检索结果-内蒙古大学图书馆

中华肝脏病杂志 2004年第11期12卷 643-647页

作者：颜学兵陈智 Delphine BOUCREUX Nicole PAVIO Christian BRECHOT 浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室 310003 U370/巴斯德研究所联合实验室

目的研究不同截短片段丙型肝炎病毒(HCV)的核心蛋白(CORE)在HCV持续感染和肝癌发病机制中的作用,构建并表达不同HCV病毒株及不同截短片断CORE原核表达质粒。方法用PCR扩增基因型为HCV 1 b型的7个不同截短片段CORE基因:氨基酸(aa)长... 详细信息

目的研究不同截短片段丙型肝炎病毒(HCV)的核心蛋白(CORE)在HCV持续感染和肝癌发病机制中的作用,构建并表达不同HCV病毒株及不同截短片断CORE原核表达质粒。方法用PCR扩增基因型为HCV 1 b型的7个不同截短片段CORE基因:氨基酸(aa)长度分别为癌中心株(BT):B:1-172 aa、1-126 aa、1-58 aa、59-126 aa、127-172 aa;癌旁株(BNT):1-172 aa及C191(HCV-J6):1-172 aa,扩增产物用BamH Ⅰ及EcoR Ⅰ双酶切后将其插入到原核表达质粒pGEX-4T-1中,阳性克隆转染到BL21中,IPTG诱导表达GST-CORE融合蛋白,纯化定量,并用western blot加以验证。结果 7个不同片段CORE在体外都得到相应表达,但表达量存在一定的差异,较长片段表达量相对较低,其中BT及BNT的1-172 aa截短片段CORE的表达高于同基因型等长度片段的C191,而BT以59-126 aa片段的表达量最高。BT、BNT及C191三株HCV基因1b型病毒株部分截短片段可形成二聚体。结论构建不同HCV病毒株及不同截短片段的CORE原核表达质粒获得成功,为研究HCV不同病毒株及不同区域CORE功能奠定基础;不同截短片段的CORE表达量不等,可能与不同片段具有不同的疏水基团、细胞毒性及在HCV结构和在HCV致病性中所起作用不同有关;HCV基因1b型的CORE二聚体的形成依耐于59-126 aa区域。

关键词：病毒核心蛋白表达质粒蛋白表达丙型肝炎病毒肝癌

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质粒介导的RNA干扰对人类细胞中HBcAg表达的抑制作用

质粒介导的RNA干扰对人类细胞中HBcAg表达的抑制作用

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2004年浙江省传染病、肝病学术会议

作者：徐宁陈智羊正纲姚航平侯晓丽吴炜蔡为民浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室

近年来,基于质粒载体的RNAi 的方法因DNA 合成便宜且稳定,能完整地进入宿主细胞的基因组产生长期的效应等优点。逐渐被认同为是一种较理想、经济的,产生RNAi 的可替代途径。本研究设计并构建了针对HBcAg 基因的shRNA 表达载体,与表达HBc... 详细信息

近年来,基于质粒载体的RNAi 的方法因DNA 合成便宜且稳定,能完整地进入宿主细胞的基因组产生长期的效应等优点。逐渐被认同为是一种较理想、经济的,产生RNAi 的可替代途径。本研究设计并构建了针对HBcAg 基因的shRNA 表达载体,与表达HBcAg-EGFP 融合蛋白的质粒共转染AD293细胞株,观察其阻断HBcAg 基因表达的效果与规律,以期为利用RNAi 效应进行抗HBV 复制的研究以及今后潜在的临床治疗应用奠定基础。

关键词：基因组共转染 HBcAg RNA 抑制作用

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质粒介导的RNA干扰对人类细胞中HBcAg表达的抑制作用

质粒介导的RNA干扰对人类细胞中HBcAg表达的抑制作用

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浙江省免疫学会第五次学术研讨会

作者：徐宁陈智羊正纲姚航平侯晓丽吴炜蔡为民浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室

近年来,基于质粒载体的RNAi的方法因DNA合成便宜且稳定,能完整地进入宿主细胞的基因组产生长期的效应等优点。逐渐被认同为是一种较理想、经济的,产生RNAi的可替代途径。本研究设计并构建了针对HBcAg基因的shRNA表达载体,与表达HBcAg-E... 详细信息

近年来,基于质粒载体的RNAi的方法因DNA合成便宜且稳定,能完整地进入宿主细胞的基因组产生长期的效应等优点。逐渐被认同为是一种较理想、经济的,产生RNAi的可替代途径。本研究设计并构建了针对HBcAg基因的shRNA表达载体,与表达HBcAg-EGFP融合蛋白的质粒共转染AD293细胞株,观察其阻断HBcAg基因表达的效果与规律,以期为利用RNAi效应进行抗HBV复制的研究以及今后潜在的临床治疗应用奠定基础。

关键词：基因组共转染 HBcAg RNA 抑制作用

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双歧杆菌与乳酸杆菌对肝缺血-再灌注损伤作用的实验研究

双歧杆菌与乳酸杆菌对肝缺血-再灌注损伤作用的实验研究

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全国微生态调节剂第六届学术研讨会

作者：李兰娟邢卉春徐凯进陈云波沈恬盛洁芳浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室 310003

目的探讨肝缺血-再灌注(I/R)损伤时肠道菌群的变化及用双歧杆菌和乳酸杆菌对缺血-再灌注肝损伤的影响。方法选用SPF级SD大鼠随机分为4组：正常对照组(8只)、假手术组(6只)、肝I/R组(10只)、双歧-乳酸杆菌预处理组(9只，用双歧杆菌和乳... 详细信息

目的探讨肝缺血-再灌注(I/R)损伤时肠道菌群的变化及用双歧杆菌和乳酸杆菌对缺血-再灌注肝损伤的影响。方法选用SPF级SD大鼠随机分为4组：正常对照组(8只)、假手术组(6只)、肝I/R组(10只)、双歧-乳酸杆菌预处理组(9只，用双歧杆菌和乳酸杆菌混合菌悬液预处理)。通过阻断入肝血流20min建立肝I/R模型，22h后采集标本。用光冈氏肠内细菌群分析法分析不同情况下回肠末段菌群构成、肠道细菌易位情况;用电子显微镜观察肠粘膜超微结构;用偶氮基质显色鲎试验定量法测定血浆内毒素;并对血清丙氨酸转氨酶(ALT)、血清天冬氨酸转氨酶(AST)、血清总胆红素(TBIL)及肝组织中丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性进行检测。结果肝I/R大鼠血清ALT、AST明显升高，血浆内毒素水平及肝组织中MDA含量也增高(P＜0.01);同时肠道双歧杆菌、乳酸杆菌较正常对照组明显减少(P＜0.01)，而肠道需氧菌如肠球菌、肠杆菌却增加，细菌易位至肾脏的阳性率增加(P＜0.05);肠粘膜细胞间隙增宽，细胞间紧密连接开放，微绒毛数目减少、变性、断裂。用双歧杆菌和乳酸杆菌混合菌预处理可使肠道双歧杆菌、乳酸杆菌数量上明显回升，肠粘膜超微结构基本正常，细菌易位至肾脏的阳性率降低，血清ALT、血浆内毒素水平及肝组织中MDA含量也降低。不同处理组大鼠肠道类杆菌数量虽有所波动，但各组间的变化无显著差异;酵母菌培养及产气荚膜梭菌培养仅在个别鼠为阳性，且不同组间差异无显著性。结论肝缺血—再灌注大鼠存在着肠道菌群的失衡(乳酸杆菌、双歧杆菌减少，肠球菌、肠杆菌增加)、肠粘膜屏障损害及肠道菌的移位：补充益生菌—乳酸杆菌和双歧杆菌可部分恢复肠道菌群的构成、改善肠粘膜屏障、减少肠道菌易位的发生率，进而降低血浆内毒素水平、减少肝脏氧自由基产生、减轻肝损伤。

关键词：肝缺血再灌注损伤双歧杆菌乳酸杆菌

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潜伏人巨细胞病毒的激活机制

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国外医学（流行病学．传染病学分册） 2003年第2期30卷 99-101页

作者：杨美芳范骏马伟杭卫生部传染病重点实验室浙江大学医学院附属一院传染病研究所310003

人巨细胞病毒感染人体后常呈亚临床感染或潜伏感染,在艾滋病、器官移植和肿瘤等免疫功能低下患者中该病毒常被激活,并出现明显临床表现,甚至是致死性后果。人巨细胞病毒的潜伏激活机制是近几年国内外研究热点,本文就有关研究进展作了综述。

关键词：人巨细胞病毒潜伏感染激活机制主要即刻早期基因 IE蛋白异基因刺激免疫抑制启动子

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人类免疫缺陷病毒感染的静脉吸毒者TT病毒的检测和部分基因序列分析

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中华传染病杂志 2001年第2期19卷 97-99页

作者：朱彪吴南屏刘克洲陈智吴灵娇浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所暨卫生部病毒性传染病重点实验室杭州310003

目的　研究人类免疫缺陷病毒 (HIV)感染的静脉吸毒者TT病毒 (TTV)感染情况和基因序列变化。方法　用聚合酶链反应 (PCR)对 35例HIV感染的静脉吸毒者 (IVDUs) ,6 4例HIV未感染的IVDUs及 45例正常献血员进行TTVDNA检测。对其中 2例HIV感染... 详细信息

目的　研究人类免疫缺陷病毒 (HIV)感染的静脉吸毒者TT病毒 (TTV)感染情况和基因序列变化。方法　用聚合酶链反应 (PCR)对 35例HIV感染的静脉吸毒者 (IVDUs) ,6 4例HIV未感染的IVDUs及 45例正常献血员进行TTVDNA检测。对其中 2例HIV感染的IVDUs和 1例HIV未感染的IVDUs的TTVDNA部分基因核苷酸序列进行测定。结果　TTVDNA在HIV感染的IVDUs中检出率为 2 5 .71% (9/ 35 ) ,HIV未感染的IVDUs中检出率为 17.18% (11/ 6 4) ,两者差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ,正常献血员中的检出率为 2 .2 % (1/ 45 )。对 2例HIV感染的IVDUsTTVDNA部分基因核苷酸序列与日本株比较 ,其同源性分别为 96 .44 %和 95 .79% ,对 1例HIV未感染的IV DUs的TTVDNA部分基因核苷酸序列与日本株比较其同源性为 98.2 5 % ;HIV感染和HIV未感染的IVDUsTTVDNA核苷酸序列比较 ,HIV感染者在被测定序列的第 2 99～ 30 9位碱基有较大的变异。结论　静脉吸毒是TTV感染的高危因素 ,TTV在IVDUs中感染率与HIV感染无明显相关性 ;HIV感染和HIV未感染者TTVDNA序列可能存在一定差异。

关键词： TT病毒人类免疫缺陷病毒聚合酶链反应核苷酸序列静脉吸毒

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静脉吸毒者丙型肝炎病毒和人类免疫缺陷病毒感染的研究

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中华内科杂志 2000年第10期39卷 707-708页

作者：朱彪吴南屏邵一鸣强耒英浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所暨卫生部病毒性传染病重点实验室杭州310003 中国预防医学科学院艾滋病研究室

静脉吸毒（IVDU）可传播多种病毒，已有文献分别报道了静脉吸毒者HCV、人类免疫缺陷病毒（HIV）感染的情况，本研究在原研究工作基础上，对IVDU者HCV感染情况和HCV重叠HIV感染对HCV病毒复制影响情况做一初步研究。

关键词：静脉吸毒丙型肝炎 HCV HIV

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