检索结果-内蒙古大学图书馆

重叠延伸PCR技术定点突变TFEB原核表达载体的构建及体外诱导表达和纯化

吉林大学学报（医学版） 2022年第5期48卷 1109-1115页

作者：焦凤娟刘俊杰卢思维姜东君济宁医学院精神卫生学院山东省行为医学重点实验室山东济宁272067

目的:基于重叠延伸PCR(SOE PCR)技术构建转录因子EB(TFEB)丝氨酸114位点突变体原核表达质粒,并进行体外诱导表达和纯化。方法:根据SOE PCR技术原理设计突变引物,以pGEX-6p-1-TFEB质粒为模板,分别采用外侧引物F和R及突变引物F_(n)和R_(n... 详细信息

目的:基于重叠延伸PCR(SOE PCR)技术构建转录因子EB(TFEB)丝氨酸114位点突变体原核表达质粒,并进行体外诱导表达和纯化。方法:根据SOE PCR技术原理设计突变引物,以pGEX-6p-1-TFEB质粒为模板,分别采用外侧引物F和R及突变引物F_(n)和R_(n)进行第1步PCR扩增,获得含突变位点的产物1和产物2。经第2步PCR退火延伸对产物1和产物2进行重叠拼接,以拼接后DNA片段为模板,采用外侧引物F和R进行第3步PCR扩增获得含突变位点的目的DNA;将其克隆至pGEX-6p-1载体,采用BamHⅠ和SalⅠ进行酶切鉴定,DNA测序验证突变结果。于大肠杆菌(***)中分别采用不同浓度异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)在不同条件下诱导TFEB及其突变体重组蛋白表达。Glutathione-Sepharose 4B琼脂糖凝珠分离纯化蛋白,SDS-PAGE凝胶电泳检测纯化产物蛋白浓度和相对分子质量。结果:第1步PCR扩增获得均含有突变位点的2条DNA片段,经第2步PCR退火延伸和第3步PCR扩增后获得大量含有突变位点的完整DNA片段。双酶切鉴定,连接的DNA片段与目的片段大小一致。DNA测序显示TFEB的114位丝氨酸(TCT)成功突变为丙氨酸(GCT)。在0.5 mmol·L^(-1)IPTG、16℃诱导过夜条件下获得TFEB及其突变体的可溶性蛋白表达。SDS-PAGE凝胶电泳,纯化后蛋白浓度较高,分子大小正确。结论:利用SOE PCR技术成功实现了TFEB丝氨酸114位点的定点突变,并且TFEB及其突变体基因在***中成功表达。

关键词：转录因子EB 重叠延伸PCR 定点突变融合蛋白丝氨酸丙氨酸

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青蒿素与牛病毒性腹泻病毒NS5B蛋白的分子对接预测及其抗病毒作用

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中国畜牧兽医 2022年第9期49卷 3581-3588页

作者：邵百卉姜东君谢艺萌刘思雨邵子益张泽财计红朱战波黑龙江八一农垦大学动物科技学院大庆163319 黑龙江省牛病防控工程技术研究中心大庆163319 济宁医学院精神卫生学院山东省行为医学重点实验室济宁272067

【目的】采用分子对接以及体外试验确定青蒿素对牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)复制的抑制作用,为抗病毒药物和制剂开发提供新思路。【方法】以BVDV-NS5B蛋白为作用靶点,通过PDB数据库检索蛋白三维晶体结构,并对... 详细信息

【目的】采用分子对接以及体外试验确定青蒿素对牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)复制的抑制作用,为抗病毒药物和制剂开发提供新思路。【方法】以BVDV-NS5B蛋白为作用靶点,通过PDB数据库检索蛋白三维晶体结构,并对其结构进行适当修饰处理;检索TCMSP数据库中的青蒿素结构,应用Autodock软件将两者进行分子对接及结合能打分。随后采用CCK-8试剂盒测定青蒿素对MDBK细胞的最大安全浓度;将选定浓度的青蒿素进行梯度稀释,采用先加病毒后加药物、先加药物后加病毒、中药和病毒同时作用的3种不同加药方式进行药物抗病毒试验,确定对病毒的最佳药物抑制浓度、预防浓度和杀灭浓度。应用实时荧光定量PCR法检测3种药物作用方式下BVDV的拷贝数,进一步明确药物对BVDV复制的作用。【结果】分子对接数据表明青蒿素与BVDV-NS5B存在相互作用,结合自由能为-28.6748 kJ/mol。青蒿素在MDBK细胞上的最佳药物安全浓度为100μmol/L。3种作用方式下青蒿素浓度为100μmol/L时均可有效影响BVDV的复制,青蒿素对BVDV的抑制作用最为明显。【结论】青蒿素可与BVDV-NS5B蛋白靶点互作,并能在MDBK细胞上有效抑制BVDV的复制,本研究为抗BVDV中药筛选奠定了基础。

关键词：青蒿素牛病毒性腹泻病毒(BVDV) 抗病毒活性分子对接病毒复制

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肠道菌群在抑郁症诊断及作用机制中的研究进展

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中华诊断学电子杂志 2021年第2期9卷 141-144页

作者：韩雪雪车荣波翟金国陈敏济宁医学院精神卫生学院 272013 山东省行为医学重点实验室山东省精神疾病诊治与行为干预协同创新中心济宁医学院精神医学研究院

抑郁症是一种常见的精神障碍疾病,具有高致残率、高自杀率和治疗难度大的特点。目前研究发现,肠道菌群与抑郁症存在密切的联系,而且微生物标记物在抑郁症诊断中的作用也逐渐被认识。肠道菌群通过作用于神经、免疫、内分泌等系统影响大... 详细信息

抑郁症是一种常见的精神障碍疾病,具有高致残率、高自杀率和治疗难度大的特点。目前研究发现,肠道菌群与抑郁症存在密切的联系,而且微生物标记物在抑郁症诊断中的作用也逐渐被认识。肠道菌群通过作用于神经、免疫、内分泌等系统影响大脑功能,其可能在抑郁症发生发展中起至关重要的作用。随着研究的不断深入,肠道菌群标记物有望填补抑郁症生物学诊断的空缺。

关键词：肠道菌群抑郁症诊断作用机制

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济宁地区孕中期孕妇血清学筛查指标中位数库的建立

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济宁医学院学报 2019年第4期42卷 267-270,278页

作者：周洪亮郭克建张健陈晓芳张华丽周旋济宁市妇幼保健计划生育服务中心济宁272000 济宁医学院山东省出生缺陷研究与转化协同创新中心济宁272067 济宁医学院精神卫生学院山东省行为医学重点实验室济宁272067

目的根据济宁本地区2014—2016年进行产前筛查的孕中期孕妇血清学标志物甲胎蛋白(AFP)、游离β-人绒毛膜促性腺激素(freeβ-HCG)和游离雌三醇(uE3)的中位数与软件内嵌中位数对比,校正并建立本地区的中位数数据库。方法以济宁地区3年154... 详细信息

目的根据济宁本地区2014—2016年进行产前筛查的孕中期孕妇血清学标志物甲胎蛋白(AFP)、游离β-人绒毛膜促性腺激素(freeβ-HCG)和游离雌三醇(uE3)的中位数与软件内嵌中位数对比,校正并建立本地区的中位数数据库。方法以济宁地区3年154424份孕中期孕妇样本为目标人群,运用时间免疫荧光技术检测3项血清学标志物的浓度,经lifecycle4.0 Rev.4软件计算3年的中位数,与软件内嵌中位数计算方法同时筛查风险进行对比,利用SPSS19.0软件的非参数检验方法比较3年中位数之间的差异,运用χ^2检验比较筛查结果。结果AFP的中位数2014年与2015年两组比2016年的偏高,差异有统计学意义。freeβ-HCG、uE3的中位数2014—2016年间差异没有统计学意义。济宁地区AFP、freeβ-HCG、uE3的中位数与软件内嵌高加索人种中位数进行对比均存在偏差,其中uE3受人种的差异影响更大。经本地区中位数校正的筛查阳性率上升。结论通过济宁地区AFP、freeβ-HCG、uE3 3个软件内嵌中位数进行本地化校正可减低血清筛查出生缺陷的假阳性率。

关键词：血清学筛查中位数数据库质量控制

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功能失调性态度对医学生心理应激与焦虑情绪的中介作用

功能失调性态度对医学生心理应激与焦虑情绪的中介作用

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中华医学会第二十次全国行为医学学术会议

作者：张慧王明慧张宁刘传新李功迎吴伊丽刘燕 272067 济宁医学院精神卫生学院山东省行为医学重点实验室

目的探讨医学生功能失调性态度在心理应激与焦虑情绪间的中介作用.方法采用随机整群抽样,使用功能失调性态度量表(DAS)、青少年生活事件量表(ASLEC)、贝克焦虑量表(BAI)等对271名在校医学生进行问卷调查.使用逐步检验法检验中介作用.... 详细信息

目的探讨医学生功能失调性态度在心理应激与焦虑情绪间的中介作用.方法采用随机整群抽样,使用功能失调性态度量表(DAS)、青少年生活事件量表(ASLEC)、贝克焦虑量表(BAI)等对271名在校医学生进行问卷调查.使用逐步检验法检验中介作用.结果男生功能失调性态度得分(130.76±26.25)高于女生(120.03±24.82),差异具有统计学意义(t=3.274,P=0.001);心理应激与焦虑情绪(r=0.302,P＜0.01)、功能失调性态度与心理应激(r=0.130,P＜0.05)、功能失调性态度与焦虑情绪(r=0.302,P＜0.01)分别呈正相关;逐步检验法显示功能失调性态度对心理应激与焦虑情绪存在中介作用,中介效应占总效应的17.72％.结论心理应激可直接或间接影响医学生的焦虑情绪,功能失调性态度在心理应激与焦虑情绪之间起中介作用,其中介作用具有性别差异,即对男生焦虑情绪仅起部分中介作用,但对女生焦虑情绪起完全中介作用.

关键词：医学生功能失调性态度心理应激焦虑情绪中介作用

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大学生抑郁情绪预测因子:随访及队列研究系统综述与meta分析

大学生抑郁情绪预测因子:随访及队列研究系统综述与meta分析

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中华医学会第二十次全国行为医学学术会议

作者：张宁张慧王明慧包广义季丙元吴伊丽刘传新李功迎刘燕 272067 济宁医学院精神卫生学院山东省行为医学重点实验室

目的探讨大学生抑郁情绪的预测因子,为大学生抑郁情绪的预防和干预提供信息和依据.方法检索PubMed/Medline,Springerlink,PsycINFO,EBSCOhost,Cochrane review,维普数据库(VIP)、中国学术文献总库(CNKI)、万方数据库等中英文相关数据... 详细信息

目的探讨大学生抑郁情绪的预测因子,为大学生抑郁情绪的预防和干预提供信息和依据.方法检索PubMed/Medline,Springerlink,PsycINFO,EBSCOhost,Cochrane review,维普数据库(VIP)、中国学术文献总库(CNKI)、万方数据库等中英文相关数据库,纳入合格的大学生抑郁情绪预测因子相关队列或随访研究,采用Stata 13.0统计软件对纳入文献进行meta分析,根据异质性检验结果选择相应效应模型,计算各影响因素合并相对危险度(relative risk,RR)及其95％可信区间(confidence interval,CI).结果 13个合格的中外文随访队列研究被纳入,共涵盖22122名大学生.各预测因子合并RR值及95％ CI依次为：性别(RR=1.15,95％CI：1.05～1,25)、基线抑郁(RR=1.28,95％ CI：1.10～ 1.45)、神经质或精神质(RR=1.25,95％ CI：1.04～1.45)、负性自动思维或负性反刍(RR=1.03,95％ CI：1.01 ～ 1.05)、儿童虐待(RR=1.05,95％ CI：1.02～ 1.08)、性虐待(RR=1.01,95％ CI：1.00～1.02)、生活压力事件(RR=1.16,95％ CI：1.04～1.27).结论女性、抑郁史、神经质或精神质、儿童期被虐待(包括性虐待)经历、压力事件等可作为大学生抑郁情绪的独立预测因子.提示我们,大学生心理健康教育及心理干预措施的实施可围绕这些方面开展.

关键词：大学生抑郁情绪队列研究随访研究预测因子

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大学生抑郁症随机对照干预研究:系统综述与meta分析

大学生抑郁症随机对照干预研究:系统综述与meta分析

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中华医学会第二十次全国行为医学学术会议

作者：王明慧张慧张宁周旋郁浩王鑫王帅杨榆彭琳刘燕 272067 济宁医学院精神卫生学院山东省行为医学重点实验室

目的针对大学生抑郁症的随机对照干预研究,分析不同干预方法对大学生抑郁症的干预效果,为制定有效的大学生抑郁症干预措施提供依据.方法全面系统地检索各中英文数据库,包括EBSCO-host、psyINFO、Pubmed,、Springlink、中国知网、万方... 详细信息

目的针对大学生抑郁症的随机对照干预研究,分析不同干预方法对大学生抑郁症的干预效果,为制定有效的大学生抑郁症干预措施提供依据.方法全面系统地检索各中英文数据库,包括EBSCO-host、psyINFO、Pubmed,、Springlink、中国知网、万方、维普等.根据严格的纳入和排除标准,筛选合格的大学生抑郁症随机对照干预研究,使用Revman 5.3版本分别对心理咨询干预、运动干预、心理与运动联合治疗以及音乐和绘画治疗等干预方法的干预效果进行meta分析.结果 BDI量表测得的心理咨询干预的合并标准化效应值为MD =-2.19(95％ CI：-2.86,-1.51).CES-D量表测得的心理咨询干预的合并效应值为MD=-1.29(95％ CI：-2.06,-0.52).SDS量表测得的心理咨询干预的合并效应值为MD =-1.10(95％ CI：-1.45,-0.75);运动干预的合并效应值为MD=-1.59(95％ CI：-2.26,-0.92);心理咨询与运动联合干预的合并效应值为MD =-0.20(95％ CI：-1.29,0.89);音乐和绘画治疗的合并效应值为MD=-1.37(95％ CI：-2.15,-0.60).SCL-90量表测得的心理咨询干预的合并效应值为MD =-0.64(95％ CI：-0.93,-0.35);运动干预的合并效应值为MD=-0.75(95％ CI：-1.03,-0.47);心理咨询与运动联合干预的合并效应值为MD =-1.14(95％ CI：-1.77,-0.52).结论心理咨询干预、运动干预或两者结合的干预均对大学生抑郁症有明显的疗效.

关键词：大学生抑郁症随机对照试验运动干预心理咨询干预

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医学生应对方式、考试焦虑与学业自我妨碍的相关研究

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中国健康心理学杂志 2012年第3期20卷 441-443页

作者：李妮娜顾怀婷李峥中国.济宁医学院精神卫生学院行为医学教研室(山东省行为医学重点实验室) 272000 济宁医学院公共卫生学院

目的探讨医学生应对方式、考试焦虑与学业自我妨碍的关系。方法使用简易应对方式问卷(SCSQ)、考试焦虑诊断问卷(TA S)和自我妨碍问卷(SHS)对医学院394名医学生进行调查。结果医学生在自我妨碍策略的使用上存在性别差异,女生自我妨碍水... 详细信息

目的探讨医学生应对方式、考试焦虑与学业自我妨碍的关系。方法使用简易应对方式问卷(SCSQ)、考试焦虑诊断问卷(TA S)和自我妨碍问卷(SHS)对医学院394名医学生进行调查。结果医学生在自我妨碍策略的使用上存在性别差异,女生自我妨碍水平高于男生(t=-2.42,P=0.016);积极应对方式对自我妨碍有显著的负向效应(r=-0.12),消极应对方式对自我妨碍产生正向效应(r=0.19);进一步回归分析发现,积极应对、消极应对、女性、自我报告学习成绩、考试焦虑对自我妨碍有36.6%的预测。结论医学生考前应对方式、考试焦虑对学业自我妨碍有一定的影响,应针对各种因素采取有效措施进行预防及干预。

关键词：医学生应对方式考试焦虑学业自我妨碍

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394名医学生成就动机、自尊与自我妨碍的关系

394名医学生成就动机、自尊与自我妨碍的关系

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国际中华应用心理学研究会第九届学术年会

作者：李妮娜李峥济宁医学院精神卫生学院行为医学教研室山东省行为医学重点实验室

目的探讨医学生成就动机、自尊与学业自我妨碍的关系。方法使用成就动机量表(AMS)、自尊量表(SES)和自我妨碍问卷(SHS)对某医学院394名医学生进行调查。结果医学生在自我妨碍策略的使用上存在性别差异,男生自我妨碍得分低于女生得分(t=-... 详细信息

目的探讨医学生成就动机、自尊与学业自我妨碍的关系。方法使用成就动机量表(AMS)、自尊量表(SES)和自我妨碍问卷(SHS)对某医学院394名医学生进行调查。结果医学生在自我妨碍策略的使用上存在性别差异,男生自我妨碍得分低于女生得分(t=-2.45,P=0.01);医学生的自我妨碍倾向与追求成功动机存在显著的负相关(r=-0.29),与避免失败动机存在显著的正相关(r=0.38);自我妨碍倾向与自尊、成就动机水平存在显著负相关;进一步回归分析发现,自尊、成就动机两个变量联合解释了自我妨碍总变异的24%。结论医学生自尊、成就动机对学业自我妨碍有一定的影响,应针对各种因素采取有效措施进行预防及干预。

关键词：成就动机自尊自我妨碍

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自噬与细胞代谢及疾病关系的研究进展

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生命科学 2011年第10期23卷 980-986页

作者：李杰路海李妮娜济宁医学院行为医学实验室山东省行为医学重点实验室济宁医学院精神卫生学院济宁医学院神经生物学研究所

自噬是以细胞质空泡化为特征的依赖于溶酶体的一种降解途径,是真核细胞特有的普遍生命现象。自噬利用溶酶体降解自身损伤的细胞质和细胞器,降解产物可用于能量生成、新的蛋白质和质膜的合成,以供细胞代谢和老化损伤细胞成分的更新,维持... 详细信息

自噬是以细胞质空泡化为特征的依赖于溶酶体的一种降解途径,是真核细胞特有的普遍生命现象。自噬利用溶酶体降解自身损伤的细胞质和细胞器,降解产物可用于能量生成、新的蛋白质和质膜的合成,以供细胞代谢和老化损伤细胞成分的更新,维持细胞存活、分化、发育和内环境稳态。自噬广泛参与多种生理和病理过程。对自噬与细胞代谢及疾病发生的关系作一概述。

关键词：自噬代谢肿瘤神经退行性疾病肌病

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