检索结果-内蒙古大学图书馆

中草药 2014年第14期45卷 2030-2035页

作者：周鹏周惠芬何昱张宇燕杨洁红戴柳玲汪兴宇王泽锋万海同浙江中医药大学心脑血管病研究所浙江杭州310053

目的研究丹红注射液中主要成分羟基红花黄色素A（HSYA）在Caco-2细胞单层模型的转运特征。方法MTT法确定HSYA对Caco-2细胞单层模型作用的安全浓度范围；采用Caco-2细胞单层模型考察转运时间、药物质量浓度、温度、pH值以及P-糖蛋白（P-g... 详细信息

目的研究丹红注射液中主要成分羟基红花黄色素A（HSYA）在Caco-2细胞单层模型的转运特征。方法MTT法确定HSYA对Caco-2细胞单层模型作用的安全浓度范围；采用Caco-2细胞单层模型考察转运时间、药物质量浓度、温度、pH值以及P-糖蛋白（P-gP）抑制剂维拉帕米和能量代谢抑制剂叠氮化钠对HSYA转运的影响；RT-PCR法检测HSYA及维拉帕米对多药耐药基因（MDR1）表达的影响。结果从顶侧（AP）到底侧（BL）（AP→BL），HSYA的表观渗透系数（Papp）在2×10-6-5×10-6cm／s，表明其吸收性中等；HSYA的转运与其质量浓度和时间呈正相关，37℃下HSYA的Papp与4、25℃下的Papp有显著差异（P〈0．01），pH值为9．0时的Papp与pH值为5．0、7．4时的Papp值也有明显差异（P〈0．01）。维拉帕米能明显下调MDR1基因的表达，但HSYA的转运不受维拉帕米的影响；叠氮化钠影响细胞能量代谢，但HSYA的转运不受能量代谢异常的影响，且Papp（BL→AP）/app（AP→BL）在1-1．5，HSYA的吸收过程基本符合被动扩散。结论HSYA在Caco-2细胞模型的转运方式为被动扩散，且不受P-gP和能量代谢的影响，低温和碱性环境下不利于HSYA的吸收。

关键词：丹红注射液羟基红花黄色素A 吸收机制 Caco-2细胞单层模型被动扩散

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川芎嗪与葛根素合用对糖氧剥夺诱导的体外血脑屏障通透性的影响

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中国中药杂志 2010年第20期35卷 2745-2748页

作者：李金辉车玲艳王玉张宇燕万海同杨洁红浙江中医药大学心脑血管病研究所浙江杭州310053

目的:探讨川芎嗪与葛根素合用对糖氧剥夺诱导的体外血脑屏障(aBBB)通透性的影响。方法:实验分为正常对照组、模型组、川芎嗪组、葛根素组、葛根素与川芎嗪合用组和尼莫地平组6个组。原代培养大鼠脑微血管内皮细胞和星形胶质细胞共培养构... 详细信息

目的:探讨川芎嗪与葛根素合用对糖氧剥夺诱导的体外血脑屏障(aBBB)通透性的影响。方法:实验分为正常对照组、模型组、川芎嗪组、葛根素组、葛根素与川芎嗪合用组和尼莫地平组6个组。原代培养大鼠脑微血管内皮细胞和星形胶质细胞共培养构建aBBB模型,经糖氧剥夺诱导处理建立aBBB损伤模型,跨内皮电阻抗、γ-谷氨酰转肽酶、碱性磷酸酶及乳酸脱氢酶鉴定aBBB损伤情况,高效液相色谱法测定川芎嗪、葛根素及尼莫地平的含量,并计算在OGD诱导下的aBBB药物透过浓度。结果:与对照组相比,模型组TEER值降低(P<0.01),川芎嗪组、川芎嗪与葛根素合用组、尼莫地平组-γGT,AKP升高(P<0.01),与川芎嗪与葛根素合用组相比,川芎嗪、葛根素单用AKP升高明显(P<0.01),尼莫地平各指标均有显著性差异(P<0.05),提示川芎嗪与葛根素合用在可升高TEER,增加-γGT,AKP含量和降低LDH具有协同作用,OGD诱导下aBBB模型的培液中川芎嗪与葛根素合用组各成分透过浓度均较川芎嗪、葛根素单用增加。结论:川芎嗪与葛根素合用较两者单用易透过aBBB,且对aBBB有一定的保护作用,可能与降低OGD诱导下的aBBB通透性有关。

关键词：川芎嗪葛根素体外血脑屏障通透性

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3′-甲氧基葛根素对大鼠脑缺血再灌注损伤保护作用研究

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中国中药杂志 2009年第11期34卷 1422-1425页

作者：韩进万海同葛立军朱振洪郭莹张宇燕李金辉浙江中医药大学心脑血管病研究所浙江杭州310053

目的:观察3′-甲氧基葛根素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的脑梗死体积、自由基变化的影响,探讨3′-甲氧基葛根素对脑缺血损伤的保护作用。方法:采用线栓法诱导大鼠大脑中动脉栓塞建立局灶性脑缺血再灌注模型,分假手术组、模型组、3′-... 详细信息

目的:观察3′-甲氧基葛根素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的脑梗死体积、自由基变化的影响,探讨3′-甲氧基葛根素对脑缺血损伤的保护作用。方法:采用线栓法诱导大鼠大脑中动脉栓塞建立局灶性脑缺血再灌注模型,分假手术组、模型组、3′-甲氧基葛根素2个剂量组(5,10 ***-1.d-1)和尼莫地平组(5 ***-1.d-1)。观察行为学的改变,脑梗死体积和测定超氧化物歧化酶(SOD)活力及丙二醛(MDA)含量。结果:3′-甲氧基葛根素具有显著减轻神经功能缺损症状,减少梗死体积,显著提高脑缺血再灌注损伤大鼠脑皮质SOD活力和降低MDA含量,其中10 ***-1的3′-甲氧基葛根素作用尤为显著。结论:3′-甲氧基葛根素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤具有保护作用。

关键词： 3'-甲氧基葛根素缺血再灌注脑损伤

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川芎嗪在Caco-2细胞单层模型的转运特征及对P-糖蛋白表达的影响

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中草药 2013年第5期44卷 581-585页

作者：杨雯周惠芬杨洁红张宇燕来丽丽万海同浙江中医药大学心脑血管病研究所浙江杭州310053

目的研究川芎嗪在Caco-2细胞单层模型的转运特征以及对P-糖蛋白(P-gp)表达的影响。方法 MTT法确定川芎嗪对Caco-2细胞单层模型作用的安全浓度范围;以Caco-2细胞单层模型研究川芎嗪的双向转运机制,以表观渗透系数(Papp)为检测指标,考察... 详细信息

目的研究川芎嗪在Caco-2细胞单层模型的转运特征以及对P-糖蛋白(P-gp)表达的影响。方法 MTT法确定川芎嗪对Caco-2细胞单层模型作用的安全浓度范围;以Caco-2细胞单层模型研究川芎嗪的双向转运机制,以表观渗透系数(Papp)为检测指标,考察时间、药物浓度以及P-gp抑制剂维拉帕米对川芎嗪转运的影响;Western blotting法检测川芎嗪对P-gp表达的影响。结果从顶侧(AP)到底侧(BL)(AP→BL),川芎嗪的Papp>10 6cm/s,表明其吸收性良好;川芎嗪的转运量与其浓度和时间呈正相关,且川芎嗪AP→BL的转运量明显大于BL→AP的转运量;川芎嗪不仅受到P-gp的外排作用,同时也抑制P-gp表达。结论川芎嗪在Caco-2细胞模型的转运方式为被动转运,且受到P-gp的外排作用,并对P-gp的表达有抑制作用。

关键词：川芎嗪吸收机制 Caco-2细胞单层模型 P-糖蛋白被动转运

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R语言多目标优化养阴通脑颗粒组方中3种黄酮类指标成分提取工艺

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中草药 2015年第8期46卷 1156-1160页

作者：虞立张宇燕杨洁红周惠芬金伟锋万海同浙江中医药大学心脑血管病研究所浙江杭州310053

目的多目标优化养阴通脑颗粒组方中3种黄酮类指标成分的提取工艺。方法以养阴通脑颗粒组方中葛根素、毛蕊异黄酮和芒柄花素的提取率为检测指标,采用4因素3水平的正交试验设计方法进行提取工艺考察。通过R语言结合熵权法赋予权值,建立BP... 详细信息

目的多目标优化养阴通脑颗粒组方中3种黄酮类指标成分的提取工艺。方法以养阴通脑颗粒组方中葛根素、毛蕊异黄酮和芒柄花素的提取率为检测指标,采用4因素3水平的正交试验设计方法进行提取工艺考察。通过R语言结合熵权法赋予权值,建立BP神经网络模型,再利用遗传算法对网络进行目标寻优,从而得到养阴通脑颗粒组方中葛根素、毛蕊异黄酮和芒柄花素的最佳提取工艺。结果养阴通脑颗粒组方中葛根素、毛蕊异黄酮和芒柄花素的最优工艺条件为乙醇体积分数85%、提取时间1.5 h、提取温度80℃、乙醇用量25倍,模型综合评价预测值为0.389,而实验所得的平均综合评价值为0.394,相对误差为1.27%,表明具有良好的网络预测性。结论结合所得3个指标成分的提取率和提取工艺的可操作性、可重复性,建立的数学模型可用于对养阴通脑颗粒组方中葛根素、毛蕊异黄酮和芒柄花素的提取工艺进行分析和预测,为实现中药有效成分多目标寻优提供了新的参考。

关键词： R语言养阴通脑颗粒组方熵权法神经网络遗传算法多目标优化

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葛根素与阿魏酸单用及联合应用在局灶性脑缺血模型大鼠体内药动学研究

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中草药 2015年第18期46卷 2759-2763页

作者：杨荣兵周惠芬张宇燕杨洁红万海同浙江中医药大学心脑血管病研究所浙江杭州310053

目的研究葛根素、阿魏酸在局灶性脑缺血模型大鼠体内单用以及合用后的药动学差异,分析2种成分相互影响情况。方法将24只雄性SD大鼠随机分为葛根素组(50 mg/kg)、阿魏酸组(50 mg/kg)以及葛根素与阿魏酸合用组(50 mg/kg+50mg/kg),制备大... 详细信息

目的研究葛根素、阿魏酸在局灶性脑缺血模型大鼠体内单用以及合用后的药动学差异,分析2种成分相互影响情况。方法将24只雄性SD大鼠随机分为葛根素组(50 mg/kg)、阿魏酸组(50 mg/kg)以及葛根素与阿魏酸合用组(50 mg/kg+50mg/kg),制备大脑中动脉阻塞(MCAO)模型后,尾iv给药,于不同时间点眼眶取血。应用高效液相色谱仪(HPLC-DAD)测定血浆中葛根素、阿魏酸的质量浓度,应用DAS 3.2.6软件以及SPSS 19.0统计分析软件进行药动学参数的分析处理。结果依据非房室模型的统计矩参数,葛根素单用组、阿魏酸单用组与葛根素与阿魏酸合用组比较,其血药浓度-时间曲线下面积(AUC)、消除半衰期(t1/2)、达峰浓度(Cmax)、一阶矩血浆浓度时间曲线下面积(AUMC)均差异不显著(P>0.05);与葛根素组比较,合用组的葛根素血浆清除率(CL)、平均滞留时间(MRT)差异显著(P<0.05);与阿魏酸组比较,合用组的阿魏酸MRT明显延长(P<0.05)。结论在局灶性脑缺血模型大鼠体内,葛根素与阿魏酸合用能明显延长各自在血液中的MRT,呈现了药物相互作用后的缓释效应。

关键词：葛根素阿魏酸局灶性脑缺血模型药动学联合用药

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3088例动脉粥样硬化性脑梗死患者中医证候特征回顾性研究

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中医杂志 2023年第21期64卷 2216-2223页

作者：曹依兰万海同韩进徐彬周惠芬虞立周鹏杨洁红何昱浙江中医药大学中医心脑血管研究院浙江杭州310053

目的探讨动脉粥样硬化性脑梗死(ATCI)不同阶段中医证候特征及病机演变规律。方法通过检索医院信息系统,回顾性收集2015年1月1日—2019年12月31日来自6个地区8家医院的ATCI患者临床资料,经分期及临床症状统计后,使用因子分析中主成分分... 详细信息

目的探讨动脉粥样硬化性脑梗死(ATCI)不同阶段中医证候特征及病机演变规律。方法通过检索医院信息系统,回顾性收集2015年1月1日—2019年12月31日来自6个地区8家医院的ATCI患者临床资料,经分期及临床症状统计后,使用因子分析中主成分分析法提取公因子,在因子分析的基础上进行聚类分析,结合证素辨证、聚类分析及专家讨论结果探讨动ATCI不同分期的证候情况。结果纳入3088例ATCI患者,其中急性期2290例,非急性期798例。除去中风主要症状(肢体麻木、无力及活动不利,言语不利,头晕),对84项四诊信息变量中出现频率≥5%的指标进行统计,急性期为36项,非急性期35项,经因子分析各提取出14项公因子,选取载荷系数>0.3的公因子进行证素判定,再将14个公因子组作为变量进行聚类,最终急性期、非急性期各聚为5类,结合临床实际和专家意见,急性期证候为气阴两虚、风痰瘀阻证(36.07%),气虚血瘀证(20.74%),风火上扰证(15.15%),阴虚风动证(9.43%),脾虚肝亢证(3.80%);非急性期证候为气阴两虚、瘀血阻络证(45.49%),气阴两虚证(20.05%),气滞血瘀证(16.42%),脾肾亏虚证(8.52%),肝阳上亢证(4.89%)。结论ATCI急性期证素以血瘀、火、内风、阳亢、气虚、阴虚等为主,非急性期以阴虚、气虚、血瘀、气滞等为主。ATCI的主要病机特征为气阴两虚,痰浊、血瘀阻络,根本病机为气阴两虚。

关键词：动脉粥样硬化性脑梗死证候特征证素因子分析聚类分析

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川芎嗪-黄芪甲苷降低缺血/再灌注损伤的大鼠脑组织中IL-1β和Caspase-3基因的表达：实时定量PCR的研究(英文)

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生理学报 2011年第3期63卷 272-280页

作者：朱振洪万海同李金辉浙江中医药大学生物工程学院杭州310053 浙江中医药大学心脑血管病研究所杭州310053

本文旨在运用实时荧光PCR技术建立大鼠脑缺血/再灌注(ischemia-reperfusion,I/R)中IL-1β和Caspase-3基因绝对定量分析方法。成年雄性Sprague-Dawely大鼠被随机分成了5组:假手术组、I/R模型组、黄芪甲苷组、川芎嗪-黄芪甲苷组、尼莫地... 详细信息

本文旨在运用实时荧光PCR技术建立大鼠脑缺血/再灌注(ischemia-reperfusion,I/R)中IL-1β和Caspase-3基因绝对定量分析方法。成年雄性Sprague-Dawely大鼠被随机分成了5组:假手术组、I/R模型组、黄芪甲苷组、川芎嗪-黄芪甲苷组、尼莫地平组。除假手术组外,其余各组均进行脑I/R处理,然后通过腹膜内注射进行药物处理,时间为脑I/R后0h、12h、1d、2d直至7d。假手术组和I/R模型组注射生理盐水(5mL/kg),黄芪甲苷组中黄芪甲苷剂量为20mg/kg,川芎嗪-黄芪甲苷组中川芎嗪和黄芪甲苷剂量分别为10mg/kg和20mg/kg,而尼莫地平组中尼莫地平剂量为10mg/kg。通过常规RT-PCR克隆了大鼠的IL-1β和Caspase-3基因,运用TA克隆技术分别构建了重组质粒pTA2-IL1和pTA2-Casp3,重组质粒经过紫外分光光度计测定A260/A280比值,并计算拷贝数。以该质粒作为标准品,首先对实时荧光PCR反应的引物进行筛选和验证,然后进行反应退火温度的优化,最后定量检测各组损伤的脑组织中IL-1β和Caspase-3的基因表达情况。结果显示,从候选引物中各筛选到一对最佳引物,熔解度曲线分析显示单一峰,琼脂糖电泳表明反应产物与预计目标产物大小一致。梯度退火温度实验表明IL-1β和Caspase-3基因的最佳退火温度分别是59°C和61.2°C。实时荧光PCR检测结果表明,与假手术组相比,I/R模型组中的IL-1β和Caspase-3表达显著升高;和I/R模型组相比,黄芪甲苷组、川芎嗪-黄芪甲苷组、尼莫地平组中IL-1β和Caspase-3基因表达水平均有所下降,特别是川芎嗪-黄芪甲苷组基因下调最显著。以上这些结果提示,本研究建立的方法适用于中药处理I/R模型后IL-1β和Caspase-3基因的定量分析。

关键词：实时PCR IL-1β Caspase-3 基因缺血再灌注损伤

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川芎嗪与葛根素合用对海马神经元损伤后的影响

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中国中药杂志 2008年第4期33卷 424-427页

作者：王玉万海同严伟民杨洁红郭莹潘远江韩进余勤浙江中医药大学心脑血管病研究所浙江杭州310053 浙江大学浙江杭州310027

目的：探讨β-淀粉样蛋白（amyloid-beta protein，Aβ）对原代培养海马神经元丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活力及乳酸脱氢酶（LDH）漏出量的影响及葛根素与川芎嗪合用对Aβ25-35诱导神经元损伤的保护作用。方法：通过Aβ2... 详细信息

目的：探讨β-淀粉样蛋白（amyloid-beta protein，Aβ）对原代培养海马神经元丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活力及乳酸脱氢酶（LDH）漏出量的影响及葛根素与川芎嗪合用对Aβ25-35诱导神经元损伤的保护作用。方法：通过Aβ25-35诱导体外培养的海马神经元，建立阿尔茨海默（AD）细胞模型，检测空白组（正常海马神经元）、模型组、脑复康组（终浓度为50μmol·L^-1）、川芎嗪组（终浓度为50μmol·L^-1）、葛根素组（终浓度为60μmol·L^-1），川芎嗪加葛根素组（葛根素注射液终浓度为30μmol·L^-1，川芎嗪注射液终浓度为25μmol·L^-1）对海马神经元SOD活性、MDA含量及LDH漏出量的影响。结果：成功建立海马神经元AD细胞模型，经检测模型组MDA含量及LDH漏出量显著高于空白对照组且SOD活力明显低于空白对照组，差异具有显著意义（P〈0．01）；脑复康组、川芎嗪加葛根素组MDA含量及LDH漏出量均低于模型组，且SOD活力明显高于模型组，差异均具有显著意义（P〈0．01）；川芎嗪与葛根素合用组在降低MDA含量及LDH漏出量及提高SOD活性方面的效果显著强于川芎嗪与葛根素单用，差异具有显著意义（P〈0．01）。结论：Aβ25-35诱导海马神经元存在自由基损伤，葛根素、川芎嗪能抗自由基损伤，对神经元具有保护作用，且二者合用在抗自由基损伤上具有协同作用。

关键词：阿尔茨海默病 β-淀粉样蛋白川芎嗪葛根素海马神经元细胞培养

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丹红有效成分配伍对缺氧损伤脑微血管内皮细胞的保护作用

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中国中药杂志 2014年第22期39卷 4399-4404页

作者：周惠芬何昱张宇燕杨洁红赵涛付巍周鹏万海同浙江中医药大学心脑血管病研究所浙江杭州310053 山东步长制药有限公司山东菏泽274000

为研究丹红有效成分配伍对缺氧致原代培养的乳鼠脑微血管内皮细胞(r BMECs)损伤的保护作用。原代培养乳鼠脑微血管内皮细胞并对细胞进行缺氧4 h损伤模型的同时,丹红有效成分(原儿茶醛、丹酚酸B、羟基红花黄色素A、丹参素)配伍作用于r BM... 详细信息

为研究丹红有效成分配伍对缺氧致原代培养的乳鼠脑微血管内皮细胞(r BMECs)损伤的保护作用。原代培养乳鼠脑微血管内皮细胞并对细胞进行缺氧4 h损伤模型的同时,丹红有效成分(原儿茶醛、丹酚酸B、羟基红花黄色素A、丹参素)配伍作用于r BMECs,MTT确定细胞非毒性剂量,采用比色法测定LDH,SOD活性和MDA水平,RT-PCR法检测ICAM-1,MMP-9,P53 mRNA表达,流式细胞术检测r BMECs细胞周期及早期凋亡的变化。丹红有效成分配伍1,2,3,7,8,9组方显著抑制缺氧细胞上清液中LDH的增加;1,2,4,6,7组方显著增强缺氧细胞内SOD活性;1,2,3,8,9组方显著降低MDA水平;1,2,6,7,9组方显著抑制缺氧诱导的r BMECs早期凋亡,缺氧后细胞P53 mRNA表达明显上调的后果是能引起G1期阻滞和促进细胞凋亡,证实P53基因的调节功能体现在G1期校正点的监测;1,2,5,6,7,8,9组方显著下调P53 mRNA表达;1,4,7,8,9组方显著下调ICAM-1 mRNA表达;1,3,6,9组方显著下调MMP-9 mRNA表达。丹红有效成分配伍对缺氧所致原代培养的r BMECs损伤具有明显的保护作用,其机制与增强细胞抗氧化能力,抑制炎症反应和细胞凋亡有关。为研究方剂配伍规律提供思路,指导临床用药。

关键词：有效成分配伍乳鼠脑微血管内皮细胞细胞凋亡抗氧化抗炎症

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