检索结果-内蒙古大学图书馆

国际中医中药杂志 2012年第3期34卷 210-213页

作者：单士刚包永芬沈定文咸宁学院基础医学院医学细胞生物学与遗传学教研室单士刚医学微生物学教研室437100 寄生虫学教研室沈定文

目的研究大蒜多糖对健康人胚肝细胞（L02细胞）氧化损伤的保护作用。方法培养L02细胞，以酒精为氧化剂损伤L02细胞，制成氧化损伤模型。在培养液中加入不同浓度大蒜多糖（10、20、40、80mg／L），观察细胞培养上清液中超氧化物歧化酶（... 详细信息

目的研究大蒜多糖对健康人胚肝细胞（L02细胞）氧化损伤的保护作用。方法培养L02细胞，以酒精为氧化剂损伤L02细胞，制成氧化损伤模型。在培养液中加入不同浓度大蒜多糖（10、20、40、80mg／L），观察细胞培养上清液中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（***）活性，细胞中丙二醛（MDA）含量的变化；用RT-qPCR法检测大蒜多糖对人肝细胞中HO．1mRNA的影响，以Western bloting分析HO．1蛋白的表达量。结果不同浓度的大蒜多糖均可减少酒精对L02的氧化损伤。肝细胞经100mmol／L酒精暴露8h后，20、40、80mg／L大蒜多糖的SOD分别为（3．65±0．42）NU／mg、（4．11±0．16）NU／mg、（4．61±0．23）NU／mg：GSH—Px分别为（75．96±8．96）mg／mg、（81．83±5．70）mg／mg^（89．32±6．35）mg／mg^MDA分别为（1．05±0．16）nmol／mg、（0．99±0．12）nmol／mg、（0．78±0．11）nmol／mg，各项分别与酒精损伤组[SOD（2．35±0．28）NU／mg、***（54．41±8．17）mg／mg、MDA（1．58±O．23）nmol／mg]比较，差异均有统计学意义（尸均〈O．05）。血红素氧化酶．1（HO．1）mRNA、蛋白表达呈浓度效应依赖性。结论大蒜多糖对L02细胞氧化损伤具有保护作用。大蒜多糖可能通过提高SOD、***活性，降低MDA含量保护被酒精氧化损伤的肝细胞，呈剂量效应关系。且可通过促进HO．1mRNA的表达，共同保护肝细胞。

关键词：大蒜多糖 L02细胞氧化损伤

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大鼠脑微血管内皮细胞的原代培养

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昆明医科大学学报 2012年第12期33卷 26-29页

作者：李华马明义马红艳泸州医学院附属医院内分泌科四川泸州646000 泸州医学院医学细胞生物学与遗传学教研室四川泸州646000

目的探索一种简便可行的脑微血管内皮细胞(brainmicrovascularendothelialcells,BMECs)的培养方法,为研究BMECs在脑血管疾病中的重要作用提供技术支持.方法分离出生后1～4 d内的Wistar大鼠乳鼠大脑皮质,用植块法培养BMECs;用倒置显微镜... 详细信息

目的探索一种简便可行的脑微血管内皮细胞(brainmicrovascularendothelialcells,BMECs)的培养方法,为研究BMECs在脑血管疾病中的重要作用提供技术支持.方法分离出生后1～4 d内的Wistar大鼠乳鼠大脑皮质,用植块法培养BMECs;用倒置显微镜观察BMECs的形态以及从皮质块细胞迁出的过程;通过形态学观察及第Ⅷ因子相关抗原免疫荧光细胞化学法对培养细胞进行鉴定.结果大脑皮质块植块法培养的大鼠BMECs呈单层贴壁生长,细胞形态以长梭形、多角形、三角形、四边形为主,呈典型的"铺路石"样征象,第3代细胞经免疫荧光染色,第Ⅷ因子相关抗原呈阳性,阳性率达95%以上.结论植块法具有经济、简便、要求条件不高,可成功培养高纯度的脑微血管内皮细胞的优点.

关键词：大鼠脑微血管内皮细胞原代培养

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多巴胺D_2、D_3受体基因多态性与汉族人精神分裂症相关研究

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中国神经精神疾病杂志 2012年第3期38卷 155-159页

作者：刘书莲程晓丽温雯静刘华李文超钟红梅郑州大学基础医学院细胞生物学与医学遗传学教研室郑州450052 河南省洛阳荣康医院郑州卫校基础护理教学部河南漯河医学高等专科学校西南民族大学生命科学与技术学院

目的探索多巴胺D2受体(Dopamine D2receptor,DRD2)基因第8外显子Taq I A位点多态和多巴胺D3受体(Dopamine D3receptor,DRD3)基因第5内含子Msp I位点多态与汉族人群精神分裂症是否关联及其在不同性别是否存有差异。方法使用聚合酶链反应... 详细信息

目的探索多巴胺D2受体(Dopamine D2receptor,DRD2)基因第8外显子Taq I A位点多态和多巴胺D3受体(Dopamine D3receptor,DRD3)基因第5内含子Msp I位点多态与汉族人群精神分裂症是否关联及其在不同性别是否存有差异。方法使用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(Polymerase chain reaction-re-striction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)及DNA测序技术,对317例精神分裂症患者及310名对照DRD2Taq I A基因多态性和DRD3Msp I位点基因多态性进行检测。结果患者组与对照组间DRD2 Taq I A位点等位基因分布差异显著(P<0.01)、两两基因型对比(A1/A2与A1/A1相比:P<0.05;A2/A2与A1/A1相比:P<0.01)及两基因型联合对比(A1/A2+A2/A2与A1/A1:P<0.01)组间差异也显著。性别分层研究DRD2Taq I A位点女性组间差异显著(P<0.01),男性组间差异无意义(P>0.05)。DRD3Msp I位点的基因型频率、等位基因分布及性别分层分析等所有数据均显示患者组与对照组之间差异无统计学意义(P>0.05)。风险因子趋势检验结果DRD2Taq I A位点等位基因A2:P<0.01;DRD3Msp I位点等位基因2:P>0.05。结论所得数据支持DRD2Taq I A位点等位基因A2可能为精神分裂发生的风险因子,特别对女性而言。数据分析不支持DRD3Msp I位点基因与精神分裂发生有关。此结果需更进一步研究证实。

关键词：精神分裂症基因多态多巴胺D2受体多巴胺D3受体

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抑制STAT5A基因的表达对人肝癌HepG2细胞增殖的影响及其机制研究

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泸州医学院学报 2012年第6期35卷 559-563页

作者：杨华秀曾永秋曹洋黄燕李洁泸州医学院附属中医院肝病科四川泸州646000 泸州医学院医学细胞生物学与遗传学教研室四川泸州646000 泸州医学院生理学教研室四川泸州646000

目的:研究抑制STAT5A基因的表达对人肝癌HepG2细胞增殖的影响,并对其影响肝癌细胞增殖的机制进行探讨,为STAT5A基因在肝细胞癌中的功能研究提供实验依据。方法:构建针对STAT5A基因的shRNA真核表达载体,脂质体法转染人肝癌细胞HepG2,采... 详细信息

目的:研究抑制STAT5A基因的表达对人肝癌HepG2细胞增殖的影响,并对其影响肝癌细胞增殖的机制进行探讨,为STAT5A基因在肝细胞癌中的功能研究提供实验依据。方法:构建针对STAT5A基因的shRNA真核表达载体,脂质体法转染人肝癌细胞HepG2,采用半定量RT-PCR的方法检测细胞中STAT5A mRNA的变化;蛋白质印迹技术检测转染前后细胞中STAT5A蛋白、细胞周期蛋白Cyclin D1蛋白表达的变化;采用MTT法检测细胞增殖的情况。结果:酶切及测序结果显示shRNA表达载体均构建成功,转染HepG2细胞48h后,与对照组相比,RT-PCR结果显示实验组细胞中STAT5A mRNA的抑制率为72.03%(P<0.05),蛋白质印迹法显示STAT5A蛋白的抑制率为66.27%(P<0.05),细胞周期蛋白Cyclin D1蛋白表达下降47.16%(P<0.05),同时MTT法显示细胞生长速度减慢、增殖抑制明显。结论:抑制STAT5A基因的表达可有效抑制HepG2细胞的增殖,其机制可能是通过下调Cyclin D1的表达实现的。

关键词： STAT5A基因 RNA干扰 HepG2细胞细胞增殖 Cyclin D1

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小鼠睾丸发育全过程中生精细胞的自发性凋亡

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云南大学学报（自然科学版） 2011年第1期33卷 113-117,F0002页

作者：罗兰张彦张闻李京昆昆明医学院基础医学院细胞生物学及遗传学教研室云南昆明650500

以17组出生后不同发育阶段的昆明种正常小鼠睾丸组织为材料,采用TDT原位末端标记法在其石蜡组织切片上进行凋亡细胞原位检测,探讨小鼠睾丸发育全过程中生精细胞的自发性凋亡规律.结果发现:小鼠生精细胞从生后开始就存在自发性凋亡现象,... 详细信息

以17组出生后不同发育阶段的昆明种正常小鼠睾丸组织为材料,采用TDT原位末端标记法在其石蜡组织切片上进行凋亡细胞原位检测,探讨小鼠睾丸发育全过程中生精细胞的自发性凋亡规律.结果发现:小鼠生精细胞从生后开始就存在自发性凋亡现象,生后1～15 d,凋亡精原细胞数目不断增加;至生后第15天时达到峰值,且15 d起个别初级精母细胞也开始出现凋亡;至27 d时,极少数次级精母细胞和精子细胞出现凋亡;至30 d时凋亡细胞基本为精原细胞;而33 d时各类型生精细胞均存在凋亡现象;至36 d时凋亡细胞又重新集中于精原细胞,并延续于此后各期.上述结果表明:小鼠睾丸发育过程中凋亡细胞主要为精原细胞;自发性凋亡活跃期发生于生后1～33 d,与生精细胞的首次发育成熟过程同步.

关键词：睾丸发育小鼠生精细胞自发性凋亡

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荧光二氧化硅纳米颗粒的制备、修饰及细胞成像分析

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化学学报 2011年第8期69卷 967-972页

作者：孙艳华扎拉嘎胡张金利关丛笑郑琳李韡乔建军天津大学化工学院天津300072 天津医科大学基础医学院天津300070 天津武警医学院细胞生物学与医学遗传学教研室天津300162

在微乳液体系中合成荧光二氧化硅纳米颗粒(FSNPs),然后对其表面进行氨基修饰,之后再连接抗体,应用高分辨透射电镜(HR-TEM),原子力显微镜(AFM),Zeta-电位分析仪,IR,荧光显微镜及激光共聚焦显微镜等多种表征工具对合成的颗粒和后续的修饰... 详细信息

在微乳液体系中合成荧光二氧化硅纳米颗粒(FSNPs),然后对其表面进行氨基修饰,之后再连接抗体,应用高分辨透射电镜(HR-TEM),原子力显微镜(AFM),Zeta-电位分析仪,IR,荧光显微镜及激光共聚焦显微镜等多种表征工具对合成的颗粒和后续的修饰进行了系统分析.研究表明,FSNPs在溶液中呈现单分散状态,但是在表面修饰了氨基之后(NH2-FSNPs),由于表面平均电位以及氨基间氢键的形成,致使颗粒严重聚集;适当的pH环境可以改善颗粒的分散状态;利用氨基修饰的荧光二氧化硅纳米颗粒(NH2-FSNPs)连接抗体识别脐血来源的间充质干细胞(MSCs)表面的蛋白CD44,从而实现对间充质干细胞荧光成像分析.结果表明,识别效果良好,为荧光二氧化硅纳米颗粒在干细胞领域的应用奠定了基础.

关键词：荧光二氧化硅纳米颗粒氨基修饰分散性 CD44

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肝癌细胞蛋白质组在DTT诱导内质网应激条件下的表达

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世界华人消化杂志 2011年第13期19卷 1331-1335页

作者：严冬梅刘友平代荣阳段春燕陈绍坤泸州医学院生物化学教研室四川省泸州市646000 泸州医学院细胞生物学和遗传学教研室四川省泸州市646000

目的:研究内质网应激条件下肝癌细胞SMMC-7721蛋白质组的表达,为人类肝细胞癌的诊治提供新的靶点.方法:培养肝癌细胞株SMMC-7721,随机分为两组,即实验组和对照组.实验组加入二硫苏糖醇(DTT,2.5mmol/L),对照组加入等量的培养基,裂解细胞... 详细信息

目的:研究内质网应激条件下肝癌细胞SMMC-7721蛋白质组的表达,为人类肝细胞癌的诊治提供新的靶点.方法:培养肝癌细胞株SMMC-7721,随机分为两组,即实验组和对照组.实验组加入二硫苏糖醇(DTT,2.5mmol/L),对照组加入等量的培养基,裂解细胞,提取全细胞蛋白.双向电泳(2-DE)分离,Image Master2D Platinum软件进行差异表达蛋白质组分析,基质辅助激光解吸附离子化飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定蛋白质.结果:实验组肝癌细胞SMMC-7721的2-DE图谱上共检出蛋白质斑点(844±46)个,对照组共检出蛋白质斑点(1015±63)个,对照组与实验组自动匹配配对(593±23)对,匹配率约71%左右,绝大多数蛋白集中于pH5.2-6.5,相对分子质量15000-80000Da;获得组间标准化总灰度值(%Vol)相差2倍及以上的蛋白斑点3个,通过MALDI-TOF-MS分析鉴定了3个差异蛋白质点,分别是:fem-1同源蛋白B、细胞周期素A1、增殖诱导蛋白44.结论:鉴定的3个肝癌细胞株SMMC-7721在内质网应激下表达改变的蛋白质,其功能涉及细胞增殖、细胞凋亡以及细胞周期等,具有潜在的作为肝癌诊断、预后标记物或治疗靶点的意义.

关键词：内质网应激肝癌细胞SMMC-7721 蛋白质组二硫苏糖醇

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线粒体DNA3243、3316、3394位点突变与精神分裂症相关分析

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第二军医大学学报 2011年第2期32卷 179-181页

作者：张景亮程晓丽刘淑莲曹玉媛封青川徐朝阳郑州大学基础医学院细胞生物学与医学遗传学教研室郑州450052 郑州卫校基础护理教研室郑州450003 郑州市精神病防治医院郑州450005

目的分析线粒体tRNALeu(UUR)基因3243位点及ND1基因3316、3394位点突变对精神分裂症(SZ)发病的影响。方法采用PCR扩增、限制性内切酶消化、琼脂糖凝胶电泳分型检测、DNA测序等方法,对随机抽取的无亲缘关系的250例患者(SZ组)和292例对照... 详细信息

目的分析线粒体tRNALeu(UUR)基因3243位点及ND1基因3316、3394位点突变对精神分裂症(SZ)发病的影响。方法采用PCR扩增、限制性内切酶消化、琼脂糖凝胶电泳分型检测、DNA测序等方法,对随机抽取的无亲缘关系的250例患者(SZ组)和292例对照组的外周血mtDNA进行3243、3316和3394位点的突变检测。结果在SZ组中发现8例3316G/A突变,对照组中3例,两组相比差异无统计学意义(P=0.138)。在SZ组中发现15例3394T/C突变,对照组中有4例,两组相比差异有统计学意义(P=0.007)。在精神分裂症患者组和对照组中均未发现3243A/G突变。结论 mtDNA3394T/C突变可能与SZ发生有一定关系,mtDNA 3243A/G、3316G/A突变可能与SZ发生无关。

关键词：精神分裂症线粒体DNA tRNA^Leu(UUR)基因 ND1基因点突变

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2个亨廷顿舞蹈病家系动态突变及mtDNA D环高变区的检测

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基础医学与临床 2011年第1期31卷 37-40页

作者：李新伟刘建新黄月丽陈晓蕾陈辉李晓文漯河医学高等专科学校生物教研室河南漯河462000 郑州大学基础医学院细胞生物学与医学遗传学教研室河南郑州450052

目的探讨mtDNA D环高变区突变与亨廷顿舞蹈病(HD)的关系。方法 PCR-DNA测序法检测2个HD家系(CAG)n重复序列、mtDNA D环高变区大片段缺失或插入突变。结果两家系正常人(CAG)n≤18次,患者n≥40次,mtDNA D环未见大片段缺失和插入。结论检... 详细信息

目的探讨mtDNA D环高变区突变与亨廷顿舞蹈病(HD)的关系。方法 PCR-DNA测序法检测2个HD家系(CAG)n重复序列、mtDNA D环高变区大片段缺失或插入突变。结果两家系正常人(CAG)n≤18次,患者n≥40次,mtDNA D环未见大片段缺失和插入。结论检测亨廷顿(IT15)基因(CAG)n可准确、快速诊断HD;mtDNA调控区大片段重组可能不是HD发病机制中的重要因素。

关键词：亨廷顿舞蹈病三核苷酸 mtDNA D环

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吗啡精神依赖对大鼠消化道嘌呤受体亚型P2Y_2 mRNA表达的影响

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广东医学 2011年第19期32卷 2489-2492页

作者：徐靖宇郭萍罗素元遵义医学院附属医院消化内科贵州遵义563003 遵义医学院基础医学院细胞生物学与遗传学教研室贵州遵义563003

目的观察吗啡条件性位置偏爱(CPP)大鼠消化系统食管、胃、十二指肠P2Y2受体mRNA表达的变化,探讨阿片类精神依赖下消化系统异常的分子机制。方法吗啡剂量递增法颈背部皮下注射建立大鼠吗啡CPP模型(模型组),生理盐水对照组则予注射生理盐... 详细信息

目的观察吗啡条件性位置偏爱(CPP)大鼠消化系统食管、胃、十二指肠P2Y2受体mRNA表达的变化,探讨阿片类精神依赖下消化系统异常的分子机制。方法吗啡剂量递增法颈背部皮下注射建立大鼠吗啡CPP模型(模型组),生理盐水对照组则予注射生理盐水,其余处理同模型组。实时荧光定量PCR分别检测大鼠食管、胃、十二指肠P2Y2受体mRNA的表达水平,采用2-△△Ct方法进行比较分析。结果与生理盐水对照组比较,模型组大鼠在白箱的停留时间明显延长(P<0.01);食管、胃、十二指肠P2Y2受体mRNA表达水平下调,分别仅为生理盐水对照组的0.41、0.33和0.14倍。结论 P2Y2受体mRNA表达下调可能与吗啡精神依赖过程胃肠道功能的失调有关。

关键词：吗啡精神依赖 P2Y2受体消化系统

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