检索结果-内蒙古大学图书馆

中华传染病杂志 2007年第10期25卷 593-596页

作者：潘韵峰周华周志慧俞云松陈亚岗李兰娟卫生部传染病重点实验室浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所

目的调查国内6个省市25家医院临床分离鲍曼不动杆菌中介导高水平氨基糖苷类抗生素耐药的16S rRNA甲基化酶基因armA、rmtA、rmtB的分布情况。方法收集2004年12月—2005年12月国内6省市8家省级医院、浙江省11个地区17家市级医院临床分离的... 详细信息

目的调查国内6个省市25家医院临床分离鲍曼不动杆菌中介导高水平氨基糖苷类抗生素耐药的16S rRNA甲基化酶基因armA、rmtA、rmtB的分布情况。方法收集2004年12月—2005年12月国内6省市8家省级医院、浙江省11个地区17家市级医院临床分离的700株鲍曼不动杆菌。琼脂稀释法测定其对妥布霉素、阿米卡星、庆大霉素、异帕米星、奈替米星5种氨基糖苷类抗生素的最低抑菌浓度(MIC)值;PCR筛选三种甲基化酶基因armA、rmtA、rmtB,克隆测序明确基因型;脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析菌株的同源性;质粒抽提、接合试验及Southern杂交确定armA基因定位。结果对妥布霉素、阿米卡星、庆大霉素、异帕米星、奈替米星的耐药率分别为67.7%、70.9%、75.7%、63.5%和71.5%。对5种氨基糖苷类抗生素全部耐药的菌株有377株,其中334株检出armA基因;未发现rmtA、rmtB阳性菌株。armA基因阳性菌株PFGE分型以A、B、C为主。碱裂解法反复抽提未得到质粒,多次接合试验未成功;Southern杂交显示,armA基因分别位于克隆A、B、C菌株染色体ApaⅠ酶切PFGE约220、300、220kb大小的PFGE片段上。结论16S rRNA甲基化酶基因armA在鲍曼不动杆菌中广泛存在,armA基因位于鲍曼不动杆菌的染色体上。

关键词：抗菌药 RNA 核糖体 16S tRNA甲基转移酶类鲍氏不动杆菌电泳凝胶脉冲场

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妊娠期病毒感染对婴儿先天性的损害

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中华传染病杂志 2007年第4期25卷 253-256页

作者：马亦林浙江大学医学院附属第一医院卫生部传染病重点实验室杭州310003

多种病原体，如病毒、螺旋体、细菌及寄生虫等，可通过妊娠期妇女感染而使胎儿发生先天性损害，其中以病毒较多见，见表1。孕妇及胎儿易受病原体感染，其主要原因与母体在免疫及内分泌方面的改变及胎儿缺乏免疫防御功能有关。生殖免疫... 详细信息

多种病原体，如病毒、螺旋体、细菌及寄生虫等，可通过妊娠期妇女感染而使胎儿发生先天性损害，其中以病毒较多见，见表1。孕妇及胎儿易受病原体感染，其主要原因与母体在免疫及内分泌方面的改变及胎儿缺乏免疫防御功能有关。生殖免疫学观点认为，胎盘滋养细胞不表达或低表达经典的组织相容性复合体Ⅰ类抗原及Ⅱ类抗原，并在胚胎发育过程中产生封闭性抗体（blocking antibody）；母体某些激素，如人绒毛膜促性腺激素、人胎盘催乳素、

关键词：病毒感染先天性妊娠期人绒毛膜促性腺激素损害组织相容性复合体免疫防御功能病原体感染

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对拉米夫定耐药患者乙型肝炎病毒基因型与病毒载量及其核苷酸序列分析

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中华传染病杂志 2007年第5期25卷 285-288页

作者：潘小平李兰娟杜维波李敏伟曹红翠陈智浙江大学医学院附属第一医院传染内科卫生部传染病重点实验室杭州310003

目的探讨对拉米夫定耐药患者HBV B、C基因型的病毒载量及其核苷酸序列突变等病毒学特性的差异。方法采用ELISA、实时荧光定量PCR和DNA序列分析的方法,检测53例对拉米夫定耐药患者的HBV基因型、病毒载量及其C、P基因核苷酸序列,并将测序... 详细信息

目的探讨对拉米夫定耐药患者HBV B、C基因型的病毒载量及其核苷酸序列突变等病毒学特性的差异。方法采用ELISA、实时荧光定量PCR和DNA序列分析的方法,检测53例对拉米夫定耐药患者的HBV基因型、病毒载量及其C、P基因核苷酸序列,并将测序结果与基因库中标准HBV基因型序列进行比较分析。结果53例拉米夫定耐药患者中,B基因型22例,C基因型31例;C基因型的YIDD突变率明显高于B基因型(87.1%比36.4%,P<0.01),且C基因型的病毒载量为(7.71±0.80)lg拷贝/mL,明显高于B基因型的(6.97±0.77)lg拷贝/mL(P<0.01);而B基因型的YVDD突变率和前C区突变(G1896A)明显高于C基因型(分别为63.6%比12.9%、77.3%比32.3%,P值均<0.01)。B、C基因型的核心启动子突变(T1762/A1764)比较,差异无统计学意义(31.8%比35.5%,P>0.05)。前C区/核心启动子的突变影响拉米夫定耐药患者的病毒水平。结论拉米夫定耐药患者HBV B、C基因型的YMDD基序分别以YVDD和YIDD变异为主,且基因型C的病毒载量比B基因型要高;B基因型易出现前C区突变(G1896A)。

关键词：启动区(遗传学) 变异(遗传学) 拉米夫定药物耐变性基因型肝炎病毒,乙型

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sea基因定位突变体构建及其重组表达产物生物学活性的研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2007年第6期27卷 525-531页

作者：范芳华严杰毛亚飞浙江大学医学院病原生物学系杭州310031 浙江大学附属第一医院卫生部传染病重点实验室杭州310031

目的构建葡萄球菌肠毒素A(SEA)基因及其突变体原核表达系统,了解突变前后重组表达产物的细胞毒性、促淋巴细胞增殖和抑制肿瘤生长活性的变化。方法采用高保真PCR和T- A克隆法,从金黄葡萄球菌ATCC13565株DNA中扩增并克隆了不含信号肽序列... 详细信息

目的构建葡萄球菌肠毒素A(SEA)基因及其突变体原核表达系统,了解突变前后重组表达产物的细胞毒性、促淋巴细胞增殖和抑制肿瘤生长活性的变化。方法采用高保真PCR和T- A克隆法,从金黄葡萄球菌ATCC13565株DNA中扩增并克隆了不含信号肽序列的sea基因。采用突变引物PCR构建sea基因定位突变体。建立sea基因及其定位突变体原核表达系统。Ni-NTA亲和层析法提纯表达的目的重组蛋白。采用TCID_(50)法测定目的重组蛋白对Vero细胞的细胞毒性。采用MTT比色法分别检测不同浓度的目的重组蛋白促小鼠脾细胞增殖及对抑制KB和HL-60癌细胞株生长的作用。结果所克隆的sea基因核苷酸序列与报道序列的相似性为100%,7种突变体均在既定位置获得预期的密码子突变。rSEA和各突变体重组蛋白表达量约为细菌总蛋白的52%。rSEA对Vero细胞TCID_(50)为4.1μg,其突变体重组蛋白分别为5.8～23.5μg。1和5μg/ml的rSEA及其5种突变体重组蛋白rSEA/H187A、rSEA/H225A、rSEA/D227A、rSEA/H187A/D227A和rSEA/H225A/D227A对小鼠脾细胞均有明显的促增殖作用(P<0.05),10和20μg/ml的rSEA及上述5种突变体重组蛋白促小鼠脾细胞增殖活性与100μg/ml PHA相似(P>0.05)。5～20μg/ml的rSEA及上述5种突变体重组蛋白作用的小鼠脾细胞上清及其上清与脾细胞混合物均能有效地抑制KB和HL-60细胞生长(P<0.05)。结论本研究成功地构建了sea基因突变体及其高效原核表达系统,其表达产物的细胞毒性均有所降低。由于rSEA/H225A、rSEA/D227A、rSEA/H225A/D227A细胞毒性较低、促脾细胞增殖和抑制肿瘤细胞生长活性较强,可作为研制升白细胞、抗肿瘤SEA相关药物的候选突变体。

关键词：葡萄球菌肠毒素A sea基因/定位突变原核表达系统/构建重组蛋白,细胞毒性脾细胞/增殖肿瘤细胞/抑制

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肝移植患者肠道双歧杆菌的生态结构

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中华传染病杂志 2007年第1期25卷 9-14页

作者：鲁海峰吴仲文李兰娟左键盛吉芳郑树森梁廷波卢安卫浙江大学医学院附属第一医院传染科卫生部传染病重点实验室杭州310003 浙江大学医学院附属第一医院传染科肝胆胰外科杭州310003

目的探讨肝移植患者肠道双歧杆菌属细菌种群分子生态结构变化特点。方法采用荧光定量PCR技术分析健康人27例、肝硬化患者51例及肝移植后患者113例粪便双歧杆菌在属及种水平上的定性和定量变化。结果与健康人比较，肝移植及肝硬化患者肠... 详细信息

目的探讨肝移植患者肠道双歧杆菌属细菌种群分子生态结构变化特点。方法采用荧光定量PCR技术分析健康人27例、肝硬化患者51例及肝移植后患者113例粪便双歧杆菌在属及种水平上的定性和定量变化。结果与健康人比较，肝移植及肝硬化患者肠道双歧杆菌总量、肠道假小链双歧杆菌或小链双歧杆菌组细菌及青春型双歧杆菌显著减少均P〈0．01；肝移植患者肠道长双歧杆菌显著增多（P〈0．01）。肝移植患者肠道假小链双歧杆菌或小链双歧杆菌、青春型双歧杆菌、短型双歧杆菌检出率显著低于健康人群均P〈0．01。肝移植组患者肠道双歧杆菌多样性显著低于健康人群（Х^2=20．1，P〈0．01）。结论肝移植及肝硬化患者肠道双歧杆菌种群生态结构均存在显著异常，尤以假小链双歧杆菌或小链双歧杆菌组及青春型双歧杆菌的数量及检出率降低最为显著，肝移植组患者肠道双歧杆菌多样性显著低于健康人群。

关键词：肝移植肝硬化双歧杆菌

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乙型肝炎病毒大蛋白和DNA在抗病毒治疗中的变化

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中华传染病杂志 2007年第7期25卷 405-407页

作者：陈晓明杨美芳薛寒胡敏君陈离伟范骏沃健儿浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部病毒性传染病重点实验室杭州310003

HBV是嗜肝DNA病毒，其S基因编码3种外膜蛋白，分别是主蛋白、中蛋白和大蛋白。近年研究表明HBV大蛋白（HBV-LP）与病毒侵入、组装和复制等密切相关，Bruss等研究发现，HBV-LP在病毒进入肝细胞时作为受体蛋白起作用，在病毒组装时，则是... 详细信息

HBV是嗜肝DNA病毒，其S基因编码3种外膜蛋白，分别是主蛋白、中蛋白和大蛋白。近年研究表明HBV大蛋白（HBV-LP）与病毒侵入、组装和复制等密切相关，Bruss等研究发现，HBV-LP在病毒进入肝细胞时作为受体蛋白起作用，在病毒组装时，则是基质类似蛋白，同时还行使调节功能。而且这种多功能性依赖于HBV-LP前S区独特的双重拓扑结构。同时研究还表明，HBV-LP对HBV复制过程具有反式激活作用，并与病毒颗粒从细胞内释放调节有关。HBV—LP存在于感染性颗粒（Dane颗粒）和亚病毒管状颗粒上，是病毒形成完整外膜的重要标志，与血清HBVDNA拷贝数具有良好的相关性，能反映患者机体内HBV复制情况。魏红山等研究表明，在HBeAg阴性慢性乙型肝炎患者血清中，

关键词：嗜肝DNA病毒抗病毒治疗外膜蛋白乙型肝炎病毒血清HBV 慢性乙型肝炎患者 HBeAg阴性反式激活作用

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国产某丙型肝炎病毒抗体试剂中吸光度/临界值的作用

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中华传染病杂志 2007年第4期25卷 206-210页

作者：李兰娟严力行朱发明马伟杭励晓涛庄辉浙江大学医学院附属第一医院传染内科卫生部传染病重点实验室浙江省传染病重点实验室浙江省血液中心卫生部血液安全研究重点实验室北京大学医学部微生物学系

目的研究某国产抗-HCV试剂样本吸光度/临界值(S/Co)的意义,探讨国产试剂检测抗-HCV的初步程序和标准。方法采用某国产试剂通过ELISA法检测295 000例无偿献血者的抗-HCV,对其阳性反应的样本采用Ortho抗-HCV试剂通过ELISA法进行检测。Orth... 详细信息

目的研究某国产抗-HCV试剂样本吸光度/临界值(S/Co)的意义,探讨国产试剂检测抗-HCV的初步程序和标准。方法采用某国产试剂通过ELISA法检测295 000例无偿献血者的抗-HCV,对其阳性反应的样本采用Ortho抗-HCV试剂通过ELISA法进行检测。Ortho试剂阳性反应的样本进行HCV重组免疫印迹实验(RIBA),并对其中的106例Ortho试剂阳性反应的样本进行核酸检测。结果在295 000例样本中,某国产试剂抗-HCV阳性反应为681例,阳性率为0.23%。某国产试剂阳性反应的样本经Ortho试剂检测后阳性反应为367例,符合率为53.8%,其中Ortho试剂S/Co值≥3.8为66.2%。在Ortho试剂S/Co值≥3.8的样本中,某国产试剂S/Co值≥8.0的占94.2%;而Ortho试剂S/Co值<3.8的样本中,某国产试剂S/Co值<8.0的占99.2%。367例Ortho阳性反应样本中,RIBA HCV阳性223例,阳性率为60.8%;在国产试剂S/Co值≥8.0的样本中,RIBA阳性率为95.7%;而同一种国产试剂S/Co值<8.0的样本中,RIBA阳性率为2.2%。106例Ortho试剂阳性反应样本中核酸检测阳性为42例。结论国产抗-HCV试剂在检测无偿献血者样本中存在较高的假阳性率,一定程度上造成了血源和血液的浪费。某国产试剂S/Co值≥8.0和Ortho试剂S/Co值≥3.8具有一定的相关性,在实验室检测抗-HCV上具有一定诊断价值。

关键词：肝炎病毒丙型分光光度法抗体病毒

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动态调节人工乳粘稠度和营养成分饲喂无菌大鼠效果研究

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浙江大学学报（农业与生命科学版） 2007年第3期33卷 259-264页

作者：王建国李兰娟卢领群萨晓婴戴方伟浙江大学医学院附属第一医院卫生部传染病重点实验室浙江杭州310003 浙江省医学科学院浙江省实验动物中心浙江杭州310013

根据无菌大鼠乳鼠吮吸乳汁的规律,建立一套新的人工哺乳(AR)无菌乳鼠的方法.设计并配制6种适合不同日龄乳鼠的人工乳(LWF),并测定人工乳主要的营养成分含量和粘稠度等.无菌剖腹产术得到30只无菌乳鼠,采用吮吸法饲喂乳鼠至21日龄断乳,以3... 详细信息

根据无菌大鼠乳鼠吮吸乳汁的规律,建立一套新的人工哺乳(AR)无菌乳鼠的方法.设计并配制6种适合不同日龄乳鼠的人工乳(LWF),并测定人工乳主要的营养成分含量和粘稠度等.无菌剖腹产术得到30只无菌乳鼠,采用吮吸法饲喂乳鼠至21日龄断乳,以30只代乳母鼠哺乳(MR)的乳鼠为对照,每日称量乳鼠体重,观察生长发育情况,计算离乳时乳鼠的生存率,检查8对100日龄以上AR无菌大鼠的生育能力.6种人工乳除LWF-6外,其余人工乳的蛋白质、脂肪、糖类、灰分、钙、钾、钠、氯、磷的含量、总能量和pH与大鼠乳相似,但这些人工乳的粘稠度不同.从LWF-1至LWF-5,蛋白质、脂肪、糖类的含量、能量和粘稠度不断增加.虽然AR乳鼠的体重增长不如MR乳鼠(2日龄时,P<0.05;3日龄时,P<0.01),但其生长发育正常.AR乳鼠的离乳率为73.3%,MR鼠为100%.8对AR无菌大鼠都有生育力.说明采用动态调节人工乳粘稠度和营养成分含量的方法可以用于饲喂无菌乳鼠,并且存活率较高.

关键词：无菌大鼠人工乳粘稠度营养成分动态调节

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血管紧张素酶基因多态性与乙型肝炎肝纤维化指标的关系

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中华传染病杂志 2007年第7期25卷 403-405页

作者：何泽宝朱坚胜陈智曾文新朱敏王庚歌陈华忠方浩浙江省台州医院感染科临海市317000 浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室浙江省台州医院中心实验室临海市317000

肝纤维化是可逆性病变，及时、有效制止肝纤维化的进展，可阻断肝硬化的发生。最近发现，在体外培养的激活的肝星状细胞表面有血管紧张素Ⅱ1型受体（AT1）表达，血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）可使这些细胞产生收缩和增生，而肝星状细胞的激活... 详细信息

肝纤维化是可逆性病变，及时、有效制止肝纤维化的进展，可阻断肝硬化的发生。最近发现，在体外培养的激活的肝星状细胞表面有血管紧张素Ⅱ1型受体（AT1）表达，血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）可使这些细胞产生收缩和增生，而肝星状细胞的激活是肝纤维化的关键因素。血管紧张素酶（ACE）是肾素一血管紧张素系统（RAs）的关键酶，其最显著的作用是激活AngⅡ，在血管及其他组织，ACE能调节间质液内AngⅡ的最终浓度。目前研究表明肝脏局部存在RAS系统，

关键词：血管紧张素酶基因多态性肝纤维化指标血管紧张素Ⅱ1型受体乙型肝炎肾素一血管紧张素系统 AngⅡ 细胞表面可逆性病变

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血清转化生长因子β1水平在慢性乙型肝炎与乙型肝炎肝硬化患者中差异的意义

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世界华人消化杂志 2007年第29期15卷 3104-3106页

作者：何泽宝朱坚胜陈智朱敏曾文新陈华忠王庚歌方浩台州医院感染科浙江省临海市317000 浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室浙江省杭州市310003 浙江省台州医院中心实验室浙江省临海市317000

目的:观察血清转化生长因子β1(TGFβ1)水平是否与肝脏炎症、纤维化程度相关及其在慢性乙型肝炎与乙肝肝硬化患者中的差异.方法:慢性乙肝(慢性肝炎组)65例,乙肝肝硬化(肝硬化组)56例,体检健康、乙肝标志物阴性者(正常对照组)50例,均空... 详细信息

目的:观察血清转化生长因子β1(TGFβ1)水平是否与肝脏炎症、纤维化程度相关及其在慢性乙型肝炎与乙肝肝硬化患者中的差异.方法:慢性乙肝(慢性肝炎组)65例,乙肝肝硬化(肝硬化组)56例,体检健康、乙肝标志物阴性者(正常对照组)50例,均空腹采血,肝纤维化指标(HA、CⅣ、PCⅢ、LN)采用放免法测定,血清TGFβ1检测采用ELISA.结果:慢性肝炎组血清TGFβ1水平明显高于肝硬化组和正常对照组(22±13μg/L vs 10±9μg/L,11±9μg/L,P<0.01),肝硬化组血清TGFβ1水平与正常对照组相比无显著性差异(P>0.05).肝硬化组PCⅢ与血清TGFβ1水平相关(r=0.269,P=0.045),慢性肝炎和肝硬化组血清TGFβ1水平与肝功能、肝纤维化指标无明显相关性(P>0.05).结论:血清TGFβ1水平可协助诊断肝脏炎症程度与纤维化程度,但不能作为他们的判断标准.

关键词：转化生长因子β1 乙型病毒性肝炎纤维化炎症酶联免疫吸附

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