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河南省畜牧兽医学会暨饲料饲草学分会2015年度学术交流会

作者：李任峰田香勤乔松林郭军庆杨艳艳张改平河南科技学院动物科学学院新乡712100 农业部动物免疫学重点实验室河南省农业科学院动物免疫学重点实验室郑州450002 河南省高等学校组织再生重点开放实验室新乡医学院新乡453003 农业部动物免疫学重点实验室河南省农业科学院动物免疫学重点实验室郑州450002 河南农业大学牧医工程学院郑州450002

为了探索新生仔猪回肠绒毛上皮是否存在M细胞(Microfold cell)以及自然感染条件下PEDV与回肠绒毛M细胞之间的关系.采用免疫荧光和形态学方法研究了正常仔猪回肠绒毛M细胞的形态学特征和分布特点、并初步探索了PEDV感染对仔猪回肠绒毛M... 详细信息

为了探索新生仔猪回肠绒毛上皮是否存在M细胞(Microfold cell)以及自然感染条件下PEDV与回肠绒毛M细胞之间的关系.采用免疫荧光和形态学方法研究了正常仔猪回肠绒毛M细胞的形态学特征和分布特点、并初步探索了PEDV感染对仔猪回肠绒毛M细胞的影响.免疫荧光结果显示,正常仔猪回肠绒毛上皮存在M细胞,沿隐窝至绒毛顶端上皮方向,M细胞的数量逐渐减少.电镜下,正常仔猪的回肠绒毛M细胞具有典型的M细胞特征.PEDV自然感染后的回肠绒毛M细胞病变明显,胞浆及囊泡中存在PEDV病毒颗粒,而相邻的其它上皮细胞病变不明显,且胞浆中没有观察到病毒颗粒.以上表明,新生仔猪回肠绒毛上皮存在M细胞,在绒毛的不同位置其分布比例存在差异.仔猪回肠绒毛M细胞可能是PEDV入侵肠道的重要通道.

关键词：新生仔猪猪流行性腹泻病毒感染病理机制回肠绒毛上皮 M细胞形态学特征位置分布

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大鼠心肌肥厚中磷酸化磷脂酞肌醇3-激酶和磷酸化蛋白激酶B蛋白表达与心肌纤维化的关系

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解剖学杂志 2014年第3期37卷 296-299页

作者：穆灵敏闫晓晓张光谋郭志坤马贵州冀艳王文锋殷国田新乡医学院形态学实验室新乡453003 新乡医学院生命科学技术学院细胞工程教研室新乡453003 河南省高等学校组织再生重点开放实验室新乡453003 新乡医学院第三附属医院新乡453003 新乡市第二人民医院新乡453003

目的:研究异丙肾上腺素致大鼠心肌肥厚中磷酸化磷脂酞肌醇3-激酶(p-PI3K)和磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)表达与心肌纤维化的关系,为探讨大鼠心肌肥厚中心肌纤维化的信号转导机制和改善心功能提供形态学资料.方法:健康成年SD大鼠皮下注射异丙... 详细信息

目的:研究异丙肾上腺素致大鼠心肌肥厚中磷酸化磷脂酞肌醇3-激酶(p-PI3K)和磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)表达与心肌纤维化的关系,为探讨大鼠心肌肥厚中心肌纤维化的信号转导机制和改善心功能提供形态学资料.方法:健康成年SD大鼠皮下注射异丙肾上腺素,造成心肌肥厚模型;取心肌组织,常规石蜡切片,Masson染色,观察心肌组织的成纤维细胞变化;免疫组织化学显色和免疫荧光显色,检测p-PI3K和p-Akt的表达及分布.利用图像分析软件对p-PI3K和p-Akt的表达结果进行定量分析.结果:大鼠实验组的心肌肥厚指标明显高于对照组;Masson染色结果显示实验组心肌细胞较对照组心肌细胞直径明显变大,细胞间距变大,细胞间纤维细胞增多,呈现区域性纤维化;免疫组织化学检测显示,实验组心肌组织p-PI3K和p-Akt蛋白表达面积和平均光密度较对照组高,两者差异有统计学意义;免疫荧光检测实验组心肌组织p-PI3K和p-Akt蛋白表达较对照组高.结论:p-PI3K和p-Akt蛋白表达增高可能在心肌纤维化的发生和发展过程中起重要作用.

关键词：磷酸化磷脂酞肌醇3-激酶磷酸化蛋白激酶B 心肌肥厚心肌纤维化

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瘤内注射吉西他滨治疗大鼠脑胶质瘤的效果观察

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肿瘤研究与临床 2013年第12期25卷 796-798页

作者：崔爱玲王巍东赵松鹤李春玲贾阿林龚亮胡红伟李甜甜新乡医学院河南省高等学校组织再生重点开放实验室 453003 新乡医学院第三附属医院输血科

目的观察吉西他滨瘤内给药治疗大鼠脑胶质瘤的效果,探讨治疗脑胶质瘤的有效化疗途径及药物.方法 50只SD大鼠随机分为对照组（5只）,肿瘤组和治疗（1 mg/ml）组和治疗（4mg/ml）组,每组15只.除对照组外,所有大鼠均在纹状体部埋植导管,... 详细信息

目的观察吉西他滨瘤内给药治疗大鼠脑胶质瘤的效果,探讨治疗脑胶质瘤的有效化疗途径及药物.方法 50只SD大鼠随机分为对照组（5只）,肿瘤组和治疗（1 mg/ml）组和治疗（4mg/ml）组,每组15只.除对照组外,所有大鼠均在纹状体部埋植导管,并接种9L胶质瘤细胞株以建立在体脑胶质瘤模型.治疗组于植入瘤细胞第9天,通过导管将吉西他滨（10μl,1 mg/ml和4 mg/ ml）分别注入瘤内.于给药第9天,每组随机取脑抽检（5只）,观察瘤形态及大小;余者（每组10只）观察其饮食、行为、体质量及存活期,评价吉西他滨对大鼠脑胶质瘤的治疗效果.结果于瘤内注入吉西他滨第9天取脑,发现各组肿瘤大小分别为：肿瘤组（44.69±7.52） mm3、治疗（1 mg/ml）组（22.44±5.37） mm3和治疗（4 mg/ml）组（18.72±7.13）mm3,肿瘤组与两治疗组间差异有统计学意义（P＜0.05）,但两治疗组之间差异无统计学意义（P＞0.05）.治疗组大鼠体质量下降较肿瘤组为轻.肿瘤组平均存活期为23.8d.4 mg/ml组1只存活期比肿瘤组短,剩余4只及全部1 mg/ml组（10只）均长于肿瘤组.结论吉西他滨可抑制脑胶质瘤生长,缓解大鼠体质量下降,延长模型动物存活期,对大鼠脑胶质瘤具有抑制作用.

关键词：神经胶质瘤吉西他滨药物疗法瘤内投药大鼠

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哺乳动物心脏淋巴与心血管疾病

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临床心血管病杂志 2012年第3期28卷 166-168页

作者：王耀峰郭志坤新乡医学院河南省高等学校组织再生重点开放实验室河南新乡453003

心淋巴管道是心脏脉管系统的重要补充,对维持心脏生理功能和心脏组织液的平衡起关键作用。心淋巴管道的异常与心血管疾病的发生密切相关。本文主要阐述心淋巴管的位置和功能、心淋巴障碍与心肌损伤、传导系统障碍、心血管病变的关系和... 详细信息

心淋巴管道是心脏脉管系统的重要补充,对维持心脏生理功能和心脏组织液的平衡起关键作用。心淋巴管道的异常与心血管疾病的发生密切相关。本文主要阐述心淋巴管的位置和功能、心淋巴障碍与心肌损伤、传导系统障碍、心血管病变的关系和促进淋巴回流在心脏病中的治疗意义。

关键词：淋巴管心肌损伤心脏传导系统心血管损伤

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异丙肾上腺素诱导的大鼠肥厚心肌组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的表达

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解剖学报 2012年第1期43卷 93-97页

作者：郭志坤武俊芳单卫华高建辉新乡医学院河南省高等学校组织再生重点开放实验室河南新乡453003

目的探讨Ⅰ、Ⅲ型胶原在肥厚心肌组织中的变化特征。方法 SD大鼠60只,分为对照组和实验组,两组分别再分为1、4、8周组,每组10只。对照组背部皮下注射生理盐水4ml/(kg.d);实验组背部皮下注射异丙肾上腺素4mg/(kg.d)。两组分别注射1、4、8... 详细信息

目的探讨Ⅰ、Ⅲ型胶原在肥厚心肌组织中的变化特征。方法 SD大鼠60只,分为对照组和实验组,两组分别再分为1、4、8周组,每组10只。对照组背部皮下注射生理盐水4ml/(kg.d);实验组背部皮下注射异丙肾上腺素4mg/(kg.d)。两组分别注射1、4、8周,然后测定各组大鼠体重(BW)、心脏湿重(HW)、左室湿重(LVW),计算出HW/BW、LVW/BW;心肌组织冷冻切片,利用图像分析软件,测量心肌细胞横径(TDM)和心肌细胞截面积(CA)。免疫组织化学法检测各组心肌组织Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达。Western blotting方法检测心肌肥厚大鼠心肌Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达及其含量。结果免疫组织化学结果显示,注射异丙肾上腺素1周后,Ⅰ和Ⅲ型胶原蛋白表达明显增加,4周后有所下降。Western blotting结果显示,实验各组Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白表达均多于对照组(P<0.01);实验1周时Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白表达量最高,4周和8周均下降。实验4周和8周组与1周组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论心肌肥厚发生1周左右是Ⅰ、Ⅲ型胶原增加的高峰期,以后趋于稳定。心肌肥厚主要引起胶原量的变化,不破坏胶原纤维的网络结构。

关键词：心肌肥厚胶原蛋白免疫组织化学免疫印迹法大鼠

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整合素β1在异丙肾上腺素诱导大鼠心肌肥厚组织中的表达

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中国临床解剖学杂志 2012年第1期30卷 79-83页

作者：武俊芳郭志坤张东高建辉新乡医学院河南省高等学校组织再生重点开放实验室河南新乡453003

目的观察心肌肥厚大鼠心肌组织中整合素β1的表达变化。方法在大鼠背部皮下分别注射7 d、28 d和56 d异丙肾上腺素(ISO),判定心肌肥厚指标,利用免疫组织化学和免疫印迹技术,观察整合素β1在肥厚左心室肌中的表达。结果免疫组化和Western ... 详细信息

目的观察心肌肥厚大鼠心肌组织中整合素β1的表达变化。方法在大鼠背部皮下分别注射7 d、28 d和56 d异丙肾上腺素(ISO),判定心肌肥厚指标,利用免疫组织化学和免疫印迹技术,观察整合素β1在肥厚左心室肌中的表达。结果免疫组化和Western blot结果显示,整合素β1主要表达于心肌细胞膜。与对照组相比,实验各组大鼠的心肌组织的整合素β1表达明显(P<0.05)。7 d、28 d和56 d各组间相比其表达含量逐渐增强。结论在心肌肥厚状态下,心肌细胞中的整合素β1表达增高,随着心肌肥大的进展其表达逐渐增加,提示整合素β1在心肌肥厚发生发展起重要作用。

关键词：整合素β1 免疫组织化学免疫印迹心肌肥厚模型大鼠

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肾性高血压模型大鼠左心室壁Ⅰ、Ⅲ型胶原网络重建

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解剖学报 2012年第5期43卷 673-678页

作者：田香勤王琳郭志坤蔡新华邢智钰吕卫锋新乡医学院河南省高等学校组织再生重点开放实验室新乡医学院本科生2008级河南新乡453003

目的探讨肾性高血压大鼠左心室壁重构过程中Ⅰ、Ⅲ型胶原分布的变化规律。方法采用双侧肾动脉狭窄法制作动物模型,32只SD大鼠随机分为假手术组、术后2周组、术后5周组和术后7周组,利用无创动物血压分析测试仪评价高血压动物模型质量,免... 详细信息

目的探讨肾性高血压大鼠左心室壁重构过程中Ⅰ、Ⅲ型胶原分布的变化规律。方法采用双侧肾动脉狭窄法制作动物模型,32只SD大鼠随机分为假手术组、术后2周组、术后5周组和术后7周组,利用无创动物血压分析测试仪评价高血压动物模型质量,免疫组织化学、Western blotting和图像分析方法检测各组左心室肌组织Ⅰ、Ⅲ型胶原的改变。结果与假手术组相比,Ⅰ、Ⅲ型胶原网络在术后2周均无明显变化,术后5周心肌细胞及肌束周围Ⅰ型胶原粗细纤维束呈断裂、聚集或部分缺如。心室壁小动脉管壁Ⅰ型胶原鞘不规整,纤维束断裂,胶原聚集或堆积,血管外膜粗纤维束向间质延伸;术后5周组肌细胞周围Ⅲ型胶原粗、细纤维束均出现严重松散或紊乱;血管壁Ⅲ型胶原鞘呈现松散现象。图像分析结果显示:术后5周组与术后7周组相比,Ⅰ型胶原平均吸光度和平均面积比均存在显著差异(P<0.05);Ⅲ型胶原平均吸光度各组间无显著差异(P>0.05),平均面积比术后2周组与术后5周组之间差异显著(P<0.05)。Western blotting检测结果表明,手术5周后Ⅰ型胶原蛋白表达量呈增高趋势,Ⅲ型胶原蛋白表达量呈降低趋势。结论高血压可导致左室壁Ⅰ、Ⅲ型胶原网络发生重建或破坏,血管外膜胶原结构严重受损。

关键词： Ⅰ型胶原 Ⅲ型胶原心肌肾性高血压模型免疫组织化学免疫印迹法大鼠

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盐酸异丙肾上腺素诱导大鼠左心室壁心肌细胞和Ⅰ/Ⅲ型胶原蛋白变化

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解剖学报 2012年第5期43卷 629-634页

作者：蔡新华赵国安王琳田香勤新乡医学院组织学与胚胎学教研室河南新乡453003 河南省高校组织再生重点开放实验室河南新乡453003 新乡医学院第三附属医院心内科河南新乡453003

目的探讨盐酸异丙肾上腺素(ISO)长期作用对大鼠左心室心肌细胞和间质Ⅰ/Ⅲ型胶原蛋白的影响。方法成年大鼠42只按4mg/(kg.d)剂量腹膜内注射ISO 1、4和8周,制备心肌缺血SD大鼠模型,用等体积生理盐水作对照组。利用电子/光学显微镜观察不... 详细信息

目的探讨盐酸异丙肾上腺素(ISO)长期作用对大鼠左心室心肌细胞和间质Ⅰ/Ⅲ型胶原蛋白的影响。方法成年大鼠42只按4mg/(kg.d)剂量腹膜内注射ISO 1、4和8周,制备心肌缺血SD大鼠模型,用等体积生理盐水作对照组。利用电子/光学显微镜观察不同阶段左心室肌组织结构,免疫组织化学和Western blotting方法检测左心室肌组织Ⅰ/Ⅲ型胶原蛋白表达,并利用HAPIS-2000显微图像分析系统和SPSS10.0统计学软件对表达强度和面积百分比进行统计学处理。结果光镜下观察ISO诱导心内膜下出现心肌细胞缺血坏死区。缺血坏死区有Ⅰ/Ⅲ型胶原蛋白高表达,缺血坏死区所占面积百分比有减小趋势,组间比较1周与4周之间差异无统计学意义(P>0.05),4周与8周间差异具有统计学意义(P<0.05);表达强度组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。非缺血坏死区心肌细胞早期表现为大量聚集糖原颗粒,后期以线粒体增多,肌原纤维松散为主要特征;免疫组织化学检测间质Ⅰ型胶原蛋白所占面积百分比无变化,组间比较差异均无统计学意义(P>0.05);表达强度实验组间比较差异无统计学意义(P>0.05),但与对照组相比,表达量减小,差异具有统计学意义(P<0.05)。免疫组织化学检测间质Ⅲ型胶原蛋白所占面积百分比呈增多趋势,组间比较,1周与4周间差异具有统计学意义(P<0.05);表达强度稳定,组间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。Western blotting结果显示,实验组间Ⅰ/Ⅲ型胶原蛋白均呈现从增多到减少的趋势,组间比较差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论 ISO长期诱导致心内膜下心肌细胞缺血坏死,且缺血坏死区面积总体趋势变小;缺血坏死区发生纤维化改变,与心壁僵硬度增大相关。非缺血坏死区心肌细胞肥大与能量代谢相关,间质Ⅰ/Ⅲ型胶原蛋白不参与心室壁僵硬度和顺应性变化。

关键词：盐酸异丙肾上腺素心肌肥大 Ⅰ/Ⅲ型胶原免疫组织化学免疫印迹法大鼠

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6-羟多巴损伤黑质导致迷走神经背核乙酰胆碱转移酶和酪氨酸羟化酶表达变化

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第三军医大学学报 2012年第17期34卷 1754-1757页

作者：连辉蔡青青王志勇新乡医学院基础医学院人体解剖学教研室河南新乡453003 新乡医学院河南省高等学校组织再生重点开放实验室河南新乡453003

目的观察6-羟多巴(6-hydroxydopamine,6-OHDA)损伤大鼠黑质后迷走神经背核(dorsal motor nucleus ofthe vagus,10N)中乙酰胆碱转移酶(choline acetyltransferase,ChAT)和酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)含量的变化。方法 16只SD大鼠根据随机数字表分为6-OHDA大鼠组和对照组。6-OHDA大鼠组双侧黑质(substantia nigra,SN)内注射6-OHDA,对照组双侧SN内注射等体积的生理盐水。6周后断头取脑,Nissl染色观察SN和10N中的Nissl小体,免疫荧光和免疫印迹检测SN内TH和10N内ChAT与TH的表达。结果与对照组比较,6-OHDA大鼠组SN内TH阳性细胞数量从(54±5)个减少至(13±2)个(P<0.05),蛋白表达水平从0.62±0.13降低至0.34±0.11(P<0.05),10N中ChAT阳性细胞数量从(37±3)个减少到(26±5)个(P<0.05),TH阳性细胞数量从(6±3)个增加到(13±2)个(P<0.05),背侧延髓内ChAT的蛋白表达水平从0.07±0.02下降至0.05±0.02(P<0.05),TH蛋白表达水平从0.08±0.05增高到0.13±0.04(P<0.05)。结论 6-OHDA大鼠10N中ChAT和TH表达变化可能与帕金森病患者的胃排空障碍存在一定的联系。

关键词： 6-羟多巴迷走神经背核乙酰胆碱转移酶酪氨酸羟化酶

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异丙肾上腺素对大鼠心肌酶和相关细胞因子的影响

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现代预防医学 2012年第6期39卷 1467-1468+1473页

作者：穆灵敏井长勤张光谋郭志坤新乡医学院形态学实验室新乡医学院生命科学技术系新乡医学院河南省高等学校组织再生重点开放实验室

目的研究异丙基肾上腺素对大鼠心肌酶和相关细胞因子的影响,探讨异丙基肾上腺素在大鼠心肌肥厚中的作用。方法 SD大鼠皮下注射异丙基肾上腺素后,观察心肌酶的变化;免疫组织化学法检测心肌组织c-fos的表达以及在心肌组织内的定位。结果... 详细信息

目的研究异丙基肾上腺素对大鼠心肌酶和相关细胞因子的影响,探讨异丙基肾上腺素在大鼠心肌肥厚中的作用。方法 SD大鼠皮下注射异丙基肾上腺素后,观察心肌酶的变化;免疫组织化学法检测心肌组织c-fos的表达以及在心肌组织内的定位。结果异丙基肾上腺素作用后,心肌组织中c-fos和心肌酶的表达较对照组显著性增高(P﹤0.05);大鼠血清LDH、MDA含量与对照组比较均有显著性增加,而大鼠血清T-AOC显著性降低(P﹤0.01)。结论异丙基肾上腺素有诱导心肌肥厚的作用。

关键词：异丙基肾上腺素 c-fos 心肌肥厚

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