检索结果-内蒙古大学图书馆

中华传染病杂志 2005年第1期23卷 1-5页

作者：颜学兵陈智 Delphine BOUCREUX Nicole PAVIO Christian BRECHOT 浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室法国巴黎第5大学

目的构建并表达丙型肝炎病毒(HCV)不同病毒株:癌中心株(BT)、癌旁珠(BNT)、HCV-J及BT不同截短片段谷胱甘肽(GST)-核心融合蛋白;寻找核心蛋白(Core)与蛋白激酶R(PKR)相互作用区域,探讨它们在HCV持续感染及细胞癌(HCC)发病机制中的作用.... 详细信息

目的构建并表达丙型肝炎病毒(HCV)不同病毒株:癌中心株(BT)、癌旁珠(BNT)、HCV-J及BT不同截短片段谷胱甘肽(GST)-核心融合蛋白;寻找核心蛋白(Core)与蛋白激酶R(PKR)相互作用区域,探讨它们在HCV持续感染及细胞癌(HCC)发病机制中的作用.方法用聚合酶链反应扩增不同片段HCV核心蛋白基因,并将7个不同的基因片段分别克隆到原核表达载体pGEX-4T-1,诱导表达并纯化表达蛋白,与两株细胞(HepG2和Huh-7)的PKR的进行相互作用试验.结果7个不同片段Core在体外都得到相应表达,不同片段结合PKR的能力存在一定差异.BT、BNT、C191的Core N端1～172氨基酸(aa)3个片段均能与PKP发生直接结合,BT与PKR结合的区域在Core N端的1～58aa.结论不同片段Core在原核细胞中获得较好的表达;Core/PKP相互作,在HCV持续感染和HCC的发病机制中可能起重要作用.

关键词： HCV核心蛋白表达丙型肝炎病毒核心蛋白 HCC 发病机制结合蛋白功能区域差异目的结论

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HBcAg重组腺病毒载体的构建及鉴定

HBcAg重组腺病毒载体的构建及鉴定

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2005年浙江省感染病、肝病学术会议

作者：贾红宇陈智黄茵周林福吴炜陈峰朱海红浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室

研究目的构建能高效转导HBcAg基因的重组腺病毒,进行病毒扩增和滴度测定,并检测转导率和HBcAg 抗原表达,以用于基因治疗的实验研究。方法应用AdEasyTM XL腺病毒载体系统构建表达HBcAg的重组腺病毒(Ad-C)。所用载体为删除 E1和E3基因的... 详细信息

研究目的构建能高效转导HBcAg基因的重组腺病毒,进行病毒扩增和滴度测定,并检测转导率和HBcAg 抗原表达,以用于基因治疗的实验研究。方法应用AdEasyTM XL腺病毒载体系统构建表达HBcAg的重组腺病毒(Ad-C)。所用载体为删除 E1和E3基因的复制缺陷5型腺病毒。目的基因首先克隆到p-shuttle-CMV形成穿梭载体,用Pme I

关键词：重组腺病毒载体 HBcAg 穿梭载体

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树突状细胞在抗HBV治疗中的应用

树突状细胞在抗HBV治疗中的应用

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2005年浙江省感染病、肝病学术会议

作者：贾红宇陈智浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室

一、树突状细胞树突状细胞(dendriticcell,DC)是起源于骨髓的专职抗原递呈细胞,具有启动T细胞介导的免疫应答功能,因其表面具有众多树突状突起而得名。DC是由美国学者Steinman及Cohn于1973年发

关键词： HBV HBsAg HBeAg

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HBV核心抗原EGFP融合蛋白表达质粒的构建及在Hep G_2细胞中的表达

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浙江预防医学 2005年第1期17卷 3-5页

作者：徐宁陈智姚航平羊正纲浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室浙江杭州310003

目的　探讨采用构建的质粒pHBc -EGFP转染HepG2 细胞 ,瞬时表达HBV核心抗原和增强型绿荧光蛋白的可行性。方法　克隆HBV核心抗原基因进入真核表达载体pEGFP -N1 中 ,脂质体法转染HepG2 细胞后在荧光显微镜下观察增强型绿荧光蛋白表达 ,... 详细信息

目的　探讨采用构建的质粒pHBc -EGFP转染HepG2 细胞 ,瞬时表达HBV核心抗原和增强型绿荧光蛋白的可行性。方法　克隆HBV核心抗原基因进入真核表达载体pEGFP -N1 中 ,脂质体法转染HepG2 细胞后在荧光显微镜下观察增强型绿荧光蛋白表达 ,并行RT -PCR及细胞免疫组化分析融合蛋白的表达。结果　重组pHBc -EGFP质粒可在HepG2 细胞内瞬时表达HBV核心抗原和增强型绿荧光蛋白融合蛋白。结论　pHBc -EGFP质粒构建成功 ,增强型绿荧光蛋白的表达可报告HBV核心抗原表达。

关键词： HBV核心抗原增强型绿荧光蛋白瞬时表达细胞免疫组化分析乙型肝炎病毒

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安珐特等三种药物抗肝纤维化的比较研究

安珐特等三种药物抗肝纤维化的比较研究

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中华医学会第十二次全国病毒性肝炎及肝病学术会议

作者：蔡卫民陶君张彬彬董凤芹刘荣华浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所肝纤维化实验室浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所肝纤维化实验室浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所肝纤维化实验室浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所肝纤维化实验室浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所肝纤维化实验室

目的比较复方牛胎肝提取物片(商品名安珐特)与复方鳖甲软肝片(简称软肝片)以及γ-干扰素抗肝纤维化疗效并探讨其作用机制。方法用四氯化碳(CCl4)诱导形成大鼠肝纤维化模型,使用不同剂量安珐特与γ-干扰素、软肝片对该模型肝纤维化大鼠治... 详细信息

目的比较复方牛胎肝提取物片(商品名安珐特)与复方鳖甲软肝片(简称软肝片)以及γ-干扰素抗肝纤维化疗效并探讨其作用机制。方法用四氯化碳(CCl4)诱导形成大鼠肝纤维化模型,使用不同剂量安珐特与γ-干扰素、软肝片对该模型肝纤维化大鼠治疗8周,并停药观察4周,设停止造模

关键词：安珐特干扰素抗肝纤维化复方鳖甲软肝片比较研究

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慢性乙型肝炎患者外周血IFN-γ受体水平的检测及临床意义

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中国感染控制杂志 2005年第1期4卷 9-11页

作者：陈峰陈祥明陈公英李敏伟浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室浙江杭州310003 浙江大学医学院附属第二医院麻醉科浙江杭州310009 杭州市第六人民医院浙江杭州310014

目的　研究慢性乙型肝炎患者外周血γ 干扰素 (IFN γ)受体的水平变化及临床意义。方法　收集 5 3例乙型肝炎病毒 (HBV)感染后不同转归者外周血 ,采用流式细胞术检测外周血中CD3+ ,CD4 + ,CD8+ ,自然杀伤细胞 (NK细胞 )和IFN γ受体水... 详细信息

目的　研究慢性乙型肝炎患者外周血γ 干扰素 (IFN γ)受体的水平变化及临床意义。方法　收集 5 3例乙型肝炎病毒 (HBV)感染后不同转归者外周血 ,采用流式细胞术检测外周血中CD3+ ,CD4 + ,CD8+ ,自然杀伤细胞 (NK细胞 )和IFN γ受体水平 ,并以 4 0例正常体检者为对照。结果　HBV感染后患者外周血CD3+ ,CD4 + ,CD8+ 淋巴细胞和NK细胞水平均显著下降 (P <0 .0 5 ) ,其中以血清丙氨酸转移酶 (ALT)异常的患者降低最为明显 ,ALT异常者IFN γ受体水平显著低于ALT正常者与正常对照者。结论　IFN γ受体水平可能与乙型肝炎患者的慢性化有关。

关键词：受体,干扰素干扰素Ⅱ型 IFN-γ受体肝炎乙型慢性淋巴细胞亚群

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慢性丙型肝炎患者外周血若干细胞免疫的评价及意义分析

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中华传染病杂志 2004年第4期22卷 246-249页

作者：陈智张萍陈峰李敏伟周慧明刘继洪沈毅范维薇浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所 310003 浙江大学医学院生物统计教研室

目的　探讨丙型肝炎病毒 (HCV)感染慢性化的原因及免疫发病机制。方法　对慢性丙型肝炎 (CHC)患者外周血CD3、CD4、CD8及自然杀伤 (NK)细胞数、细胞趋化因子受体 6 (CCR6 )、干扰素 γ受体 (IFN γRα)用流式细胞仪进行了检测 ,用酶联... 详细信息

目的　探讨丙型肝炎病毒 (HCV)感染慢性化的原因及免疫发病机制。方法　对慢性丙型肝炎 (CHC)患者外周血CD3、CD4、CD8及自然杀伤 (NK)细胞数、细胞趋化因子受体 6 (CCR6 )、干扰素 γ受体 (IFN γRα)用流式细胞仪进行了检测 ,用酶联免疫吸附 (ELISA)法检测外周血Th1、Th2类细胞因子IFN γ、IL 10 ,并对它们之间的相互关系进行了分析。结果　CHC患者外周血中T淋巴细胞总数、CD4、CD8及NK细胞数均显著下降 ;IFN γRα的表达降低 ,IFN γ、IL 10浓度及IFN γ/IL 10 (Th1/Th2 )比例均显著低于对照组 ,以IFN γ的下降尤为明显 ,但CCR6的表达较对照组明显升高。结论　CHC外周T淋巴细胞、NK细胞数量减少 ,淋巴细胞表面IFN γRα表达降低、血清IFN γ、IL 10水平及IFN γ/IL 10比例均下降 ,存在Th1/Th2比例倒置 ,这可能是CHC患者机体免疫功能低下 ,引起病毒持续感染的原因之一 ;同时CHC患者CCR6表达增高 ,可介导部分激活的效应性T细胞向肝脏内迁移 ,参与局部免疫反应 ,这可能是CHC重要发病机制。

关键词： IFN-γ CHC 患者外周血 IL-10 表达慢性丙型肝炎意义倒置激活

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癌周及癌中心不同截短片段丙型肝炎病毒核心蛋白表达质粒的构建及表达

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中华肝脏病杂志 2004年第11期12卷 643-647页

作者：颜学兵陈智 Delphine BOUCREUX Nicole PAVIO Christian BRECHOT 浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室 310003 U370/巴斯德研究所联合实验室

目的研究不同截短片段丙型肝炎病毒(HCV)的核心蛋白(CORE)在HCV持续感染和肝癌发病机制中的作用,构建并表达不同HCV病毒株及不同截短片断CORE原核表达质粒。方法用PCR扩增基因型为HCV 1 b型的7个不同截短片段CORE基因:氨基酸(aa)长... 详细信息

目的研究不同截短片段丙型肝炎病毒(HCV)的核心蛋白(CORE)在HCV持续感染和肝癌发病机制中的作用,构建并表达不同HCV病毒株及不同截短片断CORE原核表达质粒。方法用PCR扩增基因型为HCV 1 b型的7个不同截短片段CORE基因:氨基酸(aa)长度分别为癌中心株(BT):B:1-172 aa、1-126 aa、1-58 aa、59-126 aa、127-172 aa;癌旁株(BNT):1-172 aa及C191(HCV-J6):1-172 aa,扩增产物用BamH Ⅰ及EcoR Ⅰ双酶切后将其插入到原核表达质粒pGEX-4T-1中,阳性克隆转染到BL21中,IPTG诱导表达GST-CORE融合蛋白,纯化定量,并用western blot加以验证。结果 7个不同片段CORE在体外都得到相应表达,但表达量存在一定的差异,较长片段表达量相对较低,其中BT及BNT的1-172 aa截短片段CORE的表达高于同基因型等长度片段的C191,而BT以59-126 aa片段的表达量最高。BT、BNT及C191三株HCV基因1b型病毒株部分截短片段可形成二聚体。结论构建不同HCV病毒株及不同截短片段的CORE原核表达质粒获得成功,为研究HCV不同病毒株及不同区域CORE功能奠定基础;不同截短片段的CORE表达量不等,可能与不同片段具有不同的疏水基团、细胞毒性及在HCV结构和在HCV致病性中所起作用不同有关;HCV基因1b型的CORE二聚体的形成依耐于59-126 aa区域。

关键词：病毒核心蛋白表达质粒蛋白表达丙型肝炎病毒肝癌

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HIV Tat蛋白与单核细胞表达辅助受体CCR5和感染HIV病毒相互关系的研究

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浙江大学学报（医学版） 2004年第6期33卷 532-534,545页

作者：杨益大郑临吕国才陈亚岗 Maria Salvato 浙江大学医学院附属第一医院传染病科杭州浙江310003 美国马里兰大学人类病毒研究所

目的 :研究 HIV Tat蛋白对单核细胞表达 HIV辅助受体 CCR5的影响 ,并观察 Tat蛋白对单核细胞感染嗜单核细胞 HIVBa-L病毒的影响。方法 :以流式细胞仪方法测定单核细胞表面表达的 CCR5 ,单核细胞表达分泌的HIV gag p2 4蛋白由 ELISA方法... 详细信息

目的 :研究 HIV Tat蛋白对单核细胞表达 HIV辅助受体 CCR5的影响 ,并观察 Tat蛋白对单核细胞感染嗜单核细胞 HIVBa-L病毒的影响。方法 :以流式细胞仪方法测定单核细胞表面表达的 CCR5 ,单核细胞表达分泌的HIV gag p2 4蛋白由 ELISA方法检测。结果 :HIV Tat蛋白能增加单核细胞表达 CCR5 ,此作用能被多克隆 Tat蛋白抗体所抑制 ;同时 HIV Tat蛋白能明显增加嗜单核细胞 HIV病毒 (HIVBa-L)感染单核细胞 ,表现为 HIV gag p2 4蛋白表达明显增加。结论 :HIV Tat蛋白增加单核细胞表面 CCR5受体的表达 ,并增加 HIVBa-L感染单核细胞 ,表明HIV Tat蛋白在 HIV感染和发病中起着十分重要的作用。

关键词： HIV Tat蛋白辅助受体CCR5 单核细胞感染

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慢性病毒性肝炎患者血清中瘦素与肝纤维化指标的关系

引用

临床肝胆病杂志 2004年第2期20卷 85-86页

作者：卢震亚王群燕饶伟强蔡卫民刘荣华浙江大学医学院第一附属医院高级病房浙江杭州310003 浙江大学医学院第一附属医院消化实验室浙江杭州310003 浙江大学医学院第一附属医院传染病研究所浙江杭州310003

研究血清瘦素水平与慢性病毒性肝炎和肝纤维化之间的关系。用放射免疫法检测 4 5例慢性乙型肝炎(CHB)患者血清中的瘦素和肝纤维化指标的水平。发现CHB患者血清瘦素水平 (7 6 3± 2 19)ng/ml显著高于正常对照组 (3 82± 1 0 9)n... 详细信息

研究血清瘦素水平与慢性病毒性肝炎和肝纤维化之间的关系。用放射免疫法检测 4 5例慢性乙型肝炎(CHB)患者血清中的瘦素和肝纤维化指标的水平。发现CHB患者血清瘦素水平 (7 6 3± 2 19)ng/ml显著高于正常对照组 (3 82± 1 0 9)ng/ml,其瘦素 /BMI值也显著高于正常对照组 ,CHB患者的血清瘦素水平与肝纤维化指标层粘蛋白 (LN)、透明质酸 (HA)、Ⅲ型前胶原 (PCⅢ )和Ⅳ胶原 (ⅣC)的水平呈正相关。

关键词：慢性病毒性肝炎肝炎患者血清瘦素肝纤维化指标

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