目的:探讨灭活SV40致敏的猴外周血来源的树突状细胞（dendritic cells,DC）的生物学特性。方法:采用密度梯度离心法从恒河猴外周血分离出单个核细胞,然后采用玻璃黏附法分离淋巴细胞和单核细胞,使用重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（Recombinant Human granulocyte-macrophage colony stimulating factor,rhGM-CSF）扩增单核细胞,使用重组人白细胞介素4（Recombinant Human Interleukin-4,rhIL-4）诱导单核细胞向树突状细胞方向分化,使用SV40全病毒灭活疫苗作为冲击抗原,使用重组人肿瘤坏死因子（Recombinant Human Tumor Necrosis Factor,rhTNFα）促其成熟。分别于普通光学显微镜、相差显微镜、扫描电镜下观察细胞形态。使用流式细胞术分析细胞表型特征。使用H-TdR掺人法测定混合淋巴细胞反应（mixed lymphocyte reaction,MLR）中DC刺激自体及同种异体T细胞增殖的效应。使用辣根过氧化酶（HRP）内吞实验检测其群体内吞能力。结果:使用hGM-CSF可以有效促进猴DC前体的增殖,细胞生长曲线显示,细胞增殖在第8天达到增殖高峰。使用rhIL-4可以成功诱导猴DC的分化。光镜下可见大小形态各异的树突状细胞。扫描电镜下可见吞噬SV40抗原后的形成的大量面纱DC的形态。细胞吞噬能力测定显示,细胞在第6天吞噬能力最强。MLR显示体外扩增诱导的DC能够有效刺激T细胞增殖。流式细胞术表型分析显示,表达树突状细胞CD1a特异性标志的细胞比例可达77.7%,表达树突状细胞CD83成熟标志的细胞比例可达56.5%。rhTNFα具有促进猴DC成熟的作用。结论:rhGM-CSF、rhIL-4和rhTNFα可用于猴DC的扩增、诱导和成熟刺激。灭活SV40致敏的猴外周血来源的DC在MLR中能够有效刺激T细胞增殖。体外灭活SV40抗原冲击的DC多表现为循环DC的形态。
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