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中国微生态调节剂临床应用专家共识(2020版)

中华临床感染病杂志 2020年第4期13卷 241-256页

作者：无李兰娟陈烨范旻高海女郭晓奎刘杰秦环龙冉陆盛国平吴健吴仲文许国强肖纯凌徐威袁杰力郑鹏远郑树森张振玉中华预防医学会微生态学分会浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室国家感染性疾病临床医学研究中心感染性疾病诊治协同创新中心杭州310003 不详

高通量宏基因测序、代谢组学等技术研究发现人体肠道内栖息种类超过1500多种,生物量接近于1014菌落形成单位,并给机体增加约60万个基因。微生物及其代谢产物在人体内起生物屏障、参与免疫系统成熟和免疫应答的调节,并对机体生理代谢起... 详细信息

高通量宏基因测序、代谢组学等技术研究发现人体肠道内栖息种类超过1500多种,生物量接近于1014菌落形成单位,并给机体增加约60万个基因。微生物及其代谢产物在人体内起生物屏障、参与免疫系统成熟和免疫应答的调节,并对机体生理代谢起着重要作用。年龄、环境、饮食、疾病及用药等因素会引起肠道微生态失衡,同时肠道微生态变化与感染(尤其是耐药菌感染,二重感染)、肝病、消化道疾病、肿瘤、糖尿病、肥胖、自闭症、阿尔茨海默病、高血压的发生发展等密切有关,肠道微生态可为各类相关疾病甚至是肿瘤免疫治疗提供诊断工具和治疗策略。微生态调节剂对各种原因引起的肠道微生态失衡起较好的调节作用,随着人体微生态学研究的深入和发展,微生态调节剂的品种和应用也越来越广泛。近年来,微生态基础及临床应用研究发展迅速,微生态学研究技术及相关的概念颠覆了以往的医学认知。因此我们在第一版的基础上修订新版中国微生态调节剂临床应用专家共识,以供广大临床医师在选择和应用微生态调节剂时参考。

关键词：肠道菌群微生态制剂益生元益生菌专家共识

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有丝分裂结束后细胞代谢通路重启过程探析

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空军军医大学学报 2023年第8期44卷 789-793页

作者：肖党生鲁海峰严冬浙江大学医学院附属第一医院老年科浙江杭州310003 浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室传染病国家临床研究中心传染病诊治协同创新中心浙江杭州310003

能量物质氧化过程和基因表达过程是细胞内的两个核心过程,二者之间相互作用是细胞中各种生命现象的基础。有丝分裂是细胞增殖的基础,有丝分裂结束后,细胞需要对能量代谢过程和基因表达过程进行重启。细胞内存在三种重启代谢过程的模式:... 详细信息

能量物质氧化过程和基因表达过程是细胞内的两个核心过程,二者之间相互作用是细胞中各种生命现象的基础。有丝分裂是细胞增殖的基础,有丝分裂结束后,细胞需要对能量代谢过程和基因表达过程进行重启。细胞内存在三种重启代谢过程的模式:葡萄糖主导的代谢通路重启;氨基酸主导的代谢通路重启;脂质主导的代谢通路重启。其中葡萄糖主导的代谢通路重启是顺应能量物质氧化梯度的重启模式,是细胞的最优选择。基因表达过程重启滞后于代谢通路重启。在代谢通路重启过程中,能量物质氧化和基因表达间的正反馈推动细胞分化。细胞内代谢通路重启过程中存在抵抗病毒入侵的时间窗。

关键词：氧化代谢基因表达糖酵解三羧酸循环有丝分裂

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DNA聚合酶Ⅳ:抗细菌的潜在药靶

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微生物学通报 2022年第12期49卷 5342-5358页

作者：吴小磊贾程皓王剑峰王雷杰乐敏浙江大学动物预防医学研究所分子微生物学与食品安全实验室浙江省动物预防医学重点实验室浙江杭州310058 海南浙江大学研究院海南三亚572025 杭州市原种场浙江杭州311115 浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室浙江杭州310003

病原微生物及其耐药性是全球公共卫生的重要问题。众多人兽共患病原菌可通过食品产业链传播给人,同时耐药性使得感染更难治疗,增加了疾病传播和死亡的风险。从分子水平上研究病原体的变异规律、毒力及其致病机制有助于寻找新的药物靶点... 详细信息

病原微生物及其耐药性是全球公共卫生的重要问题。众多人兽共患病原菌可通过食品产业链传播给人,同时耐药性使得感染更难治疗,增加了疾病传播和死亡的风险。从分子水平上研究病原体的变异规律、毒力及其致病机制有助于寻找新的药物靶点、研制新的药物。DNA聚合酶Ⅳ(polymeraseⅣ,PolⅣ)是γ家族聚合酶中的重要成员,广泛分布在原核生物、真核生物和古细菌3个生命域。PolⅣ具有跨损伤DNA合成的能力,不仅在SOS反应(SOS response)和RpoS调控下响应DNA损伤,还参与细菌抗生素抗性及适应性的获得,在细菌中发挥着至关重要的作用。本文综述了近年来细菌PolⅣ相关研究,回顾了其遗传特征、结构特征、表达调控及对细菌适应性的影响,并且讨论了PolⅣ作为潜在药物靶点的可行性。

关键词： DNA聚合酶Ⅳ 抗菌药物抗生素

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具有广谱中和活性的新型冠状病毒受体结合结构域抗体的筛选和鉴定

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中国热带医学 2024年第3期24卷 258-264页

作者：倪婉琦任莉靳昌忠杨馥榕申玉敏王硕胡彩琴郝彦玲刘颖朱彪邵一鸣李丹王铮传染病溯源预警与智能决策全国重点实验室中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心北京102206 浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室浙江杭州310003 南开大学药学院天津300071 天津国际生物医药联合研究院天津300457

目的从2名新型冠状病毒感染康复者体内分离针对新型冠状病毒(severe acute respiratory syndrome coro‐navirus 2,SARS-CoV-2)受体结合结构域(receptor binding domain,RBD)的特异性单克隆B细胞,并筛选出具有广谱中和活性的SARS-CoV-2 RBD中和抗体。方法以生物素化的RBD为分子探针,利用流式细胞仪对康复者外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)进行单克隆B细胞分选,将获得的B细胞经裂解并完成逆转录后,采用随机引物对抗体的重链及轻链进行巢式PCR扩增,扩增产物分别克隆至对应的表达载体,随后相应配对的重轻链质粒共转染293F细胞中进行表达,利用Protein A柱纯化获得单克隆抗体。采用原始株(WT)假病毒开展中和实验挑选出半数抑制浓度(IC_(50))<0.1µg/mL的抗体,进一步在原始株(WT)、Beta株(B.1.351)和Delta株(B.1.617.2)活病毒以及目前的流行株XBB、BA.5、BF.7假病毒中进行中和能力及宽度测试。结果从2名康复者体内共获得21个RBD特异性单克隆B细胞,从中分离出13对抗体轻/重链,成功表达出9个抗体,P1-A1、P1-B6、P1-B9对原始株(WT)假病毒IC_(50)值均低于0.1µg/mL,其中P1-B6可以有效中和原始株(WT)、Beta株(B.1.351)和Delta株(B.1.617.2)活病毒,IC_(50)值均达到了0.01µg/mL。P1-B9可以有效中和原始株(WT)、Beta株(B.1.351)、Delta株(B.1.617.2)及Gamma株(P.1)活病毒,IC_(50)值分别为0.42、0.63、0.28、2.50µg/mL。此外,P1-B6对BA.5、BF.7假病毒具有较好的中和效果,IC_(50)值分别为0.06µg/mL和0.09µg/mL。结论SARS-CoV-2原始株感染可以诱导出具有广谱中和活性的抗体,且这些广谱中和抗体的产生不需要过高的体细胞高频突变率,获得的抗体可以作为诊断和预防新冠病毒感染的候选。

关键词：新型冠状病毒中和抗体受体结合结构域

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新型冠状病毒受体结合结构域分子探针的构建及在中和抗体分离中的应用

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中国热带医学 2023年第6期23卷 590-595页

作者：王铮任莉杨馥榕申玉敏胡彩琴郝彦玲朱彪李丹邵一鸣中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心病毒免疫室传染病预防控制国家重点实验室北京102206 南开大学药学院天津300071 天津国际生物医药联合研究院天津300457 浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室浙江杭州310003

目的构建新型冠状病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)受体结合结构域(receptor binding domain,RBD)分子探针,对新型冠状病毒感染康复者(简称“新冠康复者”)的外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)进行单克隆记忆B细胞分选,获得RBD特异性中和抗体。方法从GenBank中下载SARS-CoV-2 RBD序列,在C末端加入Avi标签和6组氨酸标签后进行密码子优化设计、合成基因后克隆入表达载体pDRVI1.0,转染293F表达出蛋白进行生物素化后,利用该探针从2名新冠康复者的PBMCs中分选出单克隆RBD特异性B细胞。对B细胞裂解后,进行抗体轻重链可变区扩增,将获得的抗体轻重链基因分别克隆入表达载体,转染293F细胞后采用Protein A对抗体进行纯化,并利用SARS-CoV-2假病毒对其中和能力进行测试。结果成功获得了RBD-Avi蛋白,RBD-Avi探针生物素化效率达到30%~50%,Western Blot实验证实生物素化探针可以被来自于新冠康复者血浆中的抗体所识别,利用该探针可从2名新冠康复者体内成功分别分离出7个、16个RBD特异性记忆B细胞,分别占总细胞群的0.24%和0.17%;对获得的B细胞进行裂解后扩增出抗体的轻重链可变区,分别获得了7对、12对抗体轻重链。2名新冠康复者体内共表达出16个抗体,纯化抗体后利用SARS-CoV-2假病毒进行测试,大部分抗体对假病毒都展示出了中和活性,其中6个抗体的半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)低于1μg/mL;XJ-A9和SCF-F1针对野生型假病毒的IC50值分别达到0.07μg/mL和0.35μg/mL。结论本研究构建的SARS-CoV-2 RBD分子探针具有良好的抗原性,分离的抗体具有针对SARS-CoV-2野生型假病毒的中和活性,具备深入研究的价值。

关键词：新型冠状病毒受体结合区域中和抗体记忆B细胞

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核糖核苷酸还原酶小亚基M2在慢性HBV感染及其他肝病中的表达及意义

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中华临床感染病杂志 2019年第6期12卷 456-461页

作者：李冀宏武喆喻玮裘云庆浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室国家感染性疾病临床医学研究中心感染性疾病诊治协同创新中心浙江省药物临床研究与评价重点实验室杭州310003 松阳县人民医院感染科浙江丽水323400

目的探讨核糖核苷酸还原酶小亚基M2(Ribonucleotide reductase small subunit M2,RRM2)在慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染及其他肝病中的表达及临床意义。方法收集松阳县人民医院2017年10月至2019年9月慢性HBV感染及肝病患者共428例,其中慢... 详细信息

目的探讨核糖核苷酸还原酶小亚基M2(Ribonucleotide reductase small subunit M2,RRM2)在慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染及其他肝病中的表达及临床意义。方法收集松阳县人民医院2017年10月至2019年9月慢性HBV感染及肝病患者共428例,其中慢性乙型肝炎(Chronic hepatitis B,CHB)患者166例[根据病毒载量不同,分为高病毒载量组(HBV DNA≥4.0 lgIU/mL,n=87)和低病毒载量组(HBV DNA<4.0 lg IU/mL,n=79),高病毒载量组患者根据丙氨酸转氨酶(ALT)水平不同,分为ALT≥40 U/L组(n=56)和ALT<40 U/L组(n=31)],HBV相关肝硬化53例,非HBV相关肝硬化28例,HBV相关肝癌57例,非HBV相关肝癌33例,非病毒性肝炎91例。另选取本院健康体检者36名为对照组。采用酶联免疫吸附法检测患者血清RRM2蛋白的表达水平,分析其与HBV DNA及肝功能之间的关系。应用SPSS 23.0和PRISM 8.0统计软件分析数据。相关性分析采用Spearman分析。结果CHB患者中,高病毒载量组的ALT和血清RRM2水平均高于低病毒载量组(Z=-6.68,t=6.80,P值均<0.01)。HBV相关肝硬化患者的血清RRM2水平高于非HBV相关肝硬化患者(t=9.16,P<0.01)。HBV相关肝癌组患者的血清RRM2水平高于非HBV相关肝癌组患者(t=12.42,P<0.01)。高病毒载量CHB患者中,ALT≥40 U/L组患者的血清RRM2水平与ALT<40 U/L组患者比较,差异无统计学意义(t=0.51,P>0.05)。非病毒性肝炎组ALT水平高于健康对照组(Z=-8.43,P<0.01),但两组血清RRM2水平比较,差异无统计学意义(t=1.03,P>0.05)。相关性分析显示,在慢性HBV感染及其相关肝病患者中,血清RRM2水平与HBV DNA载量呈正相关(r=0.51,P<0.01),与ALT、天冬氨酸转氨酶等肝功能指标无明显相关性(P值均>0.05)。结论血清RRM2水平与HBV DNA载量呈正相关,与ALT无明显相关性,RRM2有望成为乙型肝炎新药研发的靶点。

关键词：肝炎,乙型,慢性乙型肝炎病毒DNA 核糖核苷酸还原酶丙氨酸转氨酶

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没有感染风险的卫生保健：感染预防与控制的关键作用

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中国全科医学 2023年

作者：王媛肖永红浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室国家感染性疾病临床医学研究中心感染性疾病诊治协同创新中心济南微生态生物医学山东省实验室

医疗保健相关感染（health care-associated infections, HAIs）在全球各地发生的频率日益增高，每年有数亿患者受到HAIs的影响，HAIs对个人和国家均造成巨大的疾病负担。无论是发展中国家还是发达国家，均无法完全避免HAIs的影响。感... 详细信息

医疗保健相关感染（health care-associated infections, HAIs）在全球各地发生的频率日益增高，每年有数亿患者受到HAIs的影响，HAIs对个人和国家均造成巨大的疾病负担。无论是发展中国家还是发达国家，均无法完全避免HAIs的影响。感染预防和控制（Infection prevention and control,IPC）是一种实用的循证方法，大量证据表明，实施高质量的IPC可降低患者和医务工作者发生HAIs的风险。很多国家为确保所有人能获得以人为本的综合卫生服务，开始全面实施IPC。目前139个WHO成员国已承诺持续采取行动改善IPC，并得到了政治和管理层面的支持，取得了不错的效果，HAI发生率显著下降，有效改善了细菌耐药的现状。WHO已经证明，全球合作、共同呼吁和采取行动是预防HAIs的有效方法。WHO带头支持IPC改进，呼吁更多国家将IPC整合到国家医疗系统的各个层面，使医疗保健更安全、质量更高，减少HAIs的发生。

关键词：医疗保健相关感染感染预防和控制疾病负担

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关于新型冠状病毒肺炎患者出院后核酸检测SARS-CoV-2 RNA“复阳”原因及对策分析

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中国微生态学杂志 2020年第7期32卷 786-788页

作者：宋曙石雨涵唐海成曾东吴健上海市公共卫生临床中心上海201508 浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室、国家感染性疾病临床医学研究中心、感染性疾病诊治协同创新中心浙江杭州310003

2019年12月末中国武汉地区暴发新型冠状病毒肺炎,虽然目前国内疫情已得到基本控制,但是发现在出院患者康复后仍有一部分核酸检测复发阳性的问题,防控局面仍然严峻。本文阐述了患者复发SARS-CoV-2 RNA阳性的两个原因,一是核酸检测本身的... 详细信息

2019年12月末中国武汉地区暴发新型冠状病毒肺炎,虽然目前国内疫情已得到基本控制,但是发现在出院患者康复后仍有一部分核酸检测复发阳性的问题,防控局面仍然严峻。本文阐述了患者复发SARS-CoV-2 RNA阳性的两个原因,一是核酸检测本身的影响,二是病毒的残留。出院的患者大部分未出现复阳,但出院后的患者仍需隔离,不能放松警惕。为了降低出院患者复发阳性的概率,必须采取更准确的诊断方法,也可以对患者制定个体化的出院标准。

关键词：新型冠状病毒核酸检测复阳

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蒙特卡洛模拟评价和优化鲍曼不动杆菌血流感染给药方案

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中国抗生素杂志 2022年第12期47卷 1285-1290页

作者：辛娜吴跃刚王馨喻玮嵇金如应超群王培培刘志盈李卓肖永红西安医学院第一附属医院检验科西安710077 西安市华山中心医院呼吸内科西安710043 浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室国家感染性疾病临床研究中心感染性疾病诊治协同创新中心杭州310003

目的应用蒙特卡洛模拟研究头孢哌酮/舒巴坦、替加环素和多黏菌素B治疗鲍曼不动杆菌血流感染的疗效,预测和评价不同抗菌药物的抗菌效果,进而优化临床给药方案。方法借助全国血流感染细菌耐药监测联盟(BRICS)平台收集2018—2019年血流感... 详细信息

目的应用蒙特卡洛模拟研究头孢哌酮/舒巴坦、替加环素和多黏菌素B治疗鲍曼不动杆菌血流感染的疗效,预测和评价不同抗菌药物的抗菌效果,进而优化临床给药方案。方法借助全国血流感染细菌耐药监测联盟(BRICS)平台收集2018—2019年血流感染来源的鲍曼不动杆菌514株,使用文献公开发表的头孢哌酮/舒巴坦、替加环素和多黏菌素B的药动学参数,基于药动学/药效学(PK/PD)理论利用蒙特卡洛模拟法,计算不同给药方案在各特定的MIC值获得的目标概率,即达标概率(PTA)和累积反应分数(CFR),以PTA或CFR≥90%作为临床疗效评价的指标。结果治疗鲍曼不动杆菌引起的血流感染,头孢哌酮/舒巴坦给药方案4.5 g q6 h在最低抑菌浓度(MIC)≤1 mg/L时,可获得大于或接近90%的目标PTA值,临床分离菌的CFR值为21.53%。替加环素推荐剂量(50 mg q12 h),在MIC≤0.25 mg/L时,可获得大于90%的目标PTA值,100 mg q12 h的给药方案对临床菌株的CFR值为81.04%。多黏菌素B 1.25 mg/kg 1h输注q12 h给药方案,可使MIC≤1 mg/L的细菌的PTA达到90%以上,高剂量的多黏菌素给药方案[负荷2 mg/kg 2 h输注后2.5 mg/(kg·d)持续输注]在MIC为2 mg/L时,可提供较高的PTA(96.83%),临床CFR可达到96.26%。结论头孢哌酮/舒巴坦治疗鲍曼不动杆菌感染时,应考虑到大剂量的给药方案。同时由于鲍曼不动杆菌对头孢哌酮/舒巴坦群体耐药率较高导致CFR值较低,临床治疗中可能需要使用其他抗生素或将头孢哌酮/舒巴坦与其他抗菌药物联合使用取得更好的治疗效果。替加环素建议使用100 mg q12 h的给药方案,多黏菌素B建议使用负荷2.5 mg/kg 2 h输注后1.5 mg/kg 1 h输注q12 h或负荷2 mg/kg 2 h输注后2.5 mg/(kg·d)持续输注的给药方案。

关键词：鲍曼不动杆菌蒙特卡洛模拟达标概率累积反应分数

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肠道Akkermansia muciniphila研究最新进展

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中华临床感染病杂志 2019年第5期12卷 385-392页

作者：贾龙飞伍莉韩玉秋吕晗莹张立将王保红浙江工业大学长三角绿色制药协同创新中心杭州310014 浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室杭州310003 浙江省医学科学院安全性评价研究中心杭州310053 感染病国家临床医学研究中心杭州310003

最新研究发现,肠道Akkermansia muciniphila(***)是调节人体免疫和代谢的重要功能菌,与人体的健康和疾病密切关联。本文对***的国内外研究进展进行详细综述,重点聚焦***的基本特性、定植影响因素及其维持肠道稳态的机制;系统阐述***与... 详细信息

最新研究发现,肠道Akkermansia muciniphila(***)是调节人体免疫和代谢的重要功能菌,与人体的健康和疾病密切关联。本文对***的国内外研究进展进行详细综述,重点聚焦***的基本特性、定植影响因素及其维持肠道稳态的机制;系统阐述***与肥胖、动脉粥样硬化、糖尿病等慢性代谢疾病和感染性疾病的关联,及其成为新一代益生菌的临床应用前景和产业化过程中所面临的困难。

关键词： Akkermansia muciniphila 肠道菌群代谢性疾病感染性疾病

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