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中国药理学与毒理学杂志 2018年第6期32卷 462-468页

作者：段冷昕高杨胡举赵亚飞吴欣芳王建刚河南科技大学医学院药理学与分子生物学重点实验室河南洛阳471023

目的研究二至丸对四氯化碳(CCl4)致小鼠急性肝损伤的预防作用及潜在机制。方法雄性昆明种小鼠每天1次ig给予二至丸1.4,2.8和5.6 g·kg-1,连续14 d,末次给药8 h后,模型组和二至丸组小鼠ip给予10%CCl4溶液10 mL·kg-1,24 h后处死... 详细信息

目的研究二至丸对四氯化碳(CCl4)致小鼠急性肝损伤的预防作用及潜在机制。方法雄性昆明种小鼠每天1次ig给予二至丸1.4,2.8和5.6 g·kg-1,连续14 d,末次给药8 h后,模型组和二至丸组小鼠ip给予10%CCl4溶液10 mL·kg-1,24 h后处死小鼠,计算肝和脾指数。采用生化法测定血清谷草转氨酶(GOT)、谷丙转氨酶(GPT)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)的活性及丙二醛(MDA)的含量;HE染色观察肝组织病理改变;TUNEL法观察肝细胞凋亡;免疫组化法和Western蛋白质印迹法检测内质网应激(ERS)标志性蛋白CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)和葡糖调节蛋白78(GRP78)表达。结果与正常对照组相比,模型组小鼠血清中GPT和GOT活性及MDA含量显著升高(P<0.01),SOD和GPX活性显著下降(P<0.01);肝组织出现明显的炎症细胞浸润和坏死,肝指数明显增加(P<0.01),脾指数显著减小(P<0.01);CHOP和GRP78表达水平显著上调(P<0.01)。与模型组相比,二至丸各剂量组血清GPT和GOT的活性及MDA含量显著降低(P<0.05,P<0.01),SOD和GPX活性显著升高(P<0.05,P<0.01);HE染色结果显示,二至丸各剂量组均不同程度地减轻肝组织脂肪空泡和炎症细胞浸润;二至丸2.8和5.6 g·kg-1组小鼠肝指数显著减小,脾指数显著增加(P<0.05);TUNEL检测结果显示,二至丸各剂量组肝细胞凋亡率明显下降(P<0.05,P<0.01),并呈剂量依赖性(r=0.99,P<0.01);免疫组化及Western蛋白质印迹结果显示,二至丸1.4,2.8和5.6 g·kg-1组CHOP表达显著下降(P<0.01),并呈剂量依赖性(r=0.89,P<0.05),2.8和5.6 g·kg-1组GRP78表达显著下降(P<0.01)。结论二至丸对CCl4致小鼠急性肝损伤具有预防保护作用,其机制可能与抗氧化应激,抑制ERS,从而抑制肝细胞凋亡有关。

关键词：二至丸四氯化碳药物性肝损伤,急性内质网应激 CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白葡糖调节蛋白78

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壁虎活性组分促进肝癌细胞HepG2焦亡的作用

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中国临床药理学杂志 2019年第11期35卷 1135-1138页

作者：段一梦孔盼盼焦晴晴王建刚河南科技大学医学院药理学与分子生物学实验室

目的探讨壁虎活性组分(GACs)促进肝癌细胞HepG2焦亡的作用及相关机制。方法用不同质量浓度GACs(0,0. 15,0. 2,0. 25,0. 3,0. 35,0. 4,0. 45和0. 5 mg·mL)处理HepG2细胞24 h,用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖情况,根据MTT结果分为... 详细信息

目的探讨壁虎活性组分(GACs)促进肝癌细胞HepG2焦亡的作用及相关机制。方法用不同质量浓度GACs(0,0. 15,0. 2,0. 25,0. 3,0. 35,0. 4,0. 45和0. 5 mg·mL)处理HepG2细胞24 h,用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖情况,根据MTT结果分为空白对照组和低、中、高剂量(GACs:0. 1,0. 15,0. 225mg·mL)实验组。以乳酸脱氢酶(LDH)法检测HepG2细胞凋亡情况,以酶联免疫吸附(ELISA)法检测细胞上清中白细胞介素-1β(IL-1β)释放情况,以Western blot法检测细胞中活化胱天蛋白酶1 (cleaved caspase-1),消皮素D(GSDMD),IL-1β和白细胞介素-18(IL-18)的表达。结果 GACs可抑制HepG2细胞的增殖,并具有质量浓度依赖性,作用24,48,72 h后其IC50值分别为0. 24,0. 22,0. 18 mg·mL。空白对照组和低、中、高剂量实验组细胞培养上清液中的LDH含量分别为(63. 68±20. 54),(79. 33±14. 22),(81. 56±14. 38),(332. 96±6. 32) U·L; IL-1β含量分别为(1. 73±0. 05),(2. 11±0. 05),(2. 24±0. 01),(2. 59±0. 08) ng·L; cleaved caspase-1蛋白表达比值分别为(6. 14±0. 46)×10,(10. 71±1. 21)×10,(20. 29±2. 96)×10,(20. 61±2. 67)×10; GSDMD蛋白表达比值分别为(9. 76±0. 66)×10,(23. 67±4. 77)×10,(41. 17±3. 69)×10,(46. 56±6. 31)×10; IL-1β蛋白表达比值分别为(8. 99±0. 48)×10,(34. 39±5. 51)×10,(36. 04±6. 42)×10,(66. 33±5. 65)×10; IL-18蛋白表达比值分别为(11. 54±1. 89)×10,(30. 83±3. 29)×10,(55. 72±6. 39)×10,(56. 12±5. 41)×10;低、中、高剂量组各指标与对照组比较,差异均有统计学意义(均P <0. 01)。结论壁虎活性组分激活了caspase-1,诱导肝癌细胞HepG2焦亡,并促进IL-1β释放。

关键词：壁虎活性组分原发性肝细胞癌细胞焦亡白细胞介素-1β

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壁虎多肽混合物对肝癌SMMC7721细胞增殖及其自噬的影响

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中国临床药理学杂志 2017年第9期33卷 798-801页

作者：靳颖刘玲段冷昕郭梦丽段一梦王建刚河南科技大学医学院药理学与分子生物学实验室

目的研究壁虎多肽混合物（GPM）对人肝癌SMMC7721细胞自噬的影响。方法取对数生长期细胞种板,用不同质量浓度的GPM(0,0.04,0.06,0.09,0.14,0.20,0.30,0.45 mg·m L;)处理SMMC7721细胞24 h,通过噻唑蓝比色法（MTT）检测细胞增殖,根据... 详细信息

目的研究壁虎多肽混合物（GPM）对人肝癌SMMC7721细胞自噬的影响。方法取对数生长期细胞种板,用不同质量浓度的GPM(0,0.04,0.06,0.09,0.14,0.20,0.30,0.45 mg·m L;)处理SMMC7721细胞24 h,通过噻唑蓝比色法（MTT）检测细胞增殖,根据MTT结果,分别作为正常组（0）、低中高3个质量浓度(GPM:0.1,0.15,0.22 mg·m L;)实验组,对照组(西罗莫司40μg·m L;)。经单丹磺酰尸胺（MDC）荧光染色观察不同质量浓度GPM对SMMC7721细胞自噬的影响;免疫组化法检测细胞内Beclin1及LC3表达的变化;免疫印迹法检测细胞自噬标志物Beclin1、LC3-Ⅱ蛋白的表达。结果 GPM可抑制SMMC7721细胞的增殖,并具有质量浓度依赖性,作用24 h后其IC50值为0.16 mg·m L;。GPM处理SMMC7721细胞6 h后,在胞质中可见大量自噬小泡的形成,在显微镜下呈亮绿色荧光。正常组、对照组、低中高3个质量浓度实验组Beclin1阳性细胞数占总细胞数的百分比分别为（15.70±0.26）%,（63.47±0.54）%,（17.09±0.37）%,（70.66±0.56）%,（78.48±0.68）%;与正常组相比,对照组与中高2个质量浓度实验组差异有统计学意义（均P<0.05）。这5组LC3-阳性细胞数占总细胞数的百分比分别为（35.84±0.36）%,（82.41±0.82）%,（60.83±0.61）%,（69.66±0.70）%,（74.61±0.75）%,与正常组相比,各组差异均具有统计学意义（均P<0.05）。这5组的Beclin1与β-actin灰度比值分别为（6.87±0.68）%,（11.26±0.87）%,（6.46±1.34）%,（11.58±0.95）%,（15.82±1.58）%;与正常组相比,对照组、中高2个质量浓度实验组差异有统计学意义（均P<0.05）。这5组LC3-Ⅱ与βactin灰度比值分别为（26.70±0.41）%,（103.17±0.88）%,（30.29±0.52）%,（36.32±0.52）%,（64.34±0.48）%;与正常组相比,各组差异均具有统计学意义（均P<0.05）。结论壁虎多肽混合物能够影响人肝癌SMMC7721细胞自噬现象的发生,可能通过诱导其自噬而使细胞死亡。

关键词：壁虎多肽混合物 SMMC7721细胞自噬

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壁虎多肽混合物对HepG2细胞增殖及内质网应激途径的影响

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中国临床药理学杂志 2018年第2期34卷 148-151页

作者：段一梦段冷昕刘玲郭梦丽王兵兵黄泽月王建刚河南科技大学医学院药理学与分子生物学实验室

目的研究壁虎多肽混合物（GPM）对人肝癌HepG2细胞增殖及内质网应激途径的影响。方法用不同浓度GPM(0,0.15,0.20,0.25,0.30,0.35,0.40,0.45 mg·mL-1)处理HepG2细胞24 h。以噻唑蓝（MTT）比色法检测细胞增殖,根据MTT结果,将细胞分... 详细信息

目的研究壁虎多肽混合物（GPM）对人肝癌HepG2细胞增殖及内质网应激途径的影响。方法用不同浓度GPM(0,0.15,0.20,0.25,0.30,0.35,0.40,0.45 mg·mL-1)处理HepG2细胞24 h。以噻唑蓝（MTT）比色法检测细胞增殖,根据MTT结果,将细胞分为空白组和低、中、高3个质量浓度(GPM:0.1,0.2,0.3 mg·mL-1)实验组,对照组(氟尿嘧啶10μg·mL-1)。以Western blot法检测内质网应激相关蛋白及凋亡相关蛋白的表达水平。结果 GPM可抑制HepG2细胞的增殖,并具有质量浓度依赖性,作用24,48,72h后,其IC50值分别为0.27,0.23,0.20 mg·mL-1。正常组、对照组和低、中、高3个质量浓度实验组的双链RNA依赖的蛋白激酶样ER激酶（PERK）与GAPDH灰度比值分别为（4.31±0.81）×10-2,（8.92±0.91）×10-2,（20.73±0.97）×10-2,（24.04±0.95）×10-2,（11.65±1.67）×10-2。这5组的GRP78与GAPDH灰度比值分别为（27.99±2.36）×10-2,（35.58±1.02）×10-2,（42.55±1.19）×10-2,（54.91±1.20）×10-2,（7.31±1.01）×10-2。这5组的ATF4与GAPDH灰度比值分别为（20.82±1.42）×10-2,（39.60±0.56）×10-2,（52.02±1.83）×10-2,（73.39±1.83）×10-2,（18.13±2.28）×10-2;这5组的CHOP与GAPDH灰度比值分别为（8.71±0.76）×10-2,（11.27±1.07）×10-2,（41.29±1.36）×10-2,（48.55±1.37）×10-2,（33.01±3.95）×10-2。这5组的多聚ADP-核糖聚合酶（PARP）与GAPDH灰度比值分别为（13.06±2.88）×10-2,（36.79±2.10）×10-2,（58.72±1.53）×10-2,（67.61±1.68）×10-2,（34.88±2.02）×10-2。这5组的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）与GAPDH灰度比值分别为（5.92±0.33）×10-2,（14.71±1.11）×10-2,（17.58±1.33）×10-2,（35.41±2.91）×10-2,（5.94±1.61）×10-2,与正常组相比,4个给药组的以上各项指标差异均有统计学意义（均P<0.05）。提示GPM可能通过诱导HepG2细胞内质网应激从而诱导细胞凋亡。结论 GPM可抑制HepG2细胞增殖并诱导其凋亡,其机制可能与诱导HepG2细胞内质网应激有关。

关键词：壁虎多肽混合物 HepG2细胞内质网应激 C/EBP同源蛋白

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壁虎粗多肽诱导食管癌KYSE450细胞凋亡机制研究

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中国临床药理学杂志 2017年第24期33卷 2606-2609页

作者：郭梦丽段冷昕刘玲杨雪娇靳颖段一梦王建刚河南科技大学医学院药理学与分子生物学实验室

目的研究壁虎粗多肽（GCP）体外对食管癌KYSE450细胞的增殖抑制作用。方法取对数生长期细胞,种板,用不同浓度的(0.10,0.15,0.20,0.25,0.30,0.35,0.4,0.45,0.50,0.55,0.6 mg·mL;)GCP处理KYSE450细胞24,48,72 h,通过噻唑蓝比色法（MTT）检测细胞增殖,根据MTT结果,将实验分组为空白组（0）和低、中、高3个浓度(GCP:0.1,0.15,0.22 mg·mL;)实验组与对照组(10μg·mL;阿霉素)。以免疫印迹法检测GCP对KYSE450细胞内B淋巴细胞瘤-2基因（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9（Caspase-9）蛋白表达的影响。结果 GCP处理KYSE450细胞24,48,72 h后,半数抑制浓度(IC;)值分别为0.32,0.28,0.24 mg·mL;。空白组和低、中、高3个浓度实验组与对照组的Bax与Bcl-2灰度比值平均分别为（23.83±0.07）%,（51.08±0.78）%,（148.26±6.19）%,（329.33±4.44）%,（115.84±0.26）%;这5组的Caspase-9与甘油醛-3-磷酸脱氢酶（GAPDH）灰度比值平均分别为（14.81±1.05）%,（20.91±1.24）%,（39.61±1.89）%,（43.68±1.13）%,（39.82±0.69）%;这5组的Caspase-3与GAPDH灰度比值平均分别为（6.37±0.51）%,（10.97±0.50）%,（13.44±0.49）%,（17.03±0.49）%,（8.63±0.42）%。以上各项指标,与空白组比较差异均有统计学意义（P<0.05,P<0.01）。结论 GCP可抑制KYSE450细胞增殖并诱导其凋亡,其机制与Caspase依赖性途径有关。

关键词：壁虎粗多肽 KYSE450细胞凋亡 Caspase依赖性途径

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壁虎醇提物对H22肝癌血管新生的抑制作用

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中国临床药理学杂志 2016年第24期32卷 2282-2285页

作者：郭梦丽王建刚靳颖河南科技大学医学院药理学与分子生物学实验室

目的研究壁虎醇提物（GEE）对H22小鼠肿瘤组织血管新生的抑制作用及其机制。方法建立腋下移植H22肝癌模型,按照体重随机分为5组:模型组（0.9%Na Cl）、对照组(2 mg·kg;阿霉素)和高、中、低3个剂量实验组(GEE:80,40,20 mg·kg;)... 详细信息

目的研究壁虎醇提物（GEE）对H22小鼠肿瘤组织血管新生的抑制作用及其机制。方法建立腋下移植H22肝癌模型,按照体重随机分为5组:模型组（0.9%Na Cl）、对照组(2 mg·kg;阿霉素)和高、中、低3个剂量实验组(GEE:80,40,20 mg·kg;),连续腹腔注射10 d,计算抑瘤率;用免疫组化法观察血管内皮细胞标记物（CD34）表达水平,计算新生微血管密度（MVD）;以免疫印迹法检测血管内皮生长因子A（VEGF-A）、基质金属蛋白酶（MMP-2）、细胞外信号调节激酶（ERK）、磷酸化的细胞外信号调节激酶（P-ERK）的表达。结果高、中、低3个剂量实验组的抑瘤率分别为63.18%,50.91%,44.68%,说明GEE对H22小鼠移植瘤的抑瘤作用较明显。模型组小鼠肿瘤组织MVD为平均每个视野（24.7±4.1）个,与模型组比较,对照组、高、中、低3个剂量实验组的MVD分别为平均每个视野（13.6±3.6）,（8.0±1.6）,（11.0±1.1）,（13.9±1.7）个,其中3个剂量实验组差异有统计学意义（均P<0.01）。模型组、对照组、低中高3个剂量实验组的VEGF-A与β-actin灰度比值平均分别为0.17,0.10,0.01,0.03,0.04;这5组的MMP-2与β-actin灰度比值平均分别为1.68,1.27,0.48,1.15,1.50,而P-ERK与ERK灰度比值平均分别为0.10,0.07,0.06,0.07,0.08,与模型组相比,这4组差异均有统计学意义（均P<0.01）,说明GEE组和对照组的VEGF-A、MMP-2、P-ERK蛋白水平均明显减弱。结论 GEE可抑制小鼠H22肝癌移植瘤的生长,其抗肿瘤作用机制可能与降低肿瘤组织血管生成相关因子VEGF-A、MMP-2、P-ERK的表达及降低微血管密度有关。

关键词：壁虎醇提物 H22肝癌 ERK信号转导通路血管生成

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壁虎活性组分对HepG2细胞增殖及能量代谢的影响

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中国临床药理学杂志 2019年第23期35卷 3056-3058+3063页

作者：黄泽月段一梦王兵兵尹慧萍王建刚河南科技大学医学院药理学与分子生物学实验室

目的研究壁虎活性组分（GACs）对人肝癌HepG2细胞增殖及能量代谢的影响。方法将HepG2细胞分为空白组和低、中、高3个剂量实验组。空白组和低、中、高3个浓度实验组分别予以含0,0.10,0.15和0.22 mg·mL-1GACs和2%胎牛血清的培养液进... 详细信息

目的研究壁虎活性组分（GACs）对人肝癌HepG2细胞增殖及能量代谢的影响。方法将HepG2细胞分为空白组和低、中、高3个剂量实验组。空白组和低、中、高3个浓度实验组分别予以含0,0.10,0.15和0.22 mg·mL-1GACs和2%胎牛血清的培养液进行培养。用噻唑蓝比色法检测GACs对HepG2细胞增殖能力的影响,用分光光度法检测己糖激酶（HK）、丙酮酸激酶（PK）活力及腺苷三磷酸（ATP）的含量,用Western blot法检测磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶1（PCK1）、葡萄糖转运蛋白1（GLUT1）、HK2和丙酮酸激酶2（PKM2）的表达。结果 GACs作用于HepG2细胞24,48和72 h后,其半抑制浓度分别为0.26,0.22和0.21 mg·mL-1。空白组和低、中、高3个剂量实验组的HK活性分别为（16.71±4.38）,（10.96±0.42）,（8.59±0.82）和（2.31±1.01） U·g prot-1,PK活性分别为（25.11±0.58）,（16.51±0.63）,（8.41±1.29）和（8.66±1.24）U·g prot-1,ATP水平分别为（152.54±16.15）,（97.52±1.23）,（68.49±5.27）和（62.44±11.05）μm·g prot-1,PCK1与GAPDH的灰度值比值分别为（0.14±0.03）,（0.16±0.02）,（0.54±0.02）和（0.83±0.03）,GLUT1与GAPDH的灰度值比值分别为（1.19±0.02）,（1.01±0.03）,（0.64±0.01）和（0.63±0.02）,低、中、高剂量实验组的上述指标和空白组比较,差异均有统计学意义（均P <0.05）。结论 GACs可抑制肝癌HepG2细胞能量代谢,其机制与抑制有氧糖酵解,恢复HepG2细胞糖异生有关。

关键词：壁虎活性组分人肝癌HepG2细胞糖异生有氧糖酵解

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小RNA干扰技术沉默血管内皮生长因子-C对人肝癌HepG2细胞增殖及凋亡的体外研究

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中国临床药理学杂志 2018年第15期34卷 1854-1857页

作者：郭梦丽王彩娥段一梦王兵兵黄泽月王建刚河南科技大学医学院药理学与分子生物学实验室

目的用小RNA干扰(siRNA)技术在体外研究其对人肝癌HepG2细胞的增殖及凋亡作用。方法将3组siRNA-VEGF-C质粒分别瞬时转染到HepG2细胞中,用qRT-PCR和免疫印迹法检测转染前后VEGF-C基因的表达,挑选干扰效率最强的一组表达载体用于后续实验... 详细信息

目的用小RNA干扰(siRNA)技术在体外研究其对人肝癌HepG2细胞的增殖及凋亡作用。方法将3组siRNA-VEGF-C质粒分别瞬时转染到HepG2细胞中,用qRT-PCR和免疫印迹法检测转染前后VEGF-C基因的表达,挑选干扰效率最强的一组表达载体用于后续实验;在后续实验将细胞分为3组:空白对照组,阴性对照组,siRNA-VEGF-C1组。通过噻唑蓝比色法(MTT)检测HepG2细胞增殖情况;Hoechst 33258染色法检测HepG2细胞核形态变化;流式细胞仪检测人肝癌HepG2细胞周期及凋亡的变化。结果各干扰组VEGF-C与空白对照组比较,基因和蛋白水平明显降低,siRNA-VEGF-C1抑制率最高达80.0%,用siRNA-VEGF-C1进行后续实验。siRNA-VEGF-C1组的生长曲线平坦,细胞生长率低于对照组。空白对照组、阴性对照组,siRNA-VEGFC1组的早期凋亡率分别是(0.25±0.09)%,(4.80±1.62)%,(20.10±3.41)%,siRNA-VEGF-C1组与空白对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。空白对照组、阴性对照组,siRNA-VEGF-C1组的G0/G1期细胞数分别是(62.28±3.28)%,(62.20±4.81)%,(76.46±4.69)%,siRNAVEGF-C1组与空白对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论针对人VEGF-C基因的siRNA表达载体能抑制VEGF-C的基因表达,并可抑制HepG2细胞增殖,诱导其凋亡。

关键词：小RNA干扰血管内皮生长因子-C 肝癌基因表达

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壁虎醇提物抑制人宫颈癌SiHa细胞迁移及侵袭的研究

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中国临床药理学杂志 2016年第10期32卷 913-916页

作者：葛文静段冷昕刘玲李瑞芳曹珊珊王建刚河南科技大学医学院药理学与分子生物学实验室

目的研究壁虎醇提物（GEE）对宫颈癌SiHa细胞侵袭、迁移能力的影响及其潜在的分子机制。方法实验分为对照组（不加药）和3个浓度(0.02,0.05,0.10 mg·m L;GEE)实验组。GEE作用于SiHa细胞24 h后,通过划痕实验、Transwell小室实验分... 详细信息

目的研究壁虎醇提物（GEE）对宫颈癌SiHa细胞侵袭、迁移能力的影响及其潜在的分子机制。方法实验分为对照组（不加药）和3个浓度(0.02,0.05,0.10 mg·m L;GEE)实验组。GEE作用于SiHa细胞24 h后,通过划痕实验、Transwell小室实验分别观察其迁移及侵袭能力的改变;通过MTT法检测GEE对SiHa细胞增殖能力的影响。免疫印迹法检测GEE对SiHa细胞E钙黏蛋白、血管内皮生长因子（VEGF）及Rac1蛋白表达的影响。结果 GEE处理24h后,3个浓度实验组SiHa细胞的增殖抑制率分别为1.5%,5.5%,7.3%。SiHa细胞迁移及侵袭能力均减弱。GEE处理后的SiHa细胞内E钙黏蛋白表达上调,而VEGF和Rac1蛋白表达下调。结论 GEE可抑制SiHa细胞侵袭和迁移,其机制可能与E钙黏蛋白表达的上调、VEGF和Rac1表达的下调有关。

关键词： SiHa细胞壁虎醇提物迁移侵袭

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壁虎活性组分对HepG2细胞增殖及活性氧的影响

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中国临床药理学杂志 2018年第8期34卷 964-967页

作者：段一梦段冷昕刘玲郭梦丽王兵兵黄泽月王建刚河南科技大学医学院药理学与分子生物学实验室

目的该研究旨在探讨壁虎活性组分（GACs）对人肝癌HepG2细胞内活性氧水平,钙离子水平及线粒体膜电位水平的影响。方法实验分为对照组（不加药）和低、中、高3个浓度实验组(GACs,0.1,0.2,0.3 mg·m L-1)。GACs作用于HepG2细胞24 h后... 详细信息

目的该研究旨在探讨壁虎活性组分（GACs）对人肝癌HepG2细胞内活性氧水平,钙离子水平及线粒体膜电位水平的影响。方法实验分为对照组（不加药）和低、中、高3个浓度实验组(GACs,0.1,0.2,0.3 mg·m L-1)。GACs作用于HepG2细胞24 h后,用噻唑蓝比色法（MTT法）检测GACs对HepG2细胞增殖能力的影响,用流式细胞术检测细胞内活性氧（ROS）水平、钙离子水平及线粒体膜电位（MMP）水平。结果 GACs可抑制HepG2细胞的增殖,并具有质量浓度依赖性,作用24 h后其IC50值为0.21 mg·m L-1。对照组、低、中、高剂量组细胞增殖抑制率分别为（0.07±0.01）%,（0.17±0.03）%,（0.49±0.12）%和（0.67±0.18）%;ROS含量分别为（16.61±1.12）,（85.81±2.56）,（268.91±2.34）,（1741.5±5.64）;钙离子水平分别为（9.67±0.98）,（12.30±1.07）,（94.80±2.75）,（910.99±5.31）;MMP分别为（27.02±1.8）×10-2,（23.78±1.2）×10-2,（18.27±1.5）×10-2,（16.49±2.1）×10-2,低、中、高剂量组各指标分别与对照组比较,差异均有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。结论 GACs能抑制HepG2细胞增殖,可能通过引起HepG2细胞内ROS含量升高、钙离子水平升高、MMP降低,扰乱线粒体的正常功能,最终导致HepG2细胞的凋亡。

关键词：壁虎活性组分活性氧钙离子线粒体膜电位

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