检索结果-内蒙古大学图书馆

2008年浙江省感染病、肝病学术年会

作者：刘克洲浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室传染病研究所

近3年来,由于新的抗乙肝病毒药物的不断研发,一批新的抗病毒药物上市,包括聚乙二醇干扰素,恩替卡韦,替比夫定等,以及发表了大量长期随访研究资料,对于乙肝病毒感染自然史和疾病进展以及核苷(酸)类似物(NAs)疗效及耐药(包括耐药预测和耐... 详细信息

近3年来,由于新的抗乙肝病毒药物的不断研发,一批新的抗病毒药物上市,包括聚乙二醇干扰素,恩替卡韦,替比夫定等,以及发表了大量长期随访研究资料,对于乙肝病毒感染自然史和疾病进展以及核苷(酸)类似物(NAs)疗效及耐药(包括耐药预测和耐药管理策略)问题、抗病毒药物联合治疗,HBV与HDV/HCV/HIV重叠感染患者的治疗等都有了许多新认识。

关键词： HBeAg CHB APASL 慢性乙型肝炎抗病毒治疗 HBVDNA 慢乙肝患者

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大鼠肝缺血再灌注损伤中肝细胞凋亡的研究

大鼠肝缺血再灌注损伤中肝细胞凋亡的研究

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第十次浙江省中西医结合肝病学术会议

作者：徐凯进李兰娟邢卉春沈恬盛吉芳郑树森浙江大学医学院附属第一医院传染科、传染病研究所卫生部传染病重点实验室

肝脏是一个血供丰富的器官,正常生理条件下其血供占人体总循环血量的20-35%,在肝脏手术时为减少术中出血常采用阻断门脉、肝动脉的方法止血,这样肝脏不可避免的要经受缺血再灌注损伤(ischemia/reperfusion injury I/R)。这种损伤是术后... 详细信息

肝脏是一个血供丰富的器官,正常生理条件下其血供占人体总循环血量的20-35%,在肝脏手术时为减少术中出血常采用阻断门脉、肝动脉的方法止血,这样肝脏不可避免的要经受缺血再灌注损伤(ischemia/reperfusion injury I/R)。这种损伤是术后肝功能异常、原发性移植肝无功能、多器官功能衰竭的重要原因。要寻找有效的措施来减轻肝脏的缺血再灌注损伤,提高手术的安全性,就必须

关键词：肝细胞凋亡中央静脉缺血再灌注损伤凋亡细胞手术组肝组织汇管区 ETX 显著性差异

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葡萄糖转运蛋白-1反义寡核苷酸对喉癌Hep-2细胞增殖的影响

葡萄糖转运蛋白-1反义寡核苷酸对喉癌Hep-2细胞增殖的影响

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浙江省中西医结合学会耳鼻咽喉科专业委员会第六次学术年会暨省级继续教育学习班

作者：周水洪程瑛范骏陈晓明汪审清程可佳王勤瑛俞云松浙江大学医学院附属第一医院耳鼻咽喉科浙江大学医学院附属第一医院麻醉科传染病诊治国家重点实验室浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所

目的观察反义Glut-1对喉癌Hep-2细胞增殖、Glut-1的表达情况及葡萄糖吸收的影响。方法克隆Glut-1基因,将Glut-1cDNA反向克隆到真核表达载体pcDNA3载体,构建反义Glut-1表达载体反义Glut-1pcDNA3(+)载体,稳定转染人喉癌Hep-2细胞,并通过MT... 详细信息

目的观察反义Glut-1对喉癌Hep-2细胞增殖、Glut-1的表达情况及葡萄糖吸收的影响。方法克隆Glut-1基因,将Glut-1cDNA反向克隆到真核表达载体pcDNA3载体,构建反义Glut-1表达载体反义Glut-1pcDNA3(+)载体,稳定转染人喉癌Hep-2细胞,并通过MTT法检测葡萄糖刺激的Hep-2细胞存活率及葡萄糖摄取的影响,用RT-PCR法检测Hep-2细胞的Glut-1的表达情况及用Western Blot法检测Glut-1蛋白表达情况。结果成功克隆了Glut-1基因,并构建了携带反义Glut-1基因的真核表达载体反义Glut-1pcDNA3(+)载体,将其稳定转染人喉癌Hep-2细胞,获得了稳定表达反义Glut-1的细胞系,反义Glut-1pcDNA3载体的Hep-2细胞葡萄糖的吸收明显减少;RT-PCR结果显示PCR扩增产物为479bp大小的特异性条带,反义组与对照组和空白对照组相比Glut-1扩增条带的亮度明显降低(P<0.001)。随着时间的延长Glut-1表达下降(P<0.001),但随着葡萄糖浓度的增大Glut-1表达上调(P<0.001);在转染后24h,Western Blot法检测Glut-1蛋白表达,发现相同葡萄糖刺激浓度作用,反义Glut-1转染组Glut-1蛋白水平随作用时间延长下明显下降(P<0.01),随葡萄糖浓度的增加,反义Glut-1对Glut-1蛋白水平下调作用就越明显(P<0.01)。结论反义Glut-1基因转染可以有效地抑制喉癌Hep-2细胞的Glut-1的表达及葡萄糖的吸收,抑制喉癌Hep-2细胞的生长,以Glut-1作为靶点,阻断Glut-1的表达,为一种新的喉癌治疗策略。

关键词：反义葡萄糖转运蛋白-1 基因转染喉癌

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人巨噬细胞刺激蛋白的生化特性、抗炎作用和分子机理

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生命科学 2008年第3期20卷 483-488页

作者：刘志国姚航平王明海 Health Sciences Center School of Pharmacy Texas Tech University 杭州 310003 Department of Pharmaceutical Sciences 浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所肿瘤生物学和实验治疗研究室 Amarillo 杭州 310003 USA 79106

巨噬细胞刺激蛋白(macrophage-stimulating protein,MSP),又称肝细胞生长因子样蛋白,是肝脏合成的一种具有免疫调节活性的糖蛋白。MSP以无生物学活性的单链蛋白前体的形式存在于血浆中。在炎症反应过程中,MSP前体经胰酶样丝氨酸蛋白酶... 详细信息

巨噬细胞刺激蛋白(macrophage-stimulating protein,MSP),又称肝细胞生长因子样蛋白,是肝脏合成的一种具有免疫调节活性的糖蛋白。MSP以无生物学活性的单链蛋白前体的形式存在于血浆中。在炎症反应过程中,MSP前体经胰酶样丝氨酸蛋白酶和多种凝血酶激活,成为由α/β异二聚体构成的成熟MSP。MSP通过激活巨噬细胞膜上的特异性受体酪氨酸蛋白激酶RON而发挥其双重的炎症调节功能,既促进巨噬细胞的黏附、变形、移行和吞噬作用,又抑制巨噬细胞释放的多种炎症介质,如一氧化氮(NO)、前列腺素E2和一些细胞因子,从而达到清除病原体,控制炎症反应强度和促进组织修复的目的。MSP发挥其生物学功能的分子基础是它能够调节巨噬细胞内多条信号转导通路。因此,MSP在固有免疫、适应性免疫以及自身免疫性炎症反应中具有重要的抗炎作用。采用生物和药理学方式特异地激活MSP,可能在抑制炎症反应强度和减轻组织损伤中具有潜在的临床使用价值。

关键词：巨噬细胞刺激蛋白受体型酪氨酸激酶RON 信号转导抗炎活性生物制药

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IL-18BP和IL-4共表达腺病毒基因对关节炎小鼠滑膜组织COX-2和iNOS表达的作用

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中华风湿病学杂志 2008年第9期12卷 606-609页

作者：卢忠冷建杭姚航平沈後娅王克义汪子伟卓广超杭州市第一人民医院检验科 310006 杭州市第一人民医院中心实验室 310006 浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所

目的本研究构建了共表达小鼠白细胞介素-18结合蛋白（IL-18BP）和IL-4的重组腺病毒载体（Ad mIL-18BP／mIL-4），将其用于胶原诱导型关节炎（CIA）小鼠局部关节基因治疗，以探讨对小鼠滑膜组织环氧化酶-2（COX一2）和诱导型一氧化氮合酶... 详细信息

目的本研究构建了共表达小鼠白细胞介素-18结合蛋白（IL-18BP）和IL-4的重组腺病毒载体（Ad mIL-18BP／mIL-4），将其用于胶原诱导型关节炎（CIA）小鼠局部关节基因治疗，以探讨对小鼠滑膜组织环氧化酶-2（COX一2）和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）及其诱导产物前列腺素E2（PGE2）、一氧化氮（NO）表达水平的影响。方法采用雄性的DBA-1／BOM小鼠，建立CIA的小鼠模型，经共表达小鼠IL-18BP和IL-4的重组腺病毒载体局部关节基因治疗后，分别采用半定量反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法和Westem印迹法检测滑膜组织COX-2、iNOS mRNA的表达水平和蛋白表达水平，用竞争ELISA和硝酸酶还原法检测关节滑膜液PGE：和NO的含量．并设AdLacZ组和磷酸盐缓冲液（PBS）组分别为病毒对照组和组织对照组。结果AdmIL-18BP／mIL-4治疗组滑膜组织COX-2、iNOS mRNA表达水平明显低于AdLacZ对照组（0．15vs0．42，P〈0．01；0．05vs0．77，P〈0．01）和PBS对照组（0．15vs0．65，P〈0．01；0．05vs0．64，P〈0．01）；AdmIL～18BP/mIL-4治疗组滑膜组织COX-2、iNOS的蛋白表达水平明显低于AdLacZ对照组（0．08vs0．92，P〈0.01；0．11vs1．00，P〈0.01）及PBS对照组（0．08vs0．77，P〈0．01；0．11vs0．84，P〈0．01）；AdmIL-18BP/mIL-4治疗组关节滑膜液中PGE，及NO水平明显低于AdLacZ对照组[（0．68±0．06）vs（2．58±0．21）ng／ml，P〈0.01；（23．4±2．5）vs（60．0±11．3）μmol/L，P〈0.01）和PBS对照组[（0．68±0．06）vs（2．57±0．20）ng／mL，P〈0．01；（23．4±2．5）vs（60．3±13．4）μmol／L，P〈0．01]。结论共表达小鼠IL-18BP和IL-4的重组腺病毒基因治疗能明显下调COX-2和iNOS的表达水平，减少其诱导产物PGE2、NO的合成，这将为RA的基因治疗提供新的治疗策略。

关键词：细胞因子类关节炎类风湿一氧化氮合酶基因治疗环氧化酶-2

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猴空泡病毒40核酸序列检测法的优化研究

猴空泡病毒40核酸序列检测法的优化研究

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2008年浙江省感染病、肝病学术年会

作者：葛长勇李鸿钧谢忠平孙茂盛吴南屏浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室中国医学科学院医学生物学研究所

目的:对通常使用的猴空泡病毒40(Simian vacuolating virus 40,SV40)核酸序列检测法进行优化,寻找敏感性高、特异性强、适用面广的SV40核酸序列检引物。方法:以21个SV40毒株完全基因组为基础数据,用Primer Premier 5.00软件重新设计两对... 详细信息

目的:对通常使用的猴空泡病毒40(Simian vacuolating virus 40,SV40)核酸序列检测法进行优化,寻找敏感性高、特异性强、适用面广的SV40核酸序列检引物。方法:以21个SV40毒株完全基因组为基础数据,用Primer Premier 5.00软件重新设计两对SV40 DNA检测物,用Oligo 6.71软件和DNAMAN 6.0.40软件对引物参数进行分析,将分析结果与通常使用的检测引物进行比较。用不同稀释度SV40核酸序列作模板,比较四对引物检测的敏感性。分别用无菌水、VERO细胞DNA、SV40DNA作模板检测四对引物的特异性。结果:对于21个SV40病毒株而言,优化引物对VP1和T的序列是保守的;对于接受号为J02400、NC-001669、AF316139和AF316141的四个病毒株而言,通常使用的引物对GCVP1和GCT的序列是保守的;用同一稀释度的SV40DNA作模板,引物对VP1和T的扩增效率明显高于引物对GCVP1和GCT;在特异性检测比较中,引物对VP1和T没有出现非特异性扩增条带,引物对GCVP1和GCT在100bp处出现非特异性扩增条带。结论:优化的SV40核酸序列检测法具有敏感性高、特异性强、检测面广、引物及其PCR产物序列保守等特点。

关键词：核酸序列特异性稀释度猴空泡病毒优化研究检测法

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灭活SV40致敏的猴树突状细胞的生物学特性研究

灭活SV40致敏的猴树突状细胞的生物学特性研究

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2008年浙江省感染病、肝病学术年会

作者：葛长勇李鸿钧孙茂盛冯婷婷靳昌忠姚航平吴南屏浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室中国医学科学院医学生物学研究所

目的:探讨灭活SV40致敏的猴外周血来源的树突状细胞（dendritic cells,DC）的生物学特性。方法:采用密度梯度离心法从恒河猴外周血分离出单个核细胞,然后采用玻璃黏附法分离淋巴细胞和单核细胞,使用重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（... 详细信息

目的:探讨灭活SV40致敏的猴外周血来源的树突状细胞（dendritic cells,DC）的生物学特性。方法:采用密度梯度离心法从恒河猴外周血分离出单个核细胞,然后采用玻璃黏附法分离淋巴细胞和单核细胞,使用重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（Recombinant Human granulocyte-macrophage colony stimulating factor,rhGM-CSF）扩增单核细胞,使用重组人白细胞介素4（Recombinant Human Interleukin-4,rhIL-4）诱导单核细胞向树突状细胞方向分化,使用SV40全病毒灭活疫苗作为冲击抗原,使用重组人肿瘤坏死因子（Recombinant Human Tumor Necrosis Factor,rhTNFα）促其成熟。分别于普通光学显微镜、相差显微镜、扫描电镜下观察细胞形态。使用流式细胞术分析细胞表型特征。使用H-TdR掺人法测定混合淋巴细胞反应（mixed lymphocyte reaction,MLR）中DC刺激自体及同种异体T细胞增殖的效应。使用辣根过氧化酶（HRP）内吞实验检测其群体内吞能力。结果:使用hGM-CSF可以有效促进猴DC前体的增殖,细胞生长曲线显示,细胞增殖在第8天达到增殖高峰。使用rhIL-4可以成功诱导猴DC的分化。光镜下可见大小形态各异的树突状细胞。扫描电镜下可见吞噬SV40抗原后的形成的大量面纱DC的形态。细胞吞噬能力测定显示,细胞在第6天吞噬能力最强。MLR显示体外扩增诱导的DC能够有效刺激T细胞增殖。流式细胞术表型分析显示,表达树突状细胞CD1a特异性标志的细胞比例可达77.7%,表达树突状细胞CD83成熟标志的细胞比例可达56.5%。rhTNFα具有促进猴DC成熟的作用。结论:rhGM-CSF、rhIL-4和rhTNFα可用于猴DC的扩增、诱导和成熟刺激。灭活SV40致敏的猴外周血来源的DC在MLR中能够有效刺激T细胞增殖。体外灭活SV40抗原冲击的DC多表现为循环DC的形态。

关键词：树突状细胞外周血生物学特性研究

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人免疫缺陷病毒感染者辅助性T淋巴细胞因子变化及机会性感染的临床观察

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中华预防医学杂志 2007年第1期41卷 42-45页

作者：饶和平冯磊李丹 Bader A 吴南屏衢州学院医学系浙江324000 浙江大学医学院基础系上海传染病医院感染科德国鲁尔大学Josef医院艾滋病研究中心浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点研究室

目的观察人免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)感染者不同时期及其机会性感染者血清辅助性 T 淋巴细胞(helper T-Lymphoeytes,Th)细胞因子水平的变化规律。方法正常对照组17例。研究组 HIV 阳性85例(A 期17例,B 期29例,C ... 详细信息

目的观察人免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)感染者不同时期及其机会性感染者血清辅助性 T 淋巴细胞(helper T-Lymphoeytes,Th)细胞因子水平的变化规律。方法正常对照组17例。研究组 HIV 阳性85例(A 期17例,B 期29例,C 期39例),其中机会性感染31例。用流式细胞仪检测血 CD_4^+T 利 CD_8^+T 细胞,用酶联免疫吸附技术(enzyme linked immunosorbentassay,ELISA)检测血清白介素-2(interleukin-2,IL-2)、γ-干扰素(interferon-γ,IFN-γ)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)、白介素-10(interleukin-10,IL-10),数据采用 SPSS11.0软件进行统计。结果研究组 CD_4^+细胞(361.85±230.61)10~6/L 低于对照组(772.41±161.56)10~6/L(t=6.992,P<0.01),IL-2(61.82±63.59)pg/ml 低于对照组(11 1.25±66.14)pg/ml(t=2.907,P<0.01),研究组 CD_8^+T细胞(713.36±317.59)10~6/L 高于对照组(583.24±96.28)10~6/L(t=3.127,P<0.01)、IL-10(1362.70±869.49)pg/ml 高于对照组(818.54±276.22)pg/ml(t=4.704,P<0.01)和 IL-6(1883.14±1058.61)pg/ml 高于对照组(1208.52±745.36)pg/ml(t=2.502,P<0.05)。随着病程进展,IL-2逐渐下降,C 期(51.72±62.28)pg/ml 和 B 期(69.02±62.77)pg/ml 分别低于对照组,而 IL-6、IL-10逐渐上升,C 期的 IL-6(2040.27±1078.95)pg/ml、IL-10(1472.10±982.03)pg/ml 均高于对照组;B期的 IL-10(1347.35±780.95)pg/ml 高于对照组(818.54±276.22)pg/ml。机会性感染组 IL-6(2236.24±1052.42)pg/ml 高于无机会性感染组(1680.43±1017.05)pg/ml(t=2.395,P<0.05)。结论 HIV 感染者应动态检测血清 IL-2、IL-6、IL-10的变化,同时可考虑上调 IL-2和下调 IL-6、IL-10,调整机体 TH1/TH2细胞的平衡,以延缓疾病进展。

关键词： HIV感染 T淋巴细胞辅助诱导机会性致病菌感染观察

来源：评论

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^(18)氟脱氧葡萄糖代谢功能图像在头颈部肿瘤诊断中的价值及机理研究

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中华医学杂志 2007年第2期87卷 109-113页

作者：周水洪吴求亮汪审清范骏李林法浙江大学医学院附属第一医院耳鼻咽喉科杭州310003 浙江大学医学院附属第一医院口腔科杭州310003 浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所杭州310003 浙江大学医学院附属第一医院同位素室杭州10003

目的研究^(18)氟脱氧葡萄糖(^(18)F-FDG)双探头符合线路显像和同机 CT 融合技术在头颈部肿瘤诊治中的价值及机理。方法用^(18)F-FDG 双探头符合线路显像(DHTC)和同机 CT 融合技术检查25例头颈部肿瘤,并与 CT/MRI 结果相比较。另收集38例... 详细信息

目的研究^(18)氟脱氧葡萄糖(^(18)F-FDG)双探头符合线路显像和同机 CT 融合技术在头颈部肿瘤诊治中的价值及机理。方法用^(18)F-FDG 双探头符合线路显像(DHTC)和同机 CT 融合技术检查25例头颈部肿瘤,并与 CT/MRI 结果相比较。另收集38例[20例术前行单光子发射型计算机断层(SPECT)/CT 检查]耳鼻咽喉科、口腔外科住院的头颈部癌的新鲜组织标本,行逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学方法检测。结果 SPECT/CT 诊断灵敏度、特异性和准确性分别为100.0%、87.5%、96.0%;CT/MRI 诊断灵敏度、特异性和准确性分别为64.7%、50.0%、60.0%。在同部位 SPECT/CT 与 CT/MRI 解剖显像比较中,对4例颈部转移淋巴结癌的原发灶及4例头颈部肿块的良恶性的判断,解剖显像不能作出正确诊断,而符合线路显像及图像融合均能作出正确判断。RT-PCR 及免疫组织化学结果:葡萄糖转运蛋白-1(Glut-1)、Glut-3基因在头颈部癌中表达明显高于正常组织、癌旁组织(均 P<0.05);Glut-1蛋白在头颈部癌的表达为78.9%,Glut-3蛋白在正常组织、癌旁组织、头颈部癌中均无表达。结论符合线路显像及图像融合可作为对头颈部肿瘤良恶性鉴别及肿瘤临床分期和分级、鉴别肿瘤经手术或放射治疗后复发、不明原发灶肿瘤检出方面的一种前瞻性检查工具;Glut-1、Glut-3异常表达与头颈部癌的葡萄糖吸收增高有关。

关键词：发射型计算机体层摄影术氟脱氯葡萄糖F18 单糖转运蛋白质类头颈部肿瘤

来源：评论

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16S rRNA甲基化酶基因在鲍曼不动杆菌中的分布

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中华传染病杂志 2007年第10期25卷 593-596页

作者：潘韵峰周华周志慧俞云松陈亚岗李兰娟卫生部传染病重点实验室浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所

目的调查国内6个省市25家医院临床分离鲍曼不动杆菌中介导高水平氨基糖苷类抗生素耐药的16S rRNA甲基化酶基因armA、rmtA、rmtB的分布情况。方法收集2004年12月—2005年12月国内6省市8家省级医院、浙江省11个地区17家市级医院临床分离的... 详细信息

目的调查国内6个省市25家医院临床分离鲍曼不动杆菌中介导高水平氨基糖苷类抗生素耐药的16S rRNA甲基化酶基因armA、rmtA、rmtB的分布情况。方法收集2004年12月—2005年12月国内6省市8家省级医院、浙江省11个地区17家市级医院临床分离的700株鲍曼不动杆菌。琼脂稀释法测定其对妥布霉素、阿米卡星、庆大霉素、异帕米星、奈替米星5种氨基糖苷类抗生素的最低抑菌浓度(MIC)值;PCR筛选三种甲基化酶基因armA、rmtA、rmtB,克隆测序明确基因型;脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析菌株的同源性;质粒抽提、接合试验及Southern杂交确定armA基因定位。结果对妥布霉素、阿米卡星、庆大霉素、异帕米星、奈替米星的耐药率分别为67.7%、70.9%、75.7%、63.5%和71.5%。对5种氨基糖苷类抗生素全部耐药的菌株有377株,其中334株检出armA基因;未发现rmtA、rmtB阳性菌株。armA基因阳性菌株PFGE分型以A、B、C为主。碱裂解法反复抽提未得到质粒,多次接合试验未成功;Southern杂交显示,armA基因分别位于克隆A、B、C菌株染色体ApaⅠ酶切PFGE约220、300、220kb大小的PFGE片段上。结论16S rRNA甲基化酶基因armA在鲍曼不动杆菌中广泛存在,armA基因位于鲍曼不动杆菌的染色体上。

关键词：抗菌药 RNA 核糖体 16S tRNA甲基转移酶类鲍氏不动杆菌电泳凝胶脉冲场

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