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国际呼吸杂志 2016年第8期36卷 632-635页

作者：孙佳朱彪浙江大学医学院附属第一医院感染科传染病诊治国家重点实验室感染性疾病诊治协同创新中心杭州310006

肾素一血管紧张素系统在ALI／ARDS的病理过程中有重要作用。大约60％ARDS患者进展成肺纤维化且其病死率明显增加。目前研究显示ACE／AngⅡ／AT1R与ALI／ARDS发病机制有关，而ACE2／Ang1-7／Mas起负向调节作用——AcE2和Ang1-7对ALI／ARD... 详细信息

肾素一血管紧张素系统在ALI／ARDS的病理过程中有重要作用。大约60％ARDS患者进展成肺纤维化且其病死率明显增加。目前研究显示ACE／AngⅡ／AT1R与ALI／ARDS发病机制有关，而ACE2／Ang1-7／Mas起负向调节作用——AcE2和Ang1-7对ALI／ARDS有保护作用。因此，本文就ACE2／Ang1-7／Mas在ALI／ARDS中的保护作用和相关信号传导通路等方面最新研究进展作一阐述。

关键词：血管紧张素转换酶2 血管紧张素1-7 急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征信号通路凋亡

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H5N6禽流感病毒在哺乳动物适应过程中的氨基酸变异

H5N6禽流感病毒在哺乳动物适应过程中的氨基酸变异

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全国寄生虫病高峰论坛暨2016年浙江省热带病与寄生虫病学术年会

作者：彭秀明吴海波彭晓荣吴晓鑫程林芳刘福民季淑静吴南屏浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室感染性疾病诊治协同创新中心

目的:禽流感病毒通常在禽类间传播,但有一定概率突破物种间屏障而发生跨种间传播的特点已经较明确。H5N6高致病性禽流感病毒对人类健康和家禽业造成了重大威胁。本文通过H5N6在小鼠中传代,找到H5N6在适应小鼠过程中发生的位点变异,这些... 详细信息

目的:禽流感病毒通常在禽类间传播,但有一定概率突破物种间屏障而发生跨种间传播的特点已经较明确。H5N6高致病性禽流感病毒对人类健康和家禽业造成了重大威胁。本文通过H5N6在小鼠中传代,找到H5N6在适应小鼠过程中发生的位点变异,这些位点可能对哺乳动物适应起到重要作用。方法:对一株H5N6禽流感病毒(6D2)在BALB/c小鼠中进行了10代连续传代,对野生株(WT-6D2)和小鼠适应株(MA-6D2)进行了一代测序,找出变异位点,并且比较了WT-6D2和MA-6D2的致病力,复制力等特性。结果:我们发现,在MA-6D2组中,小鼠的死亡率和多个器官的病毒滴度都显著高于WT-6D2组。通过序列比对,我们找到了HA A150V,NA(R143K;G147E),PB2 E627K和PA A343T这5个在小鼠适应过程中发生的位点变化。结论:HA A150V影响了H5N6的受体结合特性,NA(R143K;G147E)分别改变了神经氨酸酶的催化效率和亚基间的相互作用,PB2E627K是在多篇文献报道中提到的位点,能明显改变病毒的致病力和复制力,PA A343T可能改变了核糖核蛋白复合物(RNP)的空间结构从而改变了病毒的复制和转录特性。

关键词：禽流感病毒哺乳动物

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血液净化治疗恶性疟疾并发溶血尿毒综合征2例

血液净化治疗恶性疟疾并发溶血尿毒综合征2例

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全国寄生虫病高峰论坛暨2016年浙江省热带病与寄生虫病学术年会

作者：刘月英连江山黄建荣浙江大学医学院附属第一医院感染病科传染病诊治国家重点实验室感染性疾病诊治协同创新中心

2015年12月份收治由非洲输入性重型恶性疟疾并发溶血尿毒综合征两例,经及时应用血液净化抢救治疗,获得成功,现将相关情况报道如下。1临床资料诊疗经过及转归:二例患者在初诊医院血液疟原虫检查均找到恶性疟原虫,且发病后血红蛋白进行性... 详细信息

2015年12月份收治由非洲输入性重型恶性疟疾并发溶血尿毒综合征两例,经及时应用血液净化抢救治疗,获得成功,现将相关情况报道如下。1临床资料诊疗经过及转归:二例患者在初诊医院血液疟原虫检查均找到恶性疟原虫,且发病后血红蛋白进行性下降,血肌酐进行性升高,明显少尿甚至无尿,结合流行病史及既往无肾脏基础疾病,并排除其他因素后,诊断重型恶性疟疾伴溶血尿毒综合征,予以青蒿琥酯静脉抗疟治疗,并抗感染、保肝、护胃、营

关键词：恶性疟疾青蒿琥酯溶血尿毒综合征抗疟治疗

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原发性胆汁性胆管炎患者唾液Th1/Th2细胞因子的水平变化及意义

原发性胆汁性胆管炎患者唾液Th1/Th2细胞因子的水平变化及意义

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第十一届全国免疫学学术大会

作者：卢翀陈佳宁王琳魏应凤丁玉龙侯显良刁宏燕浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室感染性疾病诊治协同创新中心

目的:原发性胆汁性胆管炎(PBC)是一种以肝内小胆管进行性损伤为特征的自身免疫性肝病,其发病机制尚不明确。有研究表明,Th1/Th2平衡失调是引起该病的原因之一。PBC发病过程中常引起口腔方面的并发症状,提示PBC患者口腔免疫功能也出现了... 详细信息

目的:原发性胆汁性胆管炎(PBC)是一种以肝内小胆管进行性损伤为特征的自身免疫性肝病,其发病机制尚不明确。有研究表明,Th1/Th2平衡失调是引起该病的原因之一。PBC发病过程中常引起口腔方面的并发症状,提示PBC患者口腔免疫功能也出现了损害。本研究的目的是通过检测PBC患者血清和唾液中Th1/Th2型细胞因子γ干扰素(IFN-γ)/白介素6(IL-6)的水平,探究PBC患者口腔中免疫环境的变化情况。方法:本研究中,实验组选取25例来自浙江大学附属第一医院的PBC患者,所有PBC患者均已临床确诊且尚未接受治疗。对照组选取32例年龄,性别相匹配的体检合格的健康成人,另选取14例年龄、性别相匹配的口腔扁平苔藓(OLP)患者作为阳性对照组。分别收集了PBC患者、健康成人的血清、唾液以及OLP患者的唾液,利用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测了PBC患者和健康成人血清、唾液和OLP患者唾液中IFN-γ、IL-6表达水平。利用t检验、单因素方差分析(one-way ANOVA)比较分析各组唾液中IFN-γ、IL-6表达水平之间的统计学差异。结果:和健康成人组相比,PBC患者血清中的IFN-γ、IL-6表达水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。PBC、OLP患者唾液中IFN-γ和IL-6表达水平均明显高于健康成人组,差异有统计学意义(P<0.05)。与OLP患者组相比,PBC患者唾液中IFN-γ和IL-6表达水平相对较低,差异有统计学意义(P<0.05)。通过相关性分析发现,PBC患者的IFN-γ、IL-6表达水平,在血清和唾液之间存在明显的正相关性。结论:PBC患者血液、唾液中均出现了IFN-γ、IL-6的高表达,反映出PBC患者免疫环境中存在Th1/Th2细胞因子平衡失调,口腔的免疫环境受到损伤,此外,患者唾液中IFN-γ、IL-6的表达水平在一定程度上反映了患者体内的免疫环境。PBC患者唾液IFN-γ、IL-6表达水平和OLP患者组相比相对较低,提示PBC患者口腔免疫功能损害相对较轻,临床上应加强PBC患者的口腔护理,做好早期预防以减少PBC患者口腔疾病的发生。

关键词：原发性胆汁性胆管炎(PBC) 唾液 IFN-γ IL-6

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高通量测序揭示T细胞受体的保守特性

高通量测序揭示T细胞受体的保守特性

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浙江省免疫学会第十次学术大会

作者：侯显良刁宏燕浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室感染性疾病诊治协同创新中心

目的:T细胞受体(T cell receptor,TCR)是T细胞表面的特异性受体,负责识别由主要组织相容性复合体(MHC)所呈递的抗原。T细胞受体的抗原结合位极为多样化,主要源于TCR基因的V(D)J重组和N区核苷酸插入。该研究利用高通量测序技术研究10个... 详细信息

目的:T细胞受体(T cell receptor,TCR)是T细胞表面的特异性受体,负责识别由主要组织相容性复合体(MHC)所呈递的抗原。T细胞受体的抗原结合位极为多样化,主要源于TCR基因的V(D)J重组和N区核苷酸插入。该研究利用高通量测序技术研究10个健康人的TCRβ链CDR3区域的图谱特征。方法:采集10个人的外周血,Ficoll分层液法分离单个核细胞;磁珠分选T淋巴细胞;多重PCR技术扩增TCR CDR3区段后进行高通量测序。参照IMGT/High V-QUEST分析TCR CDR3区段的图谱特征和多样性。结果:绝大部分的TCR CDR3序列丰度很低,表明没有经历克隆性扩增。但每个个体都会有一些丰度很高的序列,可能是由生活中接触的病原体或刺激物所引起的。在不考虑序列丰度的情况下研究个体水平的TCR CDR3序列特征,发现不同个体间的TRBV、TRBJ和TRBD基因亚家族的使用频率都相似。另外,不同个体间CDR3区段的4种核苷酸(G,C,A,T)和20种氨基酸的使用频率几乎一致。我们还发现末端脱氧核苷酸转移酶(Tdt)在N区插入的核苷酸有偏向性,插入4种核苷酸的频率依次为:G(31.92%),C(27.14%),A(21.82%)和T(19.12%)。在考虑序列丰度的情况下,以上这些特征也会存在,只是个体水平间的偏差增大。结论:TCRβ链CDR3区域具有极大的多样性,该研究发现其存在一些保守的特性,其机理有待进一步阐明。

关键词： T细胞受体高通量测序图谱特征

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骨桥蛋白促进流感病毒感染引起的肺损伤

骨桥蛋白促进流感病毒感染引起的肺损伤

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浙江省免疫学会第十次学术大会

作者：卢翀陈佳宁王琳魏应凤丁玉龙侯显良刁宏燕浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室感染性疾病诊治协同创新中心

研究目的:已有研究表明,在细菌引起的肺部感染患者中,血浆中骨桥蛋白(0PN)的含量明显增加。但在病毒引起的肺损伤患者中,OPN的表达水平还不是很清楚,同时,升高的OPN水平与肺损伤的相关性以及肺损伤中OPN升高的机制尚有待深入研究。本研... 详细信息

研究目的:已有研究表明,在细菌引起的肺部感染患者中,血浆中骨桥蛋白(0PN)的含量明显增加。但在病毒引起的肺损伤患者中,OPN的表达水平还不是很清楚,同时,升高的OPN水平与肺损伤的相关性以及肺损伤中OPN升高的机制尚有待深入研究。本研究的主要目的是探究血浆中OPN水平与肺损伤,特别是与肺水肿和肺部结构的破坏之间的关系及相互作用的机制。材料和方法:通过APACHE-Ⅱ评分标准筛选入组患者:H1N1患者组(n=12),H7N9患者组(n=13),健康人对照组(n=1O),评估各组肺损伤情况并检测血浆中OPN、TNF-α、IL-6水平,再通过小鼠肺上皮细胞(MLE-12)和人肺上皮细胞(A549)进行细胞实验进一步探究其中的作用机制。结果:研究发现OPN水平在肺损伤患者的血浆中显著升高,在流感病毒引起的肺损伤病人中,血浆中OPN水平和肺损伤的严重程度呈正相关。通过进一步研究发现,在肺泡上皮细胞中,OPN可以通过与整合素β3和CD44(OPN受体)作用而下调上皮细胞钠离子通道(ENaC)的mRNAα亚基的表达,除此之外,OPN通过与整合素β1和CD44的相互作用则可以提升基质金属蛋白酶7(MMP7)的表达,这些指标的改变均促进了肺损伤的加重。我们还发现,血浆中OPN的升高还上调了患者血浆中炎症因子TNF-α和IL-6的表达水平。结论:OPN可能是通过促进肺上皮细胞的凋亡,损害上皮细胞钠离子通道和破坏细胞外基质来促进流感病毒引起的肺损伤的。

关键词：骨桥蛋白(OPN) 肺损伤 TNF-α IL-6

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MiR-155可以作为HIV-1感染者T细胞免疫活化生物标志物

MiR-155可以作为HIV-1感染者T细胞免疫活化生物标志物

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浙江省免疫学会第十次学术大会

作者：程林芳靳昌忠吴南屏浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室感染性疾病诊治协同创新中心

目的:通过研究microRNA-155(miR-155)在人类免疫缺陷病(HIV-1)患者外周血的表达水平,并分析与HIV/AIDS患者免疫活化及免疫细胞分型的相关性,探讨miR-155在HIV-1感染中的作用。方法:本研究选取HARRT治疗病毒学失败者27例、HARRT治疗病毒... 详细信息

目的:通过研究microRNA-155(miR-155)在人类免疫缺陷病(HIV-1)患者外周血的表达水平,并分析与HIV/AIDS患者免疫活化及免疫细胞分型的相关性,探讨miR-155在HIV-1感染中的作用。方法:本研究选取HARRT治疗病毒学失败者27例、HARRT治疗病毒学成功者31例及23例健康对照为研究对象,首先流式检测免疫细胞活化指标(CD3、CD4/CD8、CD38)、细胞亚型(CD3、CD4/CD8、CD62L、CD45RA)及细胞亚群Th1、Th2、Th17相关指标;同时对HIV-1感染者、正常对照者血浆和细胞(PBMC、CD4+T、CD8+T)的miRNA-155表达水平通过Realtime PCR法进行检测;将HIV-1感染HARRT治疗病毒学成功者,病毒学失败者,正常对照者血浆、PBMC、CD4+T和CD8+T细胞miRNA-155的表达水平进行比较分析,进一步分析miRNA-155表达水平与HIV-1感染免疫活化和细胞分型相关性。结果:***-1感染者PBMC、CD4+T、CD8+T细胞中miR-155的表达水平较健康对照组明显升高(P<0.01);HARRT治疗病毒学成功组miR-155的表达水平较HARRT治疗病毒学失败组低(P<0.01)。***-1感染者CD4+T、CD8+T细胞内miR-155水平与T细胞免疫活化水平成正比(r=0.542,P=0.000 CD4+T细胞;r=0.810,P=0.000 CD8+T细胞)。***-1感染者CD4+T、CD8+T细胞中的miR-155水平分别与效应型CD4+T和效应型CD8 T细胞比例成正比(r=0.803,P=0.000 CD4+T细胞;r=0.692,P=0.000 CD8+T细胞),CD4+T细胞中的miR-155水平与Th1、Th17细胞比例正相关(r=0.542,P=0.000 Th1细胞;r=0.329,P=0.000 Th17细胞)。结论miR-155表达水平在HIV-1感染者PBMC、CD4+T、CD8+T细胞中异常高表达,且与HIV-1免疫活化和细胞分型相关,提示miR-155可能可作为HIV-1免疫活化的一个预测指标。

关键词： microRNA-155 HIV-1 免疫活化细胞亚

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H10N7亚型禽流感病毒在小鼠适应过程中的变异研究

H10N7亚型禽流感病毒在小鼠适应过程中的变异研究

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2016中华医学会热带病与寄生虫学分会年会暨丙肝进展研讨会

作者：吴海波彭秀明彭晓荣吴南屏浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室感染性疾病诊治协同创新中心

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H10N7亚型禽流感病毒在小鼠适应过程中的变异研究

H10N7亚型禽流感病毒在小鼠适应过程中的变异研究

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全国寄生虫病高峰论坛暨2016年浙江省热带病与寄生虫病学术年会

作者：吴海波彭秀明彭晓荣吴南屏浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室感染性疾病诊治协同创新中心

目的:H10亚型禽流感病毒(例如H10N8和H10N7)能够从禽类直接感染到人类引起发病,甚至死亡,对人类具有巨大危害性,然而,关于H10亚型禽流感病毒分子变异相关的研究非常有限。方法:为了阐明H10亚型禽流感病毒在适应小鼠过程中,可能发生的病... 详细信息

目的:H10亚型禽流感病毒(例如H10N8和H10N7)能够从禽类直接感染到人类引起发病,甚至死亡,对人类具有巨大危害性,然而,关于H10亚型禽流感病毒分子变异相关的研究非常有限。方法:为了阐明H10亚型禽流感病毒在适应小鼠过程中,可能发生的病毒变异,我们对H10N7亚型禽流感病毒进行了多次小鼠传代过程,通过基因组测序分析病毒发生变异,进行了小鼠感染实验,对病毒的生物学特性进行了比较分析。结果:经过小鼠中10次传代,H10N7亚型禽流感病毒对小鼠的毒力有明显增强,同时在小鼠肺脏中复制能力大大提高,并且病毒基因组发生了3个氨基酸变异,PB2(E627K)、PA(T97I)和HA(G409E)。结论:H10N7亚型禽流感病毒中发生的PB2(E627K)、PA(T97I)和HA(G409E)氨基酸变异,对病毒毒力和复制起到重要作用,在流感监测过程中需要对这些变异进行密切关注。

关键词：禽流感病毒 H10N7 变异研究

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原发性胆汁性胆管炎唾液IL-6、IFN-Y水平的变化及意义

原发性胆汁性胆管炎唾液IL-6、IFN-Y水平的变化及意义

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浙江省免疫学会第十次学术大会

作者：卢翀陈佳宁王琳魏应凤丁玉龙侯显良刁宏燕浙江大学医学院附属第一医院传染病诊治国家重点实验室感染性疾病诊治协同创新中心

研究目的:原发性胆汁性胆管炎(PBC)是一种以肝内小胆管进行性损伤为特征的自身免疫性肝病,其发病机制尚不明确,机体内免疫功能失调可能是引起该病的原因之一。有研究表明,Th1/Th2平衡在维持正常免疫功能中发挥了重要作用。PBC发病过程... 详细信息

研究目的:原发性胆汁性胆管炎(PBC)是一种以肝内小胆管进行性损伤为特征的自身免疫性肝病,其发病机制尚不明确,机体内免疫功能失调可能是引起该病的原因之一。有研究表明,Th1/Th2平衡在维持正常免疫功能中发挥了重要作用。PBC发病过程中常引起口干等口腔的并发症状,提示PBC患者口腔免疫功能也出现了损害。本研究的主要目的是通过检测PBC患者唾液中IL-6和IFN-γ的水平,探究PBC患者口腔中免疫环境的变化情况。材料和方法:本研究中,实验组选取了25例来自浙江大学附属第一医院的PBC患者,所有PBC患者均己临床确诊且尚未接受治疗。对照组选取了32例年龄,性别相匹配的体检合格的健康成人,选取了14例年龄、性别相匹配的口腔扁平苔藓(OLP)患者作为阳性对照组。分别收集了PBC、OLP患者和健康成人的唾液,利用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测了PBC、OLP患者和健康成人唾液中白介素6(IL-6)和干扰素γ(IFN-γ)表达水平。利用单因素方差分析(one-wayANOVA)比较分析各组唾液中IL-6和IFN-γ表达水平之间的统计学差异。结果:和健康成人组相比,PBC、0LP患者唾液中IL-6和IFN-γ表达水平均明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与OL,P患者组相比,PBC患者IL-6和IFN-γ表达水平相对较低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:IFN-γ和IL-6分别属于Th1和Th2型细胞因子,PBC患者唾液中出现了IL-6、IFN-γ的高表达,反映出PBC患者口腔免疫环境中Th1/Th2平衡失调,口腔免疫功能损伤。此外,PBC患者唾液IL-6、IFN-γ表达水平和OLP患者组相比相对较低,提示PBC患者口腔免疫功能损害相对较轻,临床上应加强PBC患者的口腔护理,做好早期预防以减少PBC患者口腔疾病的发生。

关键词：原发性胆汁性胆管炎(PBC) 唾液 IL-6 IFN-γ

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