检索结果-内蒙古大学图书馆

实验动物与比较医学 2013年第6期33卷 433-438页

作者：蔡月琴徐剑钦徐孝平王德军黄宇吴蔚陈民利浙江中医药大学动物实验研究中心/比较医学研究中心杭州310053

目的制备实验兔的免疫球蛋白液相芯片，建立液相芯片技术（xMAP）检测方法。方法分别将兔IgG、IgM和IgA亲和纯化的捕获抗体耦联至荧光编码微球，对蛋白耦联量进行优化，制备兔IgG、IgM和IgA液相芯片，同步检测白毛黑眼兔（WHBE兔）和日... 详细信息

目的制备实验兔的免疫球蛋白液相芯片，建立液相芯片技术（xMAP）检测方法。方法分别将兔IgG、IgM和IgA亲和纯化的捕获抗体耦联至荧光编码微球，对蛋白耦联量进行优化，制备兔IgG、IgM和IgA液相芯片，同步检测白毛黑眼兔（WHBE兔）和日本大耳白兔（JW兔）血清中IgG、IgM和IgA相对含量，建立可应用于实验兔免疫球蛋白半定量检测的xMAP方法，并对其结果用ELISA方法进行验证。结果（1）IgG、IgM和IgA的最佳蛋白耦联量分别为10、20和15№。（2）xMAP检测结果显示，WHBE兔血清中IgG、IgM蛋白含量显著低于删兔（P〈0．05），IgA蛋白含量显著高于Jw兔（P〈O．01）；ELISA检测结果表明，WHBE兔血清中IgG、IgM蛋白含量显著低于Jw兔（P〈0．05，P〈0．01），其中IgM蛋白含量变化达到极显著水平，IgA蛋白含量显著高于Jw兔（P〈0．01）。结论应用制备的兔IgG、IgM和IgA液相芯片建立的xMAP方法，对实验兔血清进行检测，检测结果与ELISA结果一致，提示该方法可应用于实验兔血清的IgG、IgM和IgA半定量检测。

关键词：免疫球蛋白液相芯片 xMAP 实验兔

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实验免RAPD反应体系的优化及引物筛选

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实验动物与比较医学 2009年第5期29卷 341-346页

作者：余佳蔡月琴肖慧陈民利浙江中医药大学动物实验研究中心／比较医学研究中心杭州310053

目的建立实验兔随机扩增多态DNA（RAPD）的最优反应体系，并对RAPD引物进行筛选优化。方法以白毛黑眼（WHBE）兔，日本大耳白（JW）兔，新西兰（NZW）兔为实验材料，对影响RAPD反应的各因素进行优化，摸索出最佳的Mg^2＋，dNTP，Taq酶... 详细信息

目的建立实验兔随机扩增多态DNA（RAPD）的最优反应体系，并对RAPD引物进行筛选优化。方法以白毛黑眼（WHBE）兔，日本大耳白（JW）兔，新西兰（NZW）兔为实验材料，对影响RAPD反应的各因素进行优化，摸索出最佳的Mg^2＋，dNTP，Taq酶，引物和DNA模板的浓度，并从60个随机引物中筛选出适合实验兔RAPD反应的引物。结果最优RAPD—PCR反应体系为：在20山的反应体系中，Mg^2＋1．5mmol／L，dNTP0．25mmol／L，Taq酶1．25U，引物5μmol／L，模板DNA40ng。60个RAPD引物中剔除了重复性差，条带模糊的引物后，有25个引物稳定，扩增出来的条带清晰、多态性高。结论本研究筛选出的25个引物和建立的PCR体系可应用于实验兔的RAPD反应。

关键词：实验兔 RAPD 体系优化引物筛选

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慢性心肌缺血小型猪的氧化应激反应指标观测

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实验动物与比较医学 2012年第5期32卷 401-406页

作者：徐孝平潘永明陈亮徐剑钦王德军朱科燕杨玉伟陈民利浙江中医药大学动物实验研究中心、比较医学研究中心杭州310053

目的观测慢性心肌缺血小型猪的氧化应激反应指标。方法15只巴马小型猪随机分成3组，即正常对照（ctr）组，高脂（HF）组和慢性心肌缺血（CMI）组，每组5只。采用维生素D3和异丙肾上腺素复合高脂饮食建立慢性心肌缺血模型，连续24周。造... 详细信息

目的观测慢性心肌缺血小型猪的氧化应激反应指标。方法15只巴马小型猪随机分成3组，即正常对照（ctr）组，高脂（HF）组和慢性心肌缺血（CMI）组，每组5只。采用维生素D3和异丙肾上腺素复合高脂饮食建立慢性心肌缺血模型，连续24周。造模24周后，观察各组血清cK—MB、血小板聚集率及心肌组织中SOD、MDA、GSH—Px、N0、LD和ATP酶含量的变化。结果与Ctr组比，CMI组血清CK-MB活性、PAR、心肌组织中MDA和LD含量均显著升高（P〈0．05，P〈0．01），心肌组织中SoD、SoD／MDA比值、GSH—Px、N0、Na＋－K＋－ATP、Ca＋＋-ATP和Mg＋＋-ATP酶活性均明显降低（P〈0．05，P〈0．01），而HF组PAR和心肌组织中sOD／MDA比值、MDA含量均升高显著（P〈0．05，P〈0．01），心肌组织中soD、GsH—Px、Na＋-K＋-ATP、Mg＋＋-ATP酶活性均降低显著（P〈0．05）；与HF组比，CMI组血清CK—MB活性明显高于HF组（P〈0．01），心肌组织中Na＋-K＋-ATP酶和Ca＋＋-ATP活性显著低于HF组（P〈0．05，P〈0．01）；相关分析显示，CMI组cK-MB活性与PAR和MDA含量呈显著正相关（P〈0．05，P〈0．01），与soD、sOD／MDA、***、NO呈显著负相关（P〈0．05，P〈0．01）；血小板聚集率与cK-MB和MDA呈显著正相关（P〈0．05），与sOD、s0D／MDA和Na＋-K＋-ATP酶活性呈显著负相关（P〈0．05，P〈0．01）；心肌组织中LD含量与MDA呈显著正相关（P〈0．05），与SOD／MDA、Na＋-K＋-ATP、Ca＋＋-ATP和Mg＋＋-ATP呈显著负相关俨〈0．05）；心肌组织中NO水平与SoD、SOD／MDA、GSH—Px呈显著正相关（P〈0．05，P〈0．01），与CK—MB和MDA呈显著负相关（P〈0．05）。

关键词：氧化应激慢性心肌缺血小型猪

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磁珠富集法筛选实验豚鼠微卫星分子标记

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中国比较医学杂志 2010年第6期20卷 29-34页

作者：朱亮蔡月琴屠珏应华忠徐剑钦陈民利浙江中医药大学动物实验研究中心/比较医学研究中心杭州310053

目的直接从实验豚鼠基因组DNA中筛选获得微卫星分子标记。方法应用磁珠和生物素标记的微卫星探针与豚鼠基因组酶切片段杂交,捕获200～1000 bp含有微卫星序列的DNA片段,连接到pMD-18V载体中,转化到感受态细胞*** DH5α中构建富集微卫星... 详细信息

目的直接从实验豚鼠基因组DNA中筛选获得微卫星分子标记。方法应用磁珠和生物素标记的微卫星探针与豚鼠基因组酶切片段杂交,捕获200～1000 bp含有微卫星序列的DNA片段,连接到pMD-18V载体中,转化到感受态细胞*** DH5α中构建富集微卫星序列的小片段插入文库。然后用PCR法进行筛选。结果从约2000个转化子中获得240个阳性克隆。对其中98个进行了测序,并成功设计豚鼠微卫星引物17对。结论经过优化的磁珠富集法能够稳定、高效地获得豚鼠微卫星标记。本研究获得的微卫星位点将成为豚鼠遗传学研究的有力工具。

关键词：豚鼠磁珠富集法微卫星

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人参皂苷Rg1对豚鼠急性心肌缺血的保护作用

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中药新药与临床药理 2011年第4期22卷 390-393页

作者：来方远潘永明艾秀锋贾临超朱科燕杨玉伟陈民利浙江中医药大学第二临床医学院杭州310053 浙江中医药大学动物实验研究中心杭州310053

目的观察人参皂苷Rg1对豚鼠急性心肌缺血的保护作用。方法建立垂体后叶素致豚鼠急性心肌缺血模型,观察人参皂苷Rg1对垂体后叶素诱发心肌缺血豚鼠心电图T波和ST段的影响,测定血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、肌酸磷酸激酶(CK)、... 详细信息

目的观察人参皂苷Rg1对豚鼠急性心肌缺血的保护作用。方法建立垂体后叶素致豚鼠急性心肌缺血模型,观察人参皂苷Rg1对垂体后叶素诱发心肌缺血豚鼠心电图T波和ST段的影响,测定血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、肌酸磷酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量的变化。结果人参皂苷Rg1能抵抗对垂体后叶素诱发豚鼠心电图T波和ST段的抬高(P<0.05,P<0.01),降低血清中AST、CK和LDH活性(P<0.05,P<0.01),升高血清中SOD和GSH-Px活性和明显降低MDA含量(P<0.05,P<0.01)。结论人参皂苷Rg1对垂体后叶素致豚鼠急性心肌缺血具有明显的保护作用。

关键词：人参皂苷Rg1 心肌缺血抗氧化豚鼠

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中国被毛孢发酵物对NOD小鼠1型糖尿病的预防作用

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中草药 2010年第8期41卷 1311-1315页

作者：寿旗扬傅惠英陈方明周卫民张才乔陈民利浙江大学动物科学学院浙江杭州310029 浙江大学医学院浙江杭州310058 浙江中医药大学动物实验研究中心浙江杭州310053

目的观察中国被毛孢发酵物对自发性1型糖尿病NOD小鼠的预防作用。方法利用NOD小鼠1型自发性糖尿病模型,连续10周ig给予1 g/kg中国被毛孢发酵物后,观察NOD小鼠的体质量、血糖、发病率、谷氨酸脱羧酶（GAD）抗体水平、胰岛病变和胰腺纤维... 详细信息

目的观察中国被毛孢发酵物对自发性1型糖尿病NOD小鼠的预防作用。方法利用NOD小鼠1型自发性糖尿病模型,连续10周ig给予1 g/kg中国被毛孢发酵物后,观察NOD小鼠的体质量、血糖、发病率、谷氨酸脱羧酶（GAD）抗体水平、胰岛病变和胰腺纤维化的变化。结果 NOD小鼠给予1 g/kg中国被毛孢发酵物后,第6~10周时血糖和发病率明显降低（P〈0.05、0.01）,小鼠血清中GAD抗体明显降低（P〈0.01）,小鼠胰岛病变和胰腺纤维化评分值显著降低（P〈0.05、0.01）,胰腺结构较为清晰,胰岛有少量炎症细胞浸润,胰岛β细胞未见异常。

关键词：中国被毛孢发酵物 NOD小鼠 1型糖尿病

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丹酚酸A改善ZDF大鼠视网膜病变及其作用机制

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中国比较医学杂志 2017年第10期27卷 40-46页

作者：马全鑫陈小真戎亦骊黄俊杰朱科燕陈诚施佳君李园园陈民利浙江中医药大学动物实验研究中心/比较医学研究所杭州310053 温州医科大学附属第二医院浙江温州325027

目的观察丹酚酸A(SAA)对Zucker糖尿病肥胖(ZDF)大鼠视网膜病变的干预作用,探讨SAA可能的作用机制。方法取7~8周龄雄性ZDF大鼠32只,Purina#5008饲料饲喂4周后,按血糖平均分为模型对照组,SAA高、低剂量组与二甲双胍(Met)组,每组8只。另取... 详细信息

目的观察丹酚酸A(SAA)对Zucker糖尿病肥胖(ZDF)大鼠视网膜病变的干预作用,探讨SAA可能的作用机制。方法取7~8周龄雄性ZDF大鼠32只,Purina#5008饲料饲喂4周后,按血糖平均分为模型对照组,SAA高、低剂量组与二甲双胍(Met)组,每组8只。另取同龄雄性ZL大鼠8只作为正常对照。SAA低、高剂量组每日尾静脉注射SAA 0.5 mg/kg、1 mg/kg,Met组每日经口灌胃Met 200 mg/kg,连续给药12周,观察ZDF大鼠白内障发生率和视网膜病理学改变,并检测血糖血脂、糖化血红蛋白(Hb A1c)和血清白介素1(IL-1)、IL-6、氧化性低密度脂蛋白(ox-LDL)、丙二醛(MDA)含量和脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)的活性,以及尿液中转铁蛋白(TRF)、视黄醇结合蛋白(RBP)的含量。结果模型对照组大鼠血糖、血脂及Hb A1c均上升,糖尿病性白内障发病率68.75%,视网膜基底增厚和微血管病变,血清IL-1、IL-6、ox-LDL和MDA含量和Lp-PLA2活性显著升高,尿液中TRF和RBP含量亦显著升高。给予SAA后,ZDF大鼠白内障发病率降低,视网膜病理学形态有不同程度的改善,血清IL-1、IL-6、ox-LDL、MDA含量和Lp-PLA2活性下降,尿液中TRF、RBP含量亦下降。结论 SAA能改善ZDF大鼠糖尿病视网膜病变,降低白内障发生率,其作用途径可能与抑制慢性炎症、防止脂质过氧化和降低Lp-PLA2活性有关。

关键词： 2型糖尿病视网膜病变 Lp-PLA2 ZDF大鼠

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乳清粉对断奶实验兔肠道微生物区系和益生菌的影响

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中国比较医学杂志 2015年第8期25卷 12-17页

作者：吕建敏刘月环浙江中医药大学动物实验研究中心杭州310053 浙江省医学科学院杭州310013

目的利用分子生物学技术研究饲粮中添加乳清粉对断奶早期实验兔肠道微生物区系和益生菌的影响。方法采用单因子实验设计,选择40日龄断奶实验兔,随机分为4组(每组12只),分别饲以乳清粉添加水平为0%、2%、5%和10%的饲粮。饲喂30 d后,每组... 详细信息

目的利用分子生物学技术研究饲粮中添加乳清粉对断奶早期实验兔肠道微生物区系和益生菌的影响。方法采用单因子实验设计,选择40日龄断奶实验兔,随机分为4组(每组12只),分别饲以乳清粉添加水平为0%、2%、5%和10%的饲粮。饲喂30 d后,每组随机取8只兔,麻醉处死,取盲肠内容物提取细菌总DNA,首先利用PCR-DGGE技术分析兔盲肠微生物区系多样性,进而应用实时荧光定量PCR(SYBR Green I)法定量检测盲肠细菌中双歧杆菌和乳酸杆菌含量。结果 (1)实验兔盲肠细菌DGGE各分析参数随乳清粉添加量的提高逐渐上升,添加不同水平乳清粉均可显著增加DGGE条带数(P<0.05,P<0.01)。2%和5%乳清粉添加水平组的DGGE条带数和香农指数均极显著(P<0.01)高于未添加组,但以上2项指标在乳清粉各添加水平间差异无显著性(P>0.05)。DGGE均匀度指数在各实验组间均无差异显著性(P>0.05)。(2)饲粮中添加乳清粉可提高实验兔盲肠内容物中乳酸杆菌和双歧杆菌数量,其中各乳清粉处理组(2%,5%和10%)的乳酸杆菌数量均显著高于0%添加组(P<0.05),10%乳清粉添加组的双歧杆菌数量显著高于未添加组(P<0.05),但与其他2个乳清粉添加组无差异显著性(P>0.05)。结论 (1)饲粮中添加乳清粉可显著提高实验兔盲肠细菌菌群的多样性。(2)在实验兔饲粮中添加乳清粉可有效增加肠道益生菌数量。

关键词：实验兔乳清粉 PCR-变性梯度凝胶电泳(PCR—DGGE) 实时荧光定量PCR 双歧杆菌乳酸杆菌

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系统性红斑狼疮患者糖皮质激素受体mRNA表达量与启动子区DNA甲基化水平之间的关系研究

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中华风湿病学杂志 2017年第1期21卷 42-45页

作者：范军芬陈红波夏虹马红珍高祥福寿旗扬张利棕范永升浙江中医药大学附属第一医院肾病科杭州310006 浙江中医药大学动物实验研究中心浙江中医药大学基础医学院

目的探讨SLE患者糖皮质激素受体（GR）基因启动子l区DNA甲基化水平与GR（xmRNA表达量之间的关系。方法收集15例新发SLE患者和15名健康对照者，亚硫酸氢盐修饰后测序法检测GR基因启动子1区DNA甲基化水平，实时定量PCR法检测PBMCs中DNA甲... 详细信息

目的探讨SLE患者糖皮质激素受体（GR）基因启动子l区DNA甲基化水平与GR（xmRNA表达量之间的关系。方法收集15例新发SLE患者和15名健康对照者，亚硫酸氢盐修饰后测序法检测GR基因启动子1区DNA甲基化水平，实时定量PCR法检测PBMCs中DNA甲基化转移酶1（DNMT1）、DNA损伤诱导蛋白45d（GADD45d）和糖皮质激素受体α（GRα）mRNA表达量。组问比较采用t检验和x2检验。用Pearson相关系数分析两变量问的相关性。结果同健康对照者比较，SLE患者GRct的mRNA量显著下降（分别为10±5，17±7，t=2．69，P〈0．05），而DNMTl和GADD45α显著上升（t=3．11，P〈0．05和t=2．98，P〈0．05）。GR启动子1区142个CpG岛总甲基化水平显著升高[（16±8）％和（11±6）％，t=2．75，P〈0．05]，GRetmRNA表达量与GR启动子1区DNA甲基化水平之间呈负相关（v=-0．6517x＋21．038，R2=0．7548）。SLE患者PBMCs全基因组DNA甲基化水平显著下降（t=4．39，P〈0．05）。结论SLE患者PBMCs中GR启动子区DNA高甲基化水平可能是导致GR基因mRNA低表达的原因之一。

关键词：红斑狼疮,系统性受体,糖皮质激素 DNA甲基化表观遗传学

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糖尿病下肢溃疡小鼠模型的建立与评价

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中国实验动物学报 2020年第1期28卷 58-65页

作者：鲁珽辛永萍林家彬陈民利浙江大学医学院附属第二医院临床研究中心杭州310009 浙江中医药大学动物实验研究中心杭州310053

目的建立和评价糖尿病下肢溃疡小鼠模型,揭示糖尿病下肢溃疡小鼠手术肢血流和病理生理的改变,初探其发病机制,为研究糖尿病外周血管病变提供基础和参考。方法小鼠分为下肢缺血组、糖尿病组和糖尿病下肢溃疡组。糖尿病下肢溃疡和糖尿病... 详细信息

目的建立和评价糖尿病下肢溃疡小鼠模型,揭示糖尿病下肢溃疡小鼠手术肢血流和病理生理的改变,初探其发病机制,为研究糖尿病外周血管病变提供基础和参考。方法小鼠分为下肢缺血组、糖尿病组和糖尿病下肢溃疡组。糖尿病下肢溃疡和糖尿病组腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立1型糖尿病模型。糖尿病下肢溃疡和下肢缺血组,采用高位结扎股动脉、股静脉并断离股动脉的方法建立下肢缺血模型;糖尿病组仅做假手术处理。术后第0、3、7、14、21天,用激光多普勒监测血流变化,观察肢体缺血坏死。第21天后HE切片观察组织形态变化,分析血小板-内皮细胞粘附分子-1(PECAM-1/CD31)及抗平滑肌抗体(SMA)表达。结果缺血术后,与下肢缺血组小鼠比较,糖尿病下肢溃疡组体重显著下降,肢体坏死情况更严重。术后,糖尿病下肢溃疡组和下肢缺血组小鼠手术肢血流灌注下降明显;术后第3、7、14天,糖尿病下肢溃疡组和下肢缺血组血流灌注逐渐恢复;第21天,下肢缺血组接近正常水平,而糖尿病下肢溃疡组略有下降。糖尿病组无肢体坏死情况,血流灌注无明显变化。糖尿病下肢溃疡组和下肢缺血组小鼠手术肢腓肠肌组织有肌肉结构破坏和炎症浸润,CD31表达明显增加;糖尿病下肢溃疡组和糖尿病组SMA有显著表达,而下肢缺血组表达不明显。结论成功建立了糖尿病下肢溃疡小鼠模型,与下肢缺血小鼠模型对比,该模型有明显的肢体坏死症状和血流灌注恢复障碍。该模型可用于研究糖尿病血管病变发病机制的研究以及治疗药物的筛选。

关键词：糖尿病下肢溃疡下肢缺血小鼠

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