检索结果-内蒙古大学图书馆

中国中药杂志 2008年第3期33卷 292-295页

作者：杨介钻卓佳陈柏坤金丽琴吕建新李兰娟浙江大学医学院附属第一医院传染科卫生部传染病重点实验室浙江杭州310003 温州医学院生命科学学院浙江温州325023 温州医学院生物化学教研室浙江温州325023

目的：研究蝉拟青霉水提物多糖对老龄大鼠免疫功能的调节作用。方法：以生理盐水处理的10～12周龄SD青年大鼠、18月龄SD老龄大鼠为对照组，实验组以不同剂量蝉拟青霉水提物多糖（50，100，200mg·kg^-1·d^-1）处理老龄大鼠3周... 详细信息

目的：研究蝉拟青霉水提物多糖对老龄大鼠免疫功能的调节作用。方法：以生理盐水处理的10～12周龄SD青年大鼠、18月龄SD老龄大鼠为对照组，实验组以不同剂量蝉拟青霉水提物多糖（50，100，200mg·kg^-1·d^-1）处理老龄大鼠3周，观察对照组、实验组大鼠腹腔、肺泡巨噬细胞对葡萄球菌的吞噬作用；以MTT法检测大鼠脾组织细胞分别在刀豆蛋白A（ConA），磷酸脂多糖（LPS）诱导下的淋巴细胞增殖活性；同时检测大鼠脾组织细胞内酸性磷酸酶（ACP），乳酸脱氢酶（LDH），精氨酸酶（ARG）等酶活力，并于透射电镜下观察大鼠脾组织超微结构。结果：与青年组比较，老龄组大鼠巨噬细胞的噬菌能力及脾组织淋巴细胞的增殖反应显著降低（P〈0．01），脾细胞内ACP，LDH，ARG等酶活力也显著低下（P〈0．01）。各种剂量蝉拟青霉多糖作用3周后老龄大鼠的这些指标均有改善，脾组织超微结构显示线粒体、内质网结构明显且数量增多。结论：蝉拟青霉水提物多糖能提高老龄大鼠腹腔、肺泡巨噬细胞吞噬功能和脾细胞免疫功能及增殖反应能力，使老龄大鼠低下的免疫功能得以改善，可能具有一定的抗衰老作用。

关键词：蝉拟青霉多糖巨噬细胞增殖反应免疫功能

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一株由插入序列引起外膜孔蛋白OprD2缺失的亚胺培南耐药铜绿假单胞菌

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中华检验医学杂志 2008年第2期31卷 190-192页

作者：沈晓强王杰魏泽庆俞云松周建英李兰娟浙江大学医学院附属第一医院卫生部传染病重点实验室杭州310003 浙江大学医学院附属第一医院呼吸科杭州市红十字会医院呼吸科

铜绿假单胞菌广泛分布于周围环境及正常人的皮肤、呼吸道和消化道等部位，是年老体弱、慢性疾病和免疫功能低下患者合并感染的常见病原菌之一，有时可引起严重感染，其在各大医院细菌分离率调查中均居于首要位置，由铜绿假单胞菌引起的... 详细信息

铜绿假单胞菌广泛分布于周围环境及正常人的皮肤、呼吸道和消化道等部位，是年老体弱、慢性疾病和免疫功能低下患者合并感染的常见病原菌之一，有时可引起严重感染，其在各大医院细菌分离率调查中均居于首要位置，由铜绿假单胞菌引起的院内感染高达30％以上。近年来对以亚胺培南为代表的碳青霉烯类抗生素多重耐药铜绿假单胞菌的出现，对临床感染控制构成了严重威胁。

关键词：多重耐药铜绿假单胞菌亚胺培南 OprD2 外膜孔蛋白插入序列碳青霉烯类抗生素免疫功能低下常见病原菌

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抗人卵巢癌-抗人CD3单链双特异性抗体体外介导的细胞毒作用及其机制

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中华肿瘤杂志 2008年第1期30卷 8-11页

作者：杨介钻李兰娟何剑琴王祥斌王小宁浙江大学医学院附属第一医院传染科卫生部传染病重点实验室杭州310003 北京安波特基因工程技术有限公司华南理工大学生物科学与工程学院

目的了解抗人卵巢癌-抗人CD3（BHL—I）单链双特异性抗体（scBsAb）体外介导的外周血淋巴细胞（PBL）对靶细胞SKOV3的细胞毒作用及可能的机制。方法二苯基溴化四氮唑蓝（MTr）法检测BHL-I体外介导PBL对SKOV3细胞的杀伤作用；逆转录-聚... 详细信息

目的了解抗人卵巢癌-抗人CD3（BHL—I）单链双特异性抗体（scBsAb）体外介导的外周血淋巴细胞（PBL）对靶细胞SKOV3的细胞毒作用及可能的机制。方法二苯基溴化四氮唑蓝（MTr）法检测BHL-I体外介导PBL对SKOV3细胞的杀伤作用；逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测BHL—I介导的细胞毒作用过程中效应细胞PBL对穿孔素（perforin）、颗粒酶（GrB）mRNA表达的影响；酶联免疫吸附（ELISA）法检测细胞培养上清液中人肿瘤坏死因子-α（hTNF—α）和人干扰素-γ（hIFN-γ）含量的变化。结果BHL-I体外介导PBL对SKOV3细胞的细胞毒作用显著高于对MCF-7细胞的作用（P〈0.01），并且在效靶比为12．5：1、作用时间为36h、BHL-I浓度为25μg/ml时，PBL对靶细胞的细胞毒作用最为显著；BHL—I体外介导的细胞毒作用中，PBL表达perforin、GrBmRNA及混合细胞培养上清液中hTNF—α和hIFN-γ的含量均显著升高，并且白介素2（IL-2）的存在有利于这些因子的表达。结论BHL—I介导PBL对靶细胞的细胞毒作用具有一定的特异性，并且IL-2能增强BHL—I介导PBL的细胞毒作用。

关键词：抗人卵巢癌-抗人CD3 单链双特异性抗体细胞毒作用细胞因子

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大鼠肝缺血再灌注损伤中肝细胞凋亡的研究

大鼠肝缺血再灌注损伤中肝细胞凋亡的研究

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第十次浙江省中西医结合肝病学术会议

作者：徐凯进李兰娟邢卉春沈恬盛吉芳郑树森浙江大学医学院附属第一医院传染科、传染病研究所卫生部传染病重点实验室

肝脏是一个血供丰富的器官,正常生理条件下其血供占人体总循环血量的20-35%,在肝脏手术时为减少术中出血常采用阻断门脉、肝动脉的方法止血,这样肝脏不可避免的要经受缺血再灌注损伤(ischemia/reperfusion injury I/R)。这种损伤是术后... 详细信息

肝脏是一个血供丰富的器官,正常生理条件下其血供占人体总循环血量的20-35%,在肝脏手术时为减少术中出血常采用阻断门脉、肝动脉的方法止血,这样肝脏不可避免的要经受缺血再灌注损伤(ischemia/reperfusion injury I/R)。这种损伤是术后肝功能异常、原发性移植肝无功能、多器官功能衰竭的重要原因。要寻找有效的措施来减轻肝脏的缺血再灌注损伤,提高手术的安全性,就必须

关键词：肝细胞凋亡中央静脉缺血再灌注损伤凋亡细胞手术组肝组织汇管区 ETX 显著性差异

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肝移植患者肠道双歧杆菌的生态结构

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中华传染病杂志 2007年第1期25卷 9-14页

作者：鲁海峰吴仲文李兰娟左键盛吉芳郑树森梁廷波卢安卫浙江大学医学院附属第一医院传染科卫生部传染病重点实验室杭州310003 浙江大学医学院附属第一医院传染科肝胆胰外科杭州310003

目的探讨肝移植患者肠道双歧杆菌属细菌种群分子生态结构变化特点。方法采用荧光定量PCR技术分析健康人27例、肝硬化患者51例及肝移植后患者113例粪便双歧杆菌在属及种水平上的定性和定量变化。结果与健康人比较，肝移植及肝硬化患者肠... 详细信息

目的探讨肝移植患者肠道双歧杆菌属细菌种群分子生态结构变化特点。方法采用荧光定量PCR技术分析健康人27例、肝硬化患者51例及肝移植后患者113例粪便双歧杆菌在属及种水平上的定性和定量变化。结果与健康人比较，肝移植及肝硬化患者肠道双歧杆菌总量、肠道假小链双歧杆菌或小链双歧杆菌组细菌及青春型双歧杆菌显著减少均P〈0．01；肝移植患者肠道长双歧杆菌显著增多（P〈0．01）。肝移植患者肠道假小链双歧杆菌或小链双歧杆菌、青春型双歧杆菌、短型双歧杆菌检出率显著低于健康人群均P〈0．01。肝移植组患者肠道双歧杆菌多样性显著低于健康人群（Х^2=20．1，P〈0．01）。结论肝移植及肝硬化患者肠道双歧杆菌种群生态结构均存在显著异常，尤以假小链双歧杆菌或小链双歧杆菌组及青春型双歧杆菌的数量及检出率降低最为显著，肝移植组患者肠道双歧杆菌多样性显著低于健康人群。

关键词：肝移植肝硬化双歧杆菌

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生物型人工肝用肝细胞源研究现状及展望

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中华肝脏病杂志 2007年第3期15卷 217-218页

作者：黄建荣浙江大学医学院附属第一医院感染病中心、卫生部传染病重点实验室 310003

作为肝衰竭（hepatic failure，FHF）有效治疗手段，生物型人工肝（Bioarti ficial liver，BAL）可以比较全面的替代肝脏解毒，生物合成和分泌代谢等功能。BAL由三部分组成：（1）生物成分；（2）生物反应器；（3）辅助循环装置：包括... 详细信息

作为肝衰竭（hepatic failure，FHF）有效治疗手段，生物型人工肝（Bioarti ficial liver，BAL）可以比较全面的替代肝脏解毒，生物合成和分泌代谢等功能。BAL由三部分组成：（1）生物成分；（2）生物反应器；（3）辅助循环装置：包括外部控制系统和体外循环系统。肝细胞作为其生物成分是BAL发展的关键因素，理想的BAL肝细胞应具有人源化，易获取，可快速、稳定增殖，而且能在数天或数周内保持良好的分化状态，能在体外完成合成和解毒功能。但BAL的细胞来源问题仍未完全解决。长期以来国内外学者不断进行研究，目前研究的肝细胞从来源来看包括人和动物肝细胞、肝干细胞、胚胎肝细胞、骨髓干细胞、人肿瘤来源的肝细胞系及永生化入肝细胞等。现就目前BAL用肝细胞源研究现状作一介绍。

关键词：肝人工肝细胞永生化细胞

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16S rRNA甲基化酶基因在鲍曼不动杆菌中的分布

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中华传染病杂志 2007年第10期25卷 593-596页

作者：潘韵峰周华周志慧俞云松陈亚岗李兰娟卫生部传染病重点实验室浙江大学医学院附属第一医院传染病研究所

目的调查国内6个省市25家医院临床分离鲍曼不动杆菌中介导高水平氨基糖苷类抗生素耐药的16S rRNA甲基化酶基因armA、rmtA、rmtB的分布情况。方法收集2004年12月—2005年12月国内6省市8家省级医院、浙江省11个地区17家市级医院临床分离的... 详细信息

目的调查国内6个省市25家医院临床分离鲍曼不动杆菌中介导高水平氨基糖苷类抗生素耐药的16S rRNA甲基化酶基因armA、rmtA、rmtB的分布情况。方法收集2004年12月—2005年12月国内6省市8家省级医院、浙江省11个地区17家市级医院临床分离的700株鲍曼不动杆菌。琼脂稀释法测定其对妥布霉素、阿米卡星、庆大霉素、异帕米星、奈替米星5种氨基糖苷类抗生素的最低抑菌浓度(MIC)值;PCR筛选三种甲基化酶基因armA、rmtA、rmtB,克隆测序明确基因型;脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析菌株的同源性;质粒抽提、接合试验及Southern杂交确定armA基因定位。结果对妥布霉素、阿米卡星、庆大霉素、异帕米星、奈替米星的耐药率分别为67.7%、70.9%、75.7%、63.5%和71.5%。对5种氨基糖苷类抗生素全部耐药的菌株有377株,其中334株检出armA基因;未发现rmtA、rmtB阳性菌株。armA基因阳性菌株PFGE分型以A、B、C为主。碱裂解法反复抽提未得到质粒,多次接合试验未成功;Southern杂交显示,armA基因分别位于克隆A、B、C菌株染色体ApaⅠ酶切PFGE约220、300、220kb大小的PFGE片段上。结论16S rRNA甲基化酶基因armA在鲍曼不动杆菌中广泛存在,armA基因位于鲍曼不动杆菌的染色体上。

关键词：抗菌药 RNA 核糖体 16S tRNA甲基转移酶类鲍氏不动杆菌电泳凝胶脉冲场

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对拉米夫定耐药患者乙型肝炎病毒基因型与病毒载量及其核苷酸序列分析

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中华传染病杂志 2007年第5期25卷 285-288页

作者：潘小平李兰娟杜维波李敏伟曹红翠陈智浙江大学医学院附属第一医院传染内科卫生部传染病重点实验室杭州310003

目的探讨对拉米夫定耐药患者HBV B、C基因型的病毒载量及其核苷酸序列突变等病毒学特性的差异。方法采用ELISA、实时荧光定量PCR和DNA序列分析的方法,检测53例对拉米夫定耐药患者的HBV基因型、病毒载量及其C、P基因核苷酸序列,并将测序... 详细信息

目的探讨对拉米夫定耐药患者HBV B、C基因型的病毒载量及其核苷酸序列突变等病毒学特性的差异。方法采用ELISA、实时荧光定量PCR和DNA序列分析的方法,检测53例对拉米夫定耐药患者的HBV基因型、病毒载量及其C、P基因核苷酸序列,并将测序结果与基因库中标准HBV基因型序列进行比较分析。结果53例拉米夫定耐药患者中,B基因型22例,C基因型31例;C基因型的YIDD突变率明显高于B基因型(87.1%比36.4%,P<0.01),且C基因型的病毒载量为(7.71±0.80)lg拷贝/mL,明显高于B基因型的(6.97±0.77)lg拷贝/mL(P<0.01);而B基因型的YVDD突变率和前C区突变(G1896A)明显高于C基因型(分别为63.6%比12.9%、77.3%比32.3%,P值均<0.01)。B、C基因型的核心启动子突变(T1762/A1764)比较,差异无统计学意义(31.8%比35.5%,P>0.05)。前C区/核心启动子的突变影响拉米夫定耐药患者的病毒水平。结论拉米夫定耐药患者HBV B、C基因型的YMDD基序分别以YVDD和YIDD变异为主,且基因型C的病毒载量比B基因型要高;B基因型易出现前C区突变(G1896A)。

关键词：启动区(遗传学) 变异(遗传学) 拉米夫定药物耐变性基因型肝炎病毒,乙型

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妊娠期病毒感染对婴儿先天性的损害

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中华传染病杂志 2007年第4期25卷 253-256页

作者：马亦林浙江大学医学院附属第一医院卫生部传染病重点实验室杭州310003

多种病原体，如病毒、螺旋体、细菌及寄生虫等，可通过妊娠期妇女感染而使胎儿发生先天性损害，其中以病毒较多见，见表1。孕妇及胎儿易受病原体感染，其主要原因与母体在免疫及内分泌方面的改变及胎儿缺乏免疫防御功能有关。生殖免疫... 详细信息

多种病原体，如病毒、螺旋体、细菌及寄生虫等，可通过妊娠期妇女感染而使胎儿发生先天性损害，其中以病毒较多见，见表1。孕妇及胎儿易受病原体感染，其主要原因与母体在免疫及内分泌方面的改变及胎儿缺乏免疫防御功能有关。生殖免疫学观点认为，胎盘滋养细胞不表达或低表达经典的组织相容性复合体Ⅰ类抗原及Ⅱ类抗原，并在胚胎发育过程中产生封闭性抗体（blocking antibody）；母体某些激素，如人绒毛膜促性腺激素、人胎盘催乳素、

关键词：病毒感染先天性妊娠期人绒毛膜促性腺激素损害组织相容性复合体免疫防御功能病原体感染

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sea基因定位突变体构建及其重组表达产物生物学活性的研究

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中华微生物学和免疫学杂志 2007年第6期27卷 525-531页

作者：范芳华严杰毛亚飞浙江大学医学院病原生物学系杭州310031 浙江大学附属第一医院卫生部传染病重点实验室杭州310031

目的构建葡萄球菌肠毒素A(SEA)基因及其突变体原核表达系统,了解突变前后重组表达产物的细胞毒性、促淋巴细胞增殖和抑制肿瘤生长活性的变化。方法采用高保真PCR和T- A克隆法,从金黄葡萄球菌ATCC13565株DNA中扩增并克隆了不含信号肽序列... 详细信息

目的构建葡萄球菌肠毒素A(SEA)基因及其突变体原核表达系统,了解突变前后重组表达产物的细胞毒性、促淋巴细胞增殖和抑制肿瘤生长活性的变化。方法采用高保真PCR和T- A克隆法,从金黄葡萄球菌ATCC13565株DNA中扩增并克隆了不含信号肽序列的sea基因。采用突变引物PCR构建sea基因定位突变体。建立sea基因及其定位突变体原核表达系统。Ni-NTA亲和层析法提纯表达的目的重组蛋白。采用TCID_(50)法测定目的重组蛋白对Vero细胞的细胞毒性。采用MTT比色法分别检测不同浓度的目的重组蛋白促小鼠脾细胞增殖及对抑制KB和HL-60癌细胞株生长的作用。结果所克隆的sea基因核苷酸序列与报道序列的相似性为100%,7种突变体均在既定位置获得预期的密码子突变。rSEA和各突变体重组蛋白表达量约为细菌总蛋白的52%。rSEA对Vero细胞TCID_(50)为4.1μg,其突变体重组蛋白分别为5.8～23.5μg。1和5μg/ml的rSEA及其5种突变体重组蛋白rSEA/H187A、rSEA/H225A、rSEA/D227A、rSEA/H187A/D227A和rSEA/H225A/D227A对小鼠脾细胞均有明显的促增殖作用(P<0.05),10和20μg/ml的rSEA及上述5种突变体重组蛋白促小鼠脾细胞增殖活性与100μg/ml PHA相似(P>0.05)。5～20μg/ml的rSEA及上述5种突变体重组蛋白作用的小鼠脾细胞上清及其上清与脾细胞混合物均能有效地抑制KB和HL-60细胞生长(P<0.05)。结论本研究成功地构建了sea基因突变体及其高效原核表达系统,其表达产物的细胞毒性均有所降低。由于rSEA/H225A、rSEA/D227A、rSEA/H225A/D227A细胞毒性较低、促脾细胞增殖和抑制肿瘤细胞生长活性较强,可作为研制升白细胞、抗肿瘤SEA相关药物的候选突变体。

关键词：葡萄球菌肠毒素A sea基因/定位突变原核表达系统/构建重组蛋白,细胞毒性脾细胞/增殖肿瘤细胞/抑制

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