检索结果-内蒙古大学图书馆

中华传染病杂志 2007年第7期25卷 405-407页

作者：陈晓明杨美芳薛寒胡敏君陈离伟范骏沃健儿浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部病毒性传染病重点实验室杭州310003

HBV是嗜肝DNA病毒，其S基因编码3种外膜蛋白，分别是主蛋白、中蛋白和大蛋白。近年研究表明HBV大蛋白（HBV-LP）与病毒侵入、组装和复制等密切相关，Bruss等研究发现，HBV-LP在病毒进入肝细胞时作为受体蛋白起作用，在病毒组装时，则是... 详细信息

HBV是嗜肝DNA病毒，其S基因编码3种外膜蛋白，分别是主蛋白、中蛋白和大蛋白。近年研究表明HBV大蛋白（HBV-LP）与病毒侵入、组装和复制等密切相关，Bruss等研究发现，HBV-LP在病毒进入肝细胞时作为受体蛋白起作用，在病毒组装时，则是基质类似蛋白，同时还行使调节功能。而且这种多功能性依赖于HBV-LP前S区独特的双重拓扑结构。同时研究还表明，HBV-LP对HBV复制过程具有反式激活作用，并与病毒颗粒从细胞内释放调节有关。HBV—LP存在于感染性颗粒（Dane颗粒）和亚病毒管状颗粒上，是病毒形成完整外膜的重要标志，与血清HBVDNA拷贝数具有良好的相关性，能反映患者机体内HBV复制情况。魏红山等研究表明，在HBeAg阴性慢性乙型肝炎患者血清中，

关键词：嗜肝DNA病毒抗病毒治疗外膜蛋白乙型肝炎病毒血清HBV 慢性乙型肝炎患者 HBeAg阴性反式激活作用

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基因1b型HCV核心蛋白不同功能区域对HepG2细胞生长的影响

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中华微生物学和免疫学杂志 2008年第5期28卷 411-415页

作者：颜学兵梅蕾陈智郑敏周林福许小燕吴炜徐州医学院附属第一医院传染科 221002 江苏省常熟市第二人民医院感染病科浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所、卫生部传染病重点实验室

目的研究基因1b型丙型肝炎病毒（HCV）不同病毒株编码的核心蛋白（CORE）：癌中心株（T）、癌旁株（NT）、C191（HCV—J6）及同一病毒株（T）编码的不同功能区域（1～172、1～126、1～58、59～126、127—172AA）在HCV致病机制中的作用... 详细信息

目的研究基因1b型丙型肝炎病毒（HCV）不同病毒株编码的核心蛋白（CORE）：癌中心株（T）、癌旁株（NT）、C191（HCV—J6）及同一病毒株（T）编码的不同功能区域（1～172、1～126、1～58、59～126、127—172AA）在HCV致病机制中的作用，为治疗HCV感染提供靶位。方法将含有3个不同病毒株（T、NT及C191）及T不同功能区域的CORE真核表达质粒，转染到HepG2细胞，用流式细胞仪检测Annexin V／PI，并用细胞生长实时观察仪观察细胞生长曲线。结果基因1b型T、NT、C191和T不同功能区域的CORE均能诱导HepG2细胞凋亡和坏死且抑制了细胞的生长，其中，T诱导细胞凋亡和坏死及抑制细胞生长强于NT和C191，T的CORE的N端1～58AA诱导细胞凋亡和坏死及抑制细胞生长均高于其他功能区域。结论HCV基因1b型不同病毒株及同一病毒株编码的CORE不同功能区域的分子致病机制存在一定的差异，N端的1～58AA在CORE的致病机制中起重要作用，可能是基因治疗的重要靶位之一。

关键词：丙型肝炎病毒核心蛋白凋亡/坏死细胞生长曲线

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肝移植受者术后巨细胞病毒抗原血症的发生及其影响因素分析

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中华医学杂志 2006年第48期86卷 3442-3444页

作者：范骏陈晓明杨美芳薛寒高海女范维薇马伟杭李兰娟浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部病毒性传染病重点实验室杭州310003

巨细胞病毒(cytomegalvirus,CMV)感染正常人群后通常呈潜伏状态,当机体处于免疫功能受损或受抑制状态时,潜伏的CMV可能被激活.肝移植受体术后免疫系统功能大大低于正常人群,CMV易被激活而导致严重的CMV病[1],并与移植后急慢性排斥反应有... 详细信息

巨细胞病毒(cytomegalvirus,CMV)感染正常人群后通常呈潜伏状态,当机体处于免疫功能受损或受抑制状态时,潜伏的CMV可能被激活.肝移植受体术后免疫系统功能大大低于正常人群,CMV易被激活而导致严重的CMV病[1],并与移植后急慢性排斥反应有关[2].监测移植术后CMV活动性感染的主要方法是测定外周血白细胞中是否出现CMVpp65抗原--即CMV抗原血症[3].借鉴骨髓移植、肾移植经验[4],肝移植受者术后定期、定量检测CMVpp65,并常规给予抗病毒药物预防而控制CMV感染.但仍有不少肝移植受者术后发生CMV感染,是否与某些因素有关?我们回顾性分析2001年至2004年间我院肝移植受者CMV抗原血症的发生情况及多种因素,期望能为临床诊断和抗病毒治疗提供参考。

关键词：巨细胞病毒抗原血症肝移植受者移植术后 CMVpp65 活动性感染免疫功能受损免疫系统功能慢性排斥反应

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质粒介导的RNA干扰对AD293细胞中HBcAg表达的抑制作用

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浙江大学学报（医学版） 2005年第2期34卷 104-109页

作者：徐宁羊正纲朱海红姚航平侯晓丽吴炜浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部病毒性传染病重点实验室浙江杭州310003

目的研究质粒介导的RNA干扰效应对HBcAg基因表达的抑制作用。方法设计并构建针对HBcAg基因的小发夹RNA表达载体,将构建好的shRNA表达载体和HBcAg-增强型绿荧光蛋白融合蛋白表达载体共转染人胚肾细胞株AD293,以空载体组以及针对无关序列... 详细信息

目的研究质粒介导的RNA干扰效应对HBcAg基因表达的抑制作用。方法设计并构建针对HBcAg基因的小发夹RNA表达载体,将构建好的shRNA表达载体和HBcAg-增强型绿荧光蛋白融合蛋白表达载体共转染人胚肾细胞株AD293,以空载体组以及针对无关序列的shRNA表达载体组为阴性对照,流式细胞术和实时荧光定量PCR法检测RNAi的抑制效果。结果构建的特异性shRNA表达载体可以抑制HBcAg基因在AD293细胞中的表达,流式细胞仪检测抑制率可达76%,实时荧光定量PCR法检测HBcAg基因的mRNA,抑制率可达58.6%。结论质粒介导的RNAi可以有效抑制HBcAg基因的表达,为利用RNAi进行抗乙型肝炎病毒复制研究提供了一个可供选择的方法。

关键词：肝炎核心抗原,乙型/分析基因疗法 RNA/遗传学基因表达调控 RNA干扰

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癌周及癌中心不同截短片段丙型肝炎病毒核心蛋白表达质粒的构建及表达

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中华肝脏病杂志 2004年第11期12卷 643-647页

作者：颜学兵陈智 Delphine BOUCREUX Nicole PAVIO Christian BRECHOT 浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室 310003 U370/巴斯德研究所联合实验室

目的研究不同截短片段丙型肝炎病毒(HCV)的核心蛋白(CORE)在HCV持续感染和肝癌发病机制中的作用,构建并表达不同HCV病毒株及不同截短片断CORE原核表达质粒。方法用PCR扩增基因型为HCV 1 b型的7个不同截短片段CORE基因:氨基酸(aa)长... 详细信息

目的研究不同截短片段丙型肝炎病毒(HCV)的核心蛋白(CORE)在HCV持续感染和肝癌发病机制中的作用,构建并表达不同HCV病毒株及不同截短片断CORE原核表达质粒。方法用PCR扩增基因型为HCV 1 b型的7个不同截短片段CORE基因:氨基酸(aa)长度分别为癌中心株(BT):B:1-172 aa、1-126 aa、1-58 aa、59-126 aa、127-172 aa;癌旁株(BNT):1-172 aa及C191(HCV-J6):1-172 aa,扩增产物用BamH Ⅰ及EcoR Ⅰ双酶切后将其插入到原核表达质粒pGEX-4T-1中,阳性克隆转染到BL21中,IPTG诱导表达GST-CORE融合蛋白,纯化定量,并用western blot加以验证。结果 7个不同片段CORE在体外都得到相应表达,但表达量存在一定的差异,较长片段表达量相对较低,其中BT及BNT的1-172 aa截短片段CORE的表达高于同基因型等长度片段的C191,而BT以59-126 aa片段的表达量最高。BT、BNT及C191三株HCV基因1b型病毒株部分截短片段可形成二聚体。结论构建不同HCV病毒株及不同截短片段的CORE原核表达质粒获得成功,为研究HCV不同病毒株及不同区域CORE功能奠定基础;不同截短片段的CORE表达量不等,可能与不同片段具有不同的疏水基团、细胞毒性及在HCV结构和在HCV致病性中所起作用不同有关;HCV基因1b型的CORE二聚体的形成依耐于59-126 aa区域。

关键词：病毒核心蛋白表达质粒蛋白表达丙型肝炎病毒肝癌

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人类免疫缺陷病毒感染的静脉吸毒者TT病毒的检测和部分基因序列分析

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中华传染病杂志 2001年第2期19卷 97-99页

作者：朱彪吴南屏刘克洲陈智吴灵娇浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所暨卫生部病毒性传染病重点实验室杭州310003

目的　研究人类免疫缺陷病毒 (HIV)感染的静脉吸毒者TT病毒 (TTV)感染情况和基因序列变化。方法　用聚合酶链反应 (PCR)对 35例HIV感染的静脉吸毒者 (IVDUs) ,6 4例HIV未感染的IVDUs及 45例正常献血员进行TTVDNA检测。对其中 2例HIV感染... 详细信息

目的　研究人类免疫缺陷病毒 (HIV)感染的静脉吸毒者TT病毒 (TTV)感染情况和基因序列变化。方法　用聚合酶链反应 (PCR)对 35例HIV感染的静脉吸毒者 (IVDUs) ,6 4例HIV未感染的IVDUs及 45例正常献血员进行TTVDNA检测。对其中 2例HIV感染的IVDUs和 1例HIV未感染的IVDUs的TTVDNA部分基因核苷酸序列进行测定。结果　TTVDNA在HIV感染的IVDUs中检出率为 2 5 .71% (9/ 35 ) ,HIV未感染的IVDUs中检出率为 17.18% (11/ 6 4) ,两者差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ,正常献血员中的检出率为 2 .2 % (1/ 45 )。对 2例HIV感染的IVDUsTTVDNA部分基因核苷酸序列与日本株比较 ,其同源性分别为 96 .44 %和 95 .79% ,对 1例HIV未感染的IV DUs的TTVDNA部分基因核苷酸序列与日本株比较其同源性为 98.2 5 % ;HIV感染和HIV未感染的IVDUsTTVDNA核苷酸序列比较 ,HIV感染者在被测定序列的第 2 99～ 30 9位碱基有较大的变异。结论　静脉吸毒是TTV感染的高危因素 ,TTV在IVDUs中感染率与HIV感染无明显相关性 ;HIV感染和HIV未感染者TTVDNA序列可能存在一定差异。

关键词： TT病毒人类免疫缺陷病毒聚合酶链反应核苷酸序列静脉吸毒

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丙型肝炎病毒核心蛋白结合蛋白激酶R的功能区域研究

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中华传染病杂志 2005年第1期23卷 1-5页

作者：颜学兵陈智 Delphine BOUCREUX Nicole PAVIO Christian BRECHOT 浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室法国巴黎第5大学

目的构建并表达丙型肝炎病毒(HCV)不同病毒株:癌中心株(BT)、癌旁珠(BNT)、HCV-J及BT不同截短片段谷胱甘肽(GST)-核心融合蛋白;寻找核心蛋白(Core)与蛋白激酶R(PKR)相互作用区域,探讨它们在HCV持续感染及细胞癌(HCC)发病机制中的作用.... 详细信息

目的构建并表达丙型肝炎病毒(HCV)不同病毒株:癌中心株(BT)、癌旁珠(BNT)、HCV-J及BT不同截短片段谷胱甘肽(GST)-核心融合蛋白;寻找核心蛋白(Core)与蛋白激酶R(PKR)相互作用区域,探讨它们在HCV持续感染及细胞癌(HCC)发病机制中的作用.方法用聚合酶链反应扩增不同片段HCV核心蛋白基因,并将7个不同的基因片段分别克隆到原核表达载体pGEX-4T-1,诱导表达并纯化表达蛋白,与两株细胞(HepG2和Huh-7)的PKR的进行相互作用试验.结果7个不同片段Core在体外都得到相应表达,不同片段结合PKR的能力存在一定差异.BT、BNT、C191的Core N端1～172氨基酸(aa)3个片段均能与PKP发生直接结合,BT与PKR结合的区域在Core N端的1～58aa.结论不同片段Core在原核细胞中获得较好的表达;Core/PKP相互作,在HCV持续感染和HCC的发病机制中可能起重要作用.

关键词： HCV核心蛋白表达丙型肝炎病毒核心蛋白 HCC 发病机制结合蛋白功能区域差异目的结论

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HBsAg重组腺病毒转染的树突状细胞诱导BALB／c小鼠抗HBV免疫的研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2006年第6期26卷 553-559页

作者：黄茵陈智贾红宇吴伟蔡玲斐周承浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室 310018 杭州师范学院基础医学部杭州师范学院基础医学部免疫学教研室

目的研究HBsAg重组腺病毒转染的小鼠树突状细胞(DC)体内外免疫刺激活性和诱导小鼠抗HBV免疫的特点。方法BALB／c小鼠的骨髓细胞体外扩增为DC,转染HBsAg重组腺病毒Ad-S或被HBsAg蛋白冲击后,流式细胞术分析DC的表型,混合淋巴细胞反应(MLR... 详细信息

目的研究HBsAg重组腺病毒转染的小鼠树突状细胞(DC)体内外免疫刺激活性和诱导小鼠抗HBV免疫的特点。方法BALB／c小鼠的骨髓细胞体外扩增为DC,转染HBsAg重组腺病毒Ad-S或被HBsAg蛋白冲击后,流式细胞术分析DC的表型,混合淋巴细胞反应(MLR)检测DC的刺激活性;或与pcDNA3．1(+)-S质粒分别免疫小鼠后,LDH法测定脾细胞CTL活性,放免法检测血清抗- HBs;流式细胞术分析体外自体MLR中及免疫后小鼠脾脏T细胞内细胞因子。结果DC／Ad-S、DC／HBsAg和各对照组DC之间的表型和MLR差异无统计学意义,并均刺激TH和Tc分泌IFN-γ。DC／Ad-S免疫后2周能诱导比DNA疫苗更强产生IFN-γ的TH(P<0．05),以及比DC／HBsAg和DNA疫苗更强分泌IFN-γ的Tc(均P<0．01)和特异性CTL(P<0．05,P<0．01)。但DC／Ad-S和DC/HBsAg诱导的CTL反应及Tc分泌IFN-γ在免疫后4周均明显减弱,且诱导抗-HBs作用弱于DNA疫苗。结论HBsAg重组腺病毒转染的DC比HBsAg冲击的DC及DNA疫苗能诱导更强的TH1／Tc1(Ⅰ型)细胞免疫和特异性CTL反应,是诱导抗HBV细胞免疫的有效刺激细胞。

关键词：乙肝表面抗原树突状细胞腺病毒 Ⅰ型免疫应答细胞毒性T淋巴细胞

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儿童艾滋病患者免疫因子水平断面研究

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中华儿科杂志 2006年第12期44卷 952-953页

作者：张福杰靳昌忠赵燕姚航平赵红心吴灵娇魏红山李在村吴南屏中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心北京100050 浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所卫生部传染病重点实验室杭州310003 北京地坛医院传染科 100011 北京佑安医院传染科 100070

儿童艾滋病(acquired immunodeficiency disease,AIDS)患者的病情特点不同于成人患者,有其特殊之处,表现为高病毒载量,低免疫学状态,疾病进展快,常伴有营养不良、发育迟缓、代谢异常等,而且机会性感染、卡波西肉瘤等并发症也较成人多见... 详细信息

儿童艾滋病(acquired immunodeficiency disease,AIDS)患者的病情特点不同于成人患者,有其特殊之处,表现为高病毒载量,低免疫学状态,疾病进展快,常伴有营养不良、发育迟缓、代谢异常等,而且机会性感染、卡波西肉瘤等并发症也较成人多见,病程与成人比较更为复杂。目前我国儿童AIDS方面的资料较少,治疗经验有限,因此,研究我国儿童AIDS患者的免疫状况十分必要。本实验对我国部分省份1992—2002年间感染的109例AIDS患儿Th1/Th2免疫因子、趋化因子及巨噬细胞刺激蛋白(macrophage stimulated protein,MSP)等进行了初步分析研究,为我国儿童AIDS的防治提供基础资料。[第一段]

关键词：艾滋病患者免疫因子儿童水平断面 AIDS患者巨噬细胞刺激蛋白 Th1/Th2 protein

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静脉吸毒者丙型肝炎病毒和人类免疫缺陷病毒感染的研究

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中华内科杂志 2000年第10期39卷 707-708页

作者：朱彪吴南屏邵一鸣强耒英浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所暨卫生部病毒性传染病重点实验室杭州310003 中国预防医学科学院艾滋病研究室

静脉吸毒（IVDU）可传播多种病毒，已有文献分别报道了静脉吸毒者HCV、人类免疫缺陷病毒（HIV）感染的情况，本研究在原研究工作基础上，对IVDU者HCV感染情况和HCV重叠HIV感染对HCV病毒复制影响情况做一初步研究。

关键词：静脉吸毒丙型肝炎 HCV HIV

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