检索结果-内蒙古大学图书馆

陆军军医大学学报 2023年第14期45卷 1539-1546页

作者：李华怡傅慧超司俊卓杨春重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室重庆400016

目的探索含a-Arrestin结构域蛋白3(a-Arrestin-domain-containing-3,ARRDC3)在肠道病毒D组68型(enterovirus D species,EV-D68)感染A549中的表达以及对A549细胞株生物学行为的影响。方法对EV-D68感染宿主细胞前后的样本进行全转录组高通量测序分析,通过生物信息学分析筛选出差异表达基因ARRDC3;RT-qPCR和Western blot验证ARRDC3的表达水平;设计实验分组4组,对照组(未感染EV-D68的A549细胞)、感染组(感染EV-D68的A549细胞)、敲低ARRDC3感染组(感染EV-D68的A549细胞转染ARRDC3-SiRNA-干扰片段)、敲低对照感染组(感染EV-D68的A549细胞转染NC-SiRNA-干扰片段),通过流式细胞术、CCK-8、Transwell实验检测ARRDC3在EV-D68感染模型中对A549细胞周期、增殖、迁移的影响。结果从测序结果中共筛选出差异表达2倍以上的差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)239个,其中上调基因135个,下调基因104个,ARRDC3是差异表达基因之一。EV-D68感染A549后,通过RT-qPCR和Western blot结果发现ARRDC3的表达水平显著增加(P<0.05)。细胞周期明显缩短,抑制细胞迁移。进一步通过转染成功干扰ARRDC3表达载体,沉默ARRDC3可以增强EV-D68感染A549细胞,沉默ARRDC3细胞周期DNA合成期延长(P<0.05),虽然对宿主细胞增殖无显著影响,但沉默ARRDC3可引起细胞迁移能力增强(P<0.05)。结论ARRDC3在EV-D68感染A549后表达明显上调,通过阻滞宿主细胞DNA合成期,抑制宿主细胞迁移等作用来发挥对宿主细胞的影响。

关键词： ARRDC3 肠道病毒D68型 A549 细胞周期细胞增殖和迁移

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2007年吉林省散发野型麻疹病毒H基因序列分析

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中国生物制品学杂志 2008年第1期21卷 16-18页

作者：胡钰李凡吉林大学基础医学院病原生物学教研室长春130021

目的分析2007年吉林省散发野型麻疹病毒的基因型别和特征。方法对2007年吉林省分离到的3株散发麻疹野型病毒,经RT-PCR扩增血凝素(H)基因片段,克隆到pMD19-T载体,进行酶切鉴定及序列测定,并分析核苷酸序列,与GenBank中麻疹病毒的22个代表... 详细信息

目的分析2007年吉林省散发野型麻疹病毒的基因型别和特征。方法对2007年吉林省分离到的3株散发麻疹野型病毒,经RT-PCR扩增血凝素(H)基因片段,克隆到pMD19-T载体,进行酶切鉴定及序列测定,并分析核苷酸序列,与GenBank中麻疹病毒的22个代表株H基因序列的同源性进行比较。结果RT-PCR产物经琼脂糖凝胶电泳,可见大小约为570bp的片段,克隆至pMD19-T载体后,酶切鉴定结果与预期相符。3株麻疹病毒均属H1基因型,其H基因之间同源性为98.5%～99.6%,与其他已知麻疹病毒的22个基因代表株相比,在核苷酸水平上最大变异为9.7%。3株病毒与H1a参考株Chin93-2、H1b参考株Chin94-5和H1c参考株Chin94-7的平均遗传距离分别为0.007～0.015、0.013～0.021和0.015～0.023。结论H1a基因型毒株是导致吉林省2007年春季麻疹散发的优势毒株。

关键词：麻疹病毒血凝素序列分析

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转化医学理念在《细菌学检验》教学中的应用

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中国病原生物学杂志 2014年第9期9卷 860-861,832页

作者：杨媛媛胡文洁谭文彬济宁医学院病原生物学教研室山东济宁272013

转化医学是近年来新兴的医学研究模式,其核心理念是将基础研究和临床进行统一和结合。《细菌学检验》是检验专业重要的专业课。本教研室在转化医学理念的指导下,对理论和实验教学进行教学改革,重点培养检验系学生的临床实践操作能力。... 详细信息

转化医学是近年来新兴的医学研究模式,其核心理念是将基础研究和临床进行统一和结合。《细菌学检验》是检验专业重要的专业课。本教研室在转化医学理念的指导下,对理论和实验教学进行教学改革,重点培养检验系学生的临床实践操作能力。本文介绍了该课程目前理论教学、实验教学和教师方面存在的问题,并在转化医学理念的指导下进行教学改革的具体方法,提高了教学质量,培养出兼具动手和分析能力,毕业即能胜任临床细菌学检验工作的人才。

关键词：转化医学细菌学检验教学改革

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网状分枝扩增技术快速检测大肠埃希菌O157:H7及其他产志贺样毒素大肠埃希菌

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吉林大学学报（医学版） 2006年第1期32卷 18-22页

作者：赵春燕易世红李凡吉林大学基础医学院病原生物学教研室吉林长春130021

目的:建立一种简便、快速、灵敏和特异的检测食品和临床标本中大肠埃希菌O157 : H7及其他产志贺样毒大肠埃希菌(STEC)的方法。方法:设计并合成了检测志贺毒素2(stx2)基因特异的环形探针和捕获探针,确定网状分枝扩增方法(RAM)的灵敏度;含... 详细信息

目的:建立一种简便、快速、灵敏和特异的检测食品和临床标本中大肠埃希菌O157 : H7及其他产志贺样毒大肠埃希菌(STEC)的方法。方法:设计并合成了检测志贺毒素2(stx2)基因特异的环形探针和捕获探针,确定网状分枝扩增方法(RAM)的灵敏度;含有stx2基因的不同血清型的菌株包括O46 : H38、 O22:H8、O111:NM,用于RAM特异度的测定。用RAM检测所有分离的菌株,并进一步对瞬时RAM进行研究。结果:RAM最低能检测10个拷贝的stx2合成靶基因和临床分离的菌株,表明RAM与PCR具有一样的灵敏度。特异度的测定结果表明不同血清型的大肠埃希菌均为stx2阳性,而非致病性大肠埃希菌ATCC23716则为阴性。在32株菌株中,28株细菌含有stx2基因,其余则为阴性,与PCR检测结果100％一致。瞬时RAM结果也表明最低能检测10个细菌,检测信号的出现依赖于样品的浓度。结论:RAM的简便和等温扩增特点可替代PCR检测各种标本中大肠埃希菌O157:H7和STEC。

关键词：大肠杆菌O157 网状分枝扩增方法环形探针聚合酶链反应/方法

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吉林省青少年超重及肥胖现状调查分析

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吉林大学学报（医学版） 2010年第2期36卷 420-423页

作者：杨颖刘彬李凡吉林大学基础医学院病原生物学教研室吉林长春130021

目的:分析2008年吉林省青少年超重、肥胖现状和分布特点,为青少年肥胖的预防提供依据。方法:采取分层整群抽样方法抽取2008年吉林省6505名9～18岁青少年作为调查对象,通过问卷、测量收集资料,计算体重指数(BMI),利用WGOC标准(中国肥胖... 详细信息

目的:分析2008年吉林省青少年超重、肥胖现状和分布特点,为青少年肥胖的预防提供依据。方法:采取分层整群抽样方法抽取2008年吉林省6505名9～18岁青少年作为调查对象,通过问卷、测量收集资料,计算体重指数(BMI),利用WGOC标准(中国肥胖问题工作组标准)和IOTF标准(欧洲肥胖问题工作组标准)对不同年龄段的BMI、超重率和肥胖率进行分析。结果:按WGOC标准分析,吉林省9～18岁青少年总体超重率为10.07%,肥胖率为6.90%,超重加肥胖率为18.51%;按IOTF标准分析,吉林省9～18岁青少年总体超重率为11.74%,肥胖率为4.30%,超重加肥胖率为16.05%。与2005年全国学生体质与健康调查结果(7～22岁男生超重率为8.20%,肥胖率5.07%;女生超重率4.61%,肥胖率2.6%)比较,吉林省青少年总体超重率和肥胖率明显增高。11～14岁是肥胖症的高发阶段,12岁是肥胖症发生最危险年龄。对于同年龄段,男生的肥胖率明显高于女生,按WGOC标准,9～18岁男生超重率为11.94%,肥胖率为10.05%;9～18岁女生超重率为8.50%,肥胖率为4.27%。在12岁时男生超重率为19.77%,肥胖率为20.53%;12岁女生超重率为12.84%,肥胖率为10.89%。结论:吉林省青少年肥胖状况呈上升趋势,男生肥胖状况明显重于女生,学校、家长等应该对此引起注意并采取有效防治措施。

关键词：青少年肥胖症体重指数

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STAT6分子不同功能域原核表达载体的构建

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吉林大学学报（医学版） 2006年第3期32卷 373-375页

作者：孙延波史红艳李菁华吉林大学基础医学院病原生物学教研室吉林长春130021

目的:利用融合表达载体pGEX-6p-2高效表达STAT6分子的不同功能域,以进一步探讨STAT6不同功能域在信号传导中的作用。方法:采用PCR技术,体外扩增STAT6分子的不同功能域,扩增后的目的基因分别构建于表达载体。重组的DNA转化到HB101细胞,... 详细信息

目的:利用融合表达载体pGEX-6p-2高效表达STAT6分子的不同功能域,以进一步探讨STAT6不同功能域在信号传导中的作用。方法:采用PCR技术,体外扩增STAT6分子的不同功能域,扩增后的目的基因分别构建于表达载体。重组的DNA转化到HB101细胞,转化子经超声裂解后,进行SDS-PAGE。结果:Western blotting显示STAT6的SHST、DST和NST功能域分别在60 000、56 000和50 000有较高丰度的表达,而空载体仅有GST的表达。结论:STAT6不同功能域可在融合表达载体内高效表达。

关键词：信号传导及转录活化因子 JAK家族酪氨酸激酶 T淋巴细胞白细胞介素4

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mIL-4昆虫表达载体pIZT/V5-His的构建及其高效表达

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吉林大学学报（医学版） 2006年第2期32卷 194-195,198页

作者：孙延波李菁华史红艳吉林大学基础医学院病原生物学教研室吉林长春130021

目的:构建昆虫表达载体pIZT/V5-His的基础上,建立能稳定高效表达mIL-4的昆虫细胞系。方法:PCR体外扩增mIL-4,将目的基因mIL-4和昆虫表达载体pIZT/V5-His用EcoRI和XbaI做双酶切,通过T4 DNA连接酶构建成含mIL-4目的基因的表达载体pIZT/V5-... 详细信息

目的:构建昆虫表达载体pIZT/V5-His的基础上,建立能稳定高效表达mIL-4的昆虫细胞系。方法:PCR体外扩增mIL-4,将目的基因mIL-4和昆虫表达载体pIZT/V5-His用EcoRI和XbaI做双酶切,通过T4 DNA连接酶构建成含mIL-4目的基因的表达载体pIZT/V5-His-IL4。采用脂质体法将重组DNA转染到生长良好的昆虫细胞Sf9中。转染后的第3天,用ELISA方法检测转染细胞的培养上清中分泌型蛋白mIL-4的含量。结果:转染后的昆虫细胞Sf9能产生大量的mIL-4,含量可达1 mg.L-1,明显高于对照组(0.003 mg.L-1)。结论:昆虫表达载体pIZT/V5-His可用于mIL-4的高效表达。

关键词：白细胞介素4 昆虫细胞Sf9 基因表达遗传载体

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弓形虫病治疗:从传统药物到纳米药物

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畜牧兽医学报 2023年第5期54卷 1834-1844页

作者：孙晓敬张磊田甜马茜姚佳汪洋西安医学院基础医学部病原生物学教研室西安710021

刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)是一种呈世界性分布的机会致病原虫,几乎感染所有的温血动物,引起人兽共患弓形虫病。免疫力正常的个体感染常呈隐性感染,无明显的临床症状;但免疫功能缺陷的人或动物感染则会导致严重后果,需进行有效治疗... 详细信息

刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)是一种呈世界性分布的机会致病原虫,几乎感染所有的温血动物,引起人兽共患弓形虫病。免疫力正常的个体感染常呈隐性感染,无明显的临床症状;但免疫功能缺陷的人或动物感染则会导致严重后果,需进行有效治疗。目前,弓形虫病已是全世界绵羊和山羊流产的常见原因,该病给人类健康和畜牧业生产都造成了严重影响。因此,控制人和动物弓形虫病对公共卫生和畜牧业经济发展极为重要。以往用于弓形虫病治疗的药物,由于其副作用和/或疾病分期的特点,治疗效果大大受限,然而纳米药物可有效克服传统药物的局限性。本文就纳米技术在弓形虫病治疗方面的新进展作一综述,以期为抗弓形虫病药物的研究提供新思路。

关键词：弓形虫传统药物纳米载药系统固体脂质纳米粒聚合物纳米粒子

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综合性评价在微生物学与免疫学实验教学改革中的应用

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中国免疫学杂志 2020年第10期36卷 1256-1261页

作者：姚佳徐文李薇马茜汪洋西安医学院基础医学部病原生物学教研室西安710021

实验教学是高等医学教学的重要环节,建立科学合理的实验教学评价体系,对深化实验教学改革,提高实验教学质量具有重要意义。我们在微生物学与免疫学实验教学改革中,对现有的"报告式评价"模式进行了改革,初步构建了一种兼顾平... 详细信息

实验教学是高等医学教学的重要环节,建立科学合理的实验教学评价体系,对深化实验教学改革,提高实验教学质量具有重要意义。我们在微生物学与免疫学实验教学改革中,对现有的"报告式评价"模式进行了改革,初步构建了一种兼顾平时的过程评价和期末的终结评价、理论考核和实操考核的综合性评价体系,并在实践中取得了良好的教学效果。

关键词：微生物学与免疫学实验教学综合性评价

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HPV16E7蛋白编码基因原核表达与鉴定

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四川大学学报（医学版） 2006年第2期37卷 187-190页

作者：施桥发王保宁李虹魏晓丽张卫东曹康蒋忠华李明远四川大学华西基础医学与法医学院微生物学教研室成都610041 成都医学院病原生物学教研室

目的研究HPV16E7蛋白的生物学特性及其细胞转化机制,对HPV16E7蛋白原核表达质粒进行构建、表达和鉴定。方法以临床确诊的HPV16感染患者子宫颈细胞DNA为模板,采用PCR方法扩增HPV16E7基因,经BamH和Hind双酶切后插入相同酶切pET32a(+)载体... 详细信息

目的研究HPV16E7蛋白的生物学特性及其细胞转化机制,对HPV16E7蛋白原核表达质粒进行构建、表达和鉴定。方法以临床确诊的HPV16感染患者子宫颈细胞DNA为模板,采用PCR方法扩增HPV16E7基因,经BamH和Hind双酶切后插入相同酶切pET32a(+)载体,转化JM109感受态细胞,并进行阳性克隆筛选。经IPTG对重组质粒进行蛋白诱导表达,SDS-PAGE和Westernblot检测目标蛋白表达情况。结果成功构建了原核表达质粒pET32/E7,HPV16E7-TRX融合蛋白在BL21(DE3)菌株中高效表达,在1mmol/LIPTG、30℃诱导条件下融合蛋白表达量占菌体总蛋白的30%左右。结论pET32/E7原核表达质粒的构建、HPV16E7融合蛋白的表达为进一步深入研究HPV16E7蛋白的生物学特性及其致细胞转化的作用机制奠定了基础。

关键词： HPV16 原核表达 SDS—PAGE 免疫印迹

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