检索结果-内蒙古大学图书馆

第三军医大学学报 2014年第14期36卷 1454-1459页

作者：李林舒静刘玉林陈俊霞重庆医科大学基础医学院细胞生物学与遗传学教研室、分子医学与肿瘤研究中心重庆400016

目的探讨核糖核酸酶抑制因子(ribonuclease inhibitor,RI)与血管生成素(angiogenin,ANG)的相互作用。方法利用免疫荧光标记结合共聚焦显微镜技术来确立RI与ANG蛋白在细胞内的共定位。利用激光共聚焦显微镜的荧光共振能量转移(fluorescen... 详细信息

目的探讨核糖核酸酶抑制因子(ribonuclease inhibitor,RI)与血管生成素(angiogenin,ANG)的相互作用。方法利用免疫荧光标记结合共聚焦显微镜技术来确立RI与ANG蛋白在细胞内的共定位。利用激光共聚焦显微镜的荧光共振能量转移(fluorescence resonance energy transfer,FRET)技术验证RI和ANG蛋白的相互作用。构建原核表达质粒pGEX-4T-RI,转化*** BL21大肠杆菌(DE3)表达,并经谷胱甘肽琼脂糖凝胶4B(glutathione sepharose4B)纯化GST-RI蛋白,考马斯亮蓝染色和免疫印迹鉴定表达情况,利用GST蛋白沉降技术检测RI与ANG蛋白在体外的结合作用。应用免疫共沉淀(co-immunoprecipitation,Co-IP)实验检测两蛋白在真核细胞内的结合作用。结果细胞内免疫荧光标记的RI和ANG蛋白在激光共聚焦显微镜观察下存在共定位现象。FRET结果显示RI与ANG在细胞内存在相互作用。另外酶切和测序结果证明原核表达质粒pGEX-4T-RI构建成功,GST-RI蛋白诱导表达正确,GST蛋白沉降结果显示RI和ANG蛋白在原核细胞反应体系中存在相互作用。结论 RI和ANG蛋白在原核细胞反应体系和真核细胞中均存在相互结合作用。

关键词：核糖核酸酶抑制因子血管生成素相互作用

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BAMBI基因过表达人结肠癌细胞移植斑马鱼致肝转移模型的构建

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中华临床医师杂志（电子版） 2015年第21期9卷 88-92页

作者：崔戈谢珊珊张婷李芳张晓涓桂建芳周天华冯文明湖州师范学院附属第一医院中心实验室浙江省313000 浙江大学医学院基础医学系细胞生物学教研室杭州310058 湖州师范学院医学院病理学教研室浙江省313000 中国科学院水生生物研究所鱼类生物学及渔业生物技术研究中心鱼类发育遗传学与细胞工程学学科组武汉430072

目的构建BAMBI基因过表达人结肠癌细胞移植斑马鱼肝转移模型,分析斑马鱼肝内转移性结肠癌细胞BAMBI基因表达水平与肝转移发生率的关联性。方法分别构建BAMBI过表达稳转结肠癌细胞株SW620(BAMBI+组)、空载体红色荧光蛋白基因转染结肠癌... 详细信息

目的构建BAMBI基因过表达人结肠癌细胞移植斑马鱼肝转移模型,分析斑马鱼肝内转移性结肠癌细胞BAMBI基因表达水平与肝转移发生率的关联性。方法分别构建BAMBI过表达稳转结肠癌细胞株SW620(BAMBI+组)、空载体红色荧光蛋白基因转染结肠癌细胞株SW620(EV组),分别显微注射到受精后第2天转基因斑马鱼Tg(Apo14∶GFP)胚胎卵黄囊(每组各680条),激光共聚焦荧光显微镜观察、拍摄,采用Image J软件测量转移至斑马鱼肝脏内结肠癌细胞红色荧光表达强度,计算肝转移发生率;采用t检验比较BAMBI+组及EV组斑马鱼肝脏内结肠癌细胞红色荧光表达强度及肝转移发生率的差异。结果与EV组相比,激光共聚焦荧光显微观察显示BAMBI+组斑马鱼肝内结肠癌细胞红色荧光表达量显著增加(t=6.247,P=0.003 3);BAMBI+组斑马鱼肝转移发生率与EV组相比显著增加(t=4.276,P=0.012 9)。结论构建了基因修饰人结肠癌细胞移植斑马鱼致肝转移模型,可较好地模拟活体状态的结肠癌肝转移;BAMBI基因可促进异种移植入斑马鱼的结肠癌细胞发生肝转移。

关键词：结肠肿瘤肝转移斑马鱼模型 BAMBI

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NO信号通过I-kappaB磷酸化激活人肝细胞内源凝血因子Ⅷ重表达的调控作用

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吉林大学学报（医学版） 2014年第6期40卷 1155-1160页

作者：温泉何玉霞周云飞王娟张军重庆医科大学基础医学院细胞生物学与遗传学教研室重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心重庆400016

目的:建立一氧化氮(NO)前体化合物L-精氨酸激活人肝细胞L02内源凝血因子Ⅷ(FⅧ)重表达的分子细胞生物学模型,探讨NO信号激活L02中内源FⅧ重表达的调控通路及分子基础。方法:取对数生长期L02细胞随机分为对照组、加药组(L-精氨酸)、抑制... 详细信息

目的:建立一氧化氮(NO)前体化合物L-精氨酸激活人肝细胞L02内源凝血因子Ⅷ(FⅧ)重表达的分子细胞生物学模型,探讨NO信号激活L02中内源FⅧ重表达的调控通路及分子基础。方法:取对数生长期L02细胞随机分为对照组、加药组(L-精氨酸)、抑制剂组(L-NAME和L-精氨酸)和抑制剂对照组(L-NAME),分别培养12、24、36、48和60h,采用流式细胞术检测作用48h后L02中人FⅧ蛋白的表达,Griess法检测不同时间点L02细胞内NO水平,RT-PCR法检测L02中人FⅧ基因、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)基因、核转录因子(NF-κB1)基因和核因子κB(免疫球蛋白κ轻链基因增强子)抑制蛋白α亚基(I-κB alpha)基因的转录水平,Western blotting法检测L02中人磷酸化I-kappaB(磷酸化I-κB)表达水平。结果:流式细胞术检测,加L-精氨酸培养48h后L02中出现人FⅧ蛋白的表达。Griess法检测,加药组L02在3、6和12h内NO表达水平显著增加(P<0.05),随后又基本恢复到正常水平,正常组、抑制剂组和抑制剂对照组L02细胞内NO水平无变化;RT-PCR检测,加药组L02中人FⅧmRNA转录;对照组、抑制剂组和抑制剂对照组均无人FⅧmRNA的转录,加药组iNOS、NF-κB1和I-κB alpha转录水平均上升(P<0.05),对照组、抑制剂组和抑制剂对照组上述基因转录水平均无明显变化。Western blotting法检测,加入L-精氨酸后,磷酸化I-κB表达水平明显增加(P<0.05),其他组则无此变化。结论:L-精氨酸通过NO信号通路进而激活I-κB磷酸化,导致人FⅧ基因启动子上游调控相关的转录因子NF-κB1进入胞核从而激活人离体肝细胞L02中内源人FⅧ的表达。

关键词：人凝血因子Ⅷ L-精氨酸一氧化氮信号通路磷酸化 human coagulation factor Ⅷ

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浅析高等医科院校医学细胞生物学教学面临的挑战和对策

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陕西教育（高教版） 2015年第12期 61-61页

作者：冯浩沙保勇景晓红西安医学院基础医学部细胞生物学与遗传学教研室

医学细胞生物学是生命科学领域的前沿学科,同时也是现代医学重要的基础课程。医学本科生只有掌握细胞生命活动的内在规律,才能够认清疾病发病的分子机制。本文提出了医学细胞生物学教学所面临的挑战及相应的对策。

关键词：医学细胞生物学教学挑战

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腺病毒介导的Wnt10b对HaCaT细胞迁移的作用及机制

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现代生物医学进展 2015年第3期15卷 429-432页

作者：陶元王瑞敏唐萄杨恬彭惠民郭海英星懿展第三军医大学学员十五营重庆400038 重庆医科大学基础医学院细胞生物学及遗传学教研室重庆400016 中铁十七局集团有限公司中心医院重症医学科山西太原030032 第三军医大学学员七营重庆400038 第三军医大学基础部细胞生物学教研室重庆400038

目的:探讨Wnt10b对Ha Ca T表皮细胞迁移的影响及机制。方法:分别用重组腺病毒Ad-GFP、Ad-GFP-Wnt10b感染Ha Ca T表皮细胞,利用细胞免疫荧光技术检测腺病毒Ad-GFP-Wnt10b感染细胞后的过表达情况;采用细胞划痕实验,于不同时间点观察并记录... 详细信息

目的:探讨Wnt10b对Ha Ca T表皮细胞迁移的影响及机制。方法:分别用重组腺病毒Ad-GFP、Ad-GFP-Wnt10b感染Ha Ca T表皮细胞,利用细胞免疫荧光技术检测腺病毒Ad-GFP-Wnt10b感染细胞后的过表达情况;采用细胞划痕实验,于不同时间点观察并记录经Wnt10b处理后,Ha Ca T细胞体外迁移功能的改变;进一步采用Westen blot技术检测不同腺病毒处理后,Ha Ca T细胞中Wnt信号关键分子β-catenin、细胞粘附分子E-cadherin表达的改变情况。结果:1Ad-GFP-Wnt10b感染Ha Ca T细胞48 h后,细胞内GFP表达上调,细胞免疫荧光染色显示Wnt10b处理组高表达Wnt10b蛋白;2Ha Ca T细胞经Ad-GFP-Wnt10b处理后,细胞创面愈合速度明显增快;3Wnt10b处理组细胞β-catenin蛋白表达水平显著高于对照组,而E-cadherin蛋白表达水平显著低于对照组。结论:Wnt10b能促进Ha Ca T细胞迁移,且该效应涉及经典Wnt/β-catenin信号的激活及由E-cadherin介导的细胞粘附性的减弱。

关键词： Wnt10b 经典Wnt信号 HaCaT细胞迁移

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医学细胞生物学的教学与思考

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现代医药卫生 2014年第15期30卷 2373-2375页

作者：冯浩景晓红西安医学院基础医学部细胞生物学与遗传学教研室陕西西安710021

医学细胞生物学是现代医学与生命科学的重要交叉学科之一。该学科从微观水平来分析生物体宏观的基本生命活动规律,其内容非常庞杂。如何在有限的学时内,既让医学生能够充分学习医学细胞生物学的理论知识,又能及时了解细胞生物学发展的... 详细信息

医学细胞生物学是现代医学与生命科学的重要交叉学科之一。该学科从微观水平来分析生物体宏观的基本生命活动规律,其内容非常庞杂。如何在有限的学时内,既让医学生能够充分学习医学细胞生物学的理论知识,又能及时了解细胞生物学发展的前沿动态及医学实践中的相关应用,是细胞生物学教学工作需不断探索的重要问题。

关键词：细胞学/教育学生,医科基于问题的学习多媒体教学方法

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以科研提高教学质量,培养创新医学人才措施与成效

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海南医学 2014年第10期25卷 1535-1536页

作者：张妮苟兴春景晓红西安医学院基础医学部细胞生物学与遗传学教研室陕西西安710021

西安医学院作为新升格的医学本科院校，秉承“厚德博学、精益求精”的校训，坚持走内涵发展之路，紧紧围绕“为学校教育教学改革服务”这一中心，努力营造教学和科研相结合的文化氛围，建立了以科研促进教学的新型医学人才培养模式。本... 详细信息

西安医学院作为新升格的医学本科院校，秉承“厚德博学、精益求精”的校训，坚持走内涵发展之路，紧紧围绕“为学校教育教学改革服务”这一中心，努力营造教学和科研相结合的文化氛围，建立了以科研促进教学的新型医学人才培养模式。本文介绍了西安医学院基础医学部细胞生物学与遗传学教研室通过加强科研工作、以科研促进教学改革、培养创新医学人才的措施及成效。

关键词：科研教学质量创新医学人才措施成效

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四川宜宾产桃花水母的线粒体COⅠ序列片段分析

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泸州医学院学报 2014年第1期37卷 79-82页

作者：蔡延森刘芹王译伟马明义税青林泸州医学院医学细胞生物学与遗传学教研室四川泸州646000 宜宾学院生命科学与食品工程学院泸州医学院化学教研室

目的:针对桃花水母形态分类中存在的一些混乱和矛盾,引入分子生物学方法阐明其分类难题。方法:采用PCR.和DNA测序技术,对四川宜宾产桃花水母标本的线粒体细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ基因(mitochondrial cytochrome coxidase subunitⅠ,COⅠ)... 详细信息

目的:针对桃花水母形态分类中存在的一些混乱和矛盾,引入分子生物学方法阐明其分类难题。方法:采用PCR.和DNA测序技术,对四川宜宾产桃花水母标本的线粒体细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ基因(mitochondrial cytochrome coxidase subunitⅠ,COⅠ)片段进行了扩增与测序,并与GenBank中已有的淡水水母目COⅠ基因序列进行比对分析,利用MEGA 5计算它们的遗传距离,构建NJ树。结果:该桃花水母标本与索氏桃花水母Craspedacusta sowerbii的COⅠ基因相似度极高,同源性在99%以上,遗传距离为0.003,在进化树中与索氏桃花水母聚为同一支。结论:该标本属于索氏桃花水母。

关键词： DNA条形码 COⅠ 索氏桃花水母 DNA分类学

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pET 22b-TP17表达载体的构建与鉴定

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泸州医学院学报 2014年第3期37卷 243-246页

作者：李佳凌李尹凤汤军蔡延森泸州医学院形态实验室四川泸州646000 重庆市北碚区中医院重症医学科泸州医学院基础医学院教务科泸州医学院医学细胞生物学与遗传学教研室

目的:采用原核基因工程技术构建表达梅毒螺旋体外膜脂蛋白TP17的载体,并进行酶切鉴定,为获得重组抗原TP17及其用于梅毒血清学诊断试剂的研究奠定基础。方法:将化学合成的寡核苷酸(oligo)通过PCR的方法拼接成TP17目的基因的序列,并将合... 详细信息

目的:采用原核基因工程技术构建表达梅毒螺旋体外膜脂蛋白TP17的载体,并进行酶切鉴定,为获得重组抗原TP17及其用于梅毒血清学诊断试剂的研究奠定基础。方法:将化学合成的寡核苷酸(oligo)通过PCR的方法拼接成TP17目的基因的序列,并将合成好的序列克隆入pMD18-T Simple载体。以pMD18-T Simple-TP17为模板,PCR扩增TP17基因片段。PCR产物通过1.5%琼脂糖凝胶电泳回收TP17条带,随后用EcoRⅠ和XhoⅠ对TP17回收所得片段及目的载体pET 22b进行双酶切并连接。连接产物电转化至感受态细胞DH10B中后,挑取克隆,提取质粒并鉴定。最后将质粒转化至BL21菌株中。挑取克隆,提质粒,进行鉴定。结果:PCR扩增片段、双酶切均出现445 bp大小的目的基因条带,与预期结果相符。结论:本研究成功构建了重组质粒pET 22b-TP17,为下一步用IPTG诱导BL21菌株表达重组目的蛋白的研究奠定了基础。

关键词：梅毒螺旋体原核表达载体质粒pET 22b 重组蛋白的表达

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广西壮族、汉族系统性红斑狼疮与Toll样受体9基因多态性研究

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中华皮肤科杂志 2014年第6期47卷 404-408页

作者：温斯健吴飞云林有坤方玲广西医科大学第一附属医院皮肤性病科南宁530021 广西医科大学基础医学院细胞生物学与遗传学教研室

目的探讨TLR9单核苷酸多态性与广西系统性红斑狼疮（sLE）患者发病的相关性，以及其在壮族、汉两个民族间的差异。方法聚合酶链反应-限制性酶切技术、聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析技术（PCR—RFLP）对97例广西SLE患者和202例... 详细信息

目的探讨TLR9单核苷酸多态性与广西系统性红斑狼疮（sLE）患者发病的相关性，以及其在壮族、汉两个民族间的差异。方法聚合酶链反应-限制性酶切技术、聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析技术（PCR—RFLP）对97例广西SLE患者和202例广西健康对照者的TLR9基因多态性进行检测，分析其基因型和等位基因频率与SLE部分临床实验室指标的关联性，并比较两民族间的差异。结果TLR9rs352140CC、CT、TT基因型频率在汉族SLE组与汉族对照组中分别为42．9％、41．1％、16．1％和38．3％、55．8％、5．8％，差异有统计学意义（P〈0．05），其C、T等位基因频率差异无统计学意义（P〉0．05）。TLR9rs352140C／T基因型频率和等位基因频率在壮族SLE组与壮族健康对照组间、壮族SLE组与汉族SLE组间差异无统计学意义（均P〉0．05）。TLR9rs352140Tr基因型频率在ds-DNA阳性组比阴性组高（P〈0．05），而T等位基因频率在两组间差异无统计学意义（P〉0．05）。TLR9rs352140TT基因型频率和T等位基因的频率在SLEDAI≥9组比SLEDAI〈9组高，差异有统计学意义（均P〈0．05）。TLR9rs352140TT基因型频率和T等位基因的频率在ANA阳性组与阴性组间差异无统计学意义（均P〉0．05）。结论TLR9rs352140基因多态性可能与广西汉族人SLE的易感性有关，TLR9基因多态性与部分SLE指标可能具有相关性。

关键词：红斑狼疮系统性 Toll样受体9 多态性单核苷酸壮族汉族

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