检索结果-内蒙古大学图书馆

中国畜牧杂志 2022年第7期58卷 63-67页

作者：陆佳峰马永双高慧王翀杨金勇浙江农林大学集贤学院浙江杭州311300 浙江农林大学文法学院浙江杭州311300 浙江省畜牧技术推广与种畜禽监测总站浙江杭州310021 浙江农林大学动物科技学院•动物医学院浙江省畜禽绿色生态健康养殖应用技术研究重点实验室动物健康互联网检测技术浙江省工程实验室浙江杭州311300

动物福利是指为动物创设一定的环境条件,满足它们的基本生存需求。随着我国生态文明建设的新发展,关于动物福利制度及其立法的问题日益引起社会的广泛关注。而我国在这一层面依旧存在空白。本文通过梳理国外动物福利立法的发展历史,并... 详细信息

动物福利是指为动物创设一定的环境条件,满足它们的基本生存需求。随着我国生态文明建设的新发展,关于动物福利制度及其立法的问题日益引起社会的广泛关注。而我国在这一层面依旧存在空白。本文通过梳理国外动物福利立法的发展历史,并与国内现有的动物福利相关的法律法规进行比较,以明确保护动物福利的立法目的、扩大动物福利的范围、建立健全公众参与制度等,为完善我国动物福利立法提供思路与启示,以促进新时期生态文明建设的发展。

关键词：动物福利动物保护立法建议

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17β-雌二醇抑制LPS诱导Raw264.7细胞炎症反应及其作用机制

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中国兽医学报 2022年第4期42卷 756-762,769页

作者：余紫薇王晓杜罗通旺姜胜巴少波王磊宋泉江周彬宋厚辉邵春艳浙江农林大学动物科技学院/动物医学院浙江省畜禽绿色生态健康养殖应用技术研究重点实验室/动物健康互联网检测技术浙江省工程研究中心/浙江省动物医学与健康管理国际科技合作基地/中澳动物健康大数据分析联合实验室浙江杭州311300

为探究雌二醇(17β-E2)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠Raw264.7细胞炎症反应的影响及作用机制,使用LPS刺激Raw264.7诱导细胞炎症为模型,试验分为Mock、LPS、E2和E2+LPS组,分别用qRT-PCR方法检测各组TLR4、IL-1β、IL-18和NLRP3 mRNA表达水平,... 详细信息

为探究雌二醇(17β-E2)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠Raw264.7细胞炎症反应的影响及作用机制,使用LPS刺激Raw264.7诱导细胞炎症为模型,试验分为Mock、LPS、E2和E2+LPS组,分别用qRT-PCR方法检测各组TLR4、IL-1β、IL-18和NLRP3 mRNA表达水平,用ELISA法检测各组细胞上清中IL-1β分泌量变化,用Western blot法检测各组细胞中IL-1β、NF-κB p65、p-IκBα和IκBα的蛋白表达水平,用免疫荧光法观察NF-κB p65在细胞内的表达和定位。结果显示,17β-E2可以不同程度的抑制LPS诱导的Raw264.7细胞TLR4、IL-1β、IL-18和NLRP3 mRNA的表达,差异显著(P<0.05),抑制细胞内IL-1β的蛋白表达量和细胞上清中IL-1β的分泌量,差异极显著(P<0.01);Western blot结果显示17β-E2可以降低LPS诱导的IκBα的磷酸化水平,差异极显著(P<0.01),抑制NF-κB p65进入细胞核;免疫荧光结果显示17β-E2主要通过ERβ抑制p65入核。综上所述,17β-E2主要通过ERβ抑制NF-κB p65入核,从而发挥抑制LPS诱导的Raw264.7细胞炎症反应的作用。

关键词： 17β-E2 LPS Raw264.7 细胞炎症 NF-κB信号通路

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宿主cGAS-STING信号通路调控机制的研究进展

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中国预防兽医学报 2022年第12期44卷 1344-1351页

作者：胡燕萍许锦霞徐阿慧程昌勇宋厚辉杨杨浙江农林大学动物科技学院动物医学院浙江省畜禽绿色生态健康养殖应用技术研究重点实验室动物健康互联网检测技术浙江省工程研究中心浙江省动物医学与健康管理国际科技合作基地中澳动物健康大数据分析联合实验室浙江杭州311300

先天性免疫识别系统是机体抵御原病侵入的第一道屏障,对于病原微生物的免疫防御至关重要。机体依赖先天性免疫识别系统中的特异性模式识别受体(Pattern recognition receptors,PRRs)监视病原微生物。一旦病原微生物侵入,机体PRRs通过感... 详细信息

先天性免疫识别系统是机体抵御原病侵入的第一道屏障,对于病原微生物的免疫防御至关重要。机体依赖先天性免疫识别系统中的特异性模式识别受体(Pattern recognition receptors,PRRs)监视病原微生物。一旦病原微生物侵入,机体PRRs通过感知病原相关分子模式(Pathogen-associated molecular pat-terns,PAMPs)或危险相关分子模式(Danger-associat-ed molecular patterns,DAMPs)识别病原并触发机体产生一系列的免疫保护反应[1]。

关键词： cGAS-STING 信号通路 STING

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哺乳动物细胞悬浮培养技术及其应用

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中国细胞生物学学报 2024年第9期46卷 1711-1718页

作者：陈铭杰毕海洋马懿昭章圣华张艳艳张燕茹杨松柏周晓龙乔自林李向臣武永淑浙江农林大学动物科技学院•动物医学院浙江省畜禽绿色生态健康养殖应用技术研究重点实验室动物健康互联网检测技术浙江省工程实验室动物医学与健康管理浙江省国际科技合作基地中澳动物健康大数据分析联合实验室杭州311300 西北民族大学甘肃省动物细胞技术创新中心兰州730030

悬浮培养技术是将细胞悬浮于培养液中,用于病毒增殖或蛋白表达的技术。该技术具有细胞培养规模大、目的产物表达量高、表达产物质量好和利于产业化等优点。当前,多种细胞已通过选择合适的生物反应器、使用微载体和无血清培养基等方法被... 详细信息

悬浮培养技术是将细胞悬浮于培养液中,用于病毒增殖或蛋白表达的技术。该技术具有细胞培养规模大、目的产物表达量高、表达产物质量好和利于产业化等优点。当前,多种细胞已通过选择合适的生物反应器、使用微载体和无血清培养基等方法被成功悬浮培养,用于病毒灭活疫苗、重组蛋白和细胞治疗等领域。该文阐述了哺乳动物细胞悬浮培养技术以及其在病毒灭活疫苗、重组蛋白和细胞治疗等方面的应用,以期为悬浮培养技术的发展和应用提供一定参考。

关键词：哺乳动物细胞生物反应器微载体无血清培养基生物制品

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猫原发性免疫介导性血小板减少症的诊断与治疗

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中国兽医杂志 2022年第6期58卷 104-107页

作者：牛祺芳陈卓倩惠鑫田振宋泉江浙江农林大学动物科技学院·动物医学院浙江省畜禽绿色生态健康养殖应用技术研究重点实验室动物健康检测互联网技术浙江省工程实验室中澳动物健康大数据分析联合实验室浙江杭州311300 初馨宠物医院山东济南250001

猫免疫介导性血小板减少症(Feline primary immune-mediated thrombocytopenia,pIMT)是兽医临床极为少见的一种疾病,可以引起猫黏膜出血、多发性紫癜、血小板减少等多种症状,本文介绍1例猫原发性免疫介导性血小板减少症的诊断、治疗和... 详细信息

猫免疫介导性血小板减少症(Feline primary immune-mediated thrombocytopenia,pIMT)是兽医临床极为少见的一种疾病,可以引起猫黏膜出血、多发性紫癜、血小板减少等多种症状,本文介绍1例猫原发性免疫介导性血小板减少症的诊断、治疗和转归过程。1患猫基本情况布偶猫,9月龄,雄性,体重4.3 kg,正常免疫,不定期驱虫。

关键词：定期驱虫血小板减少症猫兽医临床

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锥虫可变表面糖蛋白的表达调控、结构及免疫应答

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畜牧兽医学报 2024年第11期55卷 4829-4839页

作者：曾晴勤李如松李瑞朱淳殷王欣乐何学东环嘉玲叶子雨王莹张璟夏天奇宋厚辉郑亚东杨永春浙江农林大学动物科技学院/动物医学院/浙江省畜禽绿色生态健康养殖应用技术研究重点实验室/动物健康互联网检测技术浙江省工程研究中心/浙江省动物医学与健康管理国际科技合作基地/中澳动物健康大数据分析联合实验室杭州311300 宁波海关技术中心/宁波市口岸生物与食品安全检测重点实验室宁波315000 福建农林大学动物科学学院(蜂学学院)/福建-台湾动物病原生物学重点实验室福州350002 中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所(国家热带病研究中心)国家卫生健康委员会寄生虫病原与媒介生物学重点实验室世界卫生组织热带病合作中心国家级热带病国际联合研究中心上海200025

锥虫是一类由媒介传播的血液原虫,可感染人和动物引起锥虫病,危害巨大。锥虫的体表为单一可变表面糖蛋白(variant surface glycoprotein,VSG)形成的致密“外套”,会在每个虫血症时期进行周期性更换,以逃避宿主免疫杀伤作用。锥虫基因组... 详细信息

锥虫是一类由媒介传播的血液原虫,可感染人和动物引起锥虫病,危害巨大。锥虫的体表为单一可变表面糖蛋白(variant surface glycoprotein,VSG)形成的致密“外套”,会在每个虫血症时期进行周期性更换,以逃避宿主免疫杀伤作用。锥虫基因组含有成百上千个VSG基因和假基因,而虫体可通过精确的表达调控保证在特定感染阶段只表达一种VSG。VSG具有良好的抗原性,这主要由位于其N端结构域(N-terminal domain,NTD)顶叶(top lobe)的免疫显性表位、糖基化修饰和亚结构域及其构象共同决定。VSG特异的IgM反应在清除锥虫感染中发挥重要作用,但IgG介导的免疫裂解作用则十分有限。宿主特异IgG免疫反应变得固化,只会针对每个VSG中有限的免疫显性表位,降低了与不同VSG之间的交叉反应。本文综述了VSG在表达调控、蛋白质结构、免疫原性及免疫应答等方面的最新研究进展,为深入认识锥虫致病机理、研制有效锥虫病防控手段提供理论参考。

关键词：锥虫可变表面糖蛋白表达调控蛋白质结构免疫应答

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单增李斯特菌内化素家族蛋白的研究进展

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中国兽医学报 2021年第6期41卷 1219-1228页

作者：蓝莹陈绵绵程昌勇宋厚辉浙江农林大学动物科技学院动物医学院浙江省畜禽绿色生态健康养殖应用技术研究重点实验室动物健康互联网检测技术浙江省工程实验室浙江杭州311300

单核细胞增多性李斯特菌(Listeria monocytogenes)是一种革兰阳性病原菌,是食源性李斯特菌病的病原体,在免疫力低下的人和动物中能够引起高死亡率。该菌致病的关键是其能在非吞噬细胞发生内化作用并在其中存活。内化素家族蛋白(internal... 详细信息

单核细胞增多性李斯特菌(Listeria monocytogenes)是一种革兰阳性病原菌,是食源性李斯特菌病的病原体,在免疫力低下的人和动物中能够引起高死亡率。该菌致病的关键是其能在非吞噬细胞发生内化作用并在其中存活。内化素家族蛋白(internalins)在单增李斯特菌感染过程中起着至关重要的作用,该族蛋白是一组以N端有保守亮氨酸重复区(LRR)和信号肽为特征的蛋白。过去几十年里,内化素家族蛋白促进单增李斯特菌细胞侵袭和感染的分子基础已逐步阐明:细胞壁锚定内化素,如InlA和InlB,决定了单增李斯特菌黏附侵袭的建立;而分泌型内化素,如InlC,能够帮助单增李斯特菌在细胞间迁移,并逃避宿主的先天免疫。本综述中,总结了内化素蛋白促进单增李斯特菌感染的结构基础和生物学功能,这将有利于我们更好地理解食源性细菌胞内感染时内化素家族蛋白致病性的深层机制。

关键词：单增李斯特菌内化素家族蛋白黏附侵袭细胞迁移免疫逃逸胞内感染

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单增李斯特菌谷氧还蛋白Grx负调控渗透转运系统OpuC转录

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中国兽医学报 2021年第8期41卷 1512-1518页

作者：李康徐加利孙静宋厚辉程昌勇浙江农林大学动物科技学院/动物医学院浙江省畜禽绿色生态健康养殖应用技术研究重点实验室动物健康互联网检测技术浙江省工程实验室浙江杭州311300

旨在通过构建单增李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)谷氧还蛋白(glutaredoxin,Grx,由lmo2344编码)的基因缺失株以研究其与渗透转运系统(OpuC)相关基因转录的调控关系。LM基因缺失株采用本实验室已建立的同源重组方法构建并筛选获得... 详细信息

旨在通过构建单增李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)谷氧还蛋白(glutaredoxin,Grx,由lmo2344编码)的基因缺失株以研究其与渗透转运系统(OpuC)相关基因转录的调控关系。LM基因缺失株采用本实验室已建立的同源重组方法构建并筛选获得。利用实时荧光定量PCR(RT-PCR)和绿色荧光蛋白报告系统(FRS)比较LM野生株EGD-e和grx缺失株对渗透转运系统相关基因(opuCA、opuCB、opuCC和opuCD)的转录水平调控。结果表明,与野生株相比,grx基因缺失株中渗透转运相关基因opuCA/B/C/D的转录水平极显著上调(50倍以上)。此外,荧光报告系统也证实grx基因缺失确实导致上述被调控基因的启动子活性增强进而促使该基因转录明显上调。本研究首次表明LM Grx系统参与了渗透转运系统OpuC的转录调控,但该过程涉及的分子机制尚待深入探究。本研究有助于深入理解LM重要的氧化还原系统与其他应激耐受调控相关蛋白之间的调控关系,以及通过参与生物学过程介导细菌体外环境适应及宿主内感染的分子机制,对于防控食源性胞内菌感染和保障人类公共卫生具有重要意义。

关键词：单增李斯特菌谷氧还蛋白(Grx) 渗透转运系统(OpuC) 实时荧光定量PCR 绿色荧光蛋白报告系统

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基于核苷三磷酸二磷酸水解酶的马锥虫病间接ELISA抗体检测方法的建立

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农业生物技术学报 2025年第1期33卷 220-227页

作者：曾晴勤李如松李红英王欣乐王莹夏天奇王璞时恒枝张路平郑亚东赵秀玲宋厚辉宁波海关技术中心/宁波市口岸生物与食品安全检测重点实验室四川省江油市动物疫病预防控制中心浙江农林大学动物科技学院&动物医学院/浙江省畜禽绿色生态健康养殖应用技术研究重点实验室/动物健康互联网检测技术浙江省工程研究中心/浙江省动物医学与健康管理国际科技合作基地/中澳动物健康大数据分析联合实验室河北医科大学第一医院心脏外科中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所(国家热带病研究中心)/国家卫生健康委员会寄生虫病原与媒介生物学重点实验室/世界卫生组织热带病合作中心/传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室

伊氏锥虫病通常称为苏拉(Surra)，是由伊氏锥虫(Trypanosoma evansi)寄生于马(Equus)、骆驼(Camelus)等动物的血液而引起的一种原虫病。精准诊断是有效防控伊氏锥虫病的关键环节，但是现有诊断技术存在假阴性率高、价格昂贵等缺点。本... 详细信息

伊氏锥虫病通常称为苏拉(Surra)，是由伊氏锥虫(Trypanosoma evansi)寄生于马(Equus)、骆驼(Camelus)等动物的血液而引起的一种原虫病。精准诊断是有效防控伊氏锥虫病的关键环节，但是现有诊断技术存在假阴性率高、价格昂贵等缺点。本研究在体外重组表达伊氏锥虫的核苷三磷酸二磷酸水解酶(nucleoside triphosphate diphosphohydrolase, TeNTPDase)，通过优化抗原包被浓度及其条件、血清稀释度及其孵育条件、酶标二抗稀释度及其孵育条件等反应参数，建立基于TeNTPDase的马锥虫病间接ELISA抗体检测方法。结果显示，重组TeNTPDase主要以包涵体形式表达，大小约为60 kD；建立的ELISA方法在不同批次包被抗原中的变异系数为3.50%～7.32%，均小于10%，在37℃不同孵育时间内的变异系数为3.89%～14.45%，小于15%，表明所建立的方法具有较好的重复性和稳定性；利用建立的ELISA方法检测马临床血清样品，结果显示，伊氏锥虫病的阳性率为5.83%(7/120)，与商品化ELISA试剂盒的阳性率(3.33%)没有显著差异，符合率为92.5%(111/120)。本研究为马锥虫病诊断和有效防控提供技术支持。

关键词：伊氏锥虫病马核苷三磷酸二磷酸水解酶(NTPDase) ELISA

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可诱导表达结核分枝杆菌ESAT-6的THP-1细胞系的建立

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中国兽医学报 2021年第11期41卷 2148-2154页

作者：唐亦然戴鑫钧胡燕萍毕斯琪孟祥苗杨杨宋厚辉浙江农林大学动物科技学院/动物医学院浙江省畜禽绿色生态健康养殖应用技术研究重点实验室/动物健康互联网检测技术浙江省工程实验室浙江杭州311300

利用Tet-On-3G系统构建可诱导表达ESAT-6的THP-1细胞系,研究结核分枝杆菌毒力蛋白ESAT-6在宿主细胞内的生物学功能.首先,利用聚合酶链反应(PCR)扩增ESAT-6片段和红色荧光蛋白mCherry片段,并与pLVX-TRE3G载体连接,构建pTRE3G-mCherry-ESA... 详细信息

利用Tet-On-3G系统构建可诱导表达ESAT-6的THP-1细胞系,研究结核分枝杆菌毒力蛋白ESAT-6在宿主细胞内的生物学功能.首先,利用聚合酶链反应(PCR)扩增ESAT-6片段和红色荧光蛋白mCherry片段,并与pLVX-TRE3G载体连接,构建pTRE3G-mCherry-ESAT-6.将其与调控质粒pLVX-Tet3G共同转染HEK293T细胞,Dox诱导后检测ESAT-6表达情况.然后,将质粒pTRE3G-mCherry-ESAT-6和pLVX-Tet3G分别与包装质粒psPAX2和pMD2.0G共转染HEK293T细胞,以获得慢病毒颗粒LV-TRE3G-ESAT-6和LVX-Tet3G.接着,将2种病毒感染THP-1细胞,通过Puromycin和G418进行筛选诱导表达ESAT-6的阳性细胞克隆,命名为THP-1/ESAT-6.利用Western blot检测THP-1细胞中ESAT-6的表达情况.结果表明,筛选获得了携带ESAT-6的THP-1诱导表达细胞系,并且ESAT-6表达量与Dox剂量和诱导时间呈正相关.最后,对细胞系中表达的ESAT-6进行生物活性检测,结果表明ESAT-6能够促进细胞的死亡和IL-1β的分泌.该细胞系的建立为深入研究ESAT-6调控细胞信号通路的功能提供了基础.

关键词：结核分枝杆菌 ESAT-6 慢病毒包装 Tet-on 诱导表达

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