检索结果-内蒙古大学图书馆

中国药理学通报 2022年第2期38卷 311-318页

作者：严峻彬聂云梦张婷婷徐素美陈芝芸浙江中医药大学附属第一医院第二中心实验室浙江杭州310006

目的网络药理学筛选益气补肾调脂方(Yiqi-Bushen-Tiaozhi formula,YBTF)治疗非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)的机制;体内实验完成验证。方法TCMSP数据库、HPLC-MS明确YBTF成分、靶点;GSE89632数据集,筛选NASH与正常组差异基因;GeneCards、Disgenet数据库筛选疾病基因。交集为YBTF治疗NASH的靶基因。基因本体论(Gene Ontology,GO)、京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)、疾病本体论(Disease Ontology,DO)富集分析,蛋白互作网络(protein-protein interaction,PPI)、拓扑分析,明确治疗NASH关键基因。分子对接(molecular docking)预测活性成分、靶点能否结合,发挥疗效;油红O、HE染色检测肝脏脂肪变、炎症;β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)检测肝细胞衰老;荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,qRT-PCR),蛋白质免疫印迹法验证靶基因mRNA、蛋白表达。结果YBTF可调控周期依赖性激酶抑制剂1A(cyclin dependent kinase inhibitor 1A,CDKN1A)改善细胞衰老,治疗NASH。结论网络药理学结合实验可为研究YBTF治疗NASH的机制提供新的思路。

关键词：益气补肾调脂方非酒精性脂肪性肝炎网络药理学 CDKN1A 细胞衰老 β-半乳糖苷酶

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胡柚皮黄酮对棕榈酸诱导的脂肪变性肝细胞中线粒体膜电位以及自噬相关蛋白表达的影响

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浙江中西医结合杂志 2024年第1期34卷 28-33页

作者：王潇何蓓晖姚侃男陈芝芸浙江中医药大学附属第一医院(浙江省中医院)第二中心实验室杭州310006

目的观察胡柚皮黄酮(PTEC)对棕榈酸(PA)诱导的肝细胞脂肪变性的影响。方法MTT、油红O染色联合检测,设立0.3 mmol/L PA诱导HepG2细胞建立脂肪变性模型,不同浓度(0、20、40、80、160 mg/L)PTEC干预后,采用油红O染色法观察肝细胞脂肪变性;... 详细信息

目的观察胡柚皮黄酮(PTEC)对棕榈酸(PA)诱导的肝细胞脂肪变性的影响。方法MTT、油红O染色联合检测,设立0.3 mmol/L PA诱导HepG2细胞建立脂肪变性模型,不同浓度(0、20、40、80、160 mg/L)PTEC干预后,采用油红O染色法观察肝细胞脂肪变性;荧光探针法观测细胞内活性氧水平及线粒体膜电位变化;免疫印迹法检测自噬效应蛋白(Beclin-1)、微管相关蛋白质1轻链3(LC3)及P62蛋白表达。结果PA(0.3 mmol/L)诱导后,HepG2细胞内脂滴[(39.13±3.15)比(1.00±0.13),P<0.01]和活性氧[(18.56±1.48)比(1.00±0.25),P<0.01]含量明显增高;与PA组比较,PA+40、80、160 mg/L PTEC组细胞内脂滴[(16.35±4.00)、(6.26±1.69)、(2.76±2.05)比(39.13±3.15),P<0.01]和活性氧[(9.13±1.12)、(7.00±0.45)、(5.03±1.00)比(18.56±1.48),P<0.01]均明显降低,并在荧光显微镜下观察到线粒体膜电位恢复;进一步通过Western blot检测发现,LC3和Beclin-1蛋白表达上调,P62蛋白表达下调。结论PTEC能改善肝细胞脂肪变性和氧化应激反应,机制可能与其调控线粒体自噬,维持线粒体功能稳定有关。

关键词：非酒精性脂肪性肝炎胡柚皮黄酮自噬

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抗早1号对DEHP联合BPA诱导的雌性性早熟大鼠的治疗作用及机制研究

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浙江中西医结合杂志 2022年第9期32卷 790-794页

作者：郑月琳盛丽先王其莉何蓓晖浙江中医药大学附属第一医院儿科杭州310006 浙江中医药大学附属第一医院第二中心实验室杭州310006

目的观察抗早1号对邻苯二甲酸二酯(DEHP)联合双酚A(BPA)诱导的雌性大鼠性早熟模型的影响和作用机制。方法将雌性幼龄SD大鼠32只,按随机数字表法分为正常组、模型组及抗早1号低、高剂量组[5.04、10.08 mg/(g·d)],每组8只。除正常组... 详细信息

目的观察抗早1号对邻苯二甲酸二酯(DEHP)联合双酚A(BPA)诱导的雌性大鼠性早熟模型的影响和作用机制。方法将雌性幼龄SD大鼠32只,按随机数字表法分为正常组、模型组及抗早1号低、高剂量组[5.04、10.08 mg/(g·d)],每组8只。除正常组外,其余组大鼠均于21日龄采用DEHP 400 mg/kg联合BPA 200 mg/kg双诱导建立性早熟模型。抗早1号低、高剂量组于28日龄给药干预,正常组、模型组予等剂量生理盐水灌胃,共干预7 d。染毒后的24 h开始,检查阴道开口情况,1次/d;末次给药后,对大鼠子宫和卵巢进行病理学观察,计算子宫、卵巢系数;采用酶联免疫吸附试验检测各组血清雌二醇(E2)和黄体生成素(LH)的含量;通过超高效液相色谱-质谱联用仪检测尿邻苯二甲酸酯(PAEs)代谢产物邻苯二甲酸单乙基己基酯(MEHP)、邻苯二甲酸单乙基酮基己基酯(MEOHP)、邻苯二甲酸单乙基羟基己基酯(MEHHP)、邻苯二甲酸乙基羟基戊基酯(MECCP)、单邻苯二甲羟基己基酯(MCMHP)的含量。结果与正常组比较,性早熟模型组大鼠阴道开口时间显著提前[28.25±1.16)d比(33.38±1.30)d,P<0.01],子宫系数明显增加[(26.83±5.56)×10^(-4)比(18.21±3.87)×10^(-4),P<0.05],卵巢系数有升高趋势,但差异无统计学意义[(7.84±0.75)×10^(-4)比(6.76±1.25)×10^(-4),P>0.05]。与模型组比较,抗早1号低、高剂量组阴道开口时间显著延缓[(31.75±1.91)d、(32.25±1.49)d比(28.25±1.16)d,P均<0.01],高剂量组子宫、卵巢系数降低[子宫系数:(16.05±6.40)×10^(-4)比(26.83±5.56)×10^(-4),P<0.01;卵巢系数:(6.51±0.57)×10^(-4)比(7.84±0.75)×10^(-4),P<0.05]。抗早1号低、高剂量组血清E2水平降低[(68.67±9.21)ng/L、(58.20±6.67)ng/L比(85.80±14.08)ng/L,P<0.05或P<0.01],高剂量组血清LH水平降低[(8.09±2.48)mIU/mL比(11.05±2.15)mIU/mL,P<0.01]。抗早1号低、高剂量组尿PAEs代谢物水平明显下降[MEHP:(0.83±0.33)μg/mL、(1.16±0.86)μg/mL比(13.01±5.83)μg/mL;MEOHP:(125.55±28.19)μg/mL、(71.96±27.62)μg/mL比(466.26±129.03)μg/mL;MEHHP:(39.06±13.60)μg/mL、(27.71±14.67)μg/mL比(289.15±68.13)μg/mL;MECPP:(15.56±6.76)μg/mL、(6.51±4.31)μg/mL比(223.55±85.41)μg/mL;MCMHP:(2.73±1.30)μg/mL、(2.67±1.38)μg/mL比(99.26±28.05)μg/mL,P均<0.01]。结论环境内分泌干扰物DEHP联合BPA可成功诱导建立雌性性早熟大鼠模型。抗早1号可能通过降低血清LH、E2值,下调尿PAEs代谢产物表达水平,从而治疗性早熟。

关键词：大鼠性早熟抗早1号邻苯二甲酸酯双酚A

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盛丽先经验方清消Ⅰ号对肥胖小鼠血脂及炎症因子的影响

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中国中西医结合儿科学 2024年第3期16卷 206-210,F0003页

作者：郑月琳陈玉燕何蓓晖浙江中医药大学附属第一医院(浙江省中医院)儿科杭州310006 浙江中医药大学附属第一医院(浙江省中医院)第二中心实验室杭州310006

目的研究名中医盛丽先教授经验方清消Ⅰ号对高脂饮食诱导的肥胖小鼠血脂及炎症因子的影响。方法将32只C57BL/6J小鼠,随机分为对照组,模型组,中药低、高剂量组4组,每组8只。模型组给予高脂饮食8周,建立肥胖小鼠模型。于第9周起给药干预,... 详细信息

目的研究名中医盛丽先教授经验方清消Ⅰ号对高脂饮食诱导的肥胖小鼠血脂及炎症因子的影响。方法将32只C57BL/6J小鼠,随机分为对照组,模型组,中药低、高剂量组4组,每组8只。模型组给予高脂饮食8周,建立肥胖小鼠模型。于第9周起给药干预,对照组、模型组给予等剂量生理盐水灌胃,中药低、高剂量组分别灌胃5.04、10.08 mg/(g·d)清消Ⅰ号水煎剂,共干预8周。16周末,各组小鼠同时测定Lee′s指数,分离腹腔脂肪,苏木精-伊红染色观察病理。生化法测定血清胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白的含量,酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)的表达水平。结果模型组小鼠的体质量、肝脏湿质量、内脏脂肪质量以及Lee′s指数与对照组相比,均有显著增加;血清胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白含量显著增高,高密度脂蛋白含量显著降低,血清TNF-α及IL-6水平升高(P<0.05)。经清消Ⅰ号治疗后,与模型组比较,小鼠体质量、肝脏湿质量、内脏脂肪质量以及Lee′s指数均明显减低;血清胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白含量明显降低,高密度脂蛋白含量升高。血清TNF-α及IL-6水平降低(P<0.05)。结论清消Ⅰ号对高脂饮食引起的肥胖小鼠有较好的治疗作用,可能是通过降低血清炎症因子TNF-α及IL-6的表达水平,调节血脂,从而改善肝脏病理,减轻体质量。

关键词：肥胖清消Ⅰ号肿瘤坏死因子α 血脂高脂饮食小鼠

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非酒精性脂肪性肝病进展中肝组织细胞衰老相关基因P21、SIRT6和NF-κB mRNA表达

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浙江中西医结合杂志 2020年第8期30卷 631-633页

作者：谢益文徐素美陈芝芸杨晴柔何蓓晖浙江中医药大学附属第一医院全科医学科杭州310006 浙江中医药大学附属第一医院第二中心实验室杭州310018 浙江中医药大学第一临床医学院杭州310053

目的探讨非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)进展中肝组织细胞衰老相关基因P21、SIRT6和NF-κB表达的变化情况。方法采用高脂饮食建立NAFLD模型小鼠,分别在喂养第8、16、24周3个时间点,RealTime-PCR动态检测肝组织P21、SIRT6和NF-κB mRNA,研究... 详细信息

目的探讨非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)进展中肝组织细胞衰老相关基因P21、SIRT6和NF-κB表达的变化情况。方法采用高脂饮食建立NAFLD模型小鼠,分别在喂养第8、16、24周3个时间点,RealTime-PCR动态检测肝组织P21、SIRT6和NF-κB mRNA,研究肝组织细胞衰老相关基因P21、SIRT6和NF-κB表达的变化。结果RealTime-PCR结果显示,P21 mRNA表达水平在模型8周组与正常8周组差异无统计学意义[(1.38±0.70)比(1.10±0.51),P>0.05],而模型16周组和24周组则较正常组同期显著增高[(2.04±0.94)比(1.17±0.59),P<0.05;(1.83±0.64)比(1.04±0.31),P<0.05,P<0.01];SIRT6 mRNA表达水平在模型8周组较正常8周组明显增高[(1.82±0.50)比(1.14±0.67),P<0.05],而模型16周组较正常16周组有下降趋势,但差异无统计学意义[(0.88±0.43)比(1.27±1.03),P>0.05],模型24周组则较正常24周组明显下降[(0.56±0.18)比(1.14±0.65),P<0.05];NF-κB mRNA随造模时间(8周、16周、24周)增加而稍有增强,但与同期正常组相比差异均无统计学意义[(1.08±0.64)、(1.21±0.24)、(1.44±0.67)比(1.06±0.37)、(0.95±0.42)、(1.08±0.43),P均>0.05]。结论随NAFLD进展,肝细胞衰老现象逐渐增多,SIRT6在疾病进展中出现特征性的先升高后降低趋势,SIRT6基因在肝细胞衰老过程中起着重要作用。

关键词：小鼠非酒精性脂肪性肝病肝细胞衰老 P21 SIRT6/NF-κB

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医学研究杂志 2021年第12期50卷 60-63页

作者：吴明奇杨晴柔徐素美陈芝芸绍兴市第七人民医院老年二科、浙江中医药大学附属第一医院 312000 绍兴市第七人民医院神经内科 312000 浙江中医药大学附属第一医院全科杭州310006 浙江中医药大学附属第一医院第二中心实验室杭州310006

目的观察非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者血清趋化素Chemerin及相关炎性细胞因子CCL2、TNF-α的变化,探讨其在NAFLD发病中的作用。方法收集2018年4~6月在浙江中医药大学附属第一医院下沙院区接受体检,符合NAFLD临床诊断标准以及本研究纳... 详细信息

目的观察非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者血清趋化素Chemerin及相关炎性细胞因子CCL2、TNF-α的变化,探讨其在NAFLD发病中的作用。方法收集2018年4~6月在浙江中医药大学附属第一医院下沙院区接受体检,符合NAFLD临床诊断标准以及本研究纳入、排除标准的110例NAFLD患者,同时收集同期健康体检人群50例为对照组。采用液相芯片技术检测血清趋化素Chemerin、CCL2、TNF-α水平,分析血清趋化素Chemerin与BMI、血压、血糖、血脂和肝功能酶学等之间的关系。结果NAFLD组患者BMI、血糖、血压、TG、TC、LDL-C、ALT、AST、GGT、血清趋化素Chemerin、CCL2、TNF-α水平明显高于对照组(P<0.01),HDL-C水平显著低于对照组(P<0.01)。血清趋化素Chemerin与炎性细胞因子CCL2(R=0.490,P<0.01)、TNF-α(R=0.308,P<0.01)呈正相关。血清趋化素Chemerin与肝功能指标ALT(R=0.275,P<0.01)、AST(R=0.233,P<0.01)、GGT(R=0.359,P<0.01)呈正相关。血清趋化素Chemerin与MS相关标志物BMI(R=0.269,P<0.01)、TG(R=0.318,P<0.01)、SBP(R=0.310,P<0.01)、DBP(R=0.282,P<0.01)、血糖(R=0.242,P<0.05)呈正相关,与HDL-C(R=-0.335,P<0.01)呈负相关。结论血清趋化素Chemerin可能参与了NAFLD的炎性反应,与MS存在相关性。

关键词：非酒精性脂肪性肝病血清趋化素单核细胞趋化蛋白-1 肿瘤坏死因子α 炎症

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枳椇子对RAW264.7巨噬细胞极化的调控的作用及相关机制

枳椇子对RAW264.7巨噬细胞极化的调控的作用及相关机制

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第三届国际中西医结合肝病学术会议

作者：姚侃男冯彩珠朱肖鸿浙江省中医院第二中心实验室浙江中医药大学第一临床医学院浙江省中医院感染科

目的:探讨枳椇子对脂多糖(1ipopolysaccharides,LPS)诱导的巨噬细胞RAW264.7的极化调控及相关机制。方法:ELISA法检测IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α及FGF-β的含量;流式检测Kupffer细胞M1型和M2型的比率。结果:单纯LPS处理组及枳根子浓度... 详细信息

目的:探讨枳椇子对脂多糖(1ipopolysaccharides,LPS)诱导的巨噬细胞RAW264.7的极化调控及相关机制。方法:ELISA法检测IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α及FGF-β的含量;流式检测Kupffer细胞M1型和M2型的比率。结果:单纯LPS处理组及枳根子浓度<0.8 mg/ml时,促炎因子含量增加,抑炎因子含量减少;且与单纯LPS处理相比,不同浓度枳椇子处理组炎

关键词：枳椇子 RAW264.7细胞脂多糖

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