检索结果-内蒙古大学图书馆

中国预防兽医学报 2023年第5期45卷 459-465,501页

作者：张念琦孙静宋厚辉卫芳芳陈绵绵程昌勇浙江农林大学动物科技学院/动物医学院/浙江省畜禽绿色生态健康养殖应用技术研究重点实验室/动物健康互联网检测技术浙江省工程研究中心/浙江省动物医学与健康管理国际科技合作基地/中澳动物健康大数据分析联合实验室浙江杭州311300

本实验室前期对单增李斯特菌(LM)谷氧还蛋白(Grx)转录组数据进行了分析,在此基础上为了对Grx调控细胞色素氧化酶等应激相关基因(lmo0722、qox A、qox B、gr)的转录及其作用机制研究,本研究将Δgrx与野生株EGD-e经4 mmol/L肼应激后,分别... 详细信息

本实验室前期对单增李斯特菌(LM)谷氧还蛋白(Grx)转录组数据进行了分析,在此基础上为了对Grx调控细胞色素氧化酶等应激相关基因(lmo0722、qox A、qox B、gr)的转录及其作用机制研究,本研究将Δgrx与野生株EGD-e经4 mmol/L肼应激后,分别提取总RNA并反转录为cDNA作为模板,利用RT-q PCR检测Grx调控细胞色素氧化酶等应激相关基因转录情况,结果显示,Δgrx与野生株EGD-e相比,grx基因缺失引起qox B、qox A、gr、lmo0722等基因的转录水平显著上调(分别上调30、29、17和5.6倍)。利用李斯特菌穿梭质粒构建携带调控基因启动子序列的gfp报告质粒,电转化至野生株EGD-e和缺失株Δgrx感受态细胞中,获得含GFP的重组报告菌株。将这两种含GFP的重组报告菌液分别加入4 mmol/L肼后检测荧光强度,结果显示,EGD-e携带的GFP荧光数值显著低于缺失株Δgrx(P<0.01),进一步表明Grx参与调控上述应激相关基因的转录。将扩增的lmo0722、qox A、qox B和gr基因的启动子和Grx、Prf A和GAPDH重组蛋白混合,37℃孵育60 min后进行凝胶迁移试验(EMSA),结果显示,Grx和上述调控基因启动子不直接结合,提示Grx可能通过间接方式参与该调控过程。本研究首次证实LM Grx通过对氧化应激相关基因的转录调控进而在细菌抗氧化应激环境适应过程中发挥重要作用,为系统阐述重要食源性病原菌在环境适应中发挥作用的调控机制提供了科学参考。

关键词：单增李斯特菌谷氧还蛋白氧化应激相关基因调控机制环境适应

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猪流行性腹泻病毒YJH141分离株感染性克隆的构建及鉴定

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中国兽医学报 2023年第9期43卷 1800-1806,1813页

作者：郑伟康张静苗刘雅琦周莹珊杜静宋厚辉董婉玉王晓杜浙江农林大学动物科技学院/动物医学院浙江省畜禽绿色生态健康养殖应用技术研究重点实验室/动物健康互联网检测技术浙江省工程研究中心/浙江省动物医学与健康管理国际科技合作基地/中澳动物健康大数据分析联合实验室浙江杭州311300

为构建猪流行性腹泻病毒(PEDV)YJH141毒株的感染性克隆,本研究将该病毒全长基因组分为8段进行扩增,在病毒全长基因组的11467与11476位核苷酸处引入同义突变,构建SfiⅠ酶切位点作为遗传标记位点。以病毒基因组RNA为模板通过RT-PCR分别扩... 详细信息

为构建猪流行性腹泻病毒(PEDV)YJH141毒株的感染性克隆,本研究将该病毒全长基因组分为8段进行扩增,在病毒全长基因组的11467与11476位核苷酸处引入同义突变,构建SfiⅠ酶切位点作为遗传标记位点。以病毒基因组RNA为模板通过RT-PCR分别扩增各片段,随后将各片段分别构建至T载体中作为亚克隆质粒。各亚克隆质粒经测序鉴定正确后,分段连接至pBAC载体中构建YJH141全长cDNA克隆质粒,通过PCR及测序验证显示全长感染性克隆质粒构建成功,将其命名为pBAC-PEDV-YJH141。将鉴定正确的pBAC-PEDV-YJH141转染至293T细胞,转染后24h收取上清接种于Vero细胞并传代。通过观察细胞病变(CPE)、RT-PCR检测、Western blot检测及测序验证重组病毒的遗传标记位点共同验证重组病毒拯救成功,将其命名为rYJH141。通过空斑试验、间接免疫荧光试验(IFA)和病毒生长曲线探究重组病毒与亲本病毒的生长特性,结果表明YJH141及rYJH141具有相似的生长特性。本研究为探究PEDV复制及致病机制的研究提供了技术平台,同时为疫苗的研发奠定了基础。

关键词：猪流行性腹泻病毒感染性克隆拯救

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中链脂肪酸、植物精油和益生菌对肉鸡生长、免疫、抗氧化和肠道菌群及肌肉品质的影响

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中国畜牧杂志 2024年第2期60卷 391-396页

作者：雷昕茹孙耀威汪成飞杨彩梅吴艳萍牛玉郇伟伟张瑞强浙江农林大学动物科技学院·动物医学院浙江省畜禽绿色生态健康养殖应用技术研究重点实验室动物健康互联网检测技术浙江省工程实验室动物医学与健康管理浙江省国际科技合作基地中澳动物健康大数据分析联合实验室浙江杭州311300 江苏奥迈生物科技有限公司江苏南京211225 浙江万方生物科技有限公司浙江安吉313300

试验旨在研究不同饲料添加剂(中链脂肪酸、植物精油和益生菌)对肉鸡生长、免疫、抗氧化、肠道菌群和肌肉品质的影响。选用480只1日龄健康白羽公肉仔鸡,随机分为4组,每组8个重复,每重复15只试验肉鸡。空白对照组饲喂基础饲粮,中链脂肪酸... 详细信息

试验旨在研究不同饲料添加剂(中链脂肪酸、植物精油和益生菌)对肉鸡生长、免疫、抗氧化、肠道菌群和肌肉品质的影响。选用480只1日龄健康白羽公肉仔鸡,随机分为4组,每组8个重复,每重复15只试验肉鸡。空白对照组饲喂基础饲粮,中链脂肪酸组在基础饲粮中添加中链脂肪酸(含辛酸20%、葵酸20%;前期1000mg/kg,后期500mg/kg),植物精油组在基础饲粮中添加200mg/kg植物精油(含肉桂醛69%、百里香酚21%、香芹酚10%),益生菌组在基础饲粮中添加300 mg/kg益生菌(含丁酸梭菌5×108 CFU/g、枯草芽孢杆菌5×109CFU/g)。试验期为42d。结果表明:与对照组相比,添加中链脂肪酸和植物精油提高了肉鸡体重和日增重(P<0.05),增加了血清中免疫球蛋白-A、白细胞介素-4含量(P<0.05),降低了白细胞介素-6、肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-1β、白细胞介素-18含量(P<0.05),改善了血清中谷胱甘肽过氧化物酶活性和总抗氧化能力(P<0.05),降低了丙二醛含量(P<0.05),提高了肉鸡肠道绒毛高度和绒隐比(P<0.05);与对照组相比,中链脂肪酸、植物精油和益生菌均降低了肉鸡盲肠内容物中沙门氏菌和大肠杆菌的数量(P<0.05),中链脂肪酸和益生菌提高了盲肠内容物中乳酸菌的数量(P<0.05);中链脂肪酸和植物精油降低了肉鸡肌肉的L*值、蒸煮损失率、24 h和48 h滴水损失率(P<0.05);与益生菌组相比,中链脂肪酸和植物精油降低了肉鸡肌肉的48 h滴水损失(P<0.05)。由此可见,饲粮中添加中链脂肪酸和植物精油可增加肉鸡日增重,改善肉鸡免疫功能、抗氧化功能、肠道形态结构、肠道菌群结构和肌肉品质,且饲喂效果优于益生菌。

关键词：饲料添加剂生长性能免疫抗氧化肠道菌群肌肉品质鸡

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兔源大肠埃希菌噬菌体分离鉴定与生物学特性研究

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浙江农业学报 2022年第8期34卷 1599-1608页

作者：王志鹏赵剑黄盼崔雪梅南黎宋厚辉鲍国连刘燕浙江农林大学动物科技学院•动物医学院浙江省畜禽绿色生态健康养殖应用技术研究重点实验室动物健康互联网检测技术浙江省工程实验室浙江杭州311300 浙江省农业科学院畜牧兽医研究所浙江杭州310021

对浙江省某兔场腹泻病兔进行病原分离鉴定,经革兰氏染色和PCR鉴定,分离出致病性大肠埃希菌1株,命名为ZJE1株。ZJE1株对链霉素、环丙沙星敏感。以ZJE1株为宿主菌,分离纯化出噬菌体4株,分别命名为ZRP2、ZRP3、ZRP4和ZRP5,并对其生物学特... 详细信息

对浙江省某兔场腹泻病兔进行病原分离鉴定,经革兰氏染色和PCR鉴定,分离出致病性大肠埃希菌1株,命名为ZJE1株。ZJE1株对链霉素、环丙沙星敏感。以ZJE1株为宿主菌,分离纯化出噬菌体4株,分别命名为ZRP2、ZRP3、ZRP4和ZRP5,并对其生物学特性、形态与结构特征进行研究。结果显示,4株噬菌体分离株均由六角形的头部、可收缩的尾鞘和尾管组成,均属于肌尾噬菌体科。采用双层平板法测定噬菌体分离株的宿主谱、最佳感染复数、pH稳定性、热稳定性和一步生长曲线。结果显示,ZRP2、ZRP3、ZRP4和ZRP5具有宿主特异性,在37-55℃的条件下可保持良好活性。ZRP2、ZRP3在pH值7的条件下可保持良好活性,ZRP4、ZRP5在pH值5-7的条件下可保持良好活性。ZRP2、ZRP3、ZRP5的潜伏期为11-19 min,均能在体外裂解ZJE1株。研究成果可为应用噬菌体治疗兔大肠埃希菌病提供研究基础与数据支持。

关键词：肠致病性大肠埃希菌噬菌体分离鉴定生物学特性

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3C样蛋白酶:重要抗PEDV药物的筛选靶标

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中国预防兽医学报 2023年第1期45卷 105-111页

作者：刘怡炜包淋斌徐像文孙静杨杨杨永春苏明俊宋厚辉浙江农林大学动物科技学院/动物医学院/浙江省畜禽绿色生态健康养殖应用技术研究重点实验室/动物健康互联网检测技术浙江省工程研究中心/浙江省动物医学与健康管理国际科技合作基地/中澳动物健康大数据分析联合实验室浙江杭州311300 广昌县农业农村局浙江广昌344900

猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)是一种有囊膜的单股正链RNA病毒,属于套式病毒目(Nidovirales)、冠状病毒科(Coronaviridae)、冠状病毒属(Coronavirus)成员。由于冠状病毒的RNA酶缺乏校正功能,PEDV等冠状病毒... 详细信息

关键词：猪流行性腹泻病毒冠状病毒科 PEDV 冠状病毒属校正功能

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禽致病性大肠杆菌fdtACB基因缺失株的生物学特性研究

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中国预防兽医学报 2023年第6期45卷 568-574页

作者：罗平高宇杰张晓荟张宁韩先干宋厚辉韩月程昌勇浙江农林大学动物科技学院/动物医学院/浙江省畜禽绿色生态健康养殖应用技术研究重点实验室/动物健康互联网检测技术浙江省工程实验室/浙江省动物医学与健康管理国际科技合作基地/中澳动物健康大数据分析联合实验室浙江杭州311300 中国农业科学院上海兽医研究所上海闵行201199

为研究O抗原侧链岩藻糖合成酶基因fdtACB对禽致病性大肠杆菌(APEC)生物学特性的影响,本研究以O_(2)血清型APEC DE17为亲本株,通过Red同源重组构建fdtACB基因缺失株与回补株,经PCR及测序鉴定确认缺失株ΔfdtACB和回补株CΔfdtACB均正确... 详细信息

为研究O抗原侧链岩藻糖合成酶基因fdtACB对禽致病性大肠杆菌(APEC)生物学特性的影响,本研究以O_(2)血清型APEC DE17为亲本株,通过Red同源重组构建fdtACB基因缺失株与回补株,经PCR及测序鉴定确认缺失株ΔfdtACB和回补株CΔfdtACB均正确构建。采用硝酸银染色法鉴定细菌脂多糖(LPS)图谱,采用western blot鉴定缺失株与O_(2)血清型O因子血清的反应性。硝酸银染色法结果显示,ΔfdtACB缺失株未产生与野生株一样完整的LPS图谱,表现为部分O抗原梯状条带缺失和移位;western blot结果显示,ΔfdtACB与大肠杆菌O_(2)血清型O因子血清无反应条带。各菌株培养16 h后每隔1 h测定OD600nm值,绘制生长曲线;于半固体培养基培养各菌株,通过测量细菌运动圈直径分析各菌株的运动能力,通过结晶紫染色法检测各菌株生物被膜(BF)形成能力,结果显示,ΔfdtACB缺失株、野生株和回补株间生长速率无明显差异(P>0.05);与野生株相比,ΔfdtACB缺失株的运动能力显著降低(P<0.01),BF形成能力显著升高(P<0.01)。以上结果表明fdtACB影响细菌O抗原完整性、运动及BF的形成。将各菌株分别感染DF-1细胞后通过细菌计数分析APEC对细胞的黏附及侵袭力,结果显示,ΔfdtACB对DF-1细胞的黏附及侵袭力均较野生株极显著降低(P<0.01)。以不同浓度各菌株腹腔注射感染大蜡螟后,根据5 d内各组大蜡螟死亡数量计算各菌株LD50,结果显示,除高剂量各菌株外,其它剂量各菌株注射后,ΔfdtACB组大蜡螟死亡数较其它组少,经计算野生株LD50为1.85×10^(2) cfu/mL,缺失株LD50为9.16×10^(2) cfu/mL,回补株LD50为8.0×10^(1) cfu/mL,缺失株致病力比野生株降低约5倍,表明fdtACB影响细菌感染性和致病力。综上所述,本研究首次证实大肠杆菌岩藻糖合成酶FdtACB参与O_(2)型APEC O的抗原合成,在细菌运动、BF形成和感染过程中发挥作用,该结果对掌握APEC O抗原侧链的生物学功能具有重要意义。

关键词：禽致病性大肠杆菌脂多糖(LPS) O抗原侧链岩藻糖糖基合成酶

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动物肠缺氧模型研究进展

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畜牧兽医学报 2023年第10期54卷 4083-4094页

作者：戴文卞苏舒张聚民宋厚辉周莹珊刘萍王晓杜浙江农林大学动物科技学院·动物医学院、浙江省畜禽绿色生态健康养殖应用技术研究重点实验室、动物健康、互联网检测技术浙江省工程研究中心、浙江省动物医学与健康管理国际科技合作基地、中澳动物健康大数据分析联合实验室杭州311300 杭州市临安区畜牧农机发展中心杭州311300

肠缺氧是肠组织氧气需求量高于供应量的病理现象,是多种肠道疾病的直接诱发因素、预警信号和关键特征之一。建立真实可靠的肠缺氧状态动物模型或者能模拟肠缺氧的细胞模型,对肠缺氧相关疾病的病理机制研究至关重要。本文综述了近年来适... 详细信息

肠缺氧是肠组织氧气需求量高于供应量的病理现象,是多种肠道疾病的直接诱发因素、预警信号和关键特征之一。建立真实可靠的肠缺氧状态动物模型或者能模拟肠缺氧的细胞模型,对肠缺氧相关疾病的病理机制研究至关重要。本文综述了近年来适用于构建肠缺氧模型的方法,重点围绕循环性、化学性和环境性肠缺氧动物模型,物理法和化学法诱导的离体肠细胞缺氧模型和离体肠道类器官缺氧模型的构建策略、模型优劣及应用场景进行分析,为动物肠缺氧疾病的发病机制研究及治疗药物的发掘和临床药效学评价提供参考。

关键词：肠缺氧细胞模型动物模型肠道类器官

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丁酸梭菌对肉鸡屠宰性能、肌肉品质和抗氧化功能的影响

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动物营养学报 2021年第6期33卷 3250-3258页

作者：黄翠翠周若钰沈媛媛张瑞强杨彩梅浙江农林大学动物科技学院·动物医学院浙江省畜禽绿色生态健康养殖应用技术研究重点实验室动物健康互联网检测技术浙江省工程实验室临安311300

本试验旨在研究丁酸梭菌对肉鸡屠宰性能、肌肉品质和抗氧化功能的影响。选取360只健康的1日龄爱拔益加雄性肉仔鸡,随机分为3组,分别为对照组、抗生素组和丁酸梭菌组,每组8个重复,每个重复15只鸡。对照组饲喂无抗生素基础饲粮,抗生素组... 详细信息

本试验旨在研究丁酸梭菌对肉鸡屠宰性能、肌肉品质和抗氧化功能的影响。选取360只健康的1日龄爱拔益加雄性肉仔鸡,随机分为3组,分别为对照组、抗生素组和丁酸梭菌组,每组8个重复,每个重复15只鸡。对照组饲喂无抗生素基础饲粮,抗生素组饲喂基础饲粮+75 mg/kg金霉素,丁酸梭菌组饲喂基础饲粮+500 mg/kg丁酸梭菌(活菌数1×109 CFU/g)。试验期为42 d。结果表明:1)与对照组相比,丁酸梭菌组肉鸡末重、屠宰率和全净膛率显著提高(P<0.05),胸肌24 h的红度值和pH显著提高(P<0.05),胸肌粗蛋白质和粗脂肪含量显著提高(P<0.05),胸肌24 h的亮度值和蒸煮损失显著降低(P<0.05),胸肌总抗氧化能力以及总超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性显著提高(P<0.05),胸肌丙二醛含量显著降低(P<0.05),胸肌核因子E2相关因子2(Nrf2)、谷胱甘肽过氧化物酶1、超氧化物歧化酶1和血红素氧合酶1的mRNA相对表达量显著提高(P<0.05)。2)与抗生素组相比,丁酸梭菌组肉鸡胸肌肉蒸煮损失显著降低(P<0.05)。综上所述,饲粮添加丁酸梭菌可提高肉鸡末重,改善屠宰性能和胸肌肉品质,激活Nrf2信号通路相关基因的表达,增强肌肉抗氧化功能,表明丁酸梭菌可作为抗生素替代物应用于肉鸡饲粮。

关键词：肉鸡丁酸梭菌屠宰性能肉品质抗氧化功能核因子E2相关因子2

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副猪嗜血杆菌的多重耐药性及氨基糖苷类耐药基因分子流行病学分析

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中国动物传染病学报 2024年第6期32卷 145-151页

作者：吴瑗董婉玉王馨雨刘雅琦周莹珊杜静于浩然仲伟宋厚辉张聚民王晓杜金华职业技术大学农学院金华321007 浙江农林大学动物科技学院·动物医学院浙江省畜禽绿色生态健康养殖应用技术研究重点实验室动物健康互联网检测技术浙江省工程研究中心浙江省动物医学与健康管理国际科技合作基地中澳动物健康大数据分析联合实验室杭州311300 杭州市临安区畜牧农机发展中心杭州311300

为了解规模化猪场副猪嗜血杆菌(HPS)的耐药基因流行情况,对来自国内52株HPS分离株开展了耐药基因检测、药敏试验、氨基糖苷类耐药基因Aph(3')-Ia和StrB氨基酸序列的比对及分析。结果表明:HPS分离株含有多重耐药基因(β-内酰胺类,氨... 详细信息

为了解规模化猪场副猪嗜血杆菌(HPS)的耐药基因流行情况,对来自国内52株HPS分离株开展了耐药基因检测、药敏试验、氨基糖苷类耐药基因Aph(3')-Ia和StrB氨基酸序列的比对及分析。结果表明:HPS分离株含有多重耐药基因(β-内酰胺类,氨基糖苷类,磺胺类药和Ⅰ类整合子),其中bla-_(TEM)、Aph(3')-Ia、3'CS和Int1基因检出率为100%;HPS分离菌株对硫酸链霉素的耐药率高达75%。HPS分离菌株Aph(3')-Ia编码的部分氨基酸与除了已知HPS之外的6种细菌的氨基酸序列相同;HPS分离株JX-6 StrB基因编码的氨基酸序列与其他细菌差别较大,该菌株第18号位点StrB基因的ATP结合位点也发生了突变。本研究表明规模化养猪场HPS氨基糖苷类耐药基因Aph(3')-Ia和StrB携带率高,细菌耐药性的差异和耐药基因的改变可能是由一些特定的位点突变所导致。本研究为规模化养殖场HPS耐药基因变化规律研究和相关疾病的防控奠定了基础。

关键词：副猪嗜血杆菌耐药基因氨基糖苷类耐药性分子流行病学

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江浙皖部分地区副鸡禽杆菌分离鉴定及生物学特性研究

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动物医学进展 2024年第5期45卷 39-45页

作者：吴娴毕海洋张燕茹李向臣何玉龙舒建洪武永淑浙江理工大学生命科学与医药学院浙江杭州310018 浙江理工大学绍兴生物医药研究院浙江绍兴312366 浙江农林大学动物科技学院动物医学院浙江省畜禽绿色生态健康养殖应用技术研究重点实验室动物健康互联网检测技术浙江省工程实验室动物医学与健康管理浙江省国际科技合作基地中澳动物健康大数据分析联合实验室浙江杭州311300

为了解江浙皖地区鸡传染性鼻炎流行状况,对浙江、江苏和安徽部分地区疑似鸡传染性鼻炎的8个鸡场进行样品采集,对122份样品进行病原菌分离,对10株分离株进行形态学、卫星试验、PCR鉴定、生化鉴定和血清型鉴定等检测;利用分离株人工感染SP... 详细信息

为了解江浙皖地区鸡传染性鼻炎流行状况,对浙江、江苏和安徽部分地区疑似鸡传染性鼻炎的8个鸡场进行样品采集,对122份样品进行病原菌分离,对10株分离株进行形态学、卫星试验、PCR鉴定、生化鉴定和血清型鉴定等检测;利用分离株人工感染SPF鸡的动物回归试验,对攻毒后7 d和14 d的鸡只进行病理剖检和病理组织切片观察。结果表明,122份样品中副鸡禽杆菌阳性数为48个,阳性率为39.3%,8个养殖场的阳性率为36.8%~50.0%。10株副鸡禽杆菌分离菌,其中A型3株、B型4株、C型3株,致病率为60%~80%。表明不同血清型副鸡禽杆菌在江浙皖地区均有流行,具有一定的致病性,这为鸡传染性鼻炎三价疫苗研发和防控提供参考。

关键词：鸡传染性鼻炎副鸡禽杆菌分离鉴定

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