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LOX-1介导ox-LDL诱导大鼠系膜细胞表达TGF-β_1及分泌细胞外基质

第二军医大学学报 2007年第8期28卷 846-849页

作者：杜月光柴可夫万海同浙江中医药大学基础医学院病理生理学教研室杭州310053 中医临床基础教研室杭州310053

目的:观察氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)对大鼠肾小球系膜细胞表达血凝素样氧化低密度脂蛋白受体1(LOX-1)、转化生长因子β_1(TGF-β_1)及分泌细胞外基质(ECM)的影响,并观察LOX-1抑制剂多聚肌苷酸(PIA)对ox-LDL上述作用的影响。方法:体外培... 详细信息

目的:观察氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)对大鼠肾小球系膜细胞表达血凝素样氧化低密度脂蛋白受体1(LOX-1)、转化生长因子β_1(TGF-β_1)及分泌细胞外基质(ECM)的影响,并观察LOX-1抑制剂多聚肌苷酸(PIA)对ox-LDL上述作用的影响。方法:体外培养肾小球系膜细胞,RT-PCR检测不同浓度(0、25、50、100μg/ml)ox-LDL组肾小球系膜细胞LOX-1 mRNA的表达;RT-PCR观察空白组、ox-LDL组(50μg/ml)和PIA组(50μg/ml ox-LDL+250μg/ml PIA)肾小球系膜细胞LOX-1、TGF-β_1 mRNA的表达,ELISA法检测上述3组肾小球系膜细胞培养上清中TGF-β_1、纤连蛋白(FN)、Ⅳ型胶原(ColⅣ)的含量。结果:RT-PCR结果表明,25、50、100μg/ml ox-LDL组LOX-1 mRNA表达明显高于0μg/ml组(P<0.05),其中50μg/ ml组表达最高;50μg/ml ox-LDL组肾小球系膜细胞LOX-1、TGF-β_1 mRNA表达明显高于空白组和PIA组(P<0.01)。ELISA结果表明50μg/ml ox-LDL组肾小球系膜细胞培养上清中TGF-β_1、FN、ColⅣ的含量明显高于空白组和PIA组(P<0.05)。结论:ox-LDL体外可促进大鼠肾小球系膜细胞表达LOX-1、TGF-β_1及分泌细胞外基质,PIA可抑制ox-LDL的上述作用,提示LOX-1可能介导了ox-LDL对肾小球系膜细胞的损伤,参与了肾小球硬化的发生和发展。

关键词：糖尿病肾病肾小球硬化氧化低密度脂蛋白血凝素样氧化低密度脂蛋白受体1 转化生长因子β1 细胞外基质

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替加色罗对内脏高敏感大鼠结肠电及运动的恢复

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中国应用生理学杂志 2008年第2期24卷 174-176,183页

作者：印媛君吕宾杨午鸣柯庆丁瑞峰浙江中医药大学基础医学院生理教研室浙江杭州310053 浙江中医药大学附属第一医院消化内科浙江杭州310006

目的:探讨内脏高敏感大鼠结肠电活动和结肠运动的特点以及替加色罗治疗的疗效。方法:实验分对照组、模型组和替加色罗组,后两组腹腔注射鸡卵清蛋白使大鼠内脏致敏。记录结肠快波、慢波及收缩波,观察消化间期复合肌电及结肠收缩波数目、... 详细信息

目的:探讨内脏高敏感大鼠结肠电活动和结肠运动的特点以及替加色罗治疗的疗效。方法:实验分对照组、模型组和替加色罗组,后两组腹腔注射鸡卵清蛋白使大鼠内脏致敏。记录结肠快波、慢波及收缩波,观察消化间期复合肌电及结肠收缩波数目、指数。结果:模型组消化间期复合肌电及结肠收缩波数目、指数均有明显变化。经替加色罗治疗后,各数据均有显著恢复。结论:内脏高敏感大鼠结肠电及运动有明显的异常,替加色罗治疗后能恢复被改变的电及运动。

关键词：内脏高敏感替加色罗结肠电消化间期复合肌电

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木犀草素预处理减轻H_2O_2诱导的乳鼠心肌细胞凋亡

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基础医学与临床 2013年第12期33卷 1576-1580页

作者：印媛君余美荣蒋福生丁志山浙江中医药大学基础医学院生理教研室浙江杭州310053 浙江中医药大学生命科学院分子遗传教研室浙江杭州310053

目的探讨木犀草素预处理对H2O2诱导的乳鼠心肌细胞抗凋亡及抗氧化作用。方法取1-3d乳鼠的心肌细胞,常规培养，分为对照组、模型组、1、10、50、100和200μmol/L浓度的木犀草素预处理组，预处理2h后，用1mmol/LH2O2氧化损伤2h，检测各... 详细信息

目的探讨木犀草素预处理对H2O2诱导的乳鼠心肌细胞抗凋亡及抗氧化作用。方法取1-3d乳鼠的心肌细胞,常规培养，分为对照组、模型组、1、10、50、100和200μmol/L浓度的木犀草素预处理组，预处理2h后，用1mmol/LH2O2氧化损伤2h，检测各组MTT值，进而选择100μmol/L浓度的木犀草素作为预处理组。观察不同组别细胞形态学、细胞搏动频率、Hoechest33342-PI双染和Rhodamine 123染色检测MMP，检测培养液中LDH、MDA及SOD活性等。结果与模型组相比，用木犀草素预处理后的心肌细胞活力良好（P〈0.01），形态学及搏动情况良好（P〈0.01），细胞凋亡下降，细胞线粒体损伤程度减少（P〈0.01），SOD活性提高（P〈0.01）,LDH及MDA的产生受到抑制（P〈0.01）。结论木犀草素预处理对H2O2诱导的心肌细胞损伤具有一定的保护作用,木犀草素抗凋亡作用可能与其抗氧化作用有关。

关键词：木犀草素心肌细胞 H2O2诱导抗凋亡抗氧化

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温下方乙酸乙酯提取部位调控CAFs介导的Hh-Gli1通路抑制A549移植瘤生长的作用机制

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中华中医药杂志 2021年第9期36卷 5499-5504页

作者：王盟毕倩宇季旭明浙江中医药大学基础医学院杭州310053 济宁市第一人民医院医务部济宁272000 浙江中医药大学基础医学院方剂教研室杭州310053

目的:观察温下方乙酸乙酯提取部位(WFEA)对肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)介导的Hh-Gli1通路的影响,探讨其抑制A549移植瘤生长的作用机制。方法:建立肺癌A549裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为A549组、模型组、顺铂组,WFEA高、中、低剂量组和环巴... 详细信息

目的:观察温下方乙酸乙酯提取部位(WFEA)对肿瘤相关成纤维细胞(CAFs)介导的Hh-Gli1通路的影响,探讨其抑制A549移植瘤生长的作用机制。方法:建立肺癌A549裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为A549组、模型组、顺铂组,WFEA高、中、低剂量组和环巴胺组,药物干预5周。采用超高压液相色谱-飞行时间质谱仪(UPLC-Q-TOF-MS)分析WFEA的主要化学成分;采用小动物活体成像、HE染色、免疫组化等方法检测WFEA在A549移植瘤裸鼠体内的抗肿瘤活性;采用Western blot法和实时PCR法检测CAFs介导的Hh-Gli1信号通路水平。结果:采用UPLC-Q-TOF-MS方法共定性出WFEA的15种化学成分;与模型组比较,WFEA各给药组裸鼠肿瘤的光子强度均有不同程度的降低(P<0.05,P<0.01)。模型组HE染色可见细胞排列紧密,瘤细胞形态不规则,未见明显的坏死,WFEA各给药组肿瘤细胞均有不同程度坏死,胞浆破裂,细胞膜不完整;与模型组比较,WFEA各给药组FN蛋白表达以及PTCH1、SMO和Gli1的蛋白和mRNA表达水平均有不同程度的降低(P<0.01,P<0.05)。结论:WFEA对A549移植瘤有一定的抑制作用,其作用机制可能与抑制CAFs介导的Hh-Gli1信号通路有关。

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敲除组织蛋白酶K基因改善高脂饮食小鼠缺血性血管生成

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生理学报 2024年第1期76卷 45-51页

作者：王心怡王旭何震杰陈士票李伟健崔仁善姜海英浙江中医药大学基础医学院杭州310000 嘉兴大学医学院嘉兴314000 延边大学生理学教研室延吉133000

本文旨在探讨组织蛋白酶K(cathepsin K,Cat K)对高脂饮食小鼠缺血性血管生成的作用及机制。利用高脂饮食Cat K基因敲除(Cat K^(-/-))小鼠制备单侧下肢缺血模型,利用激光多普勒血流测定仪观察缺血后不同时间段血流恢复程度;免疫组织化学... 详细信息

本文旨在探讨组织蛋白酶K(cathepsin K,Cat K)对高脂饮食小鼠缺血性血管生成的作用及机制。利用高脂饮食Cat K基因敲除(Cat K^(-/-))小鼠制备单侧下肢缺血模型,利用激光多普勒血流测定仪观察缺血后不同时间段血流恢复程度;免疫组织化学染色法观察缺血下肢新生毛细血管数量;免疫印迹法检测胰岛素受体底物-1(insulin receptor substrate 1,IRS-1)、p-Akt、Akt及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)等信号蛋白表达。首先观察高脂饮食对野生型小鼠缺血性血管生成的影响。野生型小鼠随机分为对照组和高脂饮食组,分别以普通饲料或60%高脂肪饲料饲养16周。结果表明,与对照组相比,高脂饮食组小鼠体重明显增加,缺血下肢血流恢复程度明显减弱,血浆Cat K浓度及缺血侧骨骼肌中Cat K基因表达显著升高(P<0.05)。接着利用野生型和Cat K^(-/-)高脂饮食小鼠进一步观察Cat K对高脂肪负荷下缺血性血管生成的作用及机制。结果表明,Cat K^(-/-)小鼠缺血下肢的血流恢复程度明显强于野生型小鼠,缺血14天后缺血下肢的CD31阳性细胞显著增多(P<0.05);同时观察到Cat K^(-/-)小鼠缺血侧骨骼肌IRS-1、p-Akt及VEGF蛋白表达水平显著增加(P<0.05)。上述结果提示,敲除Cat K基因可能通过IRS-1-Akt-VEGF信号通路改善高脂饮食小鼠缺血性血管生成过程。

关键词：组织蛋白酶K 高脂肪血管生成胰岛素受体底物-1

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黄芪甲苷和三七总皂苷配伍对脑缺血再灌注损伤大鼠海马NSCs的保护作用

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中成药 2017年第11期39卷 2372-2376页

作者：张建平储利胜陶水良廖丹琼葛钢锋陈伟燕浙江中医药大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学教研室浙江杭州310053 浙江中医药大学基础医学院生理学教研室浙江杭州310053 浙江中医药大学护理学院浙江杭州310053

目的探讨黄芪甲苷(AS)和三七总皂苷(PNS)配伍对脑缺血再灌注损伤大鼠海马神经干细胞(NSCs)的保护作用。方法无血清法培养新生大鼠海马NSCs,将NSCs分为对照组、缺糖缺氧-再灌注(OGD-R)组、AS和PNS配伍组。对照组常规培养,OGD-R组无糖缺... 详细信息

目的探讨黄芪甲苷(AS)和三七总皂苷(PNS)配伍对脑缺血再灌注损伤大鼠海马神经干细胞(NSCs)的保护作用。方法无血清法培养新生大鼠海马NSCs,将NSCs分为对照组、缺糖缺氧-再灌注(OGD-R)组、AS和PNS配伍组。对照组常规培养,OGD-R组无糖缺氧处理后常规孵育,AS和PNS配伍组在OGD-R基础上用AS和PNS干预培养。比色法测定NSCs的乳酸脱氢酶(LDH),MTT法测定NSCs存活率,DAPI染色检测NSCs凋亡,Nestin/Brd U染色检测NSCs增殖。结果与对照组比较,OGD-R组NSCs的存活率及DAPI核染、Nestin/Brd U阳性反应显著降低,LDH漏出率显著升高(P<0.01)。与OGD-R组比较,AS和PNS组NSCs的存活率、DAPI核染、Nestin/Brd U阳性光密度、面密度及细胞数显著增多,LDH漏出率显著降低(P<0.01)。结论 AS和PNS可提高OGD-R新生大鼠海马NSCs的存活率,抑制NSCs凋亡,促进NSCs增殖。

关键词：黄芪甲苷三七总皂苷缺血再灌注损伤海马神经干细胞

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浅论运用阴阳对应性思维研读《伤寒论》

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中医杂志 2012年第1期53卷 12-15页

作者：刘玉良浙江中医药大学基础医学院中基教研室72信箱、杭州市滨江区滨文路 310053

《伤寒论》中包涵着多层次的阴阳对应性表述,运用对应性思维研读《伤寒论》,不仅有利于增强对阴阳理论的理解及基本理论的系统掌握,更有助于取得重要的发现和感悟。

关键词：阴阳对应性思维《伤寒论》阴阳辨证

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基于德尔菲法的强直性脊柱炎脾虚湿阻证诊断指标的研究

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中华中医药杂志 2022年第9期37卷 5304-5307页

作者：杨辉黄琳李海昌曹炜范永升谢志军王忆勤周岳君温成平浙江中医药大学基础医学院杭州310053 中国中医科学院广安门医院北京100053 上海中医药大学基础医学院中医诊断教研室上海201203

目的:采用专家调查的方式筛选强直性脊柱炎脾虚湿阻证的诊断指标,评价其重要性,以形成强直性脊柱炎脾虚湿瘀证的证候诊断标准。方法:制定强直性脊柱炎脾虚湿阻证诊断标准体系专家咨询问卷,遴选全国风湿免疫领域从事中医、中西医结合临... 详细信息

目的:采用专家调查的方式筛选强直性脊柱炎脾虚湿阻证的诊断指标,评价其重要性,以形成强直性脊柱炎脾虚湿瘀证的证候诊断标准。方法:制定强直性脊柱炎脾虚湿阻证诊断标准体系专家咨询问卷,遴选全国风湿免疫领域从事中医、中西医结合临床工作的专家20位,进行3轮问卷调查;统计专家积极系数,采用五尺度评分法,采用直接打分法、直接估计法、百分比法、秩和比法对专家指标重要性进行评估;并采用算数均数、等级和、满分比分析专家评价意见集中程度;采用变异系数(CV)、协调系数分析专家评价意见协调程度;并针对条目的赋分进行临床验证。结果:对专家指标重要性评估结果中,主要症状:(1)中轴关节酸痛;(2)脊背活动受限、凌晨痛甚伴活动后缓解,伴腰骶沉重、僵硬(必备);(3)纳少甚或纳呆;(4)肢体酸楚困重,神疲乏力;(5)舌苔腻。秩和比法值依次为0.15、0.14、0.13、0.12、0.10。专家评价意见集中程度分析结果中,主要症状的专家评分算数均数为4.95分,满分比为98%,CV为0.04。第1轮问卷CV波动在0.24~0.44,第2轮专家问卷CV波动在0~0.44,第3轮专家问卷CV波动在0~0.27。结论:经过3轮调查研究,专家积极程度和专业程度较高,意见可信度较高,且协调程度较高,基本形成强直性脊柱炎脾虚湿阻证的诊断标准。

关键词：强直性脊柱炎脾虚湿阻证诊断标准德尔菲法诊断指标

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蟾蜍灵在体内外抑制急性红白血病细胞K562增殖及下调WT1表达的研究

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中国药理学通报 2016年第2期32卷 229-233页

作者：汪丽佩李天一高瑞兰杜月光赵燕娜浙江中医药大学基础医学院病理学教研室浙江杭州310053 浙江中医药大学附属第一医院血液病研究所浙江杭州310006

目的研究蟾蜍灵在体内外抗K562细胞增殖及对WT1表达影响。方法半固体集落形成实验检测蟾蜍灵对K562细胞的增殖抑制作用,流式细胞术分析蟾蜍灵对K562细胞周期的影响,Western blot观察蟾蜍灵对WT1表达作用。通过高致瘤性K562细胞制备裸鼠... 详细信息

目的研究蟾蜍灵在体内外抗K562细胞增殖及对WT1表达影响。方法半固体集落形成实验检测蟾蜍灵对K562细胞的增殖抑制作用,流式细胞术分析蟾蜍灵对K562细胞周期的影响,Western blot观察蟾蜍灵对WT1表达作用。通过高致瘤性K562细胞制备裸鼠皮下荷瘤模型,分组为模型组、蟾蜍灵组及高三尖杉酯碱组,比较各组皮下瘤体积与重量、病理形态学改变及WT1蛋白表达情况。结果①半固体集落形成实验、流式及Westem blot结果显示,蟾蜍灵能明显抑制K562细胞增殖,阻滞细胞在G_0/G_1期,并下调其WT1蛋白表达,呈剂量依赖性;②蟾蜍灵组和阳性对照组裸鼠肿瘤的抑瘤率均明显高于模型组(P<0.05),且蟾蜍灵组和阳性对照组裸鼠皮下瘤重量均明显低于模型组(P<0.05);③病理切片显示,蟾蜍灵导致K562皮下瘤组织内肿瘤细胞大量坏死、凋亡,继发出血及纤维化等改变;并明显抑制K562皮下瘤组织中WT1蛋白表达水平。结论蟾蜍灵在体外可抑制K562细胞增殖及阻滞细胞周期于G_0/G_1期并下调其WT1蛋白表达,在体内可明显抑制裸鼠K562皮下瘤体积和重量,导致皮下瘤组织坏死、凋亡,并可下调其WT1蛋白的表达。

关键词：蟾蜍灵 WT1 K562 细胞周期 G0/G1期皮下瘤

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浙江省某山区县留守儿童与非留守儿童监护人预防接种知信行调查

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现代预防医学 2018年第5期45卷 908-911+919页

作者：叶丽红钱雨张婉婷叶红沈芷婕毛盈颖黄爱军沈忱张未胡洁浙江中医药大学基础医学院流行病与卫生统计学教研室

目的了解浙江省某经济欠发达山区县留守与非留守儿童监护人预防接种的知识、态度和行为现况,为改善欠发达地区预防接种现状提供参考信息。方法采用多阶段分层整群随机抽样,在该山区县随机抽取4个乡镇,共计12个行政村,通过问卷调查当地0~... 详细信息

目的了解浙江省某经济欠发达山区县留守与非留守儿童监护人预防接种的知识、态度和行为现况,为改善欠发达地区预防接种现状提供参考信息。方法采用多阶段分层整群随机抽样,在该山区县随机抽取4个乡镇,共计12个行政村,通过问卷调查当地0~6周岁留守儿童与非留守儿童监护人对预防接种的知识、态度和行为。结果调查共完成有效问卷416份,其中留守儿童家庭97户,非留守儿童家庭319户。71.13%留守儿童的监护人是(外)祖父母,55.67%留守儿童监护人的文化水平为小学及以下。17.18%留守儿童监护不了解预防接种的作用(P=0.002),81.44%留守儿童监护人不知道接种单位咨询电话(P<0.001)。55.67%留守儿童和60.82%非留守儿童监护人认为选择替代苗的主要影响因素是接种反应。11.36%留守儿童到达接种地点时长大于30分钟(P=0.016)。儿童监护人获得预防接种知识主要途径为接种单位,占32.70%。结论浙江省山区留守儿童监护人对预防接种方面的知识掌握和行为情况亟待提高,尤其应针对文化程度偏低的留守儿童监护人群制定相应的干预策略。

关键词：留守儿童预防接种监护人知信行

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