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第九次浙江省中西医结合肝病学术会议

作者：李兰娟浙江大学医学院附属第一医院传染科卫生部传染病重点实验室

一、禽流感疫情形势 1．我国禽类饲养情况我国有家禽142．32亿只,占亚洲42％,其中水禽37．35亿,占全世界76％,产蛋占全世界45％。禽类数量大,密度高,产值5千亿。在很多地方农村,家禽以散养方式为主,家禽的生活习惯有利于暴露和病毒整合... 详细信息

一、禽流感疫情形势 1．我国禽类饲养情况我国有家禽142．32亿只,占亚洲42％,其中水禽37．35亿,占全世界76％,产蛋占全世界45％。禽类数量大,密度高,产值5千亿。在很多地方农村,家禽以散养方式为主,家禽的生活习惯有利于暴露和病毒整合,而且,常出现人、禽、猪混居现象。此外,我国迁徙候鸟500万只,占全球20％。 2．H5N1宿主范围不断扩大目前发现,越来越多的动物携带H5N1病毒,阳性率达10％。鸡、火鸡、鸭、鹅、鹌鹑、鹧鸪、鸵鸟、鸽、孔雀等多种动物都对其易感。野生候鸟出现大规模发病死亡。2003年12月泰国,引起

关键词：人禽流感禽流感病毒禽流感疫情流感样病例预防控制禽流感疫苗

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质粒介导的RNA干扰对人类细胞中HBcAg表达的抑制作用

质粒介导的RNA干扰对人类细胞中HBcAg表达的抑制作用

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浙江省免疫学会第五次学术研讨会

作者：徐宁陈智羊正纲姚航平侯晓丽吴炜蔡为民浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室

近年来,基于质粒载体的RNAi的方法因DNA合成便宜且稳定,能完整地进入宿主细胞的基因组产生长期的效应等优点。逐渐被认同为是一种较理想、经济的,产生RNAi的可替代途径。本研究设计并构建了针对HBcAg基因的shRNA表达载体,与表达HBcAg-E... 详细信息

近年来,基于质粒载体的RNAi的方法因DNA合成便宜且稳定,能完整地进入宿主细胞的基因组产生长期的效应等优点。逐渐被认同为是一种较理想、经济的,产生RNAi的可替代途径。本研究设计并构建了针对HBcAg基因的shRNA表达载体,与表达HBcAg-EGFP融合蛋白的质粒共转染AD293细胞株,观察其阻断HBcAg基因表达的效果与规律,以期为利用RNAi效应进行抗HBV复制的研究以及今后潜在的临床治疗应用奠定基础。

关键词：基因组共转染 HBcAg RNA 抑制作用

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肝病微生态学的研究进展

肝病微生态学的研究进展

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第五届全国肝脏疾病临床暨中华肝脏病杂志成立十周年学术会议

作者：李兰娟浙江大学医学院附属第一医院卫生部传染病重点实验室传染病研究所

我国是世界上病毒性肝炎的高发区,乙型肝炎病毒携带者高达1．3亿。虽然一些抗病毒药物在临床得到广泛应用,但是慢性肝炎进展为肝硬化、重型肝炎的势头仍未得到有效地遏制。目前随着人工肝和肝移植技术的不断发展,使得终末期肝病的病死... 详细信息

我国是世界上病毒性肝炎的高发区,乙型肝炎病毒携带者高达1．3亿。虽然一些抗病毒药物在临床得到广泛应用,但是慢性肝炎进展为肝硬化、重型肝炎的势头仍未得到有效地遏制。目前随着人工肝和肝移植技术的不断发展,使得终末期肝病的病死率有所下降,但由于经济、技术等各种条件的限制,慢性肝病总体病死率仍居高不下。慢性肝病的防治仍然是21世纪的重大课题,我们仍然任重道远。大量临床研究显示肝病的发生发展与人体微生态的变化密切相关。其中肠道微生态与肝脏不但在解剖结构上,而且在功能上都有着密切的联系。正常情况下,肝脏可清除来自肠道的包括内毒素、氨、吲哚、酚类、短

关键词：双歧杆菌乳杆菌库普弗细胞内毒素血症肝硬化患者肝性脑病重型肝炎肝性昏迷肝肾综合征肠道微生态肝脏功能细菌移位微生态调节剂微生态学

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重型乙型肝炎血清HBV特异性循环免疫复合物的检测及其意义

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浙江医学 2005年第2期27卷 81-83,89页

作者：吴炜陈瑜李兰娟浙江大学医学院附属第一医院传染科卫生部传染病重点实验室杭州310003 浙江大学医学院附属第一医院传染科卫生部传检验科杭州310003

目的通过检测重型乙型肝炎(乙肝)病人血清HBV特异性循环免疫复合物的含量,探讨HBV特异性循环免疫复合物与重型乙肝的关系。方法采用聚乙二醇穴PEG雪沉淀法制备HBV特异性免疫复合物阳性对照品,并对80例重型乙肝患者血清HBV特异性循环免... 详细信息

目的通过检测重型乙型肝炎(乙肝)病人血清HBV特异性循环免疫复合物的含量,探讨HBV特异性循环免疫复合物与重型乙肝的关系。方法采用聚乙二醇穴PEG雪沉淀法制备HBV特异性免疫复合物阳性对照品,并对80例重型乙肝患者血清HBV特异性循环免疫复合物含量进行检测。结果80例重型乙肝患者血清解离前后HBsAg-IC阳性率最高穴56.25%雪。HBsAg-IC阳性与阴性者的年龄、HBsAg阳性率、ALT、TB水平等之间差别无显著性意义穴P>0.05雪,而HBVDNA、HBeAg阳性率之间差别有显著性意义(P<0.05)。结论PEG沉淀法检测HBV特异性循环免疫复合物简便、可靠,可用于临床检测;HBsAg-IC是重型乙肝患者循环免疫复合物的主要形式鸦HBsAg-IC阳性可能与病毒复制能力有关。

关键词：循环免疫复合物血清HBV 重型乙肝特异性重型乙型肝炎患者阳性显著性法制平等

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环境控制对于隔离器内保持无菌时间的影响

环境控制对于隔离器内保持无菌时间的影响

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2006年浙江省医学会传染病肝病会议

作者：王建国李兰娟浙江大学医学院附属第一医院，卫生部传染病重点实验室（310003）

无菌大鼠的内部生存环境－隔离器内必须达到无菌。隔离器内部与外部环境是完全隔绝，本文研究了环境控制对于隔离器内保持无菌时间的影响。

关键词：隔离器无菌时间环境控制动物模型

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乙型重型肝炎患者HBV 特异性CTL 应答功能研究

乙型重型肝炎患者HBV 特异性CTL 应答功能研究

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2006年浙江省医学会传染病肝病会议

作者：陈瑜吴炜李兰娟浙江大学医学院附属第一医院，卫生部传染病重点实验室（310003）

本课题以乙型重型肝炎患者为主要研究对象，围绕 HBV特异性CTL应答机制，采用国际上新近出现的HLA-抗原肽四聚体(Tetramer)流式细胞技术测定HBV 特异性CD8+CTL 细胞、斑点免疫吸附试验(ELISPOT)以及非放射性靶细胞裂解试验等新技术，测... 详细信息

本课题以乙型重型肝炎患者为主要研究对象，围绕 HBV特异性CTL应答机制，采用国际上新近出现的HLA-抗原肽四聚体(Tetramer)流式细胞技术测定HBV 特异性CD8+CTL 细胞、斑点免疫吸附试验(ELISPOT)以及非放射性靶细胞裂解试验等新技术，测定乙肝重型肝炎患者中针对乙肝病毒三个重要表位肽的特异性CTL 数量、其表达细胞因子及杀伤靶细胞的功能等，初步探讨乙型重型肝炎中特异性CTL 细胞免疫应答的特征性表现以及在乙肝病毒清除和肝细胞损伤两种不同效应中的内在机理，从特异性CTL 细胞免疫应答的角度揭示乙型重型肝炎的发病机理。

关键词：重型肝炎乙型肝炎发病机理细胞免疫免疫反应 L应答机制流式细胞术

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拉米夫定耐药患者乙型肝炎病毒B、C 基因型的病毒水平、YMDD 变异类型、前C 区/核心启动子突变的研究

拉米夫定耐药患者乙型肝炎病毒B、C 基因型的病毒水平、YMDD 变异...

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2006年浙江省医学会传染病肝病会议

作者：潘小平李兰娟杜维波李敏伟曹红翠陈智浙江大学医学院附属第一医院，卫生部传染病重点实验室（310003）

本研究采用酶联免疫吸附试验(ELISA)实时荧光定量PCR(Real-time PCR)和DNA序列分析的方法，分别检测53 例拉米夫定耐药患者血清中HBV的基因型、DNA 水平以及C、P 基因的部分核苷酸序列，旨在探讨乙型肝炎病毒拉米夫定耐药患者B、C 基因... 详细信息

本研究采用酶联免疫吸附试验(ELISA)实时荧光定量PCR(Real-time PCR)和DNA序列分析的方法，分别检测53 例拉米夫定耐药患者血清中HBV的基因型、DNA 水平以及C、P 基因的部分核苷酸序列，旨在探讨乙型肝炎病毒拉米夫定耐药患者B、C 基因型在病毒水平、YMDD 变异类型、以及前C 区/核心启动子基因变异等病毒学特性的差异。

关键词：拉米夫定酶联免疫吸附试验实时荧光定量序列分析核苷酸序列乙型肝炎基因变异病毒学特性

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比较判断大鼠孕鼠临产时间不同方法的准确率

比较判断大鼠孕鼠临产时间不同方法的准确率

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2006年浙江省医学会传染病肝病会议

作者：王建国李兰娟浙江大学医学院附属第一医院，卫生部传染病重点实验室（310003）

本文采用孕鼠临产期推算法、触诊法、观察法、综合法、补救法等多种判断方法的比较,观察和评价各种临产期判断方法的准确性。

关键词：哺乳动物临产时间准确率时间判断动物模型

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双歧杆菌与乳酸杆菌对肝缺血-再灌注损伤作用的实验研究

双歧杆菌与乳酸杆菌对肝缺血-再灌注损伤作用的实验研究

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全国微生态调节剂第六届学术研讨会

作者：李兰娟邢卉春徐凯进陈云波沈恬盛洁芳浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室 310003

目的探讨肝缺血-再灌注(I/R)损伤时肠道菌群的变化及用双歧杆菌和乳酸杆菌对缺血-再灌注肝损伤的影响。方法选用SPF级SD大鼠随机分为4组：正常对照组(8只)、假手术组(6只)、肝I/R组(10只)、双歧-乳酸杆菌预处理组(9只，用双歧杆菌和乳... 详细信息

目的探讨肝缺血-再灌注(I/R)损伤时肠道菌群的变化及用双歧杆菌和乳酸杆菌对缺血-再灌注肝损伤的影响。方法选用SPF级SD大鼠随机分为4组：正常对照组(8只)、假手术组(6只)、肝I/R组(10只)、双歧-乳酸杆菌预处理组(9只，用双歧杆菌和乳酸杆菌混合菌悬液预处理)。通过阻断入肝血流20min建立肝I/R模型，22h后采集标本。用光冈氏肠内细菌群分析法分析不同情况下回肠末段菌群构成、肠道细菌易位情况;用电子显微镜观察肠粘膜超微结构;用偶氮基质显色鲎试验定量法测定血浆内毒素;并对血清丙氨酸转氨酶(ALT)、血清天冬氨酸转氨酶(AST)、血清总胆红素(TBIL)及肝组织中丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性进行检测。结果肝I/R大鼠血清ALT、AST明显升高，血浆内毒素水平及肝组织中MDA含量也增高(P＜0.01);同时肠道双歧杆菌、乳酸杆菌较正常对照组明显减少(P＜0.01)，而肠道需氧菌如肠球菌、肠杆菌却增加，细菌易位至肾脏的阳性率增加(P＜0.05);肠粘膜细胞间隙增宽，细胞间紧密连接开放，微绒毛数目减少、变性、断裂。用双歧杆菌和乳酸杆菌混合菌预处理可使肠道双歧杆菌、乳酸杆菌数量上明显回升，肠粘膜超微结构基本正常，细菌易位至肾脏的阳性率降低，血清ALT、血浆内毒素水平及肝组织中MDA含量也降低。不同处理组大鼠肠道类杆菌数量虽有所波动，但各组间的变化无显著差异;酵母菌培养及产气荚膜梭菌培养仅在个别鼠为阳性，且不同组间差异无显著性。结论肝缺血—再灌注大鼠存在着肠道菌群的失衡(乳酸杆菌、双歧杆菌减少，肠球菌、肠杆菌增加)、肠粘膜屏障损害及肠道菌的移位：补充益生菌—乳酸杆菌和双歧杆菌可部分恢复肠道菌群的构成、改善肠粘膜屏障、减少肠道菌易位的发生率，进而降低血浆内毒素水平、减少肝脏氧自由基产生、减轻肝损伤。

关键词：肝缺血再灌注损伤双歧杆菌乳酸杆菌

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永生化猪肝细胞的建立及其鉴定

永生化猪肝细胞的建立及其鉴定

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2006年浙江省医学会传染病肝病会议

作者：潘小平李君盛吉芳李兰娟杜维波郝邵瑞曹红翠陈瑜盛国平章益民朱春侠浙江大学医学院附属第一医院，卫生部传染病重点实验室（310003）

人工肝(artificial liver)被认为是治疗肝衰竭的有效途径之一，本文介绍了生物型人工肝研究的热点，原代猪肝细胞在人工肝支持系统中应用。

关键词：人工肝肝衰竭猪肝细胞特异功能

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