检索结果-内蒙古大学图书馆

农业生物技术学报 2025年第3期33卷 642-649页

作者：宋亚雯高宇杰张晓荟王温馨葛同鑫翟瑞东宋厚辉程昌勇李爱云韩月浙江农林大学动物科技学院/动物医学院/浙江省畜禽绿色生态健康养殖应用技术研究重点实验室/动物健康互联网检测技术浙江省工程研究中心/浙江省动物医学与健康管理国际科技合作基地/中澳动物健康大数据分析联合实验室浙江大学医学院附属妇产科医院

鸭沙门菌(Salmonella anatum)是引起鸭沙门菌病的主要病原微生物。rfaH是编码抗转录终止因子RfaH的基因，在细菌转录、感染等生物学特性中具有重要作用。为了研究rfaH基因对鸭沙门菌生长、运动、生物被膜和感染细胞等生物学特性的影响... 详细信息

鸭沙门菌(Salmonella anatum)是引起鸭沙门菌病的主要病原微生物。rfaH是编码抗转录终止因子RfaH的基因，在细菌转录、感染等生物学特性中具有重要作用。为了研究rfaH基因对鸭沙门菌生长、运动、生物被膜和感染细胞等生物学特性的影响，本研究通过Red同源重组技术，利用鸭沙门菌分离株SA01构建了rfaH基因缺失株ΔrfaH和回补株CΔrfaH。测序结果表明，SA01的rfbH基因缺失株ΔrfaH和回补株CΔrfaH构建成功。rfbH基因缺失后，SA01生长速率不变，但O抗原合成受损，细菌运动能力显著降低，生物被膜形成能力增强，对鸡胚成纤维细胞DF-1细胞的黏附和侵袭能力增强，在小鼠单核巨噬细胞RAW264.7中的增殖能力减弱。研究结果表明，rfbH基因参与沙门菌的运动、生物被膜形成和感染细胞等生物学过程。本研究初步阐明了SA01的rfaH基因的生物学功能，为开发基于鸭沙门菌的递呈载体疫苗提供了理论依据。

关键词：鸭沙门菌 rfaH基因生物学特性

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异荭草素的生物学功能研究进展

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中国畜牧兽医 2025年第4期52卷 1579-1589页

作者：罗通旺金研盛燚凡王书杰宋厚辉邵春艳浙江农林大学动物科技学院/动物医学院浙江省畜禽绿色生态健康养殖应用技术研究重点实验室动物健康互联网检测技术浙江省工程实验室动物医学与健康管理浙江省国际科技合作基地中澳动物健康大数据分析联合实验室杭州311300

异荭草素又称异荭草苷,是一种天然的黄酮类化合物,具有广泛的生物学活性和药理作用,主要存在于荞麦、麻花艽、人字草、千屈草和荭草等植物。已有的研究表明,异荭草素具有改善骨质疏松、治疗糖尿病、抗抑郁、抗肿瘤以及减轻脏器损伤等多... 详细信息

异荭草素又称异荭草苷,是一种天然的黄酮类化合物,具有广泛的生物学活性和药理作用,主要存在于荞麦、麻花艽、人字草、千屈草和荭草等植物。已有的研究表明,异荭草素具有改善骨质疏松、治疗糖尿病、抗抑郁、抗肿瘤以及减轻脏器损伤等多种功效,而其作用机制主要是通过抗氧化应激、抗炎和调控细胞凋亡来实现,作用过程中所涉及的关键蛋白包括核因子E2相关因子2(Nrf2)、核因子激活的B细胞κ-轻链增强复合物(NF-κB)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、胞内磷脂酰肌醇激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、血红素氧合酶-1(HO-1)等。此外,异荭草素的研究目前主要以实验鼠和相关细胞系为对象进行急性毒性和亚急性毒性试验,缺乏畜禽等其他动物或细胞的基础试验,这在一定程度上影响了异荭草素的产品开发和临床应用。作者综述了异荭草素生物学功能的研究进展,并对其在临床上的应用提出展望,以期为异荭草素生物学活性的进一步研究以及拓展其在临床上的应用提供新思路和理论支撑。

关键词：异荭草素抗氧化抗炎细胞凋亡调控

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冠状病毒基因组非编码区调控病毒复制机制研究进展

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中国兽医学报 2025年第2期45卷 379-388,396页

作者：张静苗何海健杨帆吴雨芯周莹珊董婉玉王晓杜浙江农林大学动物科技学院/动物医学院浙江省畜禽绿色生态健康养殖应用技术研究重点实验室/动物健康互联网检测技术浙江省工程实验室/动物医学与健康管理浙江省国际科技合作基地/中澳动物健康大数据分析联合实验室浙江杭州311300 金华职业技术大学农学院浙江金华321017

冠状病毒是迄今已知的基因组最大的RNA病毒,其中猪冠状病毒是引起仔猪急剧腹泻的重要病原体,具有高度变异特性,防控难度较高,每年给我国养猪业带来严重的经济损失。对冠状病毒RNA合成机制的解析有助于了解冠状病毒的遗传变异规律和筛选... 详细信息

冠状病毒是迄今已知的基因组最大的RNA病毒,其中猪冠状病毒是引起仔猪急剧腹泻的重要病原体,具有高度变异特性,防控难度较高,每年给我国养猪业带来严重的经济损失。对冠状病毒RNA合成机制的解析有助于了解冠状病毒的遗传变异规律和筛选抗病毒药物,目前研究较深入的主要是鼠冠状病毒(murine coronavirus, MHV)和2型人严重呼吸道综合征冠状病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)。为探究猪冠状病毒的复制机制,本研究以MHV和SARS-CoV-2等冠状病毒为参考,总结了其与猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)、传染性胃肠炎病毒(transmissible gastroenteritis virus, TGEV)、猪德尔塔冠状病毒(porcine deltacoronavirus, PDCoV)和猪急性腹泻综合征冠状病毒(swine acute diarrhea syndrome coronavirus, SADS-CoV)等猪冠状病毒非编码区调控病毒复制的机制。重点分析5′非编码区(5′untranslated region, 5′UTR)的保守基序及二级结构在病毒复制中的作用、3′UTR的保守结构如何调控病毒复制、病毒非编码区与宿主蛋白的相互作用调控病毒复制以及病毒非编码区变异特征等内容,为针对该类靶点的抗病毒药物和高病毒滴度疫苗候选株的开发提供理论基础。

关键词：冠状病毒非编码区病毒复制调控元件

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糖基水解酶参与猪链球菌2型的致病作用

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微生物学通报 2025年第2期52卷 643-653页

作者：范靖妍张锦鹏曹江东姜合祥邓思敏杨杨宋厚辉浙江农林大学动物科技学院动物医学院浙江省畜禽绿色生态健康养殖应用技术研究重点实验室动物健康互联网检测技术浙江省工程研究中心浙江省动物医学与健康管理国际科技合作基地“一带一路”同一健康和食品安全国际联合实验室中澳动物健康大数据分析联合实验室浙江杭州311300

【背景】猪链球菌2型(Streptococcus suis serotype 2,SS2)是一种重要的人畜共患病原菌,可引起猪和人的严重感染,导致肺炎和感染性休克,甚至死亡。【目的】尽管多数毒力因子被相继发现,但其致病机制仍不清晰,寻找新的毒力因子或毒力相... 详细信息

【背景】猪链球菌2型(Streptococcus suis serotype 2,SS2)是一种重要的人畜共患病原菌,可引起猪和人的严重感染,导致肺炎和感染性休克,甚至死亡。【目的】尽管多数毒力因子被相继发现,但其致病机制仍不清晰,寻找新的毒力因子或毒力相关基因进一步解析其致病机理依旧迫在眉睫。【方法】基于前期SS2的Tn917转座子插入突变体库的大蜡螟幼虫筛选结果,选取了一株致病性显著下降的插入突变体,其突变基因鉴定为B9H01_RS10315,编码糖基水解酶(glycosyl hydrolase,GhA)。通过构建ghA基因的缺失株(△ghA)及回补株(C△ghA),进行生长观察和体内体外致病力试验,探究ghA参与的致病作用。【结果】相较于野生株,缺失株△ghA表现出一定的生长缺陷,大蜡螟幼虫24 h致死率下降25%,对上皮细胞的黏附能力下降约50%,在全血中存活能力下降约35%,以及在细菌对细胞10倍和50倍的感染比下被吞噬细胞的吞噬增加约100%和200%。【结论】猪链球菌2型糖基水解酶GhA有助于细菌的生长,并通过促进细菌黏附、血液存活、抗吞噬能力等参与其致病过程。

关键词：猪链球菌致病作用毒力基因糖基水解酶

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A型塞内卡病毒、口蹄疫病毒和猪捷申病毒3重TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立

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中国兽医学报 2025年第1期45卷 22-29页

作者：甘诗琪魏千禾倪语晨倪健波赵秀玲董婉玉周莹珊王晓杜浙江农林大学动物科技学院·动物医学院浙江省畜禽绿色生态健康养殖应用技术研究重点实验室/动物健康互联网检测技术浙江省工程实验室/浙江省动物医学与健康管理国际科技合作基地/中澳动物健康大数据分析联合实验室宁波市口岸生物与食品安全检测重点实验室宁波海关技术中心

针对A型塞内卡病毒(Senecavirus A,SVA)、口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus, FMDV)和猪捷申病毒(porcine teschovirus, PTV)核酸的保守区域，设计了用于构建TaqMan荧光定量PCR体系的引物和探针。以含有这3种病毒核酸保守序列的... 详细信息

针对A型塞内卡病毒(Senecavirus A,SVA)、口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus, FMDV)和猪捷申病毒(porcine teschovirus, PTV)核酸的保守区域，设计了用于构建TaqMan荧光定量PCR体系的引物和探针。以含有这3种病毒核酸保守序列的重组阳性质粒标准品为模板，建立了3重TaqMan荧光定量PCR方法，并对该体系进行了优化，确定了该方法的特异性、重复性、灵敏性及标准曲线，同时建立了混合感染模型。此外，利用所构建的3重TaqMan荧光定量PCR方法对临床样品进行了检测。结果显示，该方法能够特异性检测SVA、FMDV和PTV 3种病毒，与其他病原体无交叉反应；检测SVA、FMDV和PTV的最低浓度均可达到1×10～1拷贝/μL;组间和组内变异系数均小于5%;在126份样品中未检出这3种病毒。上述结果表明，该方法具有较强的特异性、高灵敏性和良好的稳定性，可用于临床检测。

关键词： A型塞内卡病毒口蹄疫病毒猪捷申病毒荧光定量RT-PCR

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基于核苷三磷酸二磷酸水解酶的马锥虫病间接ELISA抗体检测方法的建立

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农业生物技术学报 2025年第1期33卷 220-227页

作者：曾晴勤李如松李红英王欣乐王莹夏天奇王璞时恒枝张路平郑亚东赵秀玲宋厚辉宁波海关技术中心/宁波市口岸生物与食品安全检测重点实验室四川省江油市动物疫病预防控制中心浙江农林大学动物科技学院&动物医学院/浙江省畜禽绿色生态健康养殖应用技术研究重点实验室/动物健康互联网检测技术浙江省工程研究中心/浙江省动物医学与健康管理国际科技合作基地/中澳动物健康大数据分析联合实验室河北医科大学第一医院心脏外科中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所(国家热带病研究中心)/国家卫生健康委员会寄生虫病原与媒介生物学重点实验室/世界卫生组织热带病合作中心/传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室

伊氏锥虫病通常称为苏拉(Surra)，是由伊氏锥虫(Trypanosoma evansi)寄生于马(Equus)、骆驼(Camelus)等动物的血液而引起的一种原虫病。精准诊断是有效防控伊氏锥虫病的关键环节，但是现有诊断技术存在假阴性率高、价格昂贵等缺点。本... 详细信息

伊氏锥虫病通常称为苏拉(Surra)，是由伊氏锥虫(Trypanosoma evansi)寄生于马(Equus)、骆驼(Camelus)等动物的血液而引起的一种原虫病。精准诊断是有效防控伊氏锥虫病的关键环节，但是现有诊断技术存在假阴性率高、价格昂贵等缺点。本研究在体外重组表达伊氏锥虫的核苷三磷酸二磷酸水解酶(nucleoside triphosphate diphosphohydrolase, TeNTPDase)，通过优化抗原包被浓度及其条件、血清稀释度及其孵育条件、酶标二抗稀释度及其孵育条件等反应参数，建立基于TeNTPDase的马锥虫病间接ELISA抗体检测方法。结果显示，重组TeNTPDase主要以包涵体形式表达，大小约为60 kD；建立的ELISA方法在不同批次包被抗原中的变异系数为3.50%～7.32%，均小于10%，在37℃不同孵育时间内的变异系数为3.89%～14.45%，小于15%，表明所建立的方法具有较好的重复性和稳定性；利用建立的ELISA方法检测马临床血清样品，结果显示，伊氏锥虫病的阳性率为5.83%(7/120)，与商品化ELISA试剂盒的阳性率(3.33%)没有显著差异，符合率为92.5%(111/120)。本研究为马锥虫病诊断和有效防控提供技术支持。

关键词：伊氏锥虫病马核苷三磷酸二磷酸水解酶(NTPDase) ELISA

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GCN2激酶在病毒感染中作用机制的研究进展

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中国预防兽医学报 2025年第1期47卷 102-107页

作者：毕海洋李森岳商译元吴娴秘宁宁张燕茹陈铭杰李芳徐庆远曾怡能张亚南李向臣武永淑浙江农林大学动物科技学院动物医学院/浙江省畜禽绿色生态健康养殖应用技术研究重点实验室/动物健康互联网检测技术浙江省工程实验室/动物医学与健康管理浙江省国际科技合作基地/中澳动物健康大数据分析联合实验室浙江杭州311300

在哺乳动物中有4个真核翻译起始因子2α(Eu⁃karyotic initiation factor 2α,eIF2α)激酶,即一般性调控阻遏蛋白激酶2(General control nonderepressible 2,GCN2)、蛋白激酶R样内质网激酶(PKR-like ER ki⁃nase,PERK)、双链RNA依赖性蛋白激酶(Doublestranded RNA-dependent protein kinase,PKR)和血红素调节抑制剂激酶(Heme-regulated inhibitor,HRI)[1],这4个激酶会在不同胁迫条件下磷酸化eIF2α亚基第51位的丝氨酸/苏氨酸,从而削弱了eIF2在翻译过程中结合GTP的能力,进一步抑制细胞总体蛋白翻译以缓解细胞应激,恢复细胞蛋白稳态,这种细胞反应被称为整合应激反应(Integrated stress response,ISR)[2]。

关键词：病毒感染 eIF2α激酶蛋白翻译 GCN2激酶

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猪非典型瘟病毒、经典猪瘟病毒、日本乙型脑炎病毒的三重荧光定量PCR检测方法的建立与应用

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中国预防兽医学报 2025年第02期47卷 144-151页

作者：许浩文陈军光马琼琼潘杏明郭美君朱伟群周莹珊董婉玉王晓杜浙江农林大学动物科技学院/动物医学院/浙江省畜禽绿色生态健康养殖应用技术研究重点实验室/动物健康互联网检测技术浙江省工程研究中心/浙江省动物医学与健康管理国际科技合作基地/中澳动物健康大数据分析联合实验室宁海县动物卫生监督所宁波绿港水产牧业有限公司

猪非典型瘟病毒（APPV）、经典猪瘟病毒（CSFV）、日本乙型脑炎病毒（JEV）均属于黄病毒科重要成员，从临床症状难以区分且三者的混合感染。为建立一种能快速鉴别检测APPV、CSFV、JEV的三重荧光定量PCR(qPCR）检测方法，本研究根据APPV ... 详细信息

猪非典型瘟病毒（APPV）、经典猪瘟病毒（CSFV）、日本乙型脑炎病毒（JEV）均属于黄病毒科重要成员，从临床症状难以区分且三者的混合感染。为建立一种能快速鉴别检测APPV、CSFV、JEV的三重荧光定量PCR(qPCR）检测方法，本研究根据APPV 5'UTR基因、CSFV E2基因和JEV E基因分别设计引物与探针，将公司合成的重组质粒标准品pLKO.1-APPV-5'UTR、pLKO.1-CSFV-E2和pLKO.1-JEV-E按体积比1:1:1混合后均为（1×10～8拷贝/μL）作为模板，经反应条件优化，初步建立同时检测这3种病毒的三重q PCR方法。以本研究构建的APPV慢病毒、CSFV慢病毒、JEV慢病毒，以及猪流感病毒、猪Delta冠状病毒、猪流行性腹泻病毒、伪狂犬病病毒、猪圆环病毒2型、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪轮状病毒、猪传染性胃肠炎病毒、诺如病毒的基因组为模板，采用建立的该方法检测，评估其特异性，结果显示，该方法仅能检测到APPV、CSFV、JEV的慢病毒，而其他病原检测结果均为阴性。选取1×10～1拷贝/μL～1×10～8拷贝/μL的混合质粒标准品和1×10～1TU/m L～1×10～6TU/m L的三种混合慢病毒液分别作为模板，采用本研究建立的方法检测，评估该方法的敏感性，结果显示，该方法对重组质粒pLKO.1-APPV-5'UTR、pLKO.1-CSFV-E2和pLKO.1-JEV-E的检测限均为1×10～2拷贝/μL，对3种慢病毒的检测限均为1×10～2TU/mL。以1×10～7拷贝/μL、1×10～5拷贝/μL、1×10～3拷贝/μL的质粒标准品混合物作为模板，分别进行组内和组间的重复性试验，结果显示，组内和组间重复性试验的变异系数（CV）均低于4.5%。利用本研究建立的三重qPCR和已发表的3种病原的SYBR Green qPCR检测方法对111份临床样品（75份猪肛拭子样品和36份猪组织病料样品）分别检测，结果显示，该三重qPCR方法与已发表的APPV、CSFV、JEV SYBR Green qPCR方法的总符合率分别为99.10%、100%、100%。本研究首次建立的检测APPV、CSFV、JEV的三重TaqMan qPCR方法特异性强、敏感性高、重复性好，为三者临床样品的快速鉴别检测提供了技术支持。

关键词：猪非典型瘟病毒经典猪瘟病毒日本乙型脑炎病毒三重荧光定量PCR

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DegU调控单核细胞增生李斯特菌感染宿主细胞及适应高温的机制研究

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微生物学报 2023年第12期63卷 4726-4737页

作者：毛敏杰周思廖俊慧李豪杰徐加利金浩博金戈旋朱富鑫孙静宋厚辉邓思敏程昌勇浙江农林大学动物科技学院·动物医学院浙江省畜禽绿色生态健康养殖应用技术研究重点实验室动物健康互联网检测技术浙江省工程研究中心浙江省动物医学与健康管理国际科技合作基地中澳动物健康大数据分析联合实验室浙江杭州311300

【目的】本研究旨在探究孤儿调节因子DegU在介导单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes)宿主感染和高温环境适应性方面的调控机制。【方法】本研究以单增李斯特菌参考菌株EGD-e、degU基因缺失菌株ΔdegU和回补菌株CΔdegU为研究... 详细信息

【目的】本研究旨在探究孤儿调节因子DegU在介导单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes)宿主感染和高温环境适应性方面的调控机制。【方法】本研究以单增李斯特菌参考菌株EGD-e、degU基因缺失菌株ΔdegU和回补菌株CΔdegU为研究材料,通过细胞模型、实时荧光定量聚合酶链式反应和凝胶阻滞试验等方法探究DegU对单增李斯特菌感染宿主细胞和适应高温的调控机制。【结果】研究结果表明:缺失degU后,单增李斯特菌在Caco-2上的黏附和侵袭能力显著降低,在RAW264.7中的增殖能力显著降低,在L929中的空斑形成能力也显著降低;进一步通过实时荧光定量聚合酶链式反应检测degU基因缺失后引起的单增李斯特菌毒力因子转录水平变化,发现多个重要毒力因子转录水平均显著下调;该试验结果还发现与毒力相关的热应激基因clpE(受CtsR抑制的ATP依赖蛋白水解酶编码基因)转录水平显著升高,而在43℃高温条件下,clpE转录水平显著降低;进一步通过凝胶阻滞试验结果表明DegU能够与clpE的启动子直接结合。【结论】综上所述,degU基因缺失能够降低单增李斯特菌在宿主感染过程中的细胞黏附、侵袭、胞内增殖和胞间迁移能力;DegU能够与clpE启动子结合,直接调控clpE基因的转录水平来适应高温环境。该研究为进一步深入解析单增李斯特菌的宿主感染和环境适应性机制奠定了试验基础。

关键词：单增李斯特菌孤儿调节因子DegU 宿主细胞感染毒力因子高温适应

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单增李斯特菌耐药外排泵研究进展

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微生物学报 2024年第5期64卷 1331-1347页

作者：夏菁罗亚如宋厚辉程昌勇浙江农林大学动物科技学院·动物医学院、浙江省畜禽绿色生态健康养殖应用技术研究重点实验室、动物健康互联网检测技术浙江省工程研究中心、浙江省动物医学与健康管理国际科技合作基地、中澳动物健康大数据分析联合实验室浙江杭州311300

单增李斯特菌是一种重要的人兽共患食源性胞内致病菌,广泛存在于自然环境中且易污染动物性食品,人及动物感染后可引起严重的李斯特菌病,死亡率高达30%。单增李斯特菌通常对多种药物敏感,然而,因不合理使用抗菌药或消毒剂形成的选择压力... 详细信息

单增李斯特菌是一种重要的人兽共患食源性胞内致病菌,广泛存在于自然环境中且易污染动物性食品,人及动物感染后可引起严重的李斯特菌病,死亡率高达30%。单增李斯特菌通常对多种药物敏感,然而,因不合理使用抗菌药或消毒剂形成的选择压力导致李斯特菌多重耐药情况的报道日渐增多。外排泵蛋白是细菌中一类重要的蛋白,可参与机体多种生物学过程,包括影响细菌对抗生素敏感性、促进有毒化合物泵出、影响细菌毒力等。本文综述了近年来关于单增李斯特菌耐药外排泵的功能及调控机制的研究进展,为深入理解李斯特菌耐药等环境适应机制及有效控制该病原污染传播和筛选抗感染药物新靶点提供理论基础。

关键词：单增李斯特菌外排泵多重耐药毒力

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