检索结果-内蒙古大学图书馆

浙江大学学报（医学版） 2007年第6期36卷 553-560页

作者：彭国平孙雯孙箴朱嘉珺李淑萍陈智浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所传染病诊治国家重点实验室浙江杭州310003 浙江大学医学院附属口腔医院浙江杭州310031

目的:分析HBV感染不同阶段患者外周血T淋巴细胞中PD-1(program death factor-1)分子的基因定量表达情况,探讨PD-1表达水平与血清学指标的相关性。方法:采集并筛选HLA-A2阳性的31例慢性乙型肝炎(CHB)患者、9例急性恢复期乙型肝炎患者(AHB... 详细信息

目的:分析HBV感染不同阶段患者外周血T淋巴细胞中PD-1(program death factor-1)分子的基因定量表达情况,探讨PD-1表达水平与血清学指标的相关性。方法:采集并筛选HLA-A2阳性的31例慢性乙型肝炎(CHB)患者、9例急性恢复期乙型肝炎患者(AHB)、15例乙肝相关性肝硬化患者(LC)和10例健康献血者的外周血,实时荧光定量PCR分析总T细胞内PD-1的mRNA水平,同时测定其配体PD-L1、PD-L2在外周血单个核细胞(PBMCs)中的表达量;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HBV血清标记物水平,荧光定量PCR检测血清HBV DNA载量,同时进行肝功能检测。结果:以各基因在正常对照组的定量表达水平为基础值,HBeAg阳性CHB组T细胞内PD-1和PBMCs内PD-L1的mRNA表达水平明显升高,与HBeAg阴性CHB组和AHB组比较均有显著性差异,但与LC组比较无统计学意义(P>0.05)。外周血PBMCs内PD-L2的mRNA水平在各实验组中无明显差异(P均>0.05)。在所有检测的CHB患者中,外周血T细胞内PD-1表达水平在高病毒载量组(HBV DNA≥107拷贝/ml)明显高于低病毒载量组(HBV DNA<107拷贝/ml)和正常对照组,且与血清HBV病毒载量成正相关(r=0.41,P<0.01),但与血清ALT水平无明显相关性。结论:外周血T细胞中PD-1基因水平在慢性乙型肝炎患者组,尤其是在HBeAg阳性组和高病毒载量组明显上调,提示T细胞高表达的PD-1可能通过与其配体PD-L1作用而抑制T细胞免疫应答,并导致病毒持续感染。

关键词：肝炎,乙型,慢性/免疫学 T淋巴细胞免疫抑制病毒载量

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干扰素γ与肝纤维化治疗

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中华肝脏病杂志 2008年第12期16卷 955-957页

作者：翁红雷蔡卫民 Molecular Alcohol Research in gastroenterology Department of Medicine Ⅱ Faculty of Medicine at MannheimUniversity of Heidelberg Germany 浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所、传染病诊治国家重点实验室

干扰素γ（IFNγ）具有很强的抗肝纤维化作用，近年来IFNγ治疗肝纤维化的临床和基础研究已有很大进展，现就此作一综述。

关键词：干扰素γ 肝纤维化治疗

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髓系细胞触发受体-1真核表达质粒的构建及鉴定

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浙江大学学报（医学版） 2010年第5期39卷 477-482页

作者：胡艳舒力琪陈齐兴姚航平浙江大学医学院附属第一医院麻醉科浙江杭州310003 杭州外国语学校浙江杭州310023 浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所传染病诊治国家重点实验室浙江杭州310003

目的:构建髓系细胞触发受体-1(TREM-1)的真核表达质粒。方法:利用RT-PCR从人外周血总RNA中扩增TREM-1基因的全长cDNA,插入克隆载体pUCm-T,BamHI和Pst I,酶切后将目的片段插入真核表达载体pEGFP-C3,构建含有TREM-1的重组质粒pEGFP-TREM-1... 详细信息

目的:构建髓系细胞触发受体-1(TREM-1)的真核表达质粒。方法:利用RT-PCR从人外周血总RNA中扩增TREM-1基因的全长cDNA,插入克隆载体pUCm-T,BamHI和Pst I,酶切后将目的片段插入真核表达载体pEGFP-C3,构建含有TREM-1的重组质粒pEGFP-TREM-1,转染293细胞,用荧光显微镜观察、Western-blot鉴定蛋白表达。将pEGFP-TREM-1重组质粒转染THP-1细胞,100 ng/ml LPS刺激24 h后,半定量RT-PCR检测TNF-α和IL-1β基因的mRNA水平。结果:经酶切和基因测序证实,克隆的基因片段为TREM-1基因;经转染的293细胞在荧光显微镜下可见荧光,并能表达TREM-1蛋白;重组TREM-1蛋白具有生物学活性,能增强TNF-α和IL-1β基因的mRNA水平。结论:成功构建了能够表达TREM-1的真核表达质粒pEGFP-C3-TREM-1,为进一步研究该基因的功能奠定了实验基础。

关键词：受体,免疫/生物合成膜糖蛋白类/遗传学重组,遗传真核表达髓系细胞触发受体-1

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慢性乙型肝炎患者外周血树突状细胞PD-L1表达的相关研究

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浙江大学学报（医学版） 2008年第4期37卷 364-372页

作者：彭国平孙雯吴炜孙箴谈旭翡李淑萍陈智浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所传染病诊治国家重点实验室浙江杭州310003 浙江大学医学院附属口腔医院浙江杭州310031

目的:探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血树突状细胞(DCs)的PD-L1表达水平,及其对DCs刺激T细胞增殖的影响。方法:采集22例慢性HBeAg阳性CHB患者、8例急性恢复期乙型肝炎(AHB)患者和10例健康人(NC)的外周血,分离单个核细胞(PBMC)并诱导DCs... 详细信息

目的:探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者外周血树突状细胞(DCs)的PD-L1表达水平,及其对DCs刺激T细胞增殖的影响。方法:采集22例慢性HBeAg阳性CHB患者、8例急性恢复期乙型肝炎(AHB)患者和10例健康人(NC)的外周血,分离单个核细胞(PBMC)并诱导DCs的增殖和活化。相对荧光定量PCR测定DCs的PD-L1、PD-L2分子mRNA水平,流式细胞术测定DCs表面PD-L1和PD-L2的表达率。同时,测定外周血DCs刺激同种异体反应性T细胞增殖的能力,及抗PD-L1单抗对CHB组DCs刺激功能的影响。结果:体外成功诱导了外周血DCs的增殖和成熟。与NC组相比较,CHB组和AHB组患者外周血DCs内PD-L1的mRNA水平均显著增高(P均<0.05),但CHB组和AHB组间差异无统计学意义。CHB组患者外周血DCs表面PD-L1表达率较AHB组、NC组均有明显增高(P均<0.01)。而外周血DCs的PD-L2 mRNA水平及PD-L2在DCs表面的表达率在各实验组之间无明显差异(P均>0.05)。CHB组外周血DCs刺激T细胞增殖的功能较AHB组和NC组明显降低(P均<0.01),抗PD-L1抗体能显著增强CHB患者DCs刺激T细胞反应的能力。CHB患者外周血DCs表面PD-L1表达率与血清HBV病毒载量成正相关(r=0.34,P=0.007)。结论:外周血DCs表面PD-L1表达水平在慢性HBeAg阳性乙肝患者明显升高,抗PD-L1抗体可有效增强CHB患者外周血DCs刺激T细胞增殖反应的能力,表明PD-L1的高表达可能与T细胞免疫反应低下和HBV病毒高复制密切相关。

关键词：肝炎乙型慢性/免疫学树突状细胞免疫抑制病毒载量

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miR-122对乙型肝炎病毒抗原表达的影响

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浙江大学学报（医学版） 2011年第6期40卷 593-597页

作者：朱蕾陈智陈建忠王静胡中荣陈离伟刘荣华胡敏君朱海红浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室浙江杭州310003 浙江大学免疫研究所浙江杭州310058

目的:探讨miR-122对乙型肝炎病毒HBsAg、HBeAg表达的影响。方法:设计合成2条miR-122的反义寡核苷酸(anti-miR-122,LNA-antimiR-122)、hsa-miR-122以及阴性对照anti-GFP,脂质体介导转染HepG2.2.15细胞。取细胞转染24 h、48 h后的培养液,时间分辨荧光免疫法检测anti-miR-122组、LNA-antimiR-122组、hsa-miR-122组以及anti-GFP组HBsAg和HBeAg的表达,定量PCR检测各组HBV DNA的表达。转染48 h后,提取细胞内总RNA,Taqman技术实时荧光定量PCR检测各组miR-122的表达。结果:①转染48 h后anti-miR-122组、LNA-antimiR-122组miR-122表达明显受抑制,低于阴性对照组(P<0.001)。hsa-miR-122组miR-122水平较阴性对照组升高(P<0.001)。②hsa-miR-122组HBsAg、HBeAg表达均低于阴性对照组(P<0.001);anti-miR-122组、LNA-antimiR-122组HBsAg、HBeAg表达均高于阴性对照组(P<0.001)。③转染24 h与48 h后各组HBV DNA表达与阴性对照组比较无统计学意义(P>0.05)。结论:miR-122可调节乙型肝炎病毒抗原表达。

关键词：微RNAs/治疗应用肝炎e抗原,乙型/药物作用肝炎表面抗原,乙型/药物作用 miR-122 hsa-miR-122 HBsAg HBeAg LNA-antimiR-122 anti-miR-122

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抗鼠CTLA-4单链抗体的构建与表达及其免疫学活性的鉴定

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华中科技大学学报（医学版） 2008年第3期37卷 290-294页

作者：彭国平周承吴炜孙雯田锋贺纪凯陈智浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所传染病诊治国家重点实验室杭州310031 浙江大学医学院附属口腔医院杭州310003 浙江大学医学院临床医学系杭州310023

目的构建具有免疫学活性的抗小鼠细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)单链抗体ScFv(single chain fragment of variety region),为进一步将其应用到动物体内奠定基础。方法采用RT-PCR技术,从分泌抗小鼠CTLA-4单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细... 详细信息

目的构建具有免疫学活性的抗小鼠细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)单链抗体ScFv(single chain fragment of variety region),为进一步将其应用到动物体内奠定基础。方法采用RT-PCR技术,从分泌抗小鼠CTLA-4单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞中扩增mAb的VH、VL基因,并进一步将其组装成VH-Linker-VL型的ScFv片段。将ScFv片段亚克隆至pGMET载体,测序正确后将其克隆至真核分泌型表达载体pSect2-GFP,将pSect2-GFP-ScFv纯化质粒转染中国仓鼠卵巢细胞(CHO)并进行表达,同时经Zeocin筛选稳定表达株。用Western blot方法检测ScFv融合蛋白的表达,采用ELISA检测ScFv的亲和活性。结果经Zeocin筛选2周后,CHO细胞株可稳定表达GFP-ScFv蛋白。Western blot法证实GFP-ScFv蛋白在细胞上清和细胞裂解液中均有表达,大小约55kD。ELISA检测表明,CHO培养上清中的GFP-ScFv蛋白经浓缩初纯后能与重组小鼠CTLA-4纯化抗原结合,并具有抑制亲本单抗与其结合的能力。结论成功构建了抗小鼠CTLA-4的ScFv真核表达载体,并能有效表达出具有免疫学活性的ScFv融合蛋白。

关键词：细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4 单链抗体真核表达免疫学活性

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CD137L在HBsAg DNA疫苗诱导小鼠细胞免疫应答中的佐剂效应

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浙江大学学报（医学版） 2010年第4期39卷 370-377页

作者：江虹黄茵史丽云吴炜蔡玲斐贾红宇钟石根杭州师范大学基础医学部免疫学教研室浙江杭州310036 浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所传染病诊治国家重点实验室浙江杭州310003

目的:研究共刺激分子CD137L重组质粒对HBsAg DNA疫苗诱导小鼠细胞免疫应答和回忆反应的佐剂作用。方法:将小鼠CD137L真核表达载体(pcD137L)体外转染NIH3T3细胞,RT-PCR、流式细胞仪和免疫荧光法分别检测CD137L mRNA和蛋白的表达;pcD137L... 详细信息

目的:研究共刺激分子CD137L重组质粒对HBsAg DNA疫苗诱导小鼠细胞免疫应答和回忆反应的佐剂作用。方法:将小鼠CD137L真核表达载体(pcD137L)体外转染NIH3T3细胞,RT-PCR、流式细胞仪和免疫荧光法分别检测CD137L mRNA和蛋白的表达;pcD137L与HBsAg DNA疫苗(pcDS)通过肌肉注射联合免疫BALB/c小鼠,LDH释放法测定体外脾细胞特异性CTL杀伤活性;流式细胞仪分析小鼠脾脏CD8+记忆T细胞数量;流式细胞仪检测CD8+T细胞及淋巴细胞中IFN-γ和IL-4的表达水平。结果:重组质粒pcD137L在NIH3T3细胞中获得有效表达。与pcDS单独免疫组比较:免疫后1周,pcDS+pcD137L免疫组能诱导更强的HBsAg特异性CTL杀伤活性(P<0.05);免疫后1周和12周,pcDS+pcD137L免疫组CD8+T细胞CD44high和CD127表达水平均显著增高(P<0.05或P<0.01);免疫后1周、12周和13周(即再次给予pcDS刺激后1周),pcDS+pcD137L免疫组分别明显上调CD8+T细胞和淋巴细胞中IFN-γ产生细胞的百分比,差异有显著意义(均P<0.05)。结论:共刺激分子CD137L能显著增强HBsAg DNA疫苗诱导的Tc1(I型)细胞免疫、特异性CTL应答及回忆反应,是诱导HBV特异性T细胞应答的有效佐剂。

关键词： DNA,病毒/免疫学共刺激分子 CD137L 乙型肝炎病毒细胞免疫应答回忆反应 DNA疫苗

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宿主基因与结核病易感性研究概览

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浙江大学学报（医学版） 2022年第6期51卷 679-690页

作者：胡文娟徐凯进浙江大学医学院附属第一医院、传染病诊治国家重点实验室、国家感染性疾病临床医学研究中心、国家传染病医学中心、感染性疾病诊治协同创新中心浙江杭州310003

“吕贝克灾难”、双胞胎研究及收养研究等流行病学观察性研究结果都充分表明,宿主基因是决定机体对结核分枝杆菌是否易感和感染后是否发病的重要因素。从连锁分析到全基因组关联研究已发现,人白细胞抗原(HLA)类基因和非HLA类基因(SLC11A... 详细信息

“吕贝克灾难”、双胞胎研究及收养研究等流行病学观察性研究结果都充分表明,宿主基因是决定机体对结核分枝杆菌是否易感和感染后是否发病的重要因素。从连锁分析到全基因组关联研究已发现,人白细胞抗原(HLA)类基因和非HLA类基因(SLC11A1、VDR、ASAP1、细胞因子类基因及模式识别受体类基因)与结核病易感性相关。本文对近年涉及结核病易感性基因的研究进行回顾,重点叙述HLA类基因和非HLA类基因与结核病发病的关联,并对文中涉及的基因进行富集分析,结果提示大部分基因参与免疫炎症调控,并与自身免疫性疾病关系密切,可为后续结核感染风险预测和结核病诊治提供参考。

关键词：结核病宿主基因易感性富集分析风险预测综述

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感染性疾病与程序性细胞死亡相关性研究新进展

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中华临床感染病杂志 2022年第5期15卷 333-344页

作者：马亦林传染病诊治国家重点实验室、国家感染性疾病临床医学研究中心、浙江大学医学院附属第一医院感染病科杭州310003

近年来,随着细胞死亡分子机制方面的研究取得进展,人们才逐渐发现有多种新型的细胞程序性死亡方式,包括非凋亡性(10种)及凋亡性(2种)二大类。它们广泛参与感染性疾病和肿瘤等疾病的发生、发展,是目前热门研究的前沿课题,为临床防治提供... 详细信息

近年来,随着细胞死亡分子机制方面的研究取得进展,人们才逐渐发现有多种新型的细胞程序性死亡方式,包括非凋亡性(10种)及凋亡性(2种)二大类。它们广泛参与感染性疾病和肿瘤等疾病的发生、发展,是目前热门研究的前沿课题,为临床防治提供了新思路。本文通过对程序性细胞死亡文献的梳理,围绕细胞坏死、凋亡、焦亡、铁死亡、中性粒细胞的炎性细胞死亡、铜死亡及细胞广泛凋亡等特征性表现,以及与若干感染性疾病相关性研究进展作一综述。

关键词：程序性细胞死亡细胞凋亡细胞焦亡铁死亡中性粒细胞炎症性死亡铜死亡细胞广泛凋亡免疫细胞膜Fcγ受体

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人工肝血液净化系统应用于重型、危重型新型冠状病毒肺炎治疗的专家共识

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浙江医学 2020年第1期42卷 757-759页

作者：无李兰娟国家感染性疾病临床医学研究中心传染病诊治国家重点实验室中国工程院国家卫生健康委员会浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室杭州310003

全国新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的防治工作进入攻坚阶段,重型、危重型患者的有效救治是降低该疾病病死率的关键。人工肝血液净化系统能清除炎症因子,减轻炎症反应对机体的损伤,对重型、危重型患者的救治具有重要价值。由李兰娟院士领衔... 详细信息

全国新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的防治工作进入攻坚阶段,重型、危重型患者的有效救治是降低该疾病病死率的关键。人工肝血液净化系统能清除炎症因子,减轻炎症反应对机体的损伤,对重型、危重型患者的救治具有重要价值。由李兰娟院士领衔,基于全国各地的救治经验,整合全国各地专家意见,针对人工肝治疗重型、危重型COVID-19患者的基本原理、治疗适应证、相对禁忌证、治疗模式选择、监测指标及疗效评价等进行总结,制订了本专家共识,供各单位参考开展救治工作。

关键词：冠状病毒感染肝,人工新型冠状病毒肺炎专家共识

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