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HBsAg重组腺病毒转染的树突状细胞诱导BALB／c小鼠抗HBV免疫的研究

中华微生物学和免疫学杂志 2006年第6期26卷 553-559页

作者：黄茵陈智贾红宇吴伟蔡玲斐周承浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室 310018 杭州师范学院基础医学部杭州师范学院基础医学部免疫学教研室

目的研究HBsAg重组腺病毒转染的小鼠树突状细胞(DC)体内外免疫刺激活性和诱导小鼠抗HBV免疫的特点。方法BALB／c小鼠的骨髓细胞体外扩增为DC,转染HBsAg重组腺病毒Ad-S或被HBsAg蛋白冲击后,流式细胞术分析DC的表型,混合淋巴细胞反应(MLR... 详细信息

目的研究HBsAg重组腺病毒转染的小鼠树突状细胞(DC)体内外免疫刺激活性和诱导小鼠抗HBV免疫的特点。方法BALB／c小鼠的骨髓细胞体外扩增为DC,转染HBsAg重组腺病毒Ad-S或被HBsAg蛋白冲击后,流式细胞术分析DC的表型,混合淋巴细胞反应(MLR)检测DC的刺激活性;或与pcDNA3．1(+)-S质粒分别免疫小鼠后,LDH法测定脾细胞CTL活性,放免法检测血清抗- HBs;流式细胞术分析体外自体MLR中及免疫后小鼠脾脏T细胞内细胞因子。结果DC／Ad-S、DC／HBsAg和各对照组DC之间的表型和MLR差异无统计学意义,并均刺激TH和Tc分泌IFN-γ。DC／Ad-S免疫后2周能诱导比DNA疫苗更强产生IFN-γ的TH(P<0．05),以及比DC／HBsAg和DNA疫苗更强分泌IFN-γ的Tc(均P<0．01)和特异性CTL(P<0．05,P<0．01)。但DC／Ad-S和DC/HBsAg诱导的CTL反应及Tc分泌IFN-γ在免疫后4周均明显减弱,且诱导抗-HBs作用弱于DNA疫苗。结论HBsAg重组腺病毒转染的DC比HBsAg冲击的DC及DNA疫苗能诱导更强的TH1／Tc1(Ⅰ型)细胞免疫和特异性CTL反应,是诱导抗HBV细胞免疫的有效刺激细胞。

关键词：乙肝表面抗原树突状细胞腺病毒 Ⅰ型免疫应答细胞毒性T淋巴细胞

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国产某丙型肝炎病毒抗体试剂中吸光度/临界值的作用

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中华传染病杂志 2007年第4期25卷 206-210页

作者：李兰娟严力行朱发明马伟杭励晓涛庄辉浙江大学医学院附属第一医院传染内科卫生部传染病重点实验室浙江省传染病重点实验室浙江省血液中心卫生部血液安全研究重点实验室北京大学医学部微生物学系

目的研究某国产抗-HCV试剂样本吸光度/临界值(S/Co)的意义,探讨国产试剂检测抗-HCV的初步程序和标准。方法采用某国产试剂通过ELISA法检测295 000例无偿献血者的抗-HCV,对其阳性反应的样本采用Ortho抗-HCV试剂通过ELISA法进行检测。Orth... 详细信息

目的研究某国产抗-HCV试剂样本吸光度/临界值(S/Co)的意义,探讨国产试剂检测抗-HCV的初步程序和标准。方法采用某国产试剂通过ELISA法检测295 000例无偿献血者的抗-HCV,对其阳性反应的样本采用Ortho抗-HCV试剂通过ELISA法进行检测。Ortho试剂阳性反应的样本进行HCV重组免疫印迹实验(RIBA),并对其中的106例Ortho试剂阳性反应的样本进行核酸检测。结果在295 000例样本中,某国产试剂抗-HCV阳性反应为681例,阳性率为0.23%。某国产试剂阳性反应的样本经Ortho试剂检测后阳性反应为367例,符合率为53.8%,其中Ortho试剂S/Co值≥3.8为66.2%。在Ortho试剂S/Co值≥3.8的样本中,某国产试剂S/Co值≥8.0的占94.2%;而Ortho试剂S/Co值<3.8的样本中,某国产试剂S/Co值<8.0的占99.2%。367例Ortho阳性反应样本中,RIBA HCV阳性223例,阳性率为60.8%;在国产试剂S/Co值≥8.0的样本中,RIBA阳性率为95.7%;而同一种国产试剂S/Co值<8.0的样本中,RIBA阳性率为2.2%。106例Ortho试剂阳性反应样本中核酸检测阳性为42例。结论国产抗-HCV试剂在检测无偿献血者样本中存在较高的假阳性率,一定程度上造成了血源和血液的浪费。某国产试剂S/Co值≥8.0和Ortho试剂S/Co值≥3.8具有一定的相关性,在实验室检测抗-HCV上具有一定诊断价值。

关键词：肝炎病毒丙型分光光度法抗体病毒

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静脉吸毒者丙型肝炎病毒和人类免疫缺陷病毒感染的研究

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中华内科杂志 2000年第10期39卷 707-708页

作者：朱彪吴南屏邵一鸣强耒英浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所暨卫生部病毒性传染病重点实验室杭州310003 中国预防医学科学院艾滋病研究室

静脉吸毒（IVDU）可传播多种病毒，已有文献分别报道了静脉吸毒者HCV、人类免疫缺陷病毒（HIV）感染的情况，本研究在原研究工作基础上，对IVDU者HCV感染情况和HCV重叠HIV感染对HCV病毒复制影响情况做一初步研究。

关键词：静脉吸毒丙型肝炎 HCV HIV

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血管紧张素酶基因多态性与乙型肝炎肝纤维化指标的关系

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中华传染病杂志 2007年第7期25卷 403-405页

作者：何泽宝朱坚胜陈智曾文新朱敏王庚歌陈华忠方浩浙江省台州医院感染科临海市317000 浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室浙江省台州医院中心实验室临海市317000

肝纤维化是可逆性病变，及时、有效制止肝纤维化的进展，可阻断肝硬化的发生。最近发现，在体外培养的激活的肝星状细胞表面有血管紧张素Ⅱ1型受体（AT1）表达，血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）可使这些细胞产生收缩和增生，而肝星状细胞的激活... 详细信息

肝纤维化是可逆性病变，及时、有效制止肝纤维化的进展，可阻断肝硬化的发生。最近发现，在体外培养的激活的肝星状细胞表面有血管紧张素Ⅱ1型受体（AT1）表达，血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）可使这些细胞产生收缩和增生，而肝星状细胞的激活是肝纤维化的关键因素。血管紧张素酶（ACE）是肾素一血管紧张素系统（RAs）的关键酶，其最显著的作用是激活AngⅡ，在血管及其他组织，ACE能调节间质液内AngⅡ的最终浓度。目前研究表明肝脏局部存在RAS系统，

关键词：血管紧张素酶基因多态性肝纤维化指标血管紧张素Ⅱ1型受体乙型肝炎肾素一血管紧张素系统 AngⅡ 细胞表面可逆性病变

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转化生长因子β1基因多态性与乙型肝炎肝纤维化的关系研究

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中华传染病杂志 2006年第6期24卷 410-413页

作者：朱坚胜何泽宝陈智曾文新朱敏王庚歌陈华忠方浩台州医院感染科浙江省临海市317000 浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室台州医院中心实验室浙江省临海市317000

肝纤维化是慢性肝病发展到肝硬化的必经之路，阻断肝纤维化形成对改善肝硬化预后有重要意义。转化生长因子β1（TGF β1）是已知的最强的肝纤维化促进因子之一。临床上肝纤维化的形成具有一定的个体差异，这可能与患者的基因多态有关。G... 详细信息

肝纤维化是慢性肝病发展到肝硬化的必经之路，阻断肝纤维化形成对改善肝硬化预后有重要意义。转化生长因子β1（TGF β1）是已知的最强的肝纤维化促进因子之一。临床上肝纤维化的形成具有一定的个体差异，这可能与患者的基因多态有关。Gewaltig等报道TGF β1＋869（T／C）、＋915（G／C）的多态性与丙型肝炎肝纤维化的发生有关，为明确TGF β1基因多态性与乙型肝炎肝纤维化的关系，进一步从基因水平上探讨、认识肝纤维化的发生机制，为今后肝纤维化基因治疗提供新的理论依据，我们选择＋869（T／C）、＋915（G／C）位点进行此项研究。

关键词：乙型肝炎肝纤维化转化生长因子β1 基因多态性肝纤维化形成慢性肝病促进因子个体差异基因水平

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HBSAg基因修饰的树突状细胞诱导HBV转基因小鼠的免疫应答

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中华传染病杂志 2006年第5期24卷 306-310页

作者：黄茵陈智贾红宇吴炜蔡玲斐周承浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室杭州310003 杭州师范学院基础医学部杭州师范学院基础医学部免疫学教研室

目的探讨HBsAg重组腺病毒Ad-S转染的小鼠树突状细胞(DC)诱导HBV转基因(Tg)小鼠免疫应答的作用特点及其可能的治疗作用。方法Tg小鼠的骨髓细胞体外扩增为DC,转染Ad-S或被HBsAg蛋白冲击后,与pcDNA3．1(+)-S质粒分别免疫Tg鼠,用流式细胞术... 详细信息

目的探讨HBsAg重组腺病毒Ad-S转染的小鼠树突状细胞(DC)诱导HBV转基因(Tg)小鼠免疫应答的作用特点及其可能的治疗作用。方法Tg小鼠的骨髓细胞体外扩增为DC,转染Ad-S或被HBsAg蛋白冲击后,与pcDNA3．1(+)-S质粒分别免疫Tg鼠,用流式细胞术、乳酸脱氢酶释放法、酶联免疫分析(ELISA)、荧光定量聚合酶链反应(PCR)等分别检测脾脏T细胞内细胞因子和细胞毒性T淋巴细胞(CTL)活性、血清HBsAg、抗-HBs、HBV DNA及丙氨酸转氨酶(ALT)水平；病理和免疫组化分析肝脏组织学及HBsAg和HBcAg表达。结果免疫后1～2周,DC/Ad-S比DC/HBsAg和pcDNA3．1(+)-S诱导Tc分泌干扰索γ(IFN-γ)和特异性CTL均显著增强,而DC/ HBsAg组CTL较pcDNA3．1(+)-S组增强(P＜0．05)；DC/HBsAg免疫后1、2、4周CTL迅速减弱,DC/Ad-S在1、2周CTL差异不明显,但至4周时明显减弱。免疫后1～4周,对Tg鼠血清HBsAg、HBV DNA及肝组织HBcAg和HBsAg表达的抑制作用最强为DC/Ad-S免疫,其次为DC/HBsAg,显著强于pcDNA3．1(+)-s(P＜0．05或P＜0．01)。肝脏组织学、血清抗-HBs和ALT水平各组差异无统计学意义。结论Ad-S转染的DC比HBsAR冲击的DC和DNA疫苗诱导更强的Tcl和CTL应答,能较迅速抑制HBV转基因小鼠血清HBsAg、HBV DNA和肝脏HBcAg和HBsAg表达。

关键词：肝炎表面抗原乙型树突细胞腺病毒科 T淋巴细胞细胞毒性小鼠转基因

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血清转化生长因子β1水平在慢性乙型肝炎与乙型肝炎肝硬化患者中差异的意义

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世界华人消化杂志 2007年第29期15卷 3104-3106页

作者：何泽宝朱坚胜陈智朱敏曾文新陈华忠王庚歌方浩台州医院感染科浙江省临海市317000 浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室浙江省杭州市310003 浙江省台州医院中心实验室浙江省临海市317000

目的:观察血清转化生长因子β1(TGFβ1)水平是否与肝脏炎症、纤维化程度相关及其在慢性乙型肝炎与乙肝肝硬化患者中的差异.方法:慢性乙肝(慢性肝炎组)65例,乙肝肝硬化(肝硬化组)56例,体检健康、乙肝标志物阴性者(正常对照组)50例,均空... 详细信息

目的:观察血清转化生长因子β1(TGFβ1)水平是否与肝脏炎症、纤维化程度相关及其在慢性乙型肝炎与乙肝肝硬化患者中的差异.方法:慢性乙肝(慢性肝炎组)65例,乙肝肝硬化(肝硬化组)56例,体检健康、乙肝标志物阴性者(正常对照组)50例,均空腹采血,肝纤维化指标(HA、CⅣ、PCⅢ、LN)采用放免法测定,血清TGFβ1检测采用ELISA.结果:慢性肝炎组血清TGFβ1水平明显高于肝硬化组和正常对照组(22±13μg/L vs 10±9μg/L,11±9μg/L,P<0.01),肝硬化组血清TGFβ1水平与正常对照组相比无显著性差异(P>0.05).肝硬化组PCⅢ与血清TGFβ1水平相关(r=0.269,P=0.045),慢性肝炎和肝硬化组血清TGFβ1水平与肝功能、肝纤维化指标无明显相关性(P>0.05).结论:血清TGFβ1水平可协助诊断肝脏炎症程度与纤维化程度,但不能作为他们的判断标准.

关键词：转化生长因子β1 乙型病毒性肝炎纤维化炎症酶联免疫吸附

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儿童艾滋病患者免疫因子水平断面研究

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中华儿科杂志 2006年第12期44卷 952-953页

作者：张福杰靳昌忠赵燕姚航平赵红心吴灵娇魏红山李在村吴南屏中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心北京100050 浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室杭州310003 北京地坛医院传染科 100011 北京佑安医院传染科 100070

儿童艾滋病(acquired immunodeficiency disease,AIDS)患者的病情特点不同于成人患者,有其特殊之处,表现为高病毒载量,低免疫学状态,疾病进展快,常伴有营养不良、发育迟缓、代谢异常等,而且机会性感染、卡波西肉瘤等并发症也较成人多见... 详细信息

儿童艾滋病(acquired immunodeficiency disease,AIDS)患者的病情特点不同于成人患者,有其特殊之处,表现为高病毒载量,低免疫学状态,疾病进展快,常伴有营养不良、发育迟缓、代谢异常等,而且机会性感染、卡波西肉瘤等并发症也较成人多见,病程与成人比较更为复杂。目前我国儿童AIDS方面的资料较少,治疗经验有限,因此,研究我国儿童AIDS患者的免疫状况十分必要。本实验对我国部分省份1992—2002年间感染的109例AIDS患儿Th1/Th2免疫因子、趋化因子及巨噬细胞刺激蛋白(macrophage stimulated protein,MSP)等进行了初步分析研究,为我国儿童AIDS的防治提供基础资料。[第一段]

关键词：艾滋病患者免疫因子儿童水平断面 AIDS患者巨噬细胞刺激蛋白 Th1/Th2 protein

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万古霉素不敏感革兰阳性菌感染研究进展

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中国处方药 2006年第9期5卷 10-13页

作者：皮博睿俞云松卫生部传染病重点实验室浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所

近年来革兰阳性菌引起的感染呈增多趋势,耐药现象也日趋严重。肠球菌和金黄色葡萄球菌是引起院内革兰阳性菌感染的主要病原菌。耐万古霉素肠球菌、金黄色葡萄球菌的出现,给临床治疗带来了困难和挑战。本文主要从流行病学、耐药机制、治... 详细信息

近年来革兰阳性菌引起的感染呈增多趋势,耐药现象也日趋严重。肠球菌和金黄色葡萄球菌是引起院内革兰阳性菌感染的主要病原菌。耐万古霉素肠球菌、金黄色葡萄球菌的出现,给临床治疗带来了困难和挑战。本文主要从流行病学、耐药机制、治疗对策等方面,对万古霉素耐药肠球菌、万古霉素敏感性下降金黄色葡萄球菌感染进行综述。

关键词：肠球菌金黄色葡萄球菌万古霉素耐药

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HBcAg重组腺病毒载体的构建及鉴定

HBcAg重组腺病毒载体的构建及鉴定

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2005年浙江省感染病、肝病学术会议

作者：贾红宇陈智黄茵周林福吴炜陈峰朱海红浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室

研究目的构建能高效转导HBcAg基因的重组腺病毒,进行病毒扩增和滴度测定,并检测转导率和HBcAg 抗原表达,以用于基因治疗的实验研究。方法应用AdEasyTM XL腺病毒载体系统构建表达HBcAg的重组腺病毒(Ad-C)。所用载体为删除 E1和E3基因的... 详细信息

研究目的构建能高效转导HBcAg基因的重组腺病毒,进行病毒扩增和滴度测定,并检测转导率和HBcAg 抗原表达,以用于基因治疗的实验研究。方法应用AdEasyTM XL腺病毒载体系统构建表达HBcAg的重组腺病毒(Ad-C)。所用载体为删除 E1和E3基因的复制缺陷5型腺病毒。目的基因首先克隆到p-shuttle-CMV形成穿梭载体,用Pme I

关键词：重组腺病毒载体 HBcAg 穿梭载体

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