真千新来河南省新乡医学院病理学教研室新乡453003 河南省新乡医学院临床免疫学教研室新乡453003

目的探讨缺氧诱导因子-2α(hypoxia-inducible factors-2α,HIF-2α)siRNA对乳腺癌细胞MCF-7增殖能力的影响及相关机制。方法采用CoCl2处理细胞,建立细胞缺氧模型,应用RNA干扰技术沉默MCF-7细胞中HIF-2α的表达;运用RT-PCR技术检测转染... 详细信息

目的探讨缺氧诱导因子-2α(hypoxia-inducible factors-2α,HIF-2α)siRNA对乳腺癌细胞MCF-7增殖能力的影响及相关机制。方法采用CoCl2处理细胞,建立细胞缺氧模型,应用RNA干扰技术沉默MCF-7细胞中HIF-2α的表达;运用RT-PCR技术检测转染后MCF-7细胞中HIF-2αmRNA的表达;绘制细胞生长曲线,观察细胞生长速度和倍增时间;通过流式细胞术观察细胞周期分布的改变;采用RT-PCR技术检测增殖相关基因的表达。结果细胞缺氧模型建立成功。RNA干扰结果显示:缺氧+siRNA组HIF-2αmRNA的表达与单纯缺氧组相比明显降低(P<0.05);细胞生长曲线结果显示:缺氧+siRNA组与单纯缺氧组相比,细胞生长速度明显减慢,倍增时间显著延长(P均<0.05);细胞周期结果显示:缺氧+siRNA组与单纯缺氧组相比,S期和G2/M期细胞比例显著减少(P<0.05);RT-PCR结果显示:缺氧+siRNA组与单纯缺氧组相比,p21基因表达上调(P<0.05),Cyclin B基因表达下调(P<0.05)。结论 HIF-2αsiRNA可抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖能力,可能与p21基因表达上调、Cyclin B基因表达下调有关。

关键词：乳腺肿瘤缺氧诱导因子2α RNA干扰 CoCl2 增殖

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缺氧诱导因子-2α与MMP-2启动子结合位点的确定

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临床与实验病理学杂志 2018年第1期34卷 46-49页

作者：梁文辉原志庆王志慧李娜河南省新乡市中心医院新乡453000 河南省新乡医学院病理学教研室新乡453003

目的探讨缺氧诱导因子-2α(hypoxia inducible factor-2α,HIF-2α)与基质金属蛋白酶-2(matrixmetallo proteinases-2,MMP-2)基因中缺氧反应元件(hypoxia-response element,HRE)的体外结合,并确定该结合位点。方法采用凝胶滞留电泳迁移率实验(electrophoretic mobility shift assay,EMSA)鉴定HIF-2α与MMP-2基因中HRE的体外结合;同时利用染色质免疫沉淀技术(chromatin immunoprecipitation assay,CHIP)进一步验证并确定该结合位点。结果成功预测2条MMP-2启动子区潜在的HIF-2α结合位点,分别为-217^-204、-1 029^-1 007;探针标记效率检测结果显示,正义链和反义链标记效率均为50%以上,可用于EMSA实验;结果显示,MMP-2启动子区存在HIF-2α的结合位点,位于-217^-204。CHIP结果显示,实验组和对照组均扩增出约250 bp MMP-2启动子中含HRE区域的片段,提示HIF-2α蛋白与MMP-2启动子中的HRE区域存在活体内结合的关系。结论 HIF-2α与MMP-2基因中的HRE存在体内外结合。

关键词：缺氧诱导因子2α MMP-2 缺氧反应元件 MCF-7细胞

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乳腺癌中缺氧诱导因子-2α与MMP-2的表达及意义

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临床与实验病理学杂志 2013年第3期29卷 257-260页

作者：王洪兴张洁贺国洋李娜河南省新乡医学院临床免疫学教研室新乡453003 河南省新乡医学院病理学教研室新乡453003

目的探讨缺氧诱导因子-2α(hypoia-inducible factor-2α,HIF-2α)与基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)在乳腺癌中的表达及意义。方法 (1)采用免疫组化SP法检测47例乳腺癌标本及30例癌旁组织中HIF-2α和MMP-2的表达,分析其表达与乳腺癌临床病理特征的关系及二者表达的相关性;(2)采用Western blot法检测不同转移潜能乳腺癌细胞株中HIF-2α和MMP-2的表达,分析其表达与乳腺癌转移潜能的关系。结果 (1)HIF-2α蛋白在乳腺癌组织中的阳性率高于癌旁组织(P<0.05),且其高表达与肿瘤大小、分期及淋巴结转移均密切相关(P均<0.05)。MMP-2蛋白在乳腺癌组织中的阳性率高于癌旁组织(P<0.05),且其低表达与肿瘤的淋巴结转移均密切相关(P<0.05);HIF-2α蛋白与MMP-2的表达呈正相关(P<0.05)。(2)Western blot法检测结果提示与低转移乳腺癌细胞相比,高转移潜能乳腺癌细胞中HIF-2α和MMP-2的表达均明显升高。结论 HIF-2α和MMP-2的过表达可能与乳腺癌的侵袭、转移有关。二者有望成为判定乳腺癌侵袭和转移能力的指标。

关键词：乳腺肿瘤缺氧诱导因子-2α基质金属蛋白酶-2 免疫组织化学 Western blot

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食管癌切缘残留癌发生途径及其生物学特性的研究

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临床与实验病理学杂志 1993年第2期9卷 133-134,136页

作者：原志庆千高峰和瑞芝王凤荣吴国祥左连富王玉峰河南省新乡医学院病理学教研室 453003 河北医学院病理学教研室河南省新乡荣康医院 453003

本文应用流式细胞术,对食管癌切缘残留癌(RT)与其相应的主体癌和癌中心与癌前缘之间的DNA含量(DI)、异倍体(AN)率和细胞增殖指数(PI)进行了定量研究和比较分析。结果表明,RT的DI、AN率和PI显著低于主体癌(P0.05)。提示多数RT可能为多中... 详细信息

本文应用流式细胞术,对食管癌切缘残留癌(RT)与其相应的主体癌和癌中心与癌前缘之间的DNA含量(DI)、异倍体(AN)率和细胞增殖指数(PI)进行了定量研究和比较分析。结果表明,RT的DI、AN率和PI显著低于主体癌(P<0.001);而癌中心与癌前缘之间无显著差异(P>0.05)。提示多数RT可能为多中心起源所致。文中对RT的生物学行为进行初步探讨。

关键词：切缘残留癌流式细胞术食管肿瘤

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DNA甲基化对大肠癌相关基因表达的调控意义

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世界华人消化杂志 2006年第17期14卷 1699-1703页

作者：李庚千新来崔静王中群冶亚平杨晓煜李永真新乡医学院病理教研室河南省新乡市453003

目的:探讨大肠癌发生与演进中p16,Rb,cyclin D1甲基化状态与蛋白表达的关系及意义．方法:提取正常黏膜、腺瘤、癌旁组织及癌组织基因组DNA,应用MSP法检测不同病变阶段组织中各基因的甲基化状态,并对其与蛋白表达及临床病理参数的关系进... 详细信息

目的:探讨大肠癌发生与演进中p16,Rb,cyclin D1甲基化状态与蛋白表达的关系及意义．方法:提取正常黏膜、腺瘤、癌旁组织及癌组织基因组DNA,应用MSP法检测不同病变阶段组织中各基因的甲基化状态,并对其与蛋白表达及临床病理参数的关系进行分析．结果:在大肠癌发生与演进过程中,p16,Rb 基因甲基化率呈增高趋势,cyclin D1基因甲基化率呈下降趋势,p16(切缘:r=-0．185,P =0．173;腺瘤:r=-0．381,P=0．013:癌旁:r= -0．419,P=0．001;癌:r=-0．516,P=0．000)、 cyclin D1(切缘:r=-0．282,P=0．035;腺瘤:r= -0．329,P=0．033;癌旁:r=-0．298,P=0．026; 癌:r=-0．618,P=0．000)基因甲基化程度分别与其蛋白表达呈明显负相关,且在癌组织分化程度(p16:X2=11.232,P=0．002,cyclin D1:X2 =9．144,P=0．015)、浸润深度(p16:X2=6．229, P=0．013;cyclin D1:X2=8．023,P=0．006)和淋巴结转移(p16:X2=5．707,P=0．016;cyclin D1: X2=7．794,P=0．005)上有显著性差异．Rb基因的甲基化状态在Rb表达抑制上不起主要作用．结论:大肠癌p16高甲基化和cyclin D1低甲基化可能是p16失活和cyclin D1过表达的主要机制,在大肠癌的发生、发展中发挥重要作用, 对于大肠癌的早期诊断、恶性程度及预后判断有重要意义．

关键词：大肠癌 DNA甲基化 p16 Rb cyclin D1

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细胞骨架调节蛋白3促进食管鳞癌细胞的增殖、迁移和侵袭

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中国生物化学与分子生物学报 2021年第12期37卷 1648-1657页

作者：贺国洋邓美静陈庆庆王贝玺王永霞朱会芳李健李娜宋书豪千新来李巍新乡医学院病理学系河南新乡453003 新乡医学院第三附属医院病理科河南新乡453003 新乡市中心医院病理科河南新乡453003 新乡医学院法医病理学教研室河南新乡453003 新乡医学院法医物证教研室河南新乡453003

细胞骨架调节蛋白3(diaphanous related formin3,DIAPH3)参与肌动蛋白重塑和调节细胞的运动和黏附,在多种肿瘤发生发展中发挥重要作用,但其在食管鳞状细胞癌(简称:食管鳞癌)中作用尚未见报道。本研究探究DIAPH3在食管鳞癌中的作用及其... 详细信息

细胞骨架调节蛋白3(diaphanous related formin3,DIAPH3)参与肌动蛋白重塑和调节细胞的运动和黏附,在多种肿瘤发生发展中发挥重要作用,但其在食管鳞状细胞癌(简称:食管鳞癌)中作用尚未见报道。本研究探究DIAPH3在食管鳞癌中的作用及其分子机制。首先,基因表达谱交互分析(gene expression profiling interactive analysis,GEPIA)数据库和免疫组织化学染色法,用于分析食管鳞癌组织中DIAPH3在转录水平和蛋白质水平的表达。结果显示,食管鳞癌组织中DIAPH3mRNA和蛋白质的表达高于癌旁组织,其与肿瘤分化和淋巴结转移密切相关(P<0.05)。利用Western印迹检测食管鳞癌组织中DIAPH3蛋白的表达量。结果表明:与癌旁组织相比,食管鳞癌组织中蛋白质的表达量升高(P<0.05)。再利用CCK-8、划痕愈合实验和Transwell侵袭实验,分别检测细胞的增殖、迁移和侵袭能力。实验结果显示:与对照组相比,干扰DIAPH3组细胞的增殖、迁移和侵袭能力下降(P<0.05),而过表达DIAPH3组细胞的增殖、迁移和侵袭能力增强(P<0.05)。最后,利用Western印迹检测过表达/干扰DIAPH3细胞中的细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、E-钙黏着蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(vimentin)的表达。Western印迹结果显示:与对照组相比,干扰DIAPH3组细胞中,E-钙黏着蛋白表达增加,且波形蛋白和细胞周期蛋白D1表达减少(P<0.05),而过表达DIAPH3组细胞中,E-钙黏着蛋白表达减少,且波形蛋白和细胞周期蛋白D1表达增加(P<0.05)。这些研究表明,DIAPH3促进食管鳞癌细胞的增殖、迁移和侵袭。其结果为食管鳞癌的诊治提供了新思路。

关键词：食管鳞癌细胞骨架调节蛋白3 增殖迁移侵袭

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髓母细胞瘤中预后标志物的加权基因共表达网络筛选

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中华医学杂志 2020年第6期100卷 460-464页

作者：杜宝顺袁磊孙来广张哲莹河南省新乡市中心医院神经外二科新乡453003 新乡医学院三全学院新乡453003 新乡医学院病理学教研室新乡453003

目的探讨应用加权基因共表达网络分析(WGCNA)方法寻找髓母细胞瘤中特异表达的基因模块,筛选可能诊断和治疗髓母细胞瘤的标记基因。方法采用WGCNA对髓母细胞瘤中与生存相关的基因模块进行鉴定。利用Cytoscape软件构建共表达网络。采用Kap... 详细信息

目的探讨应用加权基因共表达网络分析(WGCNA)方法寻找髓母细胞瘤中特异表达的基因模块,筛选可能诊断和治疗髓母细胞瘤的标记基因。方法采用WGCNA对髓母细胞瘤中与生存相关的基因模块进行鉴定。利用Cytoscape软件构建共表达网络。采用Kaplan Meier(KM)分析方法对核心基因进行生存分析。结果根据WGCNA分析结果发现绿色模块与生存性状显著相关。对绿色模块基因进行分析结果显示,利用cytoscape软件筛选出了与生存性状相关性最大的核心基因UBE2G1,并进行了鉴定。结论UBE2G1可能作为一个候选的诊断性生物标志物和一个有希望的治疗靶点。

关键词：生物信息学共表达模块髓母细胞瘤泛素连接蛋白E2G1

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KISS-1及MMP-9基因在胃癌侵袭转移中的作用及相关性

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临床与实验病理学杂志 2012年第7期28卷 761-763,767页

作者：王洪兴张洁宋颖李娜河南省新乡医学院临床免疫学教研室病理学教研室新乡453003

目的探讨肿瘤转移抑制基因KISS-1在胃癌侵袭、转移中的作用及其与MMP-9表达的关系。方法采用Lipofectamine脂质体介导将pcDNA3.1-KISS-1真核表达质粒转染胃癌BGC-823细胞,经G418筛选,建立稳定高表达KISS-1蛋白的细胞系,通过RT-PCR和West... 详细信息

目的探讨肿瘤转移抑制基因KISS-1在胃癌侵袭、转移中的作用及其与MMP-9表达的关系。方法采用Lipofectamine脂质体介导将pcDNA3.1-KISS-1真核表达质粒转染胃癌BGC-823细胞,经G418筛选,建立稳定高表达KISS-1蛋白的细胞系,通过RT-PCR和Western blotting法证实转染成功,并检测细胞中MMP-9蛋白及mRNA的表达情况;采用Transwell体外侵袭实验,探讨KISS-1对胃癌细胞株侵袭能力的影响。结果 Western blotting和RT-PCR结果显示:转基因组BGC-823细胞中KISS-1蛋白及mRNA的表达与转空质粒组和对照组相比均明显增加(P均<0.05);转基因组BGC-823细胞中MMP-9蛋白及mR-NA的表达与转空质粒组和对照组相比均明显降低(P均<0.05);Transwell检测结果显示:转基因组BGC-823细胞的穿膜数与转空质粒和对照组相比均明显降低(P<0.05),侵袭力抑制率达到25%。结论 pcDNA3.1-KISS-1的有效转染可降低MMP-9的表达并对胃癌细胞BGC-823的侵袭能力具有抑制作用。KISS-1基因对胃癌侵袭转移的抑制作用可能是通过下调MMP-9的功能实现的。

关键词：胃癌细胞株真核表达载体 KISS-1 基质金属蛋白酶-9

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