检索结果-内蒙古大学图书馆

HBV核心抗原EGFP融合蛋白表达质粒的构建及在Hep G_2细胞中的表达

浙江预防医学 2005年第1期17卷 3-5页

作者：徐宁陈智姚航平羊正纲浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室浙江杭州310003

目的　探讨采用构建的质粒pHBc -EGFP转染HepG2 细胞 ,瞬时表达HBV核心抗原和增强型绿荧光蛋白的可行性。方法　克隆HBV核心抗原基因进入真核表达载体pEGFP -N1 中 ,脂质体法转染HepG2 细胞后在荧光显微镜下观察增强型绿荧光蛋白表达 ,... 详细信息

目的　探讨采用构建的质粒pHBc -EGFP转染HepG2 细胞 ,瞬时表达HBV核心抗原和增强型绿荧光蛋白的可行性。方法　克隆HBV核心抗原基因进入真核表达载体pEGFP -N1 中 ,脂质体法转染HepG2 细胞后在荧光显微镜下观察增强型绿荧光蛋白表达 ,并行RT -PCR及细胞免疫组化分析融合蛋白的表达。结果　重组pHBc -EGFP质粒可在HepG2 细胞内瞬时表达HBV核心抗原和增强型绿荧光蛋白融合蛋白。结论　pHBc -EGFP质粒构建成功 ,增强型绿荧光蛋白的表达可报告HBV核心抗原表达。

关键词： HBV核心抗原增强型绿荧光蛋白瞬时表达细胞免疫组化分析乙型肝炎病毒

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原发性肝癌组织中Kruppel样因子6(KLF6)的表达及其对肝癌细胞增殖的抑制作用

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实用肿瘤杂志 2007年第2期22卷 125-129页

作者：潘修成陈智陈峰陈晓红周承羊正纲浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室浙江杭州310003

目的了解Kruppel样因子6（KLF6）基因在原发性肝癌组织中的表达水平及其对肝癌细胞增殖的抑制作用。方法分别以逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和Wstern blot检测原发性肝癌及其癌旁组织KLF6 mRNA及蛋白质的表达水平。构建KLF6真核表达质... 详细信息

目的了解Kruppel样因子6（KLF6）基因在原发性肝癌组织中的表达水平及其对肝癌细胞增殖的抑制作用。方法分别以逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和Wstern blot检测原发性肝癌及其癌旁组织KLF6 mRNA及蛋白质的表达水平。构建KLF6真核表达质粒并转染肝癌细胞SMMC-7721,流式细胞仪及MTT试验观察KLF6基因对细胞周期及细胞增殖活性的影响。以Western blot技术检测外源KLF6基因对p21WAF1表达的影响。结果与对应的癌周组织比较,23例原发性肝癌组织中8例（34.8%）KLF6 mRNA,9例（39.1%）KLF6蛋白质水平明显下降。与对照组比较,转染KLF6基因的SMMC-7721细胞G0~G1期所占细胞的比例明显增高,转染KLF6基因SMMC-7721的增殖率明显下降。外源KLF6基因能上调肝癌细胞p21WAF1表达。结论KLF6基因表达水平的下降可能在原发性肝癌发病机制中起到一定作用。上调p21WAF1表达是KLF6基因抑制肝癌细胞增殖的重要途径.

关键词：癌,肝细胞/病理学基因,肿瘤抑制基因表达转染增殖细胞核抗原基因蛋白质p21

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潜伏人巨细胞病毒的激活机制

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国外医学（流行病学．传染病学分册） 2003年第2期30卷 99-101页

作者：杨美芳范骏马伟杭卫生部传染病重点实验室浙江大学医学院附属一院传染病研究所310003

人巨细胞病毒感染人体后常呈亚临床感染或潜伏感染,在艾滋病、器官移植和肿瘤等免疫功能低下患者中该病毒常被激活,并出现明显临床表现,甚至是致死性后果。人巨细胞病毒的潜伏激活机制是近几年国内外研究热点,本文就有关研究进展作了综述。

关键词：人巨细胞病毒潜伏感染激活机制主要即刻早期基因 IE蛋白异基因刺激免疫抑制启动子

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质粒介导的RNA干扰对人类细胞中HBcAg表达的抑制作用

质粒介导的RNA干扰对人类细胞中HBcAg表达的抑制作用

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浙江省免疫学会第五次学术研讨会

作者：徐宁陈智羊正纲姚航平侯晓丽吴炜蔡为民浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室

近年来,基于质粒载体的RNAi的方法因DNA合成便宜且稳定,能完整地进入宿主细胞的基因组产生长期的效应等优点。逐渐被认同为是一种较理想、经济的,产生RNAi的可替代途径。本研究设计并构建了针对HBcAg基因的shRNA表达载体,与表达HBcAg-E... 详细信息

近年来,基于质粒载体的RNAi的方法因DNA合成便宜且稳定,能完整地进入宿主细胞的基因组产生长期的效应等优点。逐渐被认同为是一种较理想、经济的,产生RNAi的可替代途径。本研究设计并构建了针对HBcAg基因的shRNA表达载体,与表达HBcAg-EGFP融合蛋白的质粒共转染AD293细胞株,观察其阻断HBcAg基因表达的效果与规律,以期为利用RNAi效应进行抗HBV复制的研究以及今后潜在的临床治疗应用奠定基础。

关键词：基因组共转染 HBcAg RNA 抑制作用

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肝病微生态学的研究进展

肝病微生态学的研究进展

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第五届全国肝脏疾病临床暨中华肝脏病杂志成立十周年学术会议

作者：李兰娟浙江大学医学院附属第一医院卫生部传染病重点实验室传染病研究所

我国是世界上病毒性肝炎的高发区,乙型肝炎病毒携带者高达1．3亿。虽然一些抗病毒药物在临床得到广泛应用,但是慢性肝炎进展为肝硬化、重型肝炎的势头仍未得到有效地遏制。目前随着人工肝和肝移植技术的不断发展,使得终末期肝病的病死... 详细信息

我国是世界上病毒性肝炎的高发区,乙型肝炎病毒携带者高达1．3亿。虽然一些抗病毒药物在临床得到广泛应用,但是慢性肝炎进展为肝硬化、重型肝炎的势头仍未得到有效地遏制。目前随着人工肝和肝移植技术的不断发展,使得终末期肝病的病死率有所下降,但由于经济、技术等各种条件的限制,慢性肝病总体病死率仍居高不下。慢性肝病的防治仍然是21世纪的重大课题,我们仍然任重道远。大量临床研究显示肝病的发生发展与人体微生态的变化密切相关。其中肠道微生态与肝脏不但在解剖结构上,而且在功能上都有着密切的联系。正常情况下,肝脏可清除来自肠道的包括内毒素、氨、吲哚、酚类、短

关键词：双歧杆菌乳杆菌库普弗细胞内毒素血症肝硬化患者肝性脑病重型肝炎肝性昏迷肝肾综合征肠道微生态肝脏功能细菌移位微生态调节剂微生态学

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双歧杆菌与乳酸杆菌对肝缺血-再灌注损伤作用的实验研究

双歧杆菌与乳酸杆菌对肝缺血-再灌注损伤作用的实验研究

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全国微生态调节剂第六届学术研讨会

作者：李兰娟邢卉春徐凯进陈云波沈恬盛洁芳浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室 310003

目的探讨肝缺血-再灌注(I/R)损伤时肠道菌群的变化及用双歧杆菌和乳酸杆菌对缺血-再灌注肝损伤的影响。方法选用SPF级SD大鼠随机分为4组：正常对照组(8只)、假手术组(6只)、肝I/R组(10只)、双歧-乳酸杆菌预处理组(9只，用双歧杆菌和乳... 详细信息

目的探讨肝缺血-再灌注(I/R)损伤时肠道菌群的变化及用双歧杆菌和乳酸杆菌对缺血-再灌注肝损伤的影响。方法选用SPF级SD大鼠随机分为4组：正常对照组(8只)、假手术组(6只)、肝I/R组(10只)、双歧-乳酸杆菌预处理组(9只，用双歧杆菌和乳酸杆菌混合菌悬液预处理)。通过阻断入肝血流20min建立肝I/R模型，22h后采集标本。用光冈氏肠内细菌群分析法分析不同情况下回肠末段菌群构成、肠道细菌易位情况;用电子显微镜观察肠粘膜超微结构;用偶氮基质显色鲎试验定量法测定血浆内毒素;并对血清丙氨酸转氨酶(ALT)、血清天冬氨酸转氨酶(AST)、血清总胆红素(TBIL)及肝组织中丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性进行检测。结果肝I/R大鼠血清ALT、AST明显升高，血浆内毒素水平及肝组织中MDA含量也增高(P＜0.01);同时肠道双歧杆菌、乳酸杆菌较正常对照组明显减少(P＜0.01)，而肠道需氧菌如肠球菌、肠杆菌却增加，细菌易位至肾脏的阳性率增加(P＜0.05);肠粘膜细胞间隙增宽，细胞间紧密连接开放，微绒毛数目减少、变性、断裂。用双歧杆菌和乳酸杆菌混合菌预处理可使肠道双歧杆菌、乳酸杆菌数量上明显回升，肠粘膜超微结构基本正常，细菌易位至肾脏的阳性率降低，血清ALT、血浆内毒素水平及肝组织中MDA含量也降低。不同处理组大鼠肠道类杆菌数量虽有所波动，但各组间的变化无显著差异;酵母菌培养及产气荚膜梭菌培养仅在个别鼠为阳性，且不同组间差异无显著性。结论肝缺血—再灌注大鼠存在着肠道菌群的失衡(乳酸杆菌、双歧杆菌减少，肠球菌、肠杆菌增加)、肠粘膜屏障损害及肠道菌的移位：补充益生菌—乳酸杆菌和双歧杆菌可部分恢复肠道菌群的构成、改善肠粘膜屏障、减少肠道菌易位的发生率，进而降低血浆内毒素水平、减少肝脏氧自由基产生、减轻肝损伤。

关键词：肝缺血再灌注损伤双歧杆菌乳酸杆菌

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RANTES蛋白对SARS病毒感染巨噬细胞的抑制效应及机制

RANTES蛋白对SARS病毒感染巨噬细胞的抑制效应及机制

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2007年传染病诊治高峰论坛暨浙江省感染病学、肝病学学术年会

作者：吴南屏常秀春姚航平李丹冯磊浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室 310003

本文阐述了RANTES蛋白对SARS病毒感染巨噬细胞的抑制效应及机制。传染性非典型肺炎(SARS)已确定是由一种新发现的冠状病毒所引起的具有高度传染性的急性呼吸道传染病。SARS 发病是由于免疫反应过激所造成的免疫耗竭所致。目前认为早期... 详细信息

本文阐述了RANTES蛋白对SARS病毒感染巨噬细胞的抑制效应及机制。传染性非典型肺炎(SARS)已确定是由一种新发现的冠状病毒所引起的具有高度传染性的急性呼吸道传染病。SARS 发病是由于免疫反应过激所造成的免疫耗竭所致。目前认为早期炎症细胞及分泌的炎症因子在体内的堆积，以及由此造成的免疫损伤可能是SARS患者致命的根源。

关键词：非典型肺炎冠状病毒免疫损伤细胞病理学

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IFN-γ与HIV-1gp120基因融合蛋白的表达及其免疫调节作用

IFN-γ与HIV-1gp120基因融合蛋白的表达及其免疫调节作用

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2007年传染病诊治高峰论坛暨浙江省感染病学、肝病学学术年会

作者：赵刚吴南屏姚航平浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室 310003

在人类免疫缺陷病毒(HIV)感染中，细胞介导的免疫反应发挥着主导作用。本研究将具有上调细胞免疫反应的Th1型细胞因子— gamma 干扰素与具有良好抗原性及特异性且体外表达稳定的HIV-1的衣壳蛋白-gp120 N端基因片段，构建成抗原-细胞因子... 详细信息

在人类免疫缺陷病毒(HIV)感染中，细胞介导的免疫反应发挥着主导作用。本研究将具有上调细胞免疫反应的Th1型细胞因子— gamma 干扰素与具有良好抗原性及特异性且体外表达稳定的HIV-1的衣壳蛋白-gp120 N端基因片段，构建成抗原-细胞因子的DNA 重组体，研究了IFN-对HIV-1gp120 抗原刺激小鼠后的免疫调节作用，为临床治疗HIV-1感染进行了探讨。

关键词： HIV感染融合蛋白免疫调节细胞病理学

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大鼠肝缺血再灌注损伤中肝细胞凋亡的研究

大鼠肝缺血再灌注损伤中肝细胞凋亡的研究

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第十次浙江省中西医结合肝病学术会议

作者：徐凯进李兰娟邢卉春沈恬盛吉芳郑树森浙江大学医学院附属第一医院传染科、传染病研究所卫生部传染病重点实验室

肝脏是一个血供丰富的器官,正常生理条件下其血供占人体总循环血量的20-35%,在肝脏手术时为减少术中出血常采用阻断门脉、肝动脉的方法止血,这样肝脏不可避免的要经受缺血再灌注损伤(ischemia/reperfusion injury I/R)。这种损伤是术后... 详细信息

肝脏是一个血供丰富的器官,正常生理条件下其血供占人体总循环血量的20-35%,在肝脏手术时为减少术中出血常采用阻断门脉、肝动脉的方法止血,这样肝脏不可避免的要经受缺血再灌注损伤(ischemia/reperfusion injury I/R)。这种损伤是术后肝功能异常、原发性移植肝无功能、多器官功能衰竭的重要原因。要寻找有效的措施来减轻肝脏的缺血再灌注损伤,提高手术的安全性,就必须

关键词：肝细胞凋亡中央静脉缺血再灌注损伤凋亡细胞手术组肝组织汇管区 ETX 显著性差异

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亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌同源性、碳青霉烯酶基因及其与ISAba1关系研究

亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌同源性、碳青霉烯酶基因及其与ISAba1关...

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第六届全国抗菌药物临床药理学术会议

作者：沈萍廖康周华周志慧卓超许宏涛陈佰义倪语星俞云松李兰娟卫生部传染病重点实验室浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所中山大学附属第一医院检验医学部卫生部传染病重点实验室浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所重庆医科大学附属第一医院检验科卫生部北京医院检验科中国医科大学附属第一医院感染科上海交通大学附属瑞金医院临床微生物科卫生部传染病重点实验室浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所

目的明确我国6省市8家省级医院、浙江省11个地区17家市级医院临床分离亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌的同源性、碳青霉烯酶基因型及其基因周围环境。方法收集我国25家医院2004年12月-2005年 12月临床分离的700株鲍曼不动杆菌,纸片扩散法筛选... 详细信息

目的明确我国6省市8家省级医院、浙江省11个地区17家市级医院临床分离亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌的同源性、碳青霉烯酶基因型及其基因周围环境。方法收集我国25家医院2004年12月-2005年 12月临床分离的700株鲍曼不动杆菌,纸片扩散法筛选亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌;琼脂稀释法和Etest法测定亚胺培南耐药菌株对14种抗菌药物的MIC值;脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析亚胺培南耐药菌株同源性;PCR扩增及克隆测序分析碳青霉烯酶基因及其周围基因环境。结果 700株鲍曼不动杆菌中筛选到342株亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌。342株亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌对氨苄西林／舒巴坦、头孢哌酮／舒巴坦两个含舒巴坦制剂耐药率分别为68％、54．2％,对多粘菌素E耐药率最低为10．8％,对米诺环素耐药率75．9％, 对其它抗菌药物的耐药率均在90％以上;342株亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌PFGE分型中298株菌株属于6 个广泛流行的克隆株;342株亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌中322株携带OXA-23-like基因,317株携带 OXA-51-like基因,313株菌株OXA-23-like基因上游检测到插入序列ISAbal,13株OXA-51基因上游检测到ISAbal。结论克隆播散是亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌最主要的传播方式,OXA-23组和OXA-51组D类β- 内酰胺酶基因是最主要的碳青霉烯酶基因型,未检测到OXA-24组、OXA-58组、IMP型和VIM型碳青霉烯酶基因。OXA类碳青霉烯酶基因与插入序列ISAbal关系密切。

关键词：鲍曼不动杆菌耐药性脉冲场凝胶电泳(PFGE) 碳青霉烯酶插入序列

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