检索结果-内蒙古大学图书馆

中华检验医学杂志 2010年第10期33卷 913-917页

作者：楼滨张杰崔大伟赵红喜朱勤玮陈瑜浙江大学医学院附属第一医院检验中心浙江大学传染病诊治国家重点实验室杭州310003

建立一种基于纳米磁珠为介质的核酸提取和富集方法,提高国产HBV核酸检测试剂的分析灵敏度,用于痕量HBV DNA的测定.方法选择经抗病毒治疗HBV DNA浓度≤1×104 IU/ml的乙型肝炎患者血清标本50份.标准品采用WHO HBV DNA标准品.通过纳... 详细信息

建立一种基于纳米磁珠为介质的核酸提取和富集方法,提高国产HBV核酸检测试剂的分析灵敏度,用于痕量HBV DNA的测定.方法选择经抗病毒治疗HBV DNA浓度≤1×104 IU/ml的乙型肝炎患者血清标本50份.标准品采用WHO HBV DNA标准品.通过纳米磁珠实现对HBV核酸的吸附浓缩,提高提取的HBV核酸模板的浓度.以瑞士罗氏公司HBV DNA检测试剂和4种国产试剂原有的核酸提取检测方法为对照,评价该方法对国产核酸检测试剂的改进效果.结果纳米磁珠核酸提取方法与国产试剂结合后,国产试剂的分析灵敏度分别达到10和50 IU/ml,与罗氏试剂的分析灵敏度12 IU/ml基本相当.4种国产试剂盒内自带提取试剂检测临床乙型肝炎患者血清中痕量HBV DNA阳性检出率分别为64%（32份）、56%（28份）、62%（31份）和58%（29份）,与罗氏试剂阳性检出率88%比较,差异具有统计学意义（x2值分别为7.895、12.698、9.013、11.416,P均＜0.05）.纳米磁珠核酸提取方法与国产试剂结合后,阳性检出率分别为88%（44份）、88%（44份）、88%（44份）和86%（43份）,与罗氏试剂（88%）比较,阳性检出率差异无统计学意义（x2值分别为0.000、0.000、0.000、0.088,P均＞0.05）.HBV核酸浓度为101～103 IU/ml时,病毒核酸浓度对数值与循环阈值呈负相关,但是比103～106 IU/ml浓度范围的相关性下降.结论以纳米磁珠为介质建立的核酸提取方法可显著提高国产HBV DNA检测的分析灵敏度,对监测乙型肝炎患者血液中痕量HBV DNA含量具有重要意义.

关键词：乙型肝炎病毒纳米磁珠核酸检测分析灵敏度

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HBV感染标志物检测：过去、现在及展望

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中华检验医学杂志 2010年第2期33卷 189-192页

作者：陈瑜浙江大学医学院附属第一医院检验科传染病诊治国家重点实验室杭州310003

一、历史回顾病毒性肝炎是一种古老的疾病，流行记载可追溯至公元前五世纪。1883年德国不来梅1289名造船工人，接种了由人淋巴结制备的牛痘疫苗，数周至数月后有15％出现了黄疸，这可能是第一次记录到乙型肝炎的流行。在20世纪40年代，... 详细信息

一、历史回顾病毒性肝炎是一种古老的疾病，流行记载可追溯至公元前五世纪。1883年德国不来梅1289名造船工人，接种了由人淋巴结制备的牛痘疫苗，数周至数月后有15％出现了黄疸，这可能是第一次记录到乙型肝炎的流行。在20世纪40年代，根据流行病学的明显差别，将病毒性肝炎分为两型：传染性肝炎和血清性肝炎。

关键词：标志物检测 HBV感染病毒性肝炎传染性肝炎牛痘疫苗人淋巴结乙型肝炎流行病学

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MicroRNA-338与靶蛋白eiF4E3的相互作用研究

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浙江大学学报（医学版） 2010年第6期39卷 583-588页

作者：何谦益彭国平刘伟霞罗本燕浙江大学医学院附属第一医院神经内科浙江杭州310003 浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室浙江杭州310003

目的:分析脑缺血再灌注损伤中MicroRNA-338的关键靶蛋白,并探讨MicroRNA调控其靶蛋白的作用及影响因素。方法:采用生物信息学软件预测microRNA-338的可能靶蛋白,根据所预测靶蛋白的mRNA3′UTR二级结构(RNAstructure 4.6软件预测)及其在... 详细信息

目的:分析脑缺血再灌注损伤中MicroRNA-338的关键靶蛋白,并探讨MicroRNA调控其靶蛋白的作用及影响因素。方法:采用生物信息学软件预测microRNA-338的可能靶蛋白,根据所预测靶蛋白的mRNA3′UTR二级结构(RNAstructure 4.6软件预测)及其在脑缺血再灌注损伤中的作用,确定关键靶蛋白。通过双荧光酶报告系统检验microRNA-338与靶蛋白3′UTR的相互识别;采用Western blot检测实验组与对照组eiF4E3的表达变化。结果:eiF4E3可能是microRNA-338的关键靶蛋白,且其与microRNA-338识别的局部RNA二级结构保持不变。细胞荧光检测结果显示,萤火虫荧光在实验组的表达较对照组显著上升(P<0.01);而海肾荧光在实验组的表达与对照组相比较,差异无统计学意义(P>0.05)。Western blot显示,实验组和对照组eiF4E3的表达无并无显著性差异(P>0.05)。结论:microRNA-338可以识别eiF4E3 mRNA的3′UTR,但对eiF4E3的表达水平并无显著影响。在microRNA识别其目的靶蛋白mRNA后存在影响microRNA与靶蛋白mRNA相互作用的因素,而这种因素很可能与mRNA的三级结构有关。

关键词：靶蛋白相互作用 microRNA 脑缺血再灌注损伤实验组对照组表达 mRNA 细胞荧光相互识别软件预测 RNA二级结构 Western 无显著性差异 MicroRNA调控统计学意义生物信息学 UTR structure 影响因素

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髓系细胞触发受体-1真核表达质粒的构建及鉴定

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浙江大学学报（医学版） 2010年第5期39卷 477-482页

作者：胡艳舒力琪陈齐兴姚航平浙江大学医学院附属第一医院麻醉科浙江杭州310003 杭州外国语学校浙江杭州310023 浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所传染病诊治国家重点实验室浙江杭州310003

目的:构建髓系细胞触发受体-1(TREM-1)的真核表达质粒。方法:利用RT-PCR从人外周血总RNA中扩增TREM-1基因的全长cDNA,插入克隆载体pUCm-T,BamHI和Pst I,酶切后将目的片段插入真核表达载体pEGFP-C3,构建含有TREM-1的重组质粒pEGFP-TREM-1... 详细信息

目的:构建髓系细胞触发受体-1(TREM-1)的真核表达质粒。方法:利用RT-PCR从人外周血总RNA中扩增TREM-1基因的全长cDNA,插入克隆载体pUCm-T,BamHI和Pst I,酶切后将目的片段插入真核表达载体pEGFP-C3,构建含有TREM-1的重组质粒pEGFP-TREM-1,转染293细胞,用荧光显微镜观察、Western-blot鉴定蛋白表达。将pEGFP-TREM-1重组质粒转染THP-1细胞,100 ng/ml LPS刺激24 h后,半定量RT-PCR检测TNF-α和IL-1β基因的mRNA水平。结果:经酶切和基因测序证实,克隆的基因片段为TREM-1基因;经转染的293细胞在荧光显微镜下可见荧光,并能表达TREM-1蛋白;重组TREM-1蛋白具有生物学活性,能增强TNF-α和IL-1β基因的mRNA水平。结论:成功构建了能够表达TREM-1的真核表达质粒pEGFP-C3-TREM-1,为进一步研究该基因的功能奠定了实验基础。

关键词：受体,免疫/生物合成膜糖蛋白类/遗传学重组,遗传真核表达髓系细胞触发受体-1

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中国部分地区铜绿假单胞菌耐药性及主要β内酰胺酶基因型分布

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中华传染病杂志 2010年第10期28卷 577-581页

作者：周志慧吕芳芳周建英俞云松沈萍魏泽庆瞿婷婷浙江大学医学院附属第一医院感染科传染病诊治国家重点实验室杭州310003

目的了解中国各地区铜绿假单胞菌对常用抗菌药物的耐药情况及其主要β内酰胺酶基因型的分布.方法收集中国16个城市28家医院2006年7月至2007年7月临床分离的铜绿假单胞菌645株.采用Etest法或Kirby-Bauer纸片扩散法测定其对11种常用抗... 详细信息

目的了解中国各地区铜绿假单胞菌对常用抗菌药物的耐药情况及其主要β内酰胺酶基因型的分布.方法收集中国16个城市28家医院2006年7月至2007年7月临床分离的铜绿假单胞菌645株.采用Etest法或Kirby-Bauer纸片扩散法测定其对11种常用抗菌药物的敏感性,应用PCR扩增及序列分析确定所有菌株TEM、SHV、CTX-M、OXA等β内酰胺酶的基因型.统计学处理采用SPSS 11.0软件.结果 645株铜绿假单胞菌对11种抗菌药物的耐药率高,仅对阿米卡星及美罗培南的耐药率＜30%.其中对亚胺培南和（或）美罗培南不敏感的菌株为275株,占42.64%,多重耐药铜绿假单胞菌368株,占57.05%,对所检测抗菌药物全部耐药的铜绿假单胞菌菌株为20株,占3.10%.从基因型分布情况来看,阳性率最高的为OXA-10群共51株,其次CARB型37株,TEM型36株,PER型35株,CTX-M型11株,VEB型9株,SHV型5株,金属酶基因型阳性的24株,GES基因型1株,未检测到质粒介导的AmpC酶及其他碳青霉烯酶基因型.并在铜绿假单胞菌中发现了CTX-M-13、CTX-M-14、CTX-M-15、CTX-M-3基因型的超广谱β内酰胺酶基因.结论中国28家医院临床分离的铜绿假单胞菌耐药情况比较严重.β内酰胺酶基因型以OXA-10及PSE-1为主.在对碳青霉烯类抗菌药物不敏感的或敏感的铜绿假单胞菌中,β内酰胺酶基因型分布也有所不同.

关键词：假单胞菌,铜绿抗药性多种细菌噻烯霉素类抗菌药 β内酰胺酶类基因型

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HIV感染疾病进展的预测指标

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中华传染病杂志 2010年第10期28卷 636-640页

作者：靳昌忠冯磊吴南屏浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室杭州310003 浙江大学医学院基础医学系

HIV感染不同的个体疾病进展的速度不同，可将HIV感染分为快速进展、典型（中度）进展以及长期不进展3类。70%～80％的HIV感染者表现为典型进展，在HIV感染的6～10年内逐渐出现HIVRNA水平升高，CD4^＋T细胞数量下降，以及艾滋病相关的疾... 详细信息

HIV感染不同的个体疾病进展的速度不同，可将HIV感染分为快速进展、典型（中度）进展以及长期不进展3类。70%～80％的HIV感染者表现为典型进展，在HIV感染的6～10年内逐渐出现HIVRNA水平升高，CD4^＋T细胞数量下降，以及艾滋病相关的疾病。10％～15％的HIV感染者是快速进展型，在感染后几年内就出现CD4^＋T细胞数量快速下降以及艾滋病相关事件。

关键词： HIV感染者疾病进展预测指标 CD4^+T细胞 HIVRNA 快速进展型数量下降相关事件

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CD137L在HBsAg DNA疫苗诱导小鼠细胞免疫应答中的佐剂效应

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浙江大学学报（医学版） 2010年第4期39卷 370-377页

作者：江虹黄茵史丽云吴炜蔡玲斐贾红宇钟石根杭州师范大学基础医学部免疫学教研室浙江杭州310036 浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所传染病诊治国家重点实验室浙江杭州310003

目的:研究共刺激分子CD137L重组质粒对HBsAg DNA疫苗诱导小鼠细胞免疫应答和回忆反应的佐剂作用。方法:将小鼠CD137L真核表达载体(pcD137L)体外转染NIH3T3细胞,RT-PCR、流式细胞仪和免疫荧光法分别检测CD137L mRNA和蛋白的表达;pcD137L... 详细信息

目的:研究共刺激分子CD137L重组质粒对HBsAg DNA疫苗诱导小鼠细胞免疫应答和回忆反应的佐剂作用。方法:将小鼠CD137L真核表达载体(pcD137L)体外转染NIH3T3细胞,RT-PCR、流式细胞仪和免疫荧光法分别检测CD137L mRNA和蛋白的表达;pcD137L与HBsAg DNA疫苗(pcDS)通过肌肉注射联合免疫BALB/c小鼠,LDH释放法测定体外脾细胞特异性CTL杀伤活性;流式细胞仪分析小鼠脾脏CD8+记忆T细胞数量;流式细胞仪检测CD8+T细胞及淋巴细胞中IFN-γ和IL-4的表达水平。结果:重组质粒pcD137L在NIH3T3细胞中获得有效表达。与pcDS单独免疫组比较:免疫后1周,pcDS+pcD137L免疫组能诱导更强的HBsAg特异性CTL杀伤活性(P<0.05);免疫后1周和12周,pcDS+pcD137L免疫组CD8+T细胞CD44high和CD127表达水平均显著增高(P<0.05或P<0.01);免疫后1周、12周和13周(即再次给予pcDS刺激后1周),pcDS+pcD137L免疫组分别明显上调CD8+T细胞和淋巴细胞中IFN-γ产生细胞的百分比,差异有显著意义(均P<0.05)。结论:共刺激分子CD137L能显著增强HBsAg DNA疫苗诱导的Tc1(I型)细胞免疫、特异性CTL应答及回忆反应,是诱导HBV特异性T细胞应答的有效佐剂。

关键词： DNA,病毒/免疫学共刺激分子 CD137L 乙型肝炎病毒细胞免疫应答回忆反应 DNA疫苗

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供受体间HLA匹配情况对肝移植术后HCMV感染的影响

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浙江检验医学 2010年第3期 7-9页

作者：赵宏胡建华高海女杨美芳张旋陈晓明范骏马伟杭浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室

目的分析肝移植供受体间HLA匹配情况对肝移植术后受体HCMV感染的影响。方法回顾性分析我院HBV感染相关终末期肝移植患者移植术前供受体间HLA-A、B、DR位点的匹配情况,根据供受体间HLA-A、B、DR匹配位点匹配情况进行分组,同时测定HCMV病... 详细信息

目的分析肝移植供受体间HLA匹配情况对肝移植术后受体HCMV感染的影响。方法回顾性分析我院HBV感染相关终末期肝移植患者移植术前供受体间HLA-A、B、DR位点的匹配情况,根据供受体间HLA-A、B、DR匹配位点匹配情况进行分组,同时测定HCMV病毒血症发生率、发生时间,其中pp65采用免疫组化方法检测,HLA位点检测通过序列特异性聚合酶链式反应(SSP-PCR)方法检测。结果肝移植术前HLA-A位点匹配数为0、1、2三组中,术后pp65阳性细胞计数中位数分别为5(2～17),6(2～15),和7(7～8),三组间pp65阳性细胞数无统计学差异(P=0.915);但在pp65检出时间方面,两个位点均匹配组检出时间为8周,而另外两组均为2周,三组间有统计学差异(P=0.04)。HLA-B位点匹配数为0、1、2三组中,术后pp65阳性细胞计数中位数分别为5(2～17),7(2～17),和5(4～15),(P=0.157);三组检出时间均为2周(P=0.653)。HLA-DR位点匹配数为0、1两组中,pp65阳性细胞计数中位数分别为6(2～15)和6(2～17),两组间无pp65阳性细胞数无统计学差异(P=0.672);两组检出时间均为2周(P=0.521)。结论 HLAA位点匹配程度可影响术后HCMV感染发生时间,但并不影响HCMV感染率。

关键词： HLA配型肝移植巨细胞病毒感染

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中国细菌耐药的现状与应对策略

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中华医学信息导报 2010年第18期25卷 21-22页

作者：肖永红浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室

在今年过去的数月中，一种新型耐药病菌的出现通过一些小型医疗报告而被透露出来，其中包括6月份美国疾控中心（CDC）的一份资料．而8月11日发表在Lancet网站上的一份通告，标志着这一问题已引起更为强烈的关注。针对我国当前的细菌耐... 详细信息

在今年过去的数月中，一种新型耐药病菌的出现通过一些小型医疗报告而被透露出来，其中包括6月份美国疾控中心（CDC）的一份资料．而8月11日发表在Lancet网站上的一份通告，标志着这一问题已引起更为强烈的关注。针对我国当前的细菌耐药问题及“超级细菌”相关情况，本栏目本期及下期特别邀请了卫生部全国细菌耐药监测网负责人、浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室肖永红与复旦大学抗生素研究所副所长、复旦大学华山医院传染科副主任王明贵两位专家进行解析，敬请关注。

关键词：细菌耐药国家重点实验室浙江大学医学院中国 Lancet 美国疾控中心复旦大学医院传染病

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有效抗菌药物,我们还有多少

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中国处方药 2010年第12期9卷 27-29页

作者：肖永红浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室

细菌耐药不断加速,而抗菌药物资源却不断耗竭,多数抗菌药物已经无法作为抗感染,特别是治疗严重感染的一线药物,而曾经备受保护的药物、不良反应明显的药物以及为数不多的新型抗菌药物正逐步成为一线抗感染药物,

关键词：抗菌药物抗感染药物细菌耐药药物资源一线药物严重感染不良反应

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