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作者：黄建荣袁雯霞浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室 (310003)

非生物型人工肝包括血液透析、血液滤过、血液灌流、血浆胆红素吸附、血浆置换等方法。近年来人工肝技术尤其是非生物型人工肝治疗在临床上逐渐普及，明显降低了肝衰竭患者的病死率。但由于我国血浆、白蛋白供给日益紧张，在一定程度上... 详细信息

非生物型人工肝包括血液透析、血液滤过、血液灌流、血浆胆红素吸附、血浆置换等方法。近年来人工肝技术尤其是非生物型人工肝治疗在临床上逐渐普及，明显降低了肝衰竭患者的病死率。但由于我国血浆、白蛋白供给日益紧张，在一定程度上限制了临床上人工肝治疗的开展。本文将针对非生物型人工肝治疗中如何应对血浆、白蛋白等来源困难的策略进行探讨。笔者认为应对目前血浆、白蛋白等来源困难可以从两大方面努力，其一是大力宣传、推广义务献血及加快人造血制品的研究，以增加临床上血浆和白蛋白供应量，其二是改进临床上人工肝治疗方法、治疗技术，以节约血浆和白蛋白应用量。本文主要讲述第二方面内容。

关键词：非生物型人工肝血浆白蛋白肝脏疾病

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恒河猴树突状细胞生物学特性的初步研究

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细胞生物学杂志 2009年第4期31卷 563-568页

作者：葛长勇李鸿钧谢天宏张光明易山孙茂盛吴南屏浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室杭州310003 中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所昆明650118

树突状细胞(dendritic cell,DC)在HIV初次感染和潜伏感染中发挥着关键作用。恒河猴的生物学性质与人类非常接近,所以恒河猴是研究HIV感染的常用动物模型。以恒河猴为实验动物进行DC的研究首先需要对恒河猴DC的生物学性质有初步的了解。... 详细信息

树突状细胞(dendritic cell,DC)在HIV初次感染和潜伏感染中发挥着关键作用。恒河猴的生物学性质与人类非常接近,所以恒河猴是研究HIV感染的常用动物模型。以恒河猴为实验动物进行DC的研究首先需要对恒河猴DC的生物学性质有初步的了解。本研究从健康恒河猴外周血中分离单个核细胞,用rhGM-CSF、rhIL-4和rhTNF-α等细胞因子组合体外扩增诱导恒河猴DC,成功诱导出具有典型形态特征的DC,所获DC高表达MHCII类分子和CD86共刺激分子,在混合淋巴细胞反应中能有效刺激T细胞增殖,培养至第9天表达CD1a的细胞比例为60.5%±2.0%,表达CD83的比例为43.8%±1.5%,辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)内吞实验说明诱导的猴DC在第6天吞噬能力最强。本研究为以恒河猴为实验动物进行DC的研究打下了基础。

关键词：恒河猴树突状细胞生物学特性

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加强肝衰竭发病机制和人工肝治疗的研究

加强肝衰竭发病机制和人工肝治疗的研究

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全国人工肝专家论坛

作者：李兰娟 310003 杭州浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室

重型病毒性肝炎(肝衰竭)严重危害我国人民的健康和生命，由于肝脏组织发生大块或亚大块坏死，乙型重型肝炎患者病情危笃，进展迅速，预后极差，病死率高达70[％]，是导致乙型肝炎患者死亡的主要原因。重型肝炎发病机制不明，缺乏敏感、... 详细信息

重型病毒性肝炎(肝衰竭)严重危害我国人民的健康和生命，由于肝脏组织发生大块或亚大块坏死，乙型重型肝炎患者病情危笃，进展迅速，预后极差，病死率高达70[％]，是导致乙型肝炎患者死亡的主要原因。重型肝炎发病机制不明，缺乏敏感、可靠的临床评估体系和特异、有效的治疗药物，是难以早期诊断、早期治疗和难以治愈的根本原因。本文就肝衰竭和人工肝的研究进展进行了综述。

关键词：肝功能衰竭重型病毒性肝炎人工肝治疗肝细胞代谢组学发病机制

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非生物型人工肝治疗应对血浆和白蛋白来源困难的策略

非生物型人工肝治疗应对血浆和白蛋白来源困难的策略

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全国人工肝专家论坛

作者：黄建荣袁雯霞 310003 杭州浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室

近年来人工肝技术尤其是非生物型人工肝治疗在临床上逐渐普及,明显降低了肝衰竭患者的病死率。但由于我国血浆、白蛋白供给日益紧张，在一定程度上限制了临床上人工肝治疗的开展。本文现针对非生物型人工肝治疗中如何应对血浆、白蛋白... 详细信息

近年来人工肝技术尤其是非生物型人工肝治疗在临床上逐渐普及,明显降低了肝衰竭患者的病死率。但由于我国血浆、白蛋白供给日益紧张，在一定程度上限制了临床上人工肝治疗的开展。本文现针对非生物型人工肝治疗中如何应对血浆、白蛋白等来源困难的策略进行探讨。应对目前血浆、白蛋白等来源困难可以从两大方面努力，其一是大力宣传、推广义务献血及加快人造血制品的研究，以增加临床上血浆和白蛋白供应量,其二是改进临床上人工肝治疗方法、治疗技术,以节约血浆和白蛋白应用量。

关键词：人工肝治疗肝衰竭血清白蛋白血浆人造血制品疗效评价

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血液透析患者HCV感染不同筛查方法的比较研究

血液透析患者HCV感染不同筛查方法的比较研究

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2009年浙江省检验医学学术年会

作者：楼滨谭亚君范剑张杰陈瑜浙江大学医学院附属第一医院检验中心浙江大学传染病诊治国家重点实验室

HCV感染是一个全球化的健康问题,普通人群平均感染率达3%,我国血清流行病学调查资料显示一般人群HCV感染率为2.5%～4.9%。HCV主要经血液传播,慢性肾功能衰竭(CRF)患者因输血和长期血液透析维持治疗而成为感染的高危人群。尽管对血液透... 详细信息

HCV感染是一个全球化的健康问题,普通人群平均感染率达3%,我国血清流行病学调查资料显示一般人群HCV感染率为2.5%～4.9%。HCV主要经血液传播,慢性肾功能衰竭(CRF)患者因输血和长期血液透析维持治疗而成为感染的高危人群。尽管对血液透析中心HCV传播采取了严格的预防措施,但感染率仍显著高于普通人群。血液透析人群的HCV高流行率可能与感染表现隐匿,早期诊断较困难有关。目

关键词： HCV 感染率联合检测筛查方法慢性肾功能衰竭检出率 RNA 核心抗原特异性抗体抗体检测比较研究

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可逆性永生化人肝细胞移植治疗CBDL-肝衰竭大鼠的研究

可逆性永生化人肝细胞移植治疗CBDL-肝衰竭大鼠的研究

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第五届国际暨全国肝衰竭与人工肝学术会议

作者：潘小平杜维波喻成波吕国良虞晓鹏曹红翠盛国平李君陈瑜李兰娟浙江大学医学院附属第一医院感染病中心传染病诊治国家染病重点实验室

目的基于Cre/LoxP重组系统的原理;采用细胞永生化技术,建立可逆性永生化的肝细胞系,为生物人工肝、肝细胞移植等治疗肝衰竭提供理想的细胞源。方法将含有SV40 LT基因的可逆性重组逆转录病毒载体转染到原代人肝细胞,建立可逆性永生化人... 详细信息

目的基于Cre/LoxP重组系统的原理;采用细胞永生化技术,建立可逆性永生化的肝细胞系,为生物人工肝、肝细胞移植等治疗肝衰竭提供理想的细胞源。方法将含有SV40 LT基因的可逆性重组逆转录病毒载体转染到原代人肝细胞,建立可逆性永生化人肝细胞系;并对该细胞系的生物学特性及功能进行评价;以及进行可逆性人肝细胞移植治疗总胆管结扎(CBDL)-肝衰竭大鼠的研究。结果可逆性永生化人肝细胞系贴壁生长,呈椭圆形、梭形;RT-PCR结果显示:该细胞具有表达ALB、GST、HBCF-x等肝细胞的生物学功能,以及具有肝细胞色素P450功能。体外药物代谢的实验结果显示:该细胞具有安定转化、代谢利多卡因等功能。可逆性永生化人肝细胞移植治疗CBDL-肝衰竭大鼠的实验结果显示:与CBDL-肝衰竭模型组比较,可逆性永生化人肝细胞移植治疗具有明显改善大鼠肝功能的指标,以及延长大鼠的生存时间。结论可逆性永生化人肝细胞系具有原代人肝细胞的生物学特性和功能、以及肝细胞色素P450酶功能,可逆性永生化人肝细胞移植具有明显改善CBDL-肝衰竭大鼠的肝功能指标,以及延长肝衰竭大鼠的生存时间;将为生物人工肝、肝细胞移植等治疗肝衰竭提供了理想的细胞源。

关键词：永生化人肝细胞肝衰竭移植治疗可逆性

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大肠埃希氏菌性脑膜炎的脑脊液早期细菌动力学变化研究

大肠埃希氏菌性脑膜炎的脑脊液早期细菌动力学变化研究

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第二届传染病诊治高峰论坛暨2009年浙江省感染病、肝病学术年会

作者：徐凯进王华英居红珍陈云波魏泽庆李永涛盛吉芳李兰娟浙江大学医学院附属第一医院感染科传染病诊治国家重点实验室

随着医疗技术的进步,抗生素的广泛应用,大肠埃希氏菌(***)性脑膜炎的发病率已明显下降,目前为10/10万,但***性脑膜炎仍然是一种危及生命的凶险疾病,一旦发病就有>5%的死亡率,有10%的病人会留下永久性的中枢神经损伤。在***性脑膜炎... 详细信息

随着医疗技术的进步,抗生素的广泛应用,大肠埃希氏菌(***)性脑膜炎的发病率已明显下降,目前为10/10万,但***性脑膜炎仍然是一种危及生命的凶险疾病,一旦发病就有>5%的死亡率,有10%的病人会留下永久性的中枢神经损伤。在***性脑膜炎的救治过程中,了解脑脊液(Cerebrospinal fluid,CSF)中细菌载量的变化规律即细菌动力学,将为医生对疾病的抗生素疗效评价和预后判断提供帮

关键词：细菌动力学模型组治疗组细菌载量外周血白细胞计数大肠埃希氏菌小脑延髓池 CSF

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人骨髓间充质干细胞体外向肝样细胞的诱导分化

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温州医学院学报 2009年第5期39卷 418-421,425页

作者：马兆文吴炜陈瑜温州医学院检验医学院浙江温州325035 浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室浙江杭州310003

目的:研究人骨髓来源的间充质干细胞(human bone marrow derived mesenchymal stemcells,hBM-MSCs)在肝细胞生长因子(HGF)、成纤维细胞生长因子-4(FGF-4)、抑瘤素M(OSM)诱导下,体外向肝样细胞的诱导分化。方法:通过密度梯度离心和贴壁... 详细信息

目的:研究人骨髓来源的间充质干细胞(human bone marrow derived mesenchymal stemcells,hBM-MSCs)在肝细胞生长因子(HGF)、成纤维细胞生长因子-4(FGF-4)、抑瘤素M(OSM)诱导下,体外向肝样细胞的诱导分化。方法:通过密度梯度离心和贴壁培养法获得hBM-MSCs,分离的hBM-MSCs扩增传至第6代,流式细胞仪检测hBM-MSCs表面CD34、CD45、CD105、CD166表达。第6代hBM-MSCs生长达100%融合时采用两步法对hBM-MSCs进行诱导分化。第1～第14天采用IMDM诱导培养基(含2%FCS、20ng/mL HGF、20ng/mL FGF-4),第15～第21天在上述培养基中加OSM(10ng/mL),促进诱导细胞的成熟,同时收集第0、第7、第14、第21天培养上清液标本,ELISA法测ALB浓度。诱导培养21d后采用RT-PCR、免疫荧光技术检测诱导后肝细胞特异标志CK18、ALB的表达,PAS染色检测诱导MSCs糖原储存。结果:传至第6代的hBM-MSCsCD34、CD45表达阴性,CD105、CD166表达阳性。在细胞因子的作用下,经过21d的体外培养,hBM-MSCs形态发生变化,由长梭形变为多边形、类圆形,并具有肝细胞特异的表型和功能。RT-PCR可检测到CK18、ALB表达,免疫荧光可检测到诱导后细胞内CK18、ALB,培养上清中有ALB的分泌,且诱导后的肝样细胞内有糖原储存。结论:hBM-MSCs体外能转化为具有肝功能的肝样细胞。

关键词：间充质干细胞人骨髓间充质干细胞肝样细胞细胞因子

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染料法实时荧光PCR检测慢性乙型重型肝炎患者外周血克隆特异性αβT淋巴细胞

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中华微生物学和免疫学杂志 2009年第11期29卷 986-986页

作者：杨介钻何剑琴邵凤霖王建国盛吉芳李兰娟浙江大学医学院附属第一医院传染科传染病诊治国家重点实验室杭州310003

以染料法（SYBR GreenⅠ）实时荧光PCR并结合基因熔解曲线峰形来监测慢性乙型重型肝炎（慢乙重肝）患者（健康献血者为对照）外周血T细胞受体β链基因（TCRBV）克隆特异性扩增情况，从而可能反映慢乙重肝患者对HBV感染的免疫应答状态。

关键词：实时荧光PCR检测慢性乙型重型肝炎重型肝炎患者外周血染料法 T淋巴细胞异性克隆

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白细胞介素-1O启动子区域627位基因多态性与乙型肝炎肝硬化的关系

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中华临床感染病杂志 2009年第4期2卷 205-208页

作者：范顺富杨益大浙江省金华市中心医院感染科 321000 浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室

目的研究IL-10启动子区627位点多态性与乙型肝炎肝硬化的关系。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR—PFLP）等技术检测220例乙型肝炎肝硬化患者及200名健康对照者IL—10启动子627位等位基因及基因型频率的分布情况，分析... 详细信息

目的研究IL-10启动子区627位点多态性与乙型肝炎肝硬化的关系。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR—PFLP）等技术检测220例乙型肝炎肝硬化患者及200名健康对照者IL—10启动子627位等位基因及基因型频率的分布情况，分析其与肝硬化发病风险的相关性。结果IL—10启动子627位点AA和CA基因型及等位基因A在乙型肝炎肝硬化中的分布明显高于对照组（x^2=7．46、5．72和13．78，P值〈0．01或0．05）。结论IL-10启动子627位点基因多态性与乙型肝炎肝硬化相关。

关键词：肝炎乙型肝硬化白细胞介素-10启动子 627位点基因多态性

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