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2012年浙江省外科学学术年会

作者：任志刚周琳蒋建文陈新华谢海洋郑树森秦楠鲁海峰浙江大学医学院附属第一医院肝胆胰外科卫生部多器官联合移植重点实验室浙江大学传染病诊治国家重点实验室

目的在肝移植中,移植肝承受缺血再灌注和移植排斥双重损伤;移植肝功能与机体代谢和肠道微生态菌群结构紧密相关。本文采用大鼠肝移植急性排斥模型,动态观察机体代谢和肠道菌群的结构和功能的改变。方法建立大鼠原位肝移植模型30例,分成... 详细信息

目的在肝移植中,移植肝承受缺血再灌注和移植排斥双重损伤;移植肝功能与机体代谢和肠道微生态菌群结构紧密相关。本文采用大鼠肝移植急性排斥模型,动态观察机体代谢和肠道菌群的结构和功能的改变。方法建立大鼠原位肝移植模型30例,分成同基因(Lewis-Lewis,n=15)移植组和异基因(DA-Lewis,n=15)移植组,并取健康Lewis大鼠10只作为正常对照(NC组),在移植后1、3、7

关键词：结构和功能肝移植肠道菌群移植排斥深度分析

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2010年中国CHINET肠球菌属细菌耐药性监测

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中国感染与化疗杂志 2012年第2期12卷 92-97页

作者：杨青俞云松倪语星孙景勇徐英春张小江孙自镛陈中举汪复朱德妹胡付品蒋晓飞王传清王爱敏卓超苏丹虹胡云建艾效曼黄文祥贾蓓张朝霞季萍张泓孔菁魏莲花吴玲徐元宏沈继录单斌杜艳浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室杭州310003 上海交通大学医学院附属瑞金医院中国医学科学院附属北京协和医院华中科技大学同济医学院附属同济医院复旦大学附属华山医院复旦大学附属儿科医院广州医学院附属第一医院呼吸疾病研究所卫生部北京医院重庆医科大学附属第一医院新疆医科大学附属第一医院上海交通大学附属儿童医院甘肃省人民医院安徽医科大学附属第一医院昆明医学院附属第一医院

目的了解2010年中国主要地区临床分离肠球菌属细菌对各类抗菌药物的耐药性。方法国内主要地区14所教学医院(12所综合性医院,2所儿童医院)按统一方案、采用统一的材料、方法(K-B法)和判断标准(CLSI 2010年版)进行肠球菌属细菌的耐药性监... 详细信息

目的了解2010年中国主要地区临床分离肠球菌属细菌对各类抗菌药物的耐药性。方法国内主要地区14所教学医院(12所综合性医院,2所儿童医院)按统一方案、采用统一的材料、方法(K-B法)和判断标准(CLSI 2010年版)进行肠球菌属细菌的耐药性监测。结果共分离到4 046株非重复肠球菌属细菌,最常见菌种为粪肠球菌1 829株(45.2%)、屎肠球菌1 817株(44.9%)、鹑鸡肠球菌78株(1.9%)、鸟肠球菌54株(1.3%)、铅黄肠球菌49株(1.2%)。肠球菌属对利奈唑胺、万古霉素、替考拉宁仍极敏感,耐药率<4%,万古霉素耐药粪肠球菌和屎肠球菌检出率分别为0.6%、3.6%。粪肠球菌对呋喃妥因、磷霉素和氨苄西林耐药率较低,分别为3.2%、5.7%和11.3%,对高浓度庆大霉素耐药率为44.0%;屎肠球菌耐药性明显高于粪肠球菌,对氨苄西林耐药率接近90%,对高浓度庆大霉素耐药率接近70%,对氯霉素耐药率仅为7.3%,儿童屎肠球菌分离株对磷霉素、呋喃妥因耐药率<10%。不同医院分离的肠球菌属细菌对抗菌药物的耐药率有一定差异。结论屎肠球菌的分离率有增加趋势,肠球菌属细菌对利奈唑胺、万古霉素、替考拉宁依然保持极高的敏感性。

关键词：肠球菌属细菌耐药性监测抗菌药

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中国大陆地区住院儿童重症及危重症甲型H1N1流感临床过程分析

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中华临床医师杂志（电子版） 2012年第10期6卷 100-105页

作者：李晓莉曹彬梁立荣谷丽杨仕贵胡克章洪院阎锡新陈巍王辰首都医科大学附属北京朝阳医院北京呼吸疾病研究所 100020 浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室武汉大学人民医院呼吸科安徽大学附属第一医院呼吸科河北医科大学附属第二医院呼吸科中国医科大学附属盛京医院呼吸科北京呼吸疾病研究所卫生部北京医院

目的探讨中国大陆地区2009年住院儿童重症以及危重症甲型H1N1流感临床过程以及预后。方法采用统一CRF表,收集中国大陆地区2009年9月1日至2009年12月31日收治的1137例住院儿童(年龄小于14岁)重症和危重症甲型H1N1流感患者的临床资料。确... 详细信息

目的探讨中国大陆地区2009年住院儿童重症以及危重症甲型H1N1流感临床过程以及预后。方法采用统一CRF表,收集中国大陆地区2009年9月1日至2009年12月31日收治的1137例住院儿童(年龄小于14岁)重症和危重症甲型H1N1流感患者的临床资料。确诊病例的定义为甲型H1N1流感病毒核酸检测阳性(实时荧光定量PCR方法)。结果中位年龄为4岁,22.6%的患儿年龄小于2岁。65.7%为男性。最常见的基础疾病为呼吸系统疾病(17.1%),主要症状为发热(1103例,97.3%)和咳嗽(1087例,95.7%)。86.3%患儿合并肺炎。1053例(92.6%)患儿接受奥司他韦抗病毒治疗,484例接受糖皮质激素治疗,263例需要机械通气。426例患儿入住ICU。所有入选患者中,58例死亡,难以纠正的低氧血症为死亡的主要原因。多因素回归分析显示年龄小于2岁(OR3.65,95%CI1.72～7.74)、免疫抑制状态(OR6.09,95%CI2.04～18.15)、呼吸困难(OR2.61,95%CI1.44～4.69)、咯血(OR3.65,95%CI1.38～9.65)以及神经系统症状(OR1.58,95%CI1.58～5.84)为死亡的独立危险因素。结论临床医师对于儿童甲型H1N1流感患者应高度重视,尤其是合并有免疫抑制状态的患者以及年龄小于2岁的儿童。难以纠正的低氧血症为死亡的主要原因。

关键词：流感病毒A型,H1N1亚型儿童危险因素

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来自癌中心和癌旁不同准种株1b型HCV核心蛋白对HepG2细胞基因表达谱的影响比较

来自癌中心和癌旁不同准种株1b型HCV核心蛋白对HepG2细胞基因表达...

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第11届全国中医药防治感染病学术大会暨江苏省中西医结合肝病学术年会

作者：颜学兵陈智徐州医学院附属医院感染性疾病科江苏徐州 221002 浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所，卫生部传染病重点实验室浙江杭州 310003

目的：研究基因lb型丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白(CORE)在HCV持续感染及致癌的分子机制。方法：将含有HCV不同准种株基因1b型CORE的真核表达质粒转染HepG2细胞，提取总RNA制备探针，与Affymetrix人基因芯片HG—u 133 Plus2.0杂交，比较基... 详细信息

目的：研究基因lb型丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白(CORE)在HCV持续感染及致癌的分子机制。方法：将含有HCV不同准种株基因1b型CORE的真核表达质粒转染HepG2细胞，提取总RNA制备探针，与Affymetrix人基因芯片HG—u 133 Plus2.0杂交，比较基因lb型HCV不同准种株一癌中心株(T)及癌旁株(NT)编码CORE对HepG2细胞基因表达谱的影响，筛选不同病毒株的差异表达基因及共同表达基因。结果：T有差异表达基因36个，上调32个，含12未知功能基因，下调4个，含2个未知功能基因;NT有43个差异表达基因，上调43个;T与NT差异表达基因共24个，其中上调21个，含有11个未知功能基因，下调3个，含有1个未知功能基因，发现一个NT与T共同明显上调的基因为CSNKlA1。结论：基因1b型不同准种株HCV的CORE在HCV持续感染及肝癌发病机制中的作用及分子致病机制存在一定的差异，筛选出T与NT特异表达基因和共同表达基因为进一步研究CORE致病机制的分子特征提供了重要线索。

关键词：丙型肝炎病毒核心蛋白分子机制 HepG2细胞基因表达

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HBV感染对肝移植术后巨细胞病毒感染的影响

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中华微生物学和免疫学杂志 2010年第2期30卷 150-153页

作者：赵宏范骏胡建华高海女杨美芳张旋周琳马伟杭浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所传染病诊治国家重点实验室杭州310003 浙江大学附属第一医院卫生部多器官联合移植重点实验室

目的探讨肝移植患者移植术前后HBV感染对移植术后巨细胞病毒（CMV）感染及其肝功能的影响.方法回顾性分析我院近两年来113例肝移植患者临床资料,排除术后1月内死亡、血型不符、失访和并发其他噬肝病毒感染患者,共有102例患者纳入.根... 详细信息

目的探讨肝移植患者移植术前后HBV感染对移植术后巨细胞病毒（CMV）感染及其肝功能的影响.方法回顾性分析我院近两年来113例肝移植患者临床资料,排除术后1月内死亡、血型不符、失访和并发其他噬肝病毒感染患者,共有102例患者纳入.根据肝移植术前是否感染HBV将患者分为HBV感染组和对照组（非HBV感染）;对于感染组患者,又根据移植术后HBV是否复发分为术后复发组和非复发组,采用免疫组化方法检测CMV被膜抗原pp65水平,时间分辨法检测乙肝病毒抗原和抗体水平,常规方法检测肝转氨酶水平.结果 HBV感染组（n=83）和对照组（n=19）中,术后pp65阳性率分别为84.3%（70/83）和57.9%（11/19）（P=0.024）;HBV感染组中,HBV复发组和非复发组中pp65阳性率分别为90.9%（10/11）和83.3%（60/72）（P=0.843）,各组间肝转氨酶水平差异无统计学意义（P〉0.05）.结论肝移植术前HBV感染可以增加术后CMV病毒血症风险,而肝移植后HBV复发并不增加CMV病毒血症风险;同时,与单一HBV或CMV感染而言,两种病毒联合感染并不明显引起肝转氨酶水平的升高.

关键词：乙肝病毒肝移植巨细胞病毒转氨酶

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外周血单个核细胞中与慢性乙型肝炎重症化进程有关的免疫分子表达

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中华传染病杂志 2010年第12期28卷 733-739页

作者：卓婷婷陈智浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病诊断与治疗重点实验室杭州310003

目的筛选慢性乙型肝炎（CHB）患者外周血单个核细胞（PBMC）中与肝炎重症化相关的免疫分子。方法采用荧光定量PCR技术检测各型CHB患者PBMC中39个免疫分子（包括白细胞分化抗原、趋化因子受体、凋亡相关配体和受体、黏附分子、Toll样受... 详细信息

目的筛选慢性乙型肝炎（CHB）患者外周血单个核细胞（PBMC）中与肝炎重症化相关的免疫分子。方法采用荧光定量PCR技术检测各型CHB患者PBMC中39个免疫分子（包括白细胞分化抗原、趋化因子受体、凋亡相关配体和受体、黏附分子、Toll样受体等）mRNA的相对表达水平。多组间两两比较采用单因素方差分析中的Scheffe法，相关性检验采用Spearman等级相关分析。结果荧光定量结果显示，39个免疫分子中与肝炎严重程度相关的分子共有9个，即肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）、TRAIL受体（TRAIL—R）2、CD64、CD30、CD27、CD28、L-选择素（CD62I。）、细胞间黏附分子-1（ICAM-1）和CXC型趋化因子受体（CXCR）2，与健康对照组相比，这9种免疫分子在CHB重度组的表达量增高倍数分别为3．88、4．37、2．51、2．22、2．97、2．53、4．07、4．29和4．25倍（F=1．96、2．13、1．33、1．16、1．57、2．14、2．03、2．10、2．09，均P〈0．05）。其中TRAIL、TRAILR2、CD64、CD30、CD27的表达量与IFN-7的表达量呈显著正相关（r=0．816、0．572、0．462、0．697、0．793，均P〈0．01）。TRAIL-R2、CD64、CD30、CD62L、1CAM-1表达量与TNF-a的表达量呈显著正相关（r=0．494、0．588、0．568、0．968、0．976，均P〈0．01）。结论TRAIL、TRAILR2、CD64、CD30、CD27、CD28、CD62L、ICAM-1和CXCR2的异常表达与肝脏炎性反应和肝炎重症化相关。

关键词：肝炎乙型慢性聚合酶链反应单核细胞细胞因子类基因表达

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肝纤维化的MRI研究进展

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国际医学放射学杂志 2009年第2期32卷 139-142页

作者：谭延斌张敏鸣浙江大学医学院附属第一医院放射科浙江大学医学院附属第一医院卫生部传染病重点实验室

肝纤维化为慢性肝病早期出现的病理改变,早期治疗能明显改善其预后,故早期诊断有重要意义。MRI扫描技术的发展使其能够对肝纤维化的结构、代谢及功能做出评价,就近年来早期诊断肝纤维化的MRI研究进展予以综述。

关键词：肝纤维化肝硬化磁共振灌注成像扩散加权成像磁共振波谱学磁共振弹性成像

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永生化猪肝细胞的建立及其鉴定

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中华传染病杂志 2008年第7期26卷 406-409页

作者：潘小平杜维波郝邵瑞曹红翠陈瑜盛国平朱春侠盛吉芳李兰娟浙江大学医学院附属第一医院传染内科卫生部传染病重点实验室杭州310003

目的建立永生化的猪肝细胞系，为生物人工肝、肝细胞移植、体外药物代谢模型提供合适的细胞源。方法应用胶原酶等四步灌流法分离获得原代猪肝细胞，以SV40大T抗原（SV40LT）和含人端粒酶反转录酶（hTERT）的重组反转录病毒感染，对其进... 详细信息

目的建立永生化的猪肝细胞系，为生物人工肝、肝细胞移植、体外药物代谢模型提供合适的细胞源。方法应用胶原酶等四步灌流法分离获得原代猪肝细胞，以SV40大T抗原（SV40LT）和含人端粒酶反转录酶（hTERT）的重组反转录病毒感染，对其进行永生化；然后，对建立的猪肝细胞系进行生物学特性鉴定。结果原代猪肝细胞经转染含人端粒酶反转录酶和SV40大T抗原的重组反转录病毒后4～6周获得三个肝细胞样细胞克隆，其中，一个猪肝细胞克隆（HepLP）传代60代以上；永生化猪肝细胞在相差显微镜、扫描电镜和透射电镜下具有典型的肝细胞的形态；Western印迹法检测该细胞系表达人端粒酶反转录酶和SV40大T抗原。RT-PCR检测到永生化猪肝细胞表达白蛋白mRNA、ELISA双抗体夹心法检测到永生化猪肝细胞培养上清液中自蛋白的分泌，以5．0×10^6细胞数接种裸鼠，观察6个月无肿瘤形成。结论新建立的无致瘤性的永生化猪肝细胞系具有正常猪肝细胞的生物学基本功能。

关键词：肝,人工细胞系端粒,末端转移酶永生化抗原,多瘤病毒转化猪

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慢性重型肝炎患者血清中的低分子量蛋白质研究

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中国病理生理杂志 2008年第9期24卷 1794-1798页

作者：刘小丽盛国平徐威李兰娟浙江大学医学院附属第一医院卫生部传染病重点实验室浙江杭州310003

目的:应用蛋白质芯片技术平台研究慢性重型肝炎血清中的低分子量蛋白质。方法:利用表面增强激光解吸离子化飞行时间串联质谱技术,检测28例慢性重型肝炎患者和22例健康对照组血清中相对分子质量位于1 kD-10 kD之间的蛋白质指纹图谱,筛选... 详细信息

目的:应用蛋白质芯片技术平台研究慢性重型肝炎血清中的低分子量蛋白质。方法:利用表面增强激光解吸离子化飞行时间串联质谱技术,检测28例慢性重型肝炎患者和22例健康对照组血清中相对分子质量位于1 kD-10 kD之间的蛋白质指纹图谱,筛选两组图谱的差异峰,结合主成分分析方法区分健康对照组和重型肝炎患者;对慢性重型肝炎组和健康对照组的血清样本进行超滤处理,研究超滤前后血清蛋白质指纹图谱的变化情况。结果:比较慢性重型肝炎组与健康对照组的蛋白质指纹图谱,有39个峰强度在两组间的P<1×10-6。用主成分分析方法对得到的数据进行处理,在得到的投影结果图上,健康对照组与慢性重型肝炎组的划分边界非常清楚。对比血清超滤前后的蛋白质指纹图谱,发现在经过截留率为30 kD的超滤膜超滤后,超滤液中相对分子质量位于1 kD^10 kD的峰基本消失。结论:慢性重型肝炎患者的血清中存在具有明显差异的低分子量蛋白质。

关键词：光谱分析,质量肝炎蛋白质组

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大鼠肝缺血再灌注损伤中肝细胞凋亡的研究

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中国病理生理杂志 2008年第4期24卷 725-729页

作者：徐凯进李兰娟邢卉春沈恬盛吉芳郑树森浙江大学医学院附属第一医院传染科传染病研究所卫生部传染病重点实验室浙江杭州310003

目的:研究阻断门脉和肝动脉所造成的肝缺血再灌注(I/R)模型中肝细胞凋亡的发生率、空间分布规律及与凋亡发生相关的因素。方法:将60只SPF级SD大鼠分为正常对照组(18只)、假手术组(18只)、I/R组(24只,缺血20min,再灌注22h)。在实验终点... 详细信息

目的:研究阻断门脉和肝动脉所造成的肝缺血再灌注(I/R)模型中肝细胞凋亡的发生率、空间分布规律及与凋亡发生相关的因素。方法:将60只SPF级SD大鼠分为正常对照组(18只)、假手术组(18只)、I/R组(24只,缺血20min,再灌注22h)。在实验终点时取各组大鼠的肝组织行HE染色、TUNEL法检测细胞凋亡、检测MDA含量及SOD活性;取血液检测TBIL、AST、ALT、ETX、TNF-α、IFN-γ、IL-4。结果:所有大鼠均检测到了凋亡的肝细胞,但只在I/R组有6只大鼠(6/24,25%)出现肝细胞坏死;I/R组大鼠的肝细胞凋亡较正常对照组、假手术组显著增加(P<0.05);正常对照组和假手术组的凋亡在肝内呈散在分布,各区的凋亡指数(AI)相近;I/R组包膜下区的肝细胞AI较中央静脉区、汇管区明显增高(P<0.05),细胞坏死区AI显著高于其它区(P<0.05);相关检测指标中ALT、AST、TNF-α、SOD/MDA与肝脏AI显著相关(P<0.05)。结论:肝脏I/R损伤中,存在凋亡与坏死2种细胞死亡方式,凋亡与坏死可在同一病灶中同时存在;肝包膜下区、坏死区AI较其它区域显著增加;肝脏总的AI与血液中ALT、AST、TNF-α水平及肝组织的SOD/MDA有相关性。

关键词：肝再灌注损伤细胞凋亡

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