检索结果-内蒙古大学图书馆

STAT5A基因有效siRNA序列的筛选及其对人肝癌HepG2细胞增殖及凋亡的影响

肿瘤防治研究 2013年第11期40卷 1031-1035页

作者：杨华秀曾永秋曹洋林春燕黄燕李洁泸州医学院附属中医医院肝病科四川泸州646000 泸州医学院医学细胞生物学与遗传学教研室泸州医学院生理学教研室

目的筛选针对STAT5A基因有效的siRNA,研究抑制STAT5A基因的表达对人肝癌HepG2细胞增殖、周期及凋亡的影响,探讨STAT5A基因在肝癌发生发展中的作用。方法设计并化学合成针对STAT5A基因三个靶点的siRNA,采用脂质体法转染人肝癌细胞HepG2,... 详细信息

目的筛选针对STAT5A基因有效的siRNA,研究抑制STAT5A基因的表达对人肝癌HepG2细胞增殖、周期及凋亡的影响,探讨STAT5A基因在肝癌发生发展中的作用。方法设计并化学合成针对STAT5A基因三个靶点的siRNA,采用脂质体法转染人肝癌细胞HepG2,分别用半定量RT-PCR、Western blot技术检测转染后HepG2细胞STAT5A mRNA和蛋白表达的变化,从中筛选出一段干扰效率最显著的siRNA;用该siRNA转染HepG2细胞,MTT法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果三段STAT5A基因的siRNA均对HepG2细胞中STAT5A mRNA和蛋白表达产生了不同程度的抑制作用,其中以siRNA-3697的干扰效率最高,STAT5A mRNA和蛋白的表达抑制率分别为72.03%和66.27%(P<0.05);转染后1～4 d细胞生长速度减慢、增殖显著抑制(P<0.05);转染后48 h细胞凋亡率为37.33%(P<0.05)。结论成功筛选出针对STAT5A基因有效的siRNA;该siRNA可特异地阻断HepG2细胞STAT5A基因的表达,抑制细胞生长,诱导细胞凋亡。

关键词： STAT5A基因 siRNA HepG2细胞细胞增殖细胞凋亡

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SEPT9基因与人类疾病

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医学信息（医学与计算机应用） 2014年第18期18卷 647-647页

作者：李洁曾永秋税青林泸州医学院医学细胞生物学与遗传学教研室四川泸州646000

SEPT9是Septin基因家族一员,其编码的Septin 9蛋白参与细胞分裂、极化等多项细胞活动,并与肿瘤等疾病的发生直接相关,对其深入研究有助于认识结构特征、表达改变以及致疾机制。

关键词：疾病 SEPT9

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一个儿童早老症家系临床特征分析和致病基因研究

一个儿童早老症家系临床特征分析和致病基因研究

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第10届中国皮肤科医师年会

作者：覃霞林有坤舒伟 530021 广西医科大学第一附属医院皮肤科广西医科大学基础医学院细胞生物学与遗传学教研室

目的：通过对一个罕见早老症家系临床表现、实验室及影像学资料、染色体核型分析、外显子测序结果的分析,探讨该家系早老症患者的临床病理学特征和遗传学因素、致病因素.方法：首先收集一个早老症家系中3例患者的基本资料(病史及查体),... 详细信息

目的：通过对一个罕见早老症家系临床表现、实验室及影像学资料、染色体核型分析、外显子测序结果的分析,探讨该家系早老症患者的临床病理学特征和遗传学因素、致病因素.方法：首先收集一个早老症家系中3例患者的基本资料(病史及查体),对其进行临床检查并对该家系中患者手部、肺脏和下颌骨影像学资料进行分析;同时抽血3例患者外周血进行染色体核型分析,并提取DNA行外显子测序对该家系进行了LMNA基因的突变分析以进一步明确致病原因.结果：家系中的3 名患者均在半岁左右即出现皮肤硬化症,表现为四肢远端硬化、头皮、颜面部皮肤变薄,皮下脂肪萎缩表现出头皮静脉显露,突眼,无耳垂,薄唇,皮肤干皱,有色素斑及钙盐沉着斑,极度衰老面容,并表现出严重生长迟缓,智力性格无明显异常.通过对3 名患者影像学资料分析发现年长患者显示双手指骨、掌骨等多发骨质疏松,下颌骨显示严重发育不全,牙床拥挤,3 名患者肺部CT 提示小胸廓,但未见明显肺部纤维化表现.通过对该家系行家系图分析得出该病为隐性遗传病.染色体核型G 显带分析显示患者及其父母染色体核型均正常.LMNA 基因突变分析显示家系中3 名患者均为LMNA 基因的纯合突变 1579C＞T(R527C),父母均为LMNA R527C 杂合突变.结论：该早老症家系3 名患者均表现出儿童早老症表型,与国际上报到的典型儿童早老症表型极其相似.实验室检查及影像学检查结果与国际报道的儿童早老症患者有相似之处.该家系所患疾病表现为隐性遗传,且家系成员染色体核型无异常.致病原因为LMNA 基因R527C 纯合突变所致,是迄今为止国际上报道的第三例.

关键词：早老症家系分析 LMNA基因突变筛查

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黄芪多糖对衰老小鼠造血干细胞细胞周期调控蛋白的影响

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遵义医学院学报 2014年第2期37卷 144-146页

作者：王乾兴金华何国平杨高巧张先平遵义医学院细胞生物学与遗传学教研室贵州遵义563099 遵义习水县人民医院急诊科贵州遵义564600 遵义医学院附属医院耳鼻喉科贵州遵义563099 遵义医学院附属医院妇产科贵州遵义563099 遵义医学院组织学与胚胎学教研究贵州遵义563099

目的观察黄芪多糖对小鼠造血干细胞(HSC)细胞周期调控蛋白表达的影响,探讨黄芪多糖延缓HSC衰老的机理。方法 C57BL/6J小鼠随机分为对照组、模型组、干预组。模型组采用D-半乳糖皮下注射建立小鼠衰老模型;干预组在造模的基础上给予黄芪... 详细信息

目的观察黄芪多糖对小鼠造血干细胞(HSC)细胞周期调控蛋白表达的影响,探讨黄芪多糖延缓HSC衰老的机理。方法 C57BL/6J小鼠随机分为对照组、模型组、干预组。模型组采用D-半乳糖皮下注射建立小鼠衰老模型;干预组在造模的基础上给予黄芪多糖灌胃;对照组和模型组给予等剂量NS灌胃。免疫磁珠分离纯化HSC,衰老相关的β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色检测衰老细胞;流式细胞术检测细胞周期分布;Western blotting检测P16、CDK4及CyclinD表达。结果与对照组比较,模型组HSC SA-β-gal染色阳性率、G1期比例及p16表达均明显增加;S期比例及CDK4、CyclinD表达下降。与模型组比较,干预组HSC SA-β-gal染色阳性率、G1期比例及p16表达均降低;S期比例、CDK4及CyclinD表达均增加。结论黄芪多糖可能通过调节细胞周期相关蛋白的表达延缓小鼠HSC衰老。

关键词：黄芪多糖造血干细胞抗衰老细胞周期

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Huntington舞蹈病Southern杂交诊断方法的建立

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现代预防医学 2013年第9期40卷 1724-1725页

作者：马明义李华杜亭雷娟覃维张宇翔泸州医学院医学细胞生物学与遗传学教研室泸州医学院附属医院内分泌科泸州医学院临床医学系

目的建立诊断Huntington舞蹈病的Southern杂交方法。方法 PCR法扩增一497bp的片段,克隆测序验证后再从质粒上切下来,用非放射性同位素地高辛标记作为探针,以经克隆测序知道IT15基因CAG重复次数为43次的个体作为阳性对照,正常个体作为阴... 详细信息

目的建立诊断Huntington舞蹈病的Southern杂交方法。方法 PCR法扩增一497bp的片段,克隆测序验证后再从质粒上切下来,用非放射性同位素地高辛标记作为探针,以经克隆测序知道IT15基因CAG重复次数为43次的个体作为阳性对照,正常个体作为阴性对照对20例临床诊断为Huntington舞蹈病的疑似个体行Southern杂交检测。结果11例病人排除Huntington舞蹈病,9名病人被确定为Huntington舞蹈病患者。结论建立了用非放射性同位素地高辛标记的探针鉴定Huntington舞蹈病的Southern杂交方法,该方法准确可靠。

关键词： Huntington舞蹈病 Southern杂交

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左旋延胡索乙素对大鼠吗啡条件性位置偏爱效应及纹状体多巴胺系统的影响

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中华行为医学与脑科学杂志 2013年第7期22卷 591-593页

作者：白威峰杨培润余守洋涂平吴明松钱刚罗素元遵义医学院细胞生物学与遗传学教研室遵义563003

目的观察左旋延胡索乙素（1-THP）对吗啡诱导大鼠条件性位置偏爱（CPP）效应、纹状体多巴胺递质含量和D2受体表达的影响。方法大鼠吗啡颈背部皮下注射CPP训练10d，剂量从每日10mg／kg逐日递增至100mg／kg，末次训练后48h行CPP检测确认... 详细信息

目的观察左旋延胡索乙素（1-THP）对吗啡诱导大鼠条件性位置偏爱（CPP）效应、纹状体多巴胺递质含量和D2受体表达的影响。方法大鼠吗啡颈背部皮下注射CPP训练10d，剂量从每日10mg／kg逐日递增至100mg／kg，末次训练后48h行CPP检测确认模型建立成功，1-THP分别3．76，1．88，0．94mg／kg灌胃治疗6d再次CPP检测后，取脑纹状体采用高效液相色谱法和免疫组化分别检测其多巴胺递质含量和D2受体的表达。结果1-THP3．76mg／kg和1．88mg／kg治疗组大鼠在伴药箱（白箱）中的停留时间[（354±58）S、（373±79）S]比生理盐水治疗组[（523±55）s]减少；同时其纹状体中多巴胺递质含量（5．49±1．95、6．11±1．05）比生理盐水治疗组（7．37±0．93）降低、D2受体平均吸光度值（0．08±0．02、0．07±0．03）较生理盐水治疗组（0．06±0．02）上调，差异均具有统计学意义（P〈0．01或P〈0．05）。结论1—THP可加速大鼠吗啡CPP效应消退，可能与逆转吗啡CPP模型大鼠纹状体中多巴胺递质含量和D2受体表达有关。

关键词：左旋延胡索乙素吗啡精神依赖多巴胺系统

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米非司酮调控乳腺癌细胞凋亡的研究

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中国计划生育学杂志 2014年第5期22卷 300-303页

作者：郭永何森苏晨王乾兴邹检平国家人口计生委科学技术研究所北京100081 沈阳药科大学生命科学与生物制药学院遵义医学院细胞生物学与遗传学教研室

目的:研究米非司酮促进乳腺癌T47D细胞凋亡的作用。方法:根据米非司酮的处理浓度分为0.25μmol/L组、2.5μmol/L组、25μmol/L组和50μmol/L组,各组分别加入相应浓度米非司酮处理人乳腺癌T47D细胞2d后,采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的d... 详细信息

目的:研究米非司酮促进乳腺癌T47D细胞凋亡的作用。方法:根据米非司酮的处理浓度分为0.25μmol/L组、2.5μmol/L组、25μmol/L组和50μmol/L组,各组分别加入相应浓度米非司酮处理人乳腺癌T47D细胞2d后,采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记测定法检测细胞凋亡,在荧光显微镜下观察绿色荧光细胞数量和荧光强度,采用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化吡啶法在流式细胞仪上检测凋亡细胞百分率。结果:25μmol/L组和50μmol/L组与对照组比较,阳性绿色荧光细胞的数量更多,荧光强度更强;25μmol/L组和50μmol/L组的凋亡细胞百分比(分别为16.1±3.5%和17.2±3.8%)高于对照组(5.1±2.3%),差异有统计学意义(分别为P=0.010和P=0.009);0.25μmol/L组和2.5μmol/L组的凋亡细胞百分比与对照组比较差异无统计学意义(分别为P=0.818和P=0.884)。结论:米非司酮能够促进乳腺癌T47D细胞的凋亡,且随着米非司酮剂量的升高,凋亡细胞数量增加。

关键词：米非司酮乳腺癌 T47D 细胞凋亡流式检测

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米非司酮调控乳腺癌细胞增殖的研究

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生殖医学杂志 2014年第4期23卷 306-311页

作者：郭永何森苏晨张瑶楠王乾兴邹检平国家人口计生委科学技术研究所北京100081 沈阳药科大学生命科学与生物制药学院沈阳110016 遵义医学院细胞生物学与遗传学教研室遵义563000

目的研究米非司酮对乳腺癌细胞系MCF-7和T47D的增殖抑制作用。方法采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测米非司酮对乳腺癌细胞系MCF-7和T47D的半数抑制浓度(IC50)。不同浓度米非司酮(0.25、2.5、25和50μmol/L)分别处理人乳腺癌细胞系MCF-7和T... 详细信息

目的研究米非司酮对乳腺癌细胞系MCF-7和T47D的增殖抑制作用。方法采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测米非司酮对乳腺癌细胞系MCF-7和T47D的半数抑制浓度(IC50)。不同浓度米非司酮(0.25、2.5、25和50μmol/L)分别处理人乳腺癌细胞系MCF-7和T47D1、2、3d后,观察细胞形态变化,以及检测各组细胞生长曲线。结果米非司酮对乳腺癌MCF-7和T47D细胞均有抑制作用,其抑制率均随着米非司酮浓度的增加而变化,存在明显的量效关系。通过对两种细胞抑制率(IR)值直线回归分析,米非司酮对MCF-7细胞的IC50为51.21μmol/L,对T47D细胞的IC50为54.29μmol/L。形态学观察发现,各组细胞体积变小,细胞间的链接消失,细胞内明显有黑色小颗粒聚集。25和50μmol/L浓度米非司酮对MCF-7乳腺癌细胞株生长抑制作用明显,特别是50μmol/L干预24h后在高倍镜下可见明显的核质浓缩。结论米非司酮对病理分型、激素受体型不同的乳腺癌MCF-7和T47D细胞均具有抑制增殖的作用,并呈时间和剂量依赖效应。

关键词：米非司酮乳腺癌细胞增殖半数抑制浓度

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肺癌消减杂交文库中共同基因的分析及验证

肺癌消减杂交文库中共同基因的分析及验证

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第十六届中国科协年会——分3环境污染及职业暴露与人类癌症学术研讨会

作者：吴明松曹毅遵义医学院细胞生物学与遗传学教研室云南省动物模型与人类疾病机理重点实验室中国科学院昆明动物研究所

抑制性消减杂交(SSH)技术因操作简单、筛选效率高、假阳性率低等优点,被广泛用于生物、医学领域。本文拟找出SSH所建立的肺癌消减杂交文库中的共同存在的差异表达基因,并就这些基因进行生物信息学分析。结果显示,这些基因参与了多条信... 详细信息

抑制性消减杂交(SSH)技术因操作简单、筛选效率高、假阳性率低等优点,被广泛用于生物、医学领域。本文拟找出SSH所建立的肺癌消减杂交文库中的共同存在的差异表达基因,并就这些基因进行生物信息学分析。结果显示,这些基因参与了多条信号通路改变,列出了最可能参与的10条信号通路。选择这些基因中的TIMP3、GPX3、HSP90B1、CD9,用Q-PCR验证,结果显示,SSH文库中基因的上调和下调趋势具有较好的特异性。

关键词：肺癌抑制性消减杂交生物信息学

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米非司酮抑制人子宫内膜基质细胞增殖

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生殖医学杂志 2014年第6期23卷 475-479页

作者：郭永赵爱华苏晨丁宁张瑶楠刘庆王乾兴国家人口计生委科学技术研究所内分泌室北京100081 解放军第309医院妇产科北京100091 遵义医学院细胞生物学与遗传学教研室遵义563000

目的在改良子宫内膜细胞原代分离培养方法的基础之上,探讨米非司酮对原代分离培养的人子宫内膜基质细胞增殖的抑制作用。方法利用改良后的"二次消化法"分离培养增殖期人子宫内膜基质和上皮细胞,进行细胞形态学观察,并通过流... 详细信息

目的在改良子宫内膜细胞原代分离培养方法的基础之上,探讨米非司酮对原代分离培养的人子宫内膜基质细胞增殖的抑制作用。方法利用改良后的"二次消化法"分离培养增殖期人子宫内膜基质和上皮细胞,进行细胞形态学观察,并通过流式细胞术检测人子宫内膜基质和上皮细胞的波形蛋白和角蛋白表达阳性的细胞比率,计算分离培养的基质和上皮细胞的纯度;采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测米非司酮对原代分离培养人子宫内膜基质细胞的半数抑制浓度(IC50)。结果原代分离培养的基质细胞较上皮细胞生长迅速。流式细胞检测结果显示,分离培养的基质细胞波形蛋白阳性率达97%,上皮细胞角蛋白阳性率达90%。米非司酮处理人子宫内膜基质细胞2d或3d后,结果均显示,随着米非司酮浓度增加,基质细胞的细胞抑制率(IR)逐渐升高。米非司酮作用基质细胞2d后,50和100μmol/L组的IR值均高于对照组,差异均具有统计学意义(P<0.05);米非司酮作用3d后,25、50和100μmol/L组的IR值均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。通过对IR值进行直线回归分析,结果表明:米非司酮处理2d和3d对原代人子宫内膜基质细胞的IC50分别为52.85μmol/L和86.46μmol/L。结论改良后的"二次消化法"可获得高纯度人子宫内膜基质细胞和上皮细胞。米非司酮对原代人子宫内膜基质细胞有抑制作用,并呈时间和剂量依赖效应。

关键词：米非司酮人子宫内膜细胞细胞增殖半数抑制浓度

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