检索结果-内蒙古大学图书馆

北方园艺 2021年第6期 129-137页

作者：陈佳宝闫道良郑炳松浙江农林大学林业与生物技术学院亚热带森林培育国家重点实验室浙江杭州310000

不定根诱导发生是研究植物发育和形态建成的一个重要理论课题,也是优良林木无性繁殖、成功实现转基因材料植株再生以及加速林业产品原料植物规模化栽培的关键问题。植物不定根的发生是一个十分复杂且多因素影响的过程,是植物体内的内源... 详细信息

不定根诱导发生是研究植物发育和形态建成的一个重要理论课题,也是优良林木无性繁殖、成功实现转基因材料植株再生以及加速林业产品原料植物规模化栽培的关键问题。植物不定根的发生是一个十分复杂且多因素影响的过程,是植物体内的内源因素和体外的外源因子共同作用的过程。该研究通过归纳国内外关于不定根发生的形态解剖、生理生化、植物分子方面的研究进展,分析不定根发生过程中存在的不同影响因素及其影响效果,以期为植物不定根诱导研究提供有力的理论依据,并为实践中植物无性繁殖诱导不定根提供参考依据。

关键词：不定根激素根诱导生根机制

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亚热带天然林转变为毛竹林和茶园对土壤胞外酶活性的影响

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农业环境科学学报 2022年第4期41卷 826-833页

作者：张海阔张宝刚周钟昱梁佳辉吴家森吕玉龙解宏图蔡延江浙江农林大学省部共建亚热带森林培育国家重点实验室杭州311300 浙江农林大学环境与资源学院杭州311300 浙江农林大学林业与生物技术学院杭州311300 安吉县自然资源和规划局浙江安吉313300 中国科学院沈阳应用生态研究所沈阳110016

为揭示我国亚热带地区天然林转变为毛竹林和茶园后土壤胞外酶活性(Extracellular enzyme activities,EEAs)的变异特征及关键驱动因子,以浙江省安吉县的天然林土壤及天然林转变的粗放经营毛竹林和集约经营茶园土壤为研究对象,测定了土壤E... 详细信息

为揭示我国亚热带地区天然林转变为毛竹林和茶园后土壤胞外酶活性(Extracellular enzyme activities,EEAs)的变异特征及关键驱动因子,以浙江省安吉县的天然林土壤及天然林转变的粗放经营毛竹林和集约经营茶园土壤为研究对象,测定了土壤EEAs及若干环境因子参数,通过冗余分析等分析方法筛选出了影响土壤EEAs的关键驱动因子。结果表明:与天然林相比,粗放经营毛竹林和集约经营茶园土壤酸性磷酸酶(Acid phosphatase,ACP)活性均显著降低,酚氧化酶(Phenol oxidase,POX)活性均显著升高;粗放经营毛竹林土壤亮氨酸氨基肽酶(Leucine aminopeptidase,LAP)活性显著升高;集约经营茶园土壤β-葡萄糖苷酶(β1,4-glucosidase,BG)、纤维二糖水解酶(Cellobiohydrolase,CBH)、N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶(β-1,4-N-acetyl-glucosaminnidase,NAG)活性均显著降低。由以上结果可推知,与天然林相比,茶园土壤氮、磷养分相对充足,毛竹林土壤的磷限制有所缓解,茶园和毛竹林土壤中微生物以惰性碳作为主要的能量来源。此外,冗余分析表明,土壤pH在环境因子中的贡献率最高,是土壤总体EEAs变化的关键驱动因子。综上所述,相比天然林,转变后的粗放经营毛竹林和集约经营茶园土壤EEAs发生了明显变化,土壤pH作为关键驱动因子解释了亚热带地区天然林转变为毛竹林和茶园后土壤总体EEAs的改变。

关键词：土壤胞外酶活性关键驱动因子天然林毛竹林茶园土地利用变化

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毛竹GRF基因家族全基因组鉴定与表达分析

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浙江农林大学学报 2021年第4期38卷 792-801页

作者：阮诗雨张智俊陈家璐马瑞芳朱丰晓刘笑雨浙江农林大学省部共建亚热带森林培育国家重点实验室浙江杭州311300 浙江农林大学林业与生物技术学院浙江杭州311300

【目的】探究毛竹Phyllostachys edulis GRF基因家族的性质、结构特点以及在不同组织中的表达水平,为进一步研究GRF在毛竹生长发育中的分子作用机制奠定基础。【方法】采用生物信息学方法,对毛竹全基因组和转录组信息进行分析,筛选出13... 详细信息

【目的】探究毛竹Phyllostachys edulis GRF基因家族的性质、结构特点以及在不同组织中的表达水平,为进一步研究GRF在毛竹生长发育中的分子作用机制奠定基础。【方法】采用生物信息学方法,对毛竹全基因组和转录组信息进行分析,筛选出13个毛竹GRF基因家族成员,并对GRF基因家族的理化性质、进化、基因结构、保守结构域、启动子、基因家族表达模式及三级结构进行分析。【结果】毛竹GRF基因家族成员按照其在scaffold上分布的位置,分别被命名为PeGRF01~PeGRF13;将含有3个内含子的PeGRF04和PeGRF12归为非ε组,其余为ε组。毛竹各GRF基因家族成员理化性质存在一定的差异,但是其结构域相对保守,均含有14/3/3结构域。毛竹GRF家族启动子区含有大量与光响应、低温响应、激素调控等相关的顺式作用元件。毛竹GRF存在基因复制扩增的现象,与水稻Oryza sativa的共线性关系明显高于拟南芥Arabidopsis thaliana。毛竹GRF在不同组织器官中均有表达,各家族成员的表达量存在差异;在毛竹花和根组织中的表达量略高于叶和鞭,同时家族成员间的表达量也存在一定差异。GRF蛋白质由2个单体构成,每个单体由9个α-螺旋构成,整体结构呈"W"型。【结论】毛竹GRF基因家族具有典型的14/3/3结构域,可能参与根、鞭、叶、花序及笋芽的生长发育过程。图6表1参39。

关键词：毛竹 GRF基因家族系统进化共线性基因表达水平

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转座子与转座子相关的非编码小RNA

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中国细胞生物学学报 2022年第2期44卷 362-371页

作者：李首道周明兵浙江农林大学林业与生物技术学院亚热带森林培育国家重点实验室杭州311300

转座子是一种在真核生物基因组中大量存在的可移动DNA序列。非编码小RNA具有广泛的生物学功能,能够在不同层面影响基因的表达。在许多真核生物基因组中,转座子是非编码小RNA的重要来源。最近的一些研究发现,转座子和其衍生非编码小RNA... 详细信息

转座子是一种在真核生物基因组中大量存在的可移动DNA序列。非编码小RNA具有广泛的生物学功能,能够在不同层面影响基因的表达。在许多真核生物基因组中,转座子是非编码小RNA的重要来源。最近的一些研究发现,转座子和其衍生非编码小RNA在基因调控中发挥着重要作用,但是国内相关的综述却较少。所以该文从转座子与其衍生的非编码小RNA的关系,这些小RNA在基因组和生物进化中扮演的角色两方面,对现阶段关于转座子和非编码小RNA的相关研究成果进行综述。

关键词：转座子非编码小RNA 微小RNA

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无子瓯柑E3泛素连接酶基因CsRNF217的克隆与功能分析

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果树学报 2022年第2期39卷 157-168页

作者：孙明艳叶潇铃蔡子涵张林张敏张迟浙江农林大学园艺科学学院·浙江省山区农业高效绿色生产协同创新中心杭州311300 浙江农林大学林业与生物技术学院·省部共建亚热带森林培育国家重点实验室杭州311300 浙江省农业技术推广中心杭州310005

【目的】无子瓯柑是其野生型的雄性不育突变体。基于转录组-代谢组关联分析,克隆无子瓯柑E3泛素连接酶基因CsRNF217,分析其序列特征、表达模式、亚细胞定位及基因功能。【方法】采用生物信息学方法分析无子瓯柑CsRNF217基因序列特征;利... 详细信息

【目的】无子瓯柑是其野生型的雄性不育突变体。基于转录组-代谢组关联分析,克隆无子瓯柑E3泛素连接酶基因CsRNF217,分析其序列特征、表达模式、亚细胞定位及基因功能。【方法】采用生物信息学方法分析无子瓯柑CsRNF217基因序列特征;利用实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qRT-PCR)分析时空表达模式;根据转基因烟草表型特征分析基因功能,采用烟草瞬时表达分析其亚细胞定位。【结果】无子瓯柑CsRNF217基因cDNA全长768 bp,编码255个氨基酸,具有RING型E3家族典型结构域。qRT-PCR结果显示,无子瓯柑CsRNF217基因在雄蕊中表达量最高,在小孢子发育后期上调表达。过表达转基因烟草的种子数量和花粉活力显著下降。烟草叶片瞬时表达的荧光信号特异位于细胞核。【结论】无子瓯柑CsRNF217基因编码RING型E3,定位于细胞核,在雄蕊中表达量最高,在花粉发育晚期上调表达,推测对无子瓯柑和过表达转基因烟草的花粉发育过程可能起到负向调控作用。

关键词：无子瓯柑 E3泛素连接酶雄性不育亚细胞定位遗传转化

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红色荧光蛋白基因DsRED在核桃植株再生过程中的表达稳定性

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林业科学 2020年第12期56卷 166-176页

作者：任飞张佳琦胡恒康梁璧黄有军娄和强张启香浙江农林大学林业与生物技术学院省部共建亚热带森林培育国家重点实验室杭州311300

【目的】报告基因是编码易被检测的蛋白质或酶的基因。红色荧光蛋白基因DsRED因其优异的适用特性已作为报告基因广泛应用于动植物以及酵母等真核细胞内基因表达的研究。课题组前期已将DsRED成功转入核桃体细胞胚,阳性体胚生长及增殖正... 详细信息

【目的】报告基因是编码易被检测的蛋白质或酶的基因。红色荧光蛋白基因DsRED因其优异的适用特性已作为报告基因广泛应用于动植物以及酵母等真核细胞内基因表达的研究。课题组前期已将DsRED成功转入核桃体细胞胚,阳性体胚生长及增殖正常、阳性再生植株长势良好。本研究通过对核桃体细胞胚和再生植株中DsRED基因的跟踪研究,探讨DsRED作为报告基因在核桃再生植株中的表达是否稳定以及对再生植株的后续生长和发育是否具有影响,同时为进一步拓宽DsRED作为报告基因的应用范围提供参考。【方法】通过荧光显微镜检测核桃体细胞胚、继代培养3年的组培苗以及3年生温室苗的DsRED荧光表达的稳定性,并通过PCR、qRT-PCR以及Western Blot技术检测DsRED基因及其编码蛋白在核桃体细胞胚和组培苗中表达的稳定性。同时,通过对DsRED组培苗及3年生苗的形态指标进行测定,从而明确DsRED作为外源报告基因的可靠性。【结果】核桃DsRED体细胞胚在白光下呈粉红至红色,荧光下呈明亮的红色;与对照相似,DsRED体细胞胚发育也经历了球形胚、心形胚、鱼雷胚和子叶胚阶段,且形态正常。DsRED组培苗和3年生苗在荧光下植株表面呈现明亮的红色,而对照无激发,视野中呈现黑色,且白光下二者表型一致。DsRED组培苗和3年生苗的茎、叶生长参数与对照相比无显著差异。显微结构荧光检测发现,DsRED在组培苗和3年生苗营养器官的维管束部位表达量较高。对核桃DsRED体胚和组培苗进行PCR检测发现DsRED体胚和组培苗均可扩增获得目的条带,与预期条带大小一致(681 bp);qRT-PCR检测结果显示,DsRED组培苗各组织及DsRED体胚的DsRED mRNA表达量无显著性差异,而对照体胚和组培苗中表达量为0。Western Blot检测结果表明,DsRED组培苗和体胚有26 kDa强阳性条带,对照植株中无特异性条带,进一步分析条带灰度,结果表明DsRED组培苗各组织间及DsRED体胚的DsRED表达量无显著性差异,而对照相应结构中表达量均为0。【结论】DsRED基因转入核桃体胚后,可在体胚和继代培养3年的组培苗中正常翻译和稳定表达,3年生温室苗DsRED表达稳定且植株表型正常,表明DsRED是核桃理想的遗传转化报告基因。研究结果可为DsRED作为报告基因在果树中的应用提供参考。

关键词：核桃报告基因红色荧光蛋白 DsRED 体细胞胚再生植株

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山核桃贝壳杉烯氧化酶基因CcKO的克隆和表达分析

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林业科学 2020年第10期56卷 70-82页

作者：梁璧张佳琦任飞胡恒康徐川梅胡渊渊黄有军娄和强张启香浙江农林大学林业与生物技术学院省部共建亚热带森林培育国家重点实验室杭州311300

【目的】内根-贝壳杉烯氧化酶(KO)是赤霉素(GAs)生物合成途径关键酶,也是植物GAs生物合成抑制剂多效唑的靶酶,若GAs生物合成途径中在KO基因位点发生阻塞,会影响植株的正常生长。本研究克隆山核桃CcKO基因(Caca0733S0131)及其启动子并进... 详细信息

【目的】内根-贝壳杉烯氧化酶(KO)是赤霉素(GAs)生物合成途径关键酶,也是植物GAs生物合成抑制剂多效唑的靶酶,若GAs生物合成途径中在KO基因位点发生阻塞,会影响植株的正常生长。本研究克隆山核桃CcKO基因(Caca0733S0131)及其启动子并进行表达分析,以利于进一步探究山核桃CcKO基因在植物生长和发育过程中,尤其是与株高调控相关的生物学功能,从而助力山核桃优新种质的创制。【方法】以山核桃体细胞胚为试验材料,采用同源重组及PCR扩增技术,克隆获得山核桃KO的基因及启动子序列,并进一步构建了具有强启动子的35S∷CcKO∷GFP过表达载体和CcKOpro∷GUS启动子表达载体;利用BLAST在线工具得到该基因编码的氨基酸序列,并对其进行生物信息学分析和同源性分析;进一步通过农杆菌介导法将启动子表达载体及过表达载体转入核桃体细胞胚并进行植株再生试验,分别获得阳性再生植株,从而深入分析山核桃CcKO基因的生物学功能。【结果】通过克隆,获得1条山核桃CcKO开放阅读框,其全长为1563 bp,共编码520个氨基酸,相对分子量为59.076 kDa。氨基酸同源性分析表明,山核桃CcKO含有细胞色素P450核心功能域FXXGXRXCXG和氨基端的跨膜结构域。BLAST结果表明,山核桃CcKO氨基酸序列与核桃JrKO氨基酸序列同源性为96%,与白梨、苹果、板栗、欧洲栓皮栎的氨基酸同源性分别为71%、79%、77%、76%。对核桃体细胞胚进行遗传转化:启动子表达经GUS染色和PCR验证表明,CcKOpro∷GUS启动子表达载体被成功转入核桃体细胞胚中,且山核桃CcKO基因主要定位于维管束中;过量表达经荧光检测显示及PCR验证表明,35S∷CcKO∷GFP过表达载体被成功转入核桃体细胞胚中;表型分析结果显示,阳性再生植株株高显著高于对照,且山核桃CcKO基因的表达丰度越高,其株高越高;实时荧光定量PCR及相关分析表明,该基因表达具有空间差异,茎中表达量显著高于其他组织部位,且过量表达可使核桃阳性再生植株GAs合成通路下游GA20ox表达量升高而GA2ox表达量下降。【结论】山核桃CcKO基因编码区全长1563 bp,编码520个氨基酸,该基因所编码的氨基酸序列与核桃JrKO氨基酸序列同源性最高,同源性为96%;启动子表达载体定位结果表明该基因主要定位于维管束。过量表达山核桃CcKO基因的核桃再生植株中,KO mRNA表达量明显升高,植株表现出明显的伸长特征,并且CcKO过量表达可使其GA20ox表达量上调,GA2ox表达量下调。本研究结果可为进一步分析KO基因在山核桃及核桃生长发育过程中的作用提供参考。

关键词：山核桃核桃内根-贝壳杉烯氧化酶启动子遗传转化基因表达

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毛竹GMD基因家族全基因组鉴定与表达分析

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分子植物育种 2021年第2期19卷 459-468页

作者：阮诗雨张智俊陈家璐马瑞芳朱丰晓刘笑雨浙江农林大学省部共建亚热带森林培育国家重点实验室杭州311300 浙江农林大学林业与生物技术学院杭州311300

GDP-甘露糖4,6-脱水酶(GDP-mannose 4,6-dehydratase, GMD)是生物体内参与多糖合成代谢的一个重要基因。本研究利用毛竹全基因组和转录组数据信息,对GMD基因家族进行细致分析,共鉴定出39个家族成员。毛竹GMD各家族基因的理化性质有一定... 详细信息

GDP-甘露糖4,6-脱水酶(GDP-mannose 4,6-dehydratase, GMD)是生物体内参与多糖合成代谢的一个重要基因。本研究利用毛竹全基因组和转录组数据信息,对GMD基因家族进行细致分析,共鉴定出39个家族成员。毛竹GMD各家族基因的理化性质有一定差异,但所含甘露糖4,6脱水酶结构域进化相对保守。进化树分析将毛竹GMD基因家族分为3大类。该家族基因上游启动子序列存在多种光响应、环境胁迫、激素应答等有关顺式作用元件。同源模建显示毛竹GMD为同源二聚体蛋白质,两个亚基均有相同或催化功能。转录组数据分析发现,部分成员GMD基因在竹笋生长阶段基因高表达特征明显,表明其可能参与笋的生长发育。另外,GMD的表达受到不同激素的影响。本研究通过对GMD基因的生物信息学分析,有利于进一步明确毛竹GMD基因的功能及其在岩藻糖生物合成途径中的作用。

关键词：毛竹(Phyllostachys edulis) GMD基因家族系统进化共线性基因表达

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浙江平阳县典型绿竹林土壤质量分析

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竹子学报 2022年第1期41卷 60-65页

作者：邱金莲王刚郭明阳史文辉应叶青浙江农林大学林业与生物技术学院省部共建亚热带森林培育国家重点实验室浙江杭州311300

为科学评价浙江平阳县地区绿竹林土壤环境质量,选取平阳县典型绿竹林样地,取样分析了土壤物理和化学性质及土壤酶活性,并采用主成分法对土壤因子进行分析。结果显示:研究区绿竹林土壤容重在1.37~1.51 g·cm^(-3),含水率在24.33%~27.... 详细信息

为科学评价浙江平阳县地区绿竹林土壤环境质量,选取平阳县典型绿竹林样地,取样分析了土壤物理和化学性质及土壤酶活性,并采用主成分法对土壤因子进行分析。结果显示:研究区绿竹林土壤容重在1.37~1.51 g·cm^(-3),含水率在24.33%~27.67%,孔隙度在43.15%~48.08%之间。土壤全氮、全磷、全钾含量分别在1.09~2.29 g·kg^(-1)、0.38~0.61 g·kg^(-1)、21.74~34.41 g·kg^(-1)。土壤碱解氮、有效磷和速效钾含量分别在100.98~119.60 mg·kg^(-1)、2.25~4.94 mg·kg^(-1)和150.56~213.56 mg·kg^(-1)之间。土壤脲酶、酸性磷酸酶、硝酸还原酶、亚硝酸还原酶活性分别在1175.09~1332.93μg·d^(-1)·g^(-1)、6.93~9.22 mg·d^(-1)·g^(-1)、19.42~25.52μg·d^(-1)·g^(-1)、21.66~28.85μg·d^(-1)·g^(-1)之间。主成分分析结果显示:绿竹林土壤前5个主分量累计方差贡献率达85.18%。绿竹林土壤中第1和第2主分量反应原始数据信息的61.15%,其中以全氮、全磷、碱解氮、有效磷、速效钾、全钾、有机质、脲酶的特征向量绝对值较大。土壤有效养分含量是该区绿竹土壤肥力最主要的限制性因素,土壤有机质含量也是影响竹林土壤肥力的重要指标。因此,绿竹林经营需根据需肥规律科学施肥,提高肥料利用率,避免面源污染和土壤环境质量恶化。

关键词：绿竹林土壤因子主成成分分析

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浙江樟3种组织及不同区段木材挥发性组分差异分析

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林业与环境科学 2022年第2期38卷 23-32页

作者：李子安赵珍妮张俊红楼雄珍童再康浙江农林大学林业与生物技术学院/省部共建亚热带森林培育国家重点实验室浙江杭州311300

为探究浙江樟Cinnamomum chekiangense组织部位间、单株间和木材不同区段间挥发性成分的差异,提取和鉴定浙江樟叶片、干皮与木质部3种组织部位中的挥发性成分,以代表性原则采集样品,利用固相微萃取法-气相色谱-质谱联用法(SPME-GC-MS)... 详细信息

为探究浙江樟Cinnamomum chekiangense组织部位间、单株间和木材不同区段间挥发性成分的差异,提取和鉴定浙江樟叶片、干皮与木质部3种组织部位中的挥发性成分,以代表性原则采集样品,利用固相微萃取法-气相色谱-质谱联用法(SPME-GC-MS)结合计算机自动检索辅助人工解析挥发性成分,通过峰面积归一法测定其相对含量。从7年生浙江樟3种组织部位中共检测出主要挥发性成分134种。其中,干皮83种,独有成分40种;叶片77种,独有38种;木质部45种,9种是独有的。成分种类分析知,浙江樟不同组织部位挥发性成分包括烯烃类、烷烃类、醇类和酯类等9种类别;相对含量分析知,浙江樟各组织部位挥发性成分均以烯烃类化合物为主,组分数量和相对含量均远高于其它8类成分。通过进一步分析知,7年生浙江樟单株间挥发性成分有明显差异,24年生浙江樟木材的实际生长时间对木质部挥发性有机物的种类和相对含量也有明显影响。综合表明浙江樟不同组织部位间、单株间、不同区段木材间挥发性成分种类与组成特征异同明显,主要功能性组分与相对含量均存在一定差异。

关键词：挥发性有机物固相微萃取气相色谱-质谱浙江樟

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