检索结果-内蒙古大学图书馆

中国职业医学 2011年第5期38卷 369-372页

作者：王威李智涛祝寒松赵勇王丽霞燕贞李时恩许东吴卫东吴拥军吴逸明郑州大学公共卫生学院职业卫生与职业医学教研室河南郑州450001 河南科技大学医学院 471003

目的探讨煤焦沥青致人支气管上皮细胞(BEAS-2B)恶变细胞的端粒损伤作用。方法用中温煤焦沥青烟提取物作为诱导剂,建立永生化BEAS-2B的恶性转化模型,用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)法检测端粒DNA长度和端粒酶活力变化。结果煤焦沥... 详细信息

目的探讨煤焦沥青致人支气管上皮细胞(BEAS-2B)恶变细胞的端粒损伤作用。方法用中温煤焦沥青烟提取物作为诱导剂,建立永生化BEAS-2B的恶性转化模型,用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)法检测端粒DNA长度和端粒酶活力变化。结果煤焦沥青烟提取物诱导BEAS-2B细胞后,30代时诱导组细胞能在软琼脂上形成典型的阳性克隆,染色体二倍体核型比例显著降低,形成恶性转化细胞。BEAS-2B恶性转化细胞端粒DNA长度缩短(0.41±0.03),与正常对照组(1.01±0.08)和二甲基亚砜(DMSO)组(0.92±0.04)比较,差异均有统计学意义(P<0.001)。BEAS-2B恶性转化细胞端粒酶活力增强(1.62±0.07),与正常对照组(1.03±0.08)和DMSO组(1.11±0.03)比较,差异均有统计学意义(P<0.001)。结论端粒损伤在煤焦沥青致细胞恶性转化中起重要作用。

关键词：煤焦沥青恶性转化端粒长度端粒酶

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肺鳞癌组织中热休克蛋白27表达及意义

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中国公共卫生 2011年第4期27卷 443-445页

作者：燕贞冯艳铭周舫李时恩姚武吴卫东吴逸明郑州大学公共卫生学院劳动卫生学教研室河南郑州450001 河南科技大学医学院

目的检测肺鳞癌组织中热休克蛋白27(heat shock protein 27,HSP27)mRNA和蛋白表达水平变化及其意义。方法应用实时荧光定量PCR(RQ-PCR)和免疫印迹(western blot)技术检测22例不同分期及分化程度的肺鳞癌组织及其相应癌旁正常组织中HSP2... 详细信息

目的检测肺鳞癌组织中热休克蛋白27(heat shock protein 27,HSP27)mRNA和蛋白表达水平变化及其意义。方法应用实时荧光定量PCR(RQ-PCR)和免疫印迹(western blot)技术检测22例不同分期及分化程度的肺鳞癌组织及其相应癌旁正常组织中HSP27表达情况,并分析其与病理指标的关系。结果 HSP27在肺鳞癌组织和癌旁正常组织中mRNA表达水平差异无统计学意义;肺鳞癌组织中HSP27蛋白表达水平(0.85±0.11)明显高于癌旁正常组织(0.57±0.24);HSP27在低分化肺鳞癌组织中的蛋白表达水平明显高于高、中分化癌组织(P<0.05);HSP27在早期(Ⅰ期+Ⅱ期)肺鳞癌组织和非早期(Ⅲ期)癌组织中的蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论 HSP27在肺鳞癌中蛋白表达水平增高,可能与肺癌的发生、发展有关。

关键词：热休克蛋白27 肺鳞癌荧光定量PCR 免疫印迹

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志贺菌成簇的规律间隔短回文重复序列的检测及同源性分析

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吉林大学学报（医学版） 2015年第2期41卷 261-268,I0003页

作者：王鹏飞王颖芳段广才王琳琳郭向娇薛泽润郗园林杨海燕郑州大学公共卫生学院流行病学教研室河南郑州450001 河南科技大学医学院公共卫生教研室河南洛阳471003 新乡医学院分子诊断与医学检验技术河南省协同创新中心河南新乡453003

目的:检测志贺菌成簇的规律间隔短回文重复序列(CRISPR),并与GenBank全基因组中志贺菌重复序列和间隔序列对比,分析其结构特征及同源性。方法:利用PCR法扩增获得志贺菌CRISPR,采用生物信息学方法对重复序列及间隔序列进行同源性分析;运... 详细信息

目的:检测志贺菌成簇的规律间隔短回文重复序列(CRISPR),并与GenBank全基因组中志贺菌重复序列和间隔序列对比,分析其结构特征及同源性。方法:利用PCR法扩增获得志贺菌CRISPR,采用生物信息学方法对重复序列及间隔序列进行同源性分析;运用多序列比对分析间隔序列特点及其与侧翼序列间的联系;BLAST分析间隔序列与质粒和噬菌体的同源性;weblogo分析重复序列碱基频率及RNAfold预测其RNA二级结构;重复序列的同源聚类分析并用BLAST分析重复序列与其他细菌的同源性。结果:被测3株临床志贺菌及9株全基因组志贺菌中均含有不同数量CRISPR;同一个CRISPR中,间隔序列有的相似、有的完全不同,某些CRISPR间隔序列的部分序列与CRISPR侧翼序列存在同源性,某些间隔序列可能是信息基因和操纵基因的拼接重组;重复序列保守性不一致,可能与细菌进化存在一定的联系,重复序列碱基的差异影响茎的长度,从而影响二级结构的稳定性及CRISPR的功能。重复序列与个别远缘菌种具有较高的同源性。结论:志贺菌存在多样的CRISPR结构,不同CRISPR的重复序列保守性不同。某些间隔序列部分与CRISPR侧翼序列同源,某些间隔序列是多基因拼接而成。

关键词：志贺菌成簇的规律间隔短回文重复序列重复序列间隔序列同源性

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志贺菌诱导耐多药相关基因抑制性消减杂交法筛选

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中国公共卫生 2013年第3期29卷 354-357页

作者：宋春花王颖芳郗园林段广才郑州大学公共卫生学院流行病学教研室河南郑州450001 河南科技大学医学院预防医学教研室

目的应用抑制性消减杂交技术研究志贺菌诱导耐多药株与其敏感株之间差异基因,筛选耐多药相关基因,探讨基因表达差异与志贺菌诱导耐多药的相关性。方法以志贺菌诱导耐多药株DNA为检测子(tester),以其敏感株DNA为驱赶子(driver),构建DNA... 详细信息

目的应用抑制性消减杂交技术研究志贺菌诱导耐多药株与其敏感株之间差异基因,筛选耐多药相关基因,探讨基因表达差异与志贺菌诱导耐多药的相关性。方法以志贺菌诱导耐多药株DNA为检测子(tester),以其敏感株DNA为驱赶子(driver),构建DNA消减文库,采用PCR鉴定及斑点杂交进行筛选,并随机挑取阳性克隆测序,所得结果在GenBank中做同源性比较分析。结果成功构建了志贺菌诱导耐多药株的特异性DNA消减杂交文库;选取部分阳性克隆进行杂交筛选,获得12个诱导耐多药差异片段,对其中6个基因片段经克隆测序并与GenBank数据库进行初步比对,3个未知基因可能为新基因,3个已知基因分别为16S rRNA核糖体基因、预测的rep蛋白质(解螺旋酶)、位点特异性Ⅰ型脱氧核糖核酸酶(Hsds)等相关基因。结论志贺菌耐多药是多基因参与的复杂过程,筛选的新基因片段为进一步克隆其全长基因进而研究其功能打下基础。

关键词：志贺菌诱导耐多药相关基因抑制性消减杂交

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肝硬化患者胆囊结石发生率及其影响因素分析

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实用医学杂志 2016年第19期32卷 3212-3215页

作者：刘晓敏王萍王宏运张腊梅周新许锦锦张英剑河南科技大学临床医学院河南科技大学第一附属医院消化内科河南省洛阳市471003 河南科技大学医学院公共卫生教研室河南省洛阳市471003

目的:了解肝硬化患者胆囊结石的发生率,同时分析其影响因素及临床意义。方法:选择2014年10月至2015年8月在河南科技大学第一附属医院诊治的128例肝硬化患者为肝硬化组,并以同期门诊行体检者140例为健康对照组;其中肝硬化组根据肝功能Chi... 详细信息

目的:了解肝硬化患者胆囊结石的发生率,同时分析其影响因素及临床意义。方法:选择2014年10月至2015年8月在河南科技大学第一附属医院诊治的128例肝硬化患者为肝硬化组,并以同期门诊行体检者140例为健康对照组;其中肝硬化组根据肝功能Child-Pugh分级标准分为肝功A级(A组)、肝功B级(B组)、肝功C级(C组)。对所有研究对象进行空腹血清ALB、空腹血清CCK水平的测定。分析肝硬化胆囊结石的发生与性别、肝功能Child-Pugh分级、腹腔积液、血清ALB及CCK的关系。结果:(1)单因素分析结果显示:肝硬化组胆囊结石的发生率明显高于健康对照组(35.2%vs 8.6%,P<0.05);且随着肝功能损害程度加重,胆囊结石的发生率随之升高,即B组和C组患者的胆囊结石发生率显著高于A组患者(A组22.9%vs B组35.0%vs C组50.0%,P<0.05)。肝硬化并发腹腔积液患者的胆囊结石发生率较无腹腔积液、健康对照组明显升高(38.6%vs 22.2%vs 8.6%,P<0.05)。肝硬化组血清ALB水平较健康对照组降低(P<0.05),且随着肝功能损害程度加重而变化;而肝硬化组血清CCK水平明显高于健康对照组(P<0.05),同样随着肝功能损害程度加重而变化。肝硬化患者胆囊结石发生率无性别差异(P>0.05)。(2)多因素Logistic回归结果显示:血清ALB含量是影响肝硬化患者胆囊结石发生的重要影响因素,结果有统计学意义(P<0.05),其他影响因素无统计学意义(P>0.05)。结论 :肝硬化患者易发生胆囊结石,其发生与性别无关,而与肝功能损害程度、腹腔积液、血清ALB及CCK水平等有关,其中ALB是肝硬化患者伴胆囊结石的重要影响因素。

关键词：肝硬化胆囊结石胆囊收缩素腹水肝功能分级

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河南省农村居民生命质量及影响因素分析

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中国公共卫生 2004年第2期20卷 209-211页

作者：谢婧施学忠李颍琰段广才王爱英郑州大学公共卫生学院卫生统计与社会医学教研室 450052 河南科技大学

目的　了解河南省农村居民生命质量及其影响因素。方法　用多阶段分层抽样的方法 ,采用WHO制定的生命质量测定量表对 194 9名农村居民进行家庭健康问卷调查。结果　河南省农村居民生命质量的平均得分为91 5 8,生理维度、心理维度、社... 详细信息

目的　了解河南省农村居民生命质量及其影响因素。方法　用多阶段分层抽样的方法 ,采用WHO制定的生命质量测定量表对 194 9名农村居民进行家庭健康问卷调查。结果　河南省农村居民生命质量的平均得分为91 5 8,生理维度、心理维度、社会适应维度的平均得分分别为 92 5 9,85 75和 95 4 6。男性、已婚、较高的文化程度等因素与生命质量呈正相关 ,而年龄较大、丧偶、医疗支出等因素与生命质量得分呈负相关关系。结论　河南省农村居民总的生命质量水平尚好 ,但心理维度得分较低 ,应加强对农村居民的心理咨询。年龄、婚姻状况、文化水平、医疗支出等是影响农民生命质量的重要因素。

关键词：生命质量农村居民影响因素

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应用抑制性消减杂交筛选志贺菌基因转移耐多药相关基因

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郑州大学学报（医学版） 2013年第1期48卷 63-66页

作者：宋春花王颖芳段广才郗园林郑州大学公共卫生学院流行病学教研室郑州450001 河南科技大学医学院预防医学教研室洛阳471003

目的:应用抑制性消减杂交技术初步筛选志贺菌基因转移耐多药相关基因。方法:以志贺菌基因转移耐多药株DNA为检测子,以其敏感株DNA为驱赶子,构建DNA消减文库,采用PCR鉴定及斑点杂交进行筛选,并随机挑取阳性克隆测序,所得结果在GenBank中... 详细信息

目的:应用抑制性消减杂交技术初步筛选志贺菌基因转移耐多药相关基因。方法:以志贺菌基因转移耐多药株DNA为检测子,以其敏感株DNA为驱赶子,构建DNA消减文库,采用PCR鉴定及斑点杂交进行筛选,并随机挑取阳性克隆测序,所得结果在GenBank中进行同源性比较和分析。结果:成功构建了志贺菌基因转移耐多药株的特异性DNA消减杂交文库。选取部分阳性克隆进行杂交筛选,其中5个测序成功,与GenBank数据库进行初步比对,3个可能为新基因,2个为已知基因(Tn3926转座子部分的转座酶基因及23SrRNA核糖体核糖核酸)。结论:成功构建了志贺菌基因转移耐多药株的特异性DNA消减杂交文库并获得了其耐多药相关基因,提示转座子介导的耐药机制可能在志贺菌基因转移耐多药中起重要作用。

关键词：志贺菌基因转移耐多药相关基因

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基于CRISPR1上游侧翼序列鉴定沙门菌的效果评价

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中国病原生物学杂志 2020年第11期15卷 1310-1313页

作者：梁文娟王鹏飞段广才郗园林杨海燕陈帅印新乡医学院公共卫生学院流行病与卫生统计学教研室河南新乡453003 河南科技大学医院郑州大学公共卫生学院流行病与卫生统计学系

目的评价基于成簇规律间隔的短回文重复序列(Clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR)1上游侧翼序列鉴定沙门菌的效果。方法在NCBI里通过已知的重复序列BLAST识别并获得全基因组测序沙门菌的CRISPRs和CRISP... 详细信息

目的评价基于成簇规律间隔的短回文重复序列(Clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR)1上游侧翼序列鉴定沙门菌的效果。方法在NCBI里通过已知的重复序列BLAST识别并获得全基因组测序沙门菌的CRISPRs和CRISPR相关基因(CRISPR-associated,cas)信息;选择并提取确定CRISPRs的上、下游各500bp的侧翼序列,使用Clustal X软件比对侧翼序列;采用PCR方法扩增沙门菌的CRISPRs序列和CRISPR1上游特异侧翼序列,与金标准API方法鉴定的菌株比较,评价CRISPR1上游特异侧翼序列检测对鉴定沙门菌的效果。结果329株全基因测序和38株实验室保存的沙门菌均存在I-E CRISPR/Cas,除猪霍乱沙门菌C500外,其余所有菌株均存在CRISPR1和2两个位点。在沙门菌的CRISPR1上游侧翼序列存在61bp的特异序列,一致性为99%,且具有种属特异性,通过PCR扩增此序列鉴定沙门菌的灵敏度为97.4%,特异度为99.1%。结论基于CRISPR1上游侧翼序列鉴定沙门菌的方法灵敏特异,效果良好。

关键词：沙门菌成簇规律间隔的短回文重复序列侧翼序列鉴定

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洛阳市手足口病危重型78例

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实用儿科临床杂志 2012年第12期27卷 960-961页

作者：姜志红韩娟杨慧敏夏晓燕河南科技大学第一附属医院儿科河南洛阳471003 华中科技大学同济医学院公共卫生学院儿少卫生与妇幼保健学系武汉430030 河南科技大学医学院预防医学教研室河南洛阳471003

目的分析手足口病(HFMD)危重型的临床特点,为诊断提供线索。方法对本院2010年收治的HFMD危重型78例患儿的发病特点、临床表现、辅助检查结果进行分析。结果病例分布在5-11月,呈2个高峰。59例居住在农村,26/31例为EV71感染,70例为3岁以下... 详细信息

目的分析手足口病(HFMD)危重型的临床特点,为诊断提供线索。方法对本院2010年收治的HFMD危重型78例患儿的发病特点、临床表现、辅助检查结果进行分析。结果病例分布在5-11月,呈2个高峰。59例居住在农村,26/31例为EV71感染,70例为3岁以下,男女比例为1.791.0,61例于病程3 d内出现危重表现。三凹征阳性59例,休克42例,肺部啰音36例,血性泡沫痰23例,昏迷16例,频繁抽搐11例,脑疝4例。尿糖、血糖、血WBC和PLT、心肌酶、ALT、二氧化碳分压、脑压、脑脊液白细胞数和蛋白升高,血氧分压、pH值、二氧化碳结合力降低,胸片、ECG、EEG、MRI等部分患儿出现异常。结论 HFMD危重型以呼吸系统危重表现多见,应动态监测血气、胸片等。

关键词：重症手足口病临床表现儿童

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CRISPR/Cas系统与志贺菌毒力和耐药的关系及插入序列IS600对cse2表达水平的影响

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微生物学报 2016年第12期56卷 1912-1923页

作者：洪丽娟张冰段广才梁文娟王颖芳陈帅印杨海燕郗园林郑州大学公共卫生学院流行病学教研室河南郑州450001 新乡医学院分子诊断与医学检验技术河南省协同创新中心河南新乡453003 河南科技大学预防医学教研室河南洛阳471003

【目的】了解志贺菌中成簇的规律间隔短回文重复序列(Clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR)的分布及其与毒力和耐药的关系,并分析志贺菌中插入序列IS600对CRISPR相关蛋白基因cse2 m RNA表达水平的影响。... 详细信息

【目的】了解志贺菌中成簇的规律间隔短回文重复序列(Clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR)的分布及其与毒力和耐药的关系,并分析志贺菌中插入序列IS600对CRISPR相关蛋白基因cse2 m RNA表达水平的影响。【方法】利用课题组前期设计的引物PCR扩增志贺菌的3个CRISPR位点、CRISPR相关蛋白基因cse2、耐药基因和毒力基因;改良Kirby-Bauer(K-B)纸片法进行药敏试验;台盼蓝计数试验检测细菌毒力;Real-time PCR检测志贺菌中cse2基因m RNA表达水平。分别分析志贺菌中CRISPR/Cas系统与耐药基因、耐药表型、毒力基因、毒力表型的关系;了解IS600对CRISPR相关蛋白基因cse2 m RNA表达水平的影响。【结果】志贺菌中CRISPR1位点阴性细菌的毒力强;插入序列IS600使cse2 m RNA表达水平降低。【结论】志贺菌中存在CRISPR1、2、3位点;CRISPR1位点与毒力有关;插入序列IS600对cse2 m RNA表达水平有影响。

关键词：志贺菌 CRISPR/Cas系统插入序列耐药毒力

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