肌肉生长抑制素(MSTN)是动物肌肉发育和生长过程中的负调控因子。为了明确淇河鲫MSTN基因序列及其在肌肉生长发育中的调控功能,本研究利用RACE方法克隆淇河鲫MSTN全长c DNA序列,q RT-PCR分析其在不同组织和胚胎发育阶段的表达情况。结果显示,淇河鲫MSTN c DNA序列全长2094 bp(***851952.1),包含86 bp 5′非编码区、880 bp 3′非编码区和1128 bp开放阅读框,编码375个氨基酸残基,前22个氨基酸残基为信号肽,34;56位氨基酸残基为TGF-β前肽域,281;75是TGF-β结构域,具蛋白酶水解位点RIRR和C端生物活性区的9个保守半胱氨酸残基。蛋白同源分析发现淇河鲫MSTN与鲤形目鱼类相似性较高,与哺乳动物和鸟类的相似性最低。系统进化分析显示,淇河鲫MSTN与鲫、鲤、鳡等鲤科鱼类亲缘关系较近。实时定量PCR分析表明,淇河鲫MSTN基因在各个组织中均有表达,脑中表达量最高,其次为肌肉和肝脏,肠道表达量最低。淇河鲫胚胎发育的各阶段MSTN基因均有表达,受精卵表达量最高,其次为囊胚期,神经胚期表达量最低。推测MSTN与淇河鲫肌肉发育生长具有一定的相关性,可能参与"双背鲫"特征的形成。
为探究植物乳杆菌HS-07胞外多糖(exopolysaccharides from Lactbacillu plantarum HS-07, EPS-07)对鲤免疫、抗氧化及抗嗜水气单胞菌感染能力的影响。将不同浓度的EPS-07 (250μg/mL、500μg/mL和1000μg/mL)与鲤头肾细胞体外共培养;并...
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为探究植物乳杆菌HS-07胞外多糖(exopolysaccharides from Lactbacillu plantarum HS-07, EPS-07)对鲤免疫、抗氧化及抗嗜水气单胞菌感染能力的影响。将不同浓度的EPS-07 (250μg/mL、500μg/mL和1000μg/mL)与鲤头肾细胞体外共培养;并设置对照组(灌喂无菌生理盐水)和EPS-07处理组(灌喂250μg/mL、500μg/mL、1000μg/mL的EPS-07)进行体内实验, 1次/d,连续灌喂7 d,随后腹腔注射嗜水气单胞菌攻毒处理24 h。体外结果显示,鲤头肾细胞与EPS-07共同培养后,其增殖能力、吞噬活性、上清液中一氧化氮(NO)的含量、促炎细胞因子[肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)、白介素-1β(interleukin, IL-1β)、白介素-6 (IL-6)]和抗炎细胞因子[白介素-10(IL-10)、转化生长因子-β(transforming growth factor, TGF-β)]的表达均显著增强(P<0.05)。体内实验结果显示,嗜水气单胞菌感染前, EPS-07处理组血清中NO的含量、促炎细胞因子和抗炎细胞因子的表达显著增强(P<0.05);肝胰腺中总抗氧化能力(T-AOC)和谷胱甘肽(GSH)含量,以及超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和过氧化氢酶(CAT)的活性均显著高于对照组(P<0.05),但丙二醛(MDA)的含量显著低于对照组(P<0.05);嗜水气单胞菌感染后,EPS-07能抑制NO的大量释放,上调抗炎细胞因子的表达和下调促炎细胞因子的表达。综上所述,EPS-07在细胞水平和个体水平均能提高鲤免疫应答能力,增强其抗氧化和抗细菌感染能力。
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