检索结果-内蒙古大学图书馆

第三军医大学学报 2020年第7期42卷 692-698页

作者：陈鹏徐婷郭丹黄佳祎重庆医科大学基础医学院病理生理学教研室重庆400016 重庆医科大学附属第二医院三腺外科重庆400016

目的建立乳腺癌拉帕替尼耐药细胞株,探讨Hippo通路中YAP蛋白在HER2阳性乳腺癌细胞拉帕替尼耐药中的作用及机制。方法采用逐步增加剂量与高浓度反复间歇诱导乳腺癌细胞株Skbr3对拉帕替尼耐药,耐药株命名为Skbr3-LR。用拉帕替尼同时处理... 详细信息

目的建立乳腺癌拉帕替尼耐药细胞株,探讨Hippo通路中YAP蛋白在HER2阳性乳腺癌细胞拉帕替尼耐药中的作用及机制。方法采用逐步增加剂量与高浓度反复间歇诱导乳腺癌细胞株Skbr3对拉帕替尼耐药,耐药株命名为Skbr3-LR。用拉帕替尼同时处理亲本细胞和耐药细胞株,CCK-8法检测其耐药指数;结晶紫染色和平板克隆形成实验检测细胞的存活状况;定量PCR检测上皮-间质化改变。定量PCR及Western blot检测YAP、TAZ的表达。以维替泊芬阻断耐药细胞株Skbr3-LR中YAP下游通路的激活,CCK-8法检测其细胞活性的改变并计算IC50值的变化;结晶紫染色检测细胞存活数量的变化。定量PCR及Western blot检测YAP表达的改变。结果与亲本细胞比较,结晶紫染色和平板克隆形成实验结果均显示,耐药株存活细胞数量明显增多。亲本细胞耐药指数为3.61μmol/L,耐药株耐药指数上升约8倍,为29.26μmol/L。PCR结果显示,与亲本细胞比较,耐药细胞株的上皮标志物E-cadherin表达降低,而间质标志物Twist、Vinemtin和N-cadherin表达上升,YAP/TAZ表达上升,差异均有统计学意义(P<0.05)。Western blot结果显示,耐药细胞株中总YAP和磷酸化YAP表达均较亲本细胞显著上升(P<0.05)。以维替泊芬阻断耐药细胞株YAP下游通路的激活后,其耐药指数为2.98μmol/L,较未处理的Skbr3-LR耐药指数下降约4倍;其存活细胞数量明显降低,YAP表达也明显降低(P<0.05)。结论成功建立了拉帕替尼获得性耐药的乳腺癌细胞模型,其耐药机制可能与Hippo信号通路下游的关键效应因子YAP表达异常有关。

关键词：拉帕替尼乳腺癌 Hippo YAP

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依维莫司协同拉帕替尼降低HER2^+乳腺癌对拉帕替尼耐药

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基因组学与应用生物学 2020年第5期39卷 2411-2417页

作者：徐婷陈鹏郭丹黄佳祎重庆医科大学基础医学院病理生理学教研室重庆400016 重庆医科大学附属第二医院三腺外科重庆400016

研究依维莫司(Everolimus)联合拉帕替尼(Lapatinib)对HER2^+乳腺癌耐药细胞的影响。CCK-8法测定乳腺癌亲本细胞(skbr3)和耐药细胞(skbr3-LR)的细胞活性、半数抑制浓度(Half inhibitory concentration,IC50);CompuSyn软件计算联合作用指数(combined effect index,CI)值;流式细胞术检测对照组实验组skbr3-LR的周期;Western blotting方法检测各组AKT、m TOR、S6相关蛋白的表达量。依维莫司联合拉帕替尼使skbr3-LR对拉帕替尼的IC50从(27.13±0.3)下降到(6.79±0.04);20 nmol/L依维莫司联合5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L、40μmol/L拉帕替尼CI指数分别为0.24367、0.27861、0.28219、0.36679、0.41667;拉帕替尼联合依维莫司组G1期细胞百分数(69.84±0.93)%显著大于对照组(52.91±1.64)%(p<0.001),也显著高于拉帕替尼组(59.77±0.52)%(p<0.001)和依维莫司组(58.73±0.64)%(p<0.001);Western blotting结果显示skbr3-LR中p-mTOR比skbr3表达上调(p<0.001),20 nmol/L依维莫司或10μmol/L拉帕替尼单独处理skbr3-LR,以及联合用药组与skbr3-LR组相比p-mTOR均有显著下调(p<0.001,p<0.01,p<0.001)。依维莫司联合拉帕替尼可协同抑制skbr3-LR增殖,降低其拉帕替尼耐药性,其作用机制部分是通过下调AKT/mTOR/S6通路实现的。

关键词：依维莫司拉帕替尼乳腺癌 mTOR

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热休克蛋白90对结肠癌荷瘤小鼠肝脏功能的影响

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中国实验诊断学 2021年第5期25卷 740-743页

作者：于爽吴颖李佳昕齐航马娇艳林楠锦州市中心医院消化科辽宁锦州121000 吉林大学基础医学院病理生理学教研室吉林长春130021

目的探讨热休克蛋白90(HSP90)在结肠癌介导肝脏损伤中的作用,为HSP90抑制剂的临床应用提供一定的数据支持。方法健康的SPF级BALB/C雄性6-8周龄小鼠20只,将5×10^(6)结肠癌CT-26细胞接种至小鼠右后腿外侧,实验采用随机分组,分为对照... 详细信息

目的探讨热休克蛋白90(HSP90)在结肠癌介导肝脏损伤中的作用,为HSP90抑制剂的临床应用提供一定的数据支持。方法健康的SPF级BALB/C雄性6-8周龄小鼠20只,将5×10^(6)结肠癌CT-26细胞接种至小鼠右后腿外侧,实验采用随机分组,分为对照组和PU-H71组,每组各10只,PU-H71组经尾静脉给药(2mg/kg),每周2次,持续给药2周,对照组给予等量生理盐水。通过HE染色从病理学角度确定肝损伤程度;采用试剂盒检测小鼠血清中谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)的含量变化;通过酶联免疫吸附试验(ELISA)法分析血清中炎症因子白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达变化;最后,通过qPCR分析肝脏组织中线粒体自噬相关基因PINK、Parkin、p62和LC3的表达变化。结果相较于对照组,PU-H71处理组血清中AST、ALT和MDA含量明显降低(P<0.05),同时SOD含量明显升高(P<0.05);病理学结果显示PU-H71小鼠,肝小叶结构相对完整,肝血窦变窄程度较弱,相对清晰可见,肝细胞肿胀程度较轻;血清中促炎因子IL-1β、IL-6和TNF-α的表达明显降低(P<0.05);肝组织中线粒体自噬相关基因PINK、Parkin、p62和LC3的表达明显升高(P<0.05)。结论抑制HSP90可能通过调控肝细胞线粒体自噬影响结肠癌荷瘤小鼠肝功能。

关键词：热休克蛋白90,PU-H71 荷瘤小鼠肝脏线粒体自噬

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基于高压水动力注射基因转染法构建小鼠原发性肝癌模型的方法及研究进展

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中国癌症防治杂志 2022年第4期14卷 363-369页

作者：洪昕高铭舒许小君魏元元李小磊黄启超空军军医大学基础医学院生理与病理生理学教研室西安710000 西北大学生命科学学院西安710000 陕西中医药大学第二临床医学院西安710000 中国人民解放军第960医院济南250000

原发性肝癌发病率和死亡率不断上升,在预防、诊断和治疗方面对全球健康提出了更高挑战。建立原发性肝癌动物模型是筛选潜在治疗靶点和开展临床前研究的必要条件。基于高压水动力注射基因转染法构建小鼠原发性肝癌模型具有可靠、快速、... 详细信息

原发性肝癌发病率和死亡率不断上升,在预防、诊断和治疗方面对全球健康提出了更高挑战。建立原发性肝癌动物模型是筛选潜在治疗靶点和开展临床前研究的必要条件。基于高压水动力注射基因转染法构建小鼠原发性肝癌模型具有可靠、快速、灵活和节约成本等优势,为更好地了解人类肝癌的分子发病机制,测试抗肝癌药物的治疗潜力等提供了有效途径,近二十年来逐渐被研究者们应用。本文以高压水动力注射基因转染构建小鼠原发性肝癌模型的基本原理为切入点,综述该模型的具体构建方法及其近年来的研究进展,以期为原发性肝癌的临床前研究提供有价值的参考。

关键词：原发性肝癌高压水动力转染转座子小鼠模型

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胃饥饿素在缺血再灌注损伤介导肝纤维化中对基质金属蛋白酶/基质金属蛋白酶组织抑制因子的调控

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实用医学杂志 2020年第17期36卷 2353-2359页

作者：屈豫花刘仁贵秦燕大理大学基础医学院病理学与病理生理学教研室云南大理671000 大理大学第一附属医院普外二科云南大理671000

目的观察缺血再灌注损伤介导小鼠肝纤维化进程中,胃饥饿素(Ghrelin)对基质金属蛋白酶-13(MMP-13)、基质金属蛋白酶组织抑制因子-2(TIMP-2)的调控及调控后对肝纤维化逆转的作用。方法C57小鼠分为假手术组(Sham组)、HIRI组(H/R组)及Ghreli... 详细信息

目的观察缺血再灌注损伤介导小鼠肝纤维化进程中,胃饥饿素(Ghrelin)对基质金属蛋白酶-13(MMP-13)、基质金属蛋白酶组织抑制因子-2(TIMP-2)的调控及调控后对肝纤维化逆转的作用。方法C57小鼠分为假手术组(Sham组)、HIRI组(H/R组)及Ghrelin干预组(G-H/R组)。阻断70%入肝血流90 min后,恢复血流0、3、6、72 h及7、15 d,诱导小鼠肝纤维化,同时给予Ghrelin干预。检测小鼠血浆ALT水平;测定肝组织Hyp含量;RT-PCR检测肝组织α-SMA、Ⅰ型、Ⅲ型胶原、MMP-13及TIMP-2 mRNA表达水平;HE染色观察肝组织形态学变化,Masson染色观察肝组织中胶原沉积情况。结果G-H/R组血浆ALT水平、肝组织Hyp含量与同一时间点H/R组相比明显下降(P<0.05);G-H/R组与同一时间点H/R组比较,α-SMA、Ⅰ型、Ⅲ型胶原mRNA表达水平明显降低(P<0.05);肝组织病理形态学变化与与上述指标变化趋势一致;与H/R组相比,G-H/R 0、3、6、72 h组MMP-13 mRNA表达水平降低,G-H/R 7、15 d组升高(P<0.05),TIMP-2 mRNA表达水平均降低(P<0.05),MMP-13/TIMP-2 mRNA比值先降低后升高。结论Ghrelin在HIRI介导肝纤维化早期及进展期对MMP-13、TIMP-2均有调控作用,可使MMP-13/TIMP-2的分泌重新处于新的平衡,促使肝脏中ECM降解,抑制肝纤维化的发生和发展。

关键词： Ghrelin 肝缺血再灌注损伤肝纤维化 MMP-13 TIMP-2

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SPOC与雨课堂相融合的病理生理学教学改革探索

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中华医学教育杂志 2021年第5期41卷 416-420页

作者：骆亚莉李能莲方玲张秋菊甘肃中医药大学中西医结合学院兰州730000 甘肃中医药大学基础医学院病理学与病理生理学教研室兰州730000

为了满足病理生理学专业发展和课程建设的需求,传统教学模式必须与现代信息技术进行深度融合,改进教学设计和思路,从而提高教学水平。甘肃中医药大学教学团队在综合分析的基础上,结合本校教学实际,充分利用异步SPOC与雨课堂教学软件的... 详细信息

为了满足病理生理学专业发展和课程建设的需求,传统教学模式必须与现代信息技术进行深度融合,改进教学设计和思路,从而提高教学水平。甘肃中医药大学教学团队在综合分析的基础上,结合本校教学实际,充分利用异步SPOC与雨课堂教学软件的优势与特点,探索双平台融合应用的病理生理学教学方法策略建设智慧课堂,在课前—课中—课后进行线上线下教学的全程覆盖和对教学效果的实时监测分析,有助于弥补传统教学模式的不足,开拓教学改革的思路和策略,促进实现精准教学,提升教学质量。

关键词：小规模限制性在线课程雨课堂病理生理学教学设计教学改革

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病原生物学实验教学中应用多学科整合及虚拟实验的探索

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中国微生态学杂志 2020年第7期32卷 833-835页

作者：刘银辉刘磊张彩华李华军大连医科大学基础医学院微生态学教研室辽宁大连116044 大连医科大学基础医学院病原实验室辽宁大连116044 大连医科大学基础医学院病理生理学教研室辽宁大连116044

病原生物学作为一门实践性很强的学科,其实验教学在其中发挥重要的作用。为了提高病原生物学实验的系统性和可操作性,结合微生态学、医学微生物学及免疫学各自学科特点,进行以"抗生素诱导的肠道菌群失调"为例探讨病原生物学... 详细信息

病原生物学作为一门实践性很强的学科,其实验教学在其中发挥重要的作用。为了提高病原生物学实验的系统性和可操作性,结合微生态学、医学微生物学及免疫学各自学科特点,进行以"抗生素诱导的肠道菌群失调"为例探讨病原生物学整合实验。由于临床标本及实验条件的限制,采用可视化虚拟实验进行消化性溃疡中病原菌分离与鉴定及微生态菌群分析实验。这将为病原生物学实验教学的改革提供相应参考。

关键词：病原生物学整合实验虚拟实验正常菌群

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基于家庭的物理性康复疗法在慢性阻塞性肺疾病中的应用

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中华物理医学与康复杂志 2021年第6期43卷 560-563页

作者：杜舒婷邢彬张晶白冲河北北方学院基础医学院病理生理学教研室张家口075000 解放军陆军第81集团军医院呼吸内科张家口075000 海军军医大学(第二军医大学)长海医院呼吸与危重症医学科上海200433

慢性阻塞性肺疾病(COPD)对患者个人及社会危害巨大。肺康复(PR)作为目前最具成本效益的COPD治疗策略之一,有助于减少COPD患者住院次数,降低医疗费用,还能改善COPD患者运动耐力及生活质量。在当前新冠肺炎疫情影响下,以及有部分患者不愿... 详细信息

慢性阻塞性肺疾病(COPD)对患者个人及社会危害巨大。肺康复(PR)作为目前最具成本效益的COPD治疗策略之一,有助于减少COPD患者住院次数,降低医疗费用,还能改善COPD患者运动耐力及生活质量。在当前新冠肺炎疫情影响下,以及有部分患者不愿或不能外出进行PR治疗,故如何在家庭环境中进行PR训练具有重要现实意义。本文对基于家庭能开展的物理康复疗法进行综述,以期为居家环境下实施COPD康复治疗提供选择方案及理论指导。

关键词：慢性阻塞性肺疾病物理康复家庭环境肺康复治疗家庭治疗

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黄芪对睾丸衰老调控的相关研究进展

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康颐 2022年第13期 290-292页

作者：梁丁宁心宇李彩虹蔡章敏黄玲广西医科大学肿瘤医学院，广西南宁 530021 广西医科大学肿瘤医学院，广西南宁 530021 广西医科大学肿瘤医学院，广西南宁 530021 广西医科大学肿瘤医学院，广西南宁 530021 广西医科大学基础医学院病理生理学教研室，广西南宁 530021

睾丸衰老是机体衰老的表现之一，其不仅影响了男性生殖系统，而且与多种慢性病的发生发展相关，严重影响了男性的生理、心理健康，因此需要高度重视睾丸衰老的防治。本文拟从黄芪对睾丸组织的抗氧化能力、对睾丸支持细胞功能的保护作用... 详细信息

睾丸衰老是机体衰老的表现之一，其不仅影响了男性生殖系统，而且与多种慢性病的发生发展相关，严重影响了男性的生理、心理健康，因此需要高度重视睾丸衰老的防治。本文拟从黄芪对睾丸组织的抗氧化能力、对睾丸支持细胞功能的保护作用、对睾丸间质细胞功能的促进作用进行阐述，为临床研究黄芪防治睾丸衰老提供参考。

关键词：黄芪睾丸衰老

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蛋白激酶B2慢病毒载体的构建及其沉默效果的验证

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解剖学杂志 2021年第2期44卷 118-122页

作者：戴研平高晓勤贵州医科大学基础医学院病理学与病理生理学教研室贵阳550004 遵义医药高等专科学校基础医学院遵义563006 岳阳市岳阳楼区人民医院岳阳414000

目的:利用RNA干扰技术,以蛋白激酶B 2(AKT2)的mRNA为靶点,设计、构建AKT-2的RNA干扰慢病毒载体,并对其沉默效果进行验证。方法:根据目的基因设计3个小干扰RNA(siRNA)靶点,进行引物合成。将单链的引物退火成双链oligo序列,连接入双酶切... 详细信息

目的:利用RNA干扰技术,以蛋白激酶B 2(AKT2)的mRNA为靶点,设计、构建AKT-2的RNA干扰慢病毒载体,并对其沉默效果进行验证。方法:根据目的基因设计3个小干扰RNA(siRNA)靶点,进行引物合成。将单链的引物退火成双链oligo序列,连接入双酶切线性化的RNA干扰载体。测序验证正确的转化子,进行高纯度质粒抽提。提取3种阳性克隆质粒测序,转染HEK293-T细胞后产生慢病毒质粒。实验大鼠被随机分为5组,每组10只,空白对照组不注射慢病毒,NC-shRNA阴性感染组、PL-AKT2-shRNA-1感染组、PL-AKT2-shRNA-2感染组、PL-AKT2-shRNA-3感染组。大鼠附睾分别被注射200μL含有NC-shRNA、PL-AKT2-shRNA-1、PLAKT2-shRNA-2、PL-AKT2-shRNA-3的病毒液;免疫印迹检测大鼠附睾AKT2的蛋白沉默效果。结果:测序结果证明3种慢病毒载体被包装成功。感染大鼠附睾后,AKT2的蛋白表达量均较阴性感染组和正常对照组明显降低,其中以PL-AKT2-shRNA-3质粒组干扰效果更为有效。结论:成功设计了AKT-2基因的RNA干扰靶点和制备了AKT-2基因的慢病毒载体,基因沉默效果明显。

关键词：蛋白激酶B2 慢病毒干扰基因沉默附睾

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