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细胞色素P4502A13野生型/突变体稳定表达Flp-In^(TM)CHO细胞系的建立

郑州大学学报（医学版） 2021年第2期56卷 191-195页

作者：郑丹丹李靖王永林李勇军刘亭贵州医科大学基础医学院病理生理学教研室贵阳550025 贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室/省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室贵阳550004 贵州医科大学药学院贵阳550025 贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心贵阳550004

目的:构建稳定表达细胞色素P4502A13(CYP2A13)野生型(CYP2A13*1)和5种突变体的Flp-In^(TM)CHO细胞系。方法:构建CYP2A13野生型、各突变体的pcDNA5/FRT重组质粒。将pcDNA5-CYP2A13*1、*2、*5、*6、*8和*9重组质粒分别转染至Flp-In^(TM)CHO细胞中,用实时荧光定量PCR、Western blot和黄曲霉毒素B1(AFB1)细胞毒性实验检测转染细胞中CYP2A13表达量及其活性,筛选稳定表达CYP2A13野生型和各突变体的Flp-In^(TM)CHO细胞。结果:和转染pcDNA5/FRT空质粒的Flp-In^(TM)CHO细胞相比,转染各CYP2A13野生型和各突变体的CHO细胞中CYP2A13 mRNA和蛋白表达水平增加,对AFB1毒性敏感度增加(P<0.05)。结论:成功建立了稳定表达CYP2A13*1、*2、*5、*6、*8和*9 Flp-In^(TM)CHO细胞系。

关键词：细胞色素P4502A13 黄曲霉毒素B1 突变体稳定表达 Flp-In^(TM)CHO细胞

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医学影像学专业病理学CBL教学案例库的建设与应用

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中华医学教育探索杂志 2020年第5期19卷 543-546页

作者：李娟李淑蓉张录顺刘馨莲吴晓波成都医学院基础医学院病理学与病理生理学教研室 610500 四川省肿瘤医院超声医学中心成都610041

建立针对医学影像学专业的病理学CBL教学案例库,其内容包括主诉及现病史、病例特点、影像学检查结果、问题、术中所见和讨论。该案例库以手术切除的新鲜标本为切入点获取案例,并回顾患者术前进行的各项影像学检查,以尽可能完善的资料库... 详细信息

建立针对医学影像学专业的病理学CBL教学案例库,其内容包括主诉及现病史、病例特点、影像学检查结果、问题、术中所见和讨论。该案例库以手术切除的新鲜标本为切入点获取案例,并回顾患者术前进行的各项影像学检查,以尽可能完善的资料库形式,收集每个案例的全部信息,包括术后病理诊断报告。将案例库用于病理学CBL教学中,能激发学生学习的主动性和积极性,培养影像诊断思维方式,提高教学效果。

关键词：病理学医学影像学专业 CBL 案例库

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基于网络药理学和分子对接探讨蒙药额尔敦-乌日勒治疗癫痫的潜在作用机制

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亚太传统医药 2022年第2期18卷 198-204页

作者：于凯卜凡李鹏苏秦夏蕾薛金晔郝雷内蒙古医科大学第一临床医学院内蒙古呼和浩特010050 内蒙古医科大学附属医院儿科内蒙古呼和浩特010050 内蒙古医科大学内蒙古临床医学院内蒙古呼和浩特010110 内蒙古医科大学基础医学院病理生理学教研室内蒙古呼和浩特010110

利用网络药理学筛选额尔敦-乌日勒抗癫痫的作用靶点及潜在作用机制,为临床治疗癫痫提供理论依据。从有关文献中确定额尔敦-乌日勒的有效成分,采用TCMSP数据库筛选出额尔敦-乌日勒的有效活性成分及靶标;通过TTD、OMIM数据库筛选癫痫的预... 详细信息

利用网络药理学筛选额尔敦-乌日勒抗癫痫的作用靶点及潜在作用机制,为临床治疗癫痫提供理论依据。从有关文献中确定额尔敦-乌日勒的有效成分,采用TCMSP数据库筛选出额尔敦-乌日勒的有效活性成分及靶标;通过TTD、OMIM数据库筛选癫痫的预测靶点,将两者靶点进行映射交集,利用STRING数据库构建蛋白互作网络图并筛选出47个核心靶点;再通过AmiGO2平台进行GO(Gene Ontology)生物过程和KEGG信号通路富集分析,利用Cytoscape 3.7.2软件构建活性成分-关键靶点-通路网络图,分子对接显示木犀草素、3-甲基环十五烷酮对MAOA、MMP9、EGFR等具有较强的亲和力。网络药理学研究提示,额尔敦-乌日勒通过降低表皮生长因子(EGF)的mRNA表达,促进癫痫凋亡因子表达和增强脑内抑制性神经递质的表达,通过多途径抑制脑内神经元的同步化放电,从而达到治疗癫痫的目的。通过探讨蒙药额尔敦-乌日勒治疗癫痫多靶点多通路的作用特点,为额尔敦-乌日勒治疗癫痫的下一步研究及临床应用提供理论依据。

关键词：额尔敦-乌日勒民族医药癫痫网络药理学分子对接

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多烯紫杉醇对前列腺癌细胞基因SPC24表达的影响

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蛇志 2020年第2期32卷 146-149页

作者：陈穗霞刘承武广西医科大学基础医学院病理生理学教研室广西南宁530021

目的前列腺癌在中国的发病率逐年上升,其致病诱因包括种族、年龄、饮食、遗传等。SPC24是核分裂周期80(NDC80)复合物的亚基之一,参与细胞有丝分裂中的着丝点-纺锤体微管精准耦合、染色体精确均分等过程。目前前列腺癌的发病机制是否与基... 详细信息

目的前列腺癌在中国的发病率逐年上升,其致病诱因包括种族、年龄、饮食、遗传等。SPC24是核分裂周期80(NDC80)复合物的亚基之一,参与细胞有丝分裂中的着丝点-纺锤体微管精准耦合、染色体精确均分等过程。目前前列腺癌的发病机制是否与基因SPC24表达的相关研究鲜有报道。本研究探究多烯紫杉醇(docetaxel,DT)对前列腺癌细胞基因SPC24表达的影响,探讨其成为潜在前列腺癌潜在治疗的生物标志物可能性。方法体外培养前列腺癌细胞DU145,随机分成实验组和阴性对照组。其中实验组加入含不同浓度DT(10^-8 mol/L、10^-7 mol/L、10^-6 mol/L、10^-5 mol/L)的培养基,阴性对照组加入等体积培养液。经干预24、48、72、96 h后,采用Cell Counting Kit-8(CCK8)法检测DT对前列腺癌细胞DU145增殖的影响,利用RT-qPCR和Western blotting检测技术分别检测SPC24 mRNA和SPC24蛋白的表达水平。结果DT可显著抑制DU145细胞增殖,且随DT浓度的增加抑制率逐渐升高,于72 h达到最高。选取抑制效果最佳的10^-5 mol/L浓度的DT作用72 h后,SPC24 mRNA表达水平显著降低(P<0.05),SPC24蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论DT能抑制前列腺癌细胞DU145增殖,其作用机制可能与SPC24表达下调有关,SPC24可能是前列腺癌治疗的潜在靶点。

关键词：多烯紫杉醇前列腺癌 SPC24

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高通量测序分析类风湿关节炎患者外周血单个核细胞circRNAs表达谱差异

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免疫学杂志 2019年第3期35卷 262-268页

作者：杨旋张梦洁张蓓青岛大学基础医学院免疫学系陆军军医大学病理生理学教研室

目的探讨类风湿关节炎(RA)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中环状RNA (circRNA)表达谱的差异,并结合临床验证筛选出可辅助RA诊断的分子标志物。方法采用高通量测序技术,检测4例RA患者和3例健康对照者PBMCs中circRNA和mRNA表达;基因聚类分... 详细信息

目的探讨类风湿关节炎(RA)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中环状RNA (circRNA)表达谱的差异,并结合临床验证筛选出可辅助RA诊断的分子标志物。方法采用高通量测序技术,检测4例RA患者和3例健康对照者PBMCs中circRNA和mRNA表达;基因聚类分析差异表达的circRNAs,KEGG pathway分析差异表达的mRNAs;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法在32例RA患者和20例健康对照者中验证部分差异表达circRNAs,结合ROC曲线分析其作为RA诊断分子标志物的潜力。结果高通量测序结果显示,RA组和健康对照组中共有71种显著差异表达的circRNAs,其中41种上调,30种下调,生物信息学分析显示,涉及的通路多与炎症和转录活性相关。多样本qRT-PCR验证结果显示hsa_circ_0000396和hsa_circ_0130438在RA患者PBMCs中的表达水平显著低于健康对照组(P<0.05),ROC曲线分析进一步表明显示hsa_circ_0000396有望成为RA诊断分子标志物。结论在RA患者PBMCs中存在差异表达的circRNAs,它们在RA的发生发展过程中可能起调控作用,其中hsa_circ_0000396有成为RA诊断分子标志物的潜能。

关键词：高通量测序类风湿关节炎环状RNA 外周血单个核细胞 hsa_circ_0000396

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棕榈酸激活人脐静脉内皮细胞PP2C降低eNOS Ser1177的磷酸化

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细胞与分子免疫学杂志 2020年第6期36卷 520-526页

作者：王敬杰张倩秦思骆妍蓓于敏丁菁陆德琴贵州医科大学基础医学院病理生理学教研室贵州贵阳550025 贵州医科大学贵州省常见慢性疾病发病机制及药物研究重点实验室贵州贵阳550025

目的探讨棕榈酸(PA)激活人脐静脉内皮细胞(HUVEC)蛋白磷酸酶2C(PP2C)对内皮一氧化氮合酶第1177位丝氨酸(eNOS Ser1177)磷酸化的调控作用。方法HUVEC随机分为对照组、PA组、特异性PP2C抑制剂血根碱(San)联合PA组以及转染PP2Cα特异性小干... 详细信息

目的探讨棕榈酸(PA)激活人脐静脉内皮细胞(HUVEC)蛋白磷酸酶2C(PP2C)对内皮一氧化氮合酶第1177位丝氨酸(eNOS Ser1177)磷酸化的调控作用。方法HUVEC随机分为对照组、PA组、特异性PP2C抑制剂血根碱(San)联合PA组以及转染PP2Cα特异性小干扰RNA(siRNA)组。采用Western blot法检测eNOS总蛋白、eNOS Ser1177磷酸化水平和PP2Cα蛋白水平,二氨基荧光素-FM二乙酸酯(DAF-FM DA)负载法检测细胞内一氧化氮(NO)含量,免疫共沉淀法观察eNOS与PP2C之间的共定位关系。结果与对照组相比,PA处理组eNOS Ser1177磷酸化水平及NO含量均降低,San预处理组可逆转以上变化。敲低PP2Cα蛋白表达水平后,eNOS Ser1177磷酸化水平增加。eNOS与PP2C在细胞内共定位。结论PA通过激活HUVEC的PP2C引起eNOS Ser1177磷酸化水平降低。

关键词：棕榈酸(PA) 蛋白磷酸酶2C(PP2C) 内皮一氧化氮合酶(eNOS) 人脐静脉内皮细胞(HUVEC)

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地方院校医学本科生科研方法教育的现状与对策分析

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医学教育研究与实践 2020年第3期28卷 396-400页

作者：张立民冯妞妞郜思齐史宝林张玉平赵自刚河北北方学院微循环研究所/基础医学院病理生理学教研室河北张家口075000

科研方法教育对于培养医学生的创新意识与科研思维具有重要作用。通过调查问卷方式调查了研究生在本科阶段是否了解医学科研以及课程学习、参加科学研究、发表论文等情况,结合研究生复试情况,分析地方院校医学本科生接受科研方法教育的... 详细信息

科研方法教育对于培养医学生的创新意识与科研思维具有重要作用。通过调查问卷方式调查了研究生在本科阶段是否了解医学科研以及课程学习、参加科学研究、发表论文等情况,结合研究生复试情况,分析地方院校医学本科生接受科研方法教育的现状,浅谈加强地方院校医学本科生科研方法教育的重要性,从学生、教师、学校不同层面提出了加强医学生科学精神培养的对策,以期逐步建立地方院校医学生"接触科研-了解科研-参与科研-主持科研"的"四步走"模式,推动高素质创新型医学专门人才的培养。

关键词：科研方法教育医学本科生科学精神

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HIF-1介导的自噬在心脏疾病中的研究进展

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基础医学与临床 2021年第8期41卷 1186-1189页

作者：张刘杰李静吴博哈尔滨医科大学基础医学院病理生理学教研室黑龙江哈尔滨150086 哈尔滨医科大学附属第二医院老年病科黑龙江哈尔滨150081

低氧诱导因子1(HIF-1)通过调控靶基因表达维持机体供氧和需氧平衡,保持细胞氧稳态,并调节缺血心肌自噬水平,其靶基因表达产物BNIP3蛋白参与此调节过程。

关键词：低氧诱导因子1 低氧自噬心脏

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结直肠癌中K-ras基因突变与TAK1、MAP4K2蛋白表达的相关性研究

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四川大学学报（医学版） 2019年第1期50卷 61-65页

作者：马其钊杨以文马岩林廖诗平郑焱江张姝曹悦岩张霁王玉芳四川大学华西基础医学与法医学院病理生理学教研室成都610041 四川大学华西基础医学与法医学院法医物证学教研室成都610041 四川大学华西基础医学与法医学院机能学实验室成都610041

目的分析K-ras基因突变、转化生长因子激酶1(TAK1)蛋白和MAP4K2蛋白的表达与结直肠癌临床病理特征的关系,并分析K-ras基因突变与TAK1、MAP4K2蛋白表达的相关性。方法应用DNA测序法检测76例结直肠癌样本中K-ras基因突变情况,应用免疫组... 详细信息

目的分析K-ras基因突变、转化生长因子激酶1(TAK1)蛋白和MAP4K2蛋白的表达与结直肠癌临床病理特征的关系,并分析K-ras基因突变与TAK1、MAP4K2蛋白表达的相关性。方法应用DNA测序法检测76例结直肠癌样本中K-ras基因突变情况,应用免疫组化法检测样本中TAK1和MAP4K2蛋白表达情况。结果76例结直肠癌中,K-ras基因突变率为32.89%(25例),K-ras基因突变与肿瘤分化程度有关(P<0.05),与浸润深度、是否有淋巴结转移无关;TAK1阳性率为48.68%,MAP4K2阳性率为46.05%,TAK1蛋白表达和MAP4K2蛋白表达均与肿瘤分化程度、是否有淋巴结转移有关(P<0.05),与浸润深度无关。在76例结直肠癌中,K-ras基因突变与TAK1蛋白表达、MAP4K2蛋白表达均无相关性(P>0.05),TAK1蛋白表达与MAP4K2蛋白表达之间无相关性;在25例K-ras基因突变的结直肠癌中,TAK1蛋白表达与MAP4K2蛋白表达之间呈正相关(r=0.402,P<0.028)。结论 K-ras基因突变、TAK1和MAP4K2蛋白表达均与结直肠癌的肿瘤分化程度有关,与浸润深度无关;在K-ras基因突变的结直肠癌中,TAK1蛋白表达与MAP4K2蛋白表达之间呈正相关。

关键词：结直肠癌 K-ras TAK1 MAP4K2

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微小RNA-153在砷致肝细胞凋亡过程中的表达变化及其调控作用

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中华地方病学杂志 2020年第10期39卷 703-709页

作者：杨毅刘丽谢汝佳汤雷郑璐蔡爽陈雨丝粱猜郭怡歆杨勤韩冰贵州医科大学基础医学院病理生理学教研室贵州省常见慢性疾病发病机制及药物研究重点实验室贵阳550000 贵州医科大学公共卫生教研室贵阳550000

目的探讨砷诱导内质网应激致肝细胞凋亡过程中微小RNA-153(miR-153)表达变化及调控组蛋白H3第4位赖氨酸(H3K4)甲基转移酶(SET7/9)和组蛋白H3K4一甲基化(H3K4me1)水平变化的机制。方法体外培养人正常肝细胞(L-02细胞),根据不同处理方式... 详细信息

目的探讨砷诱导内质网应激致肝细胞凋亡过程中微小RNA-153(miR-153)表达变化及调控组蛋白H3第4位赖氨酸(H3K4)甲基转移酶(SET7/9)和组蛋白H3K4一甲基化(H3K4me1)水平变化的机制。方法体外培养人正常肝细胞(L-02细胞),根据不同处理方式分为对照、砷处理、砷+阴性转染、砷+miR-153上调和砷+miR-153下调组,其中砷+阴性转染、砷+miR-153上调和砷+miR-153下调组转染质粒与转染试剂均按照3μg∶8μl进行转染。24 h后,砷处理、砷+阴性转染、砷+miR-153上调和砷+miR-153下调组再以100μmol/L亚砷酸钠(NaAsO2)作为终浓度处理24 h;对照组加入与NaAsO2等体积的磷酸盐缓冲液(PBS)处理24 h。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测各组细胞miR-153表达水平;流式细胞术检测各组细胞凋亡和周期情况;实时无标记细胞动态分析(RTCA)仪检测细胞增殖情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组细胞内质网标志蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、SET7/9及H3K4me1蛋白表达水平。结果各组细胞miR-153表达水平比较,差异有统计学意义(F=10.73,P<0.05)。与对照组[(41.10±6.08)%]比较,砷处理组miR-153表达水平[(4.35±0.20)%]明显降低(P<0.05);与砷+阴性转染组[(10.00±2.40)%]比较,砷+miR-153上调组miR-153表达水平[(157.70±42.70)%]明显升高(P<0.05),砷+miR-153下调组miR-153表达水平[(4.20±0.28)%]明显降低(P<0.05)。各组细胞总凋亡率、G1期细胞比例比较,差异有统计学意义(F=29.69、104.32,P均<0.05)。与对照组比较,砷处理、砷+miR-153上调、砷+miR-153下调组细胞总凋亡率、G1期细胞比例明显升高(P均<0.05);与砷+阴性转染组比较,砷+miR-153上调组细胞总凋亡率、G1期细胞比例明显下降(P均<0.05),砷+miR-153下调组细胞总凋亡率、G1期细胞比例明显升高(P均<0.05)。各组细胞增殖率比较差异有统计学意义(F=799.35,P<0.05)。与对照组比较,砷处理、砷+miR-153上调、砷+miR-153下调组细胞增殖率明显下降(P均<0.05);与砷+阴性转染组比较,砷+miR-153上调组细胞增殖率升高(P<0.05),砷+miR-153下调组细胞增殖率下降(P<0.05)。各组细胞SET7/9、GRP78和H3K4me1蛋白表达水平比较,差异有统计学意义(F=78.52、52.13、54.32,P均<0.05)。与对照组比较,砷处理组SET7/9、GRP78和H3K4me1蛋白表达水平明显升高(P均<0.05);与砷+阴性转染组比较,砷+miR-153上调组SET7/9、GRP78和H3K4me1蛋白表达水平明显下降(P均<0.05),砷+miR-153下调组SET7/9、GRP78和H3K4me1蛋白表达水平明显升高(P均<0.05)。结论miR-153在砷诱导内质网应激致肝细胞凋亡过程中具有重要作用,其表达和调控与SET7/9和H3K4me1水平变化有关。

关键词：砷中毒细胞凋亡微小RNA-153 组蛋白H3第4位赖氨酸甲基转移酶组蛋白H3第4位赖氨酸一甲基化

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